金耳子实体和发酵菌丝体多糖的分离、纯化与结构的比较研究

人工段木栽培的金耳（TremellaaurantialbaBandonietZang）子实体和深层培养的金耳菌丝体分别经沸水提取、醇析、透析,Sevape法脱蛋白、SephadexG—100柱层析纯化,得子实体纯多糖TAf和菌丝体纯多糖TAm。玻璃纤维纸电泳表明TAm和TAf为单一均匀多糖。薄层层析表明,TAm的单糖组成为半乳糖、葡萄糖、甘露糖、岩藻糖、鼠李糖。TAf的单糖组成为葡萄糖、甘露糖、木糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸。UV分析表明组成中不含核酸和蛋白质。TAf经乙醇分级分离得TAf－1和TAf－2。TAf－1经SephadexG－100柱层析表明其为单一均匀物质。红外光谱分析证明,TAf－1和TAf－2有多糖吸收峰,存在吡喃环,α-糖苷键和β-糖苷键连接。     

猴头菌子实体和菌丝体多糖的分离纯化与理化特征的比较

人工栽培的猴头菌子实体和固体培养的菌丝体分别经热水提取,浓缩、醇析后得子实体粗多糖（HFP）和菌丝体粗多糖（HMP）,HFP的得率和多糖含量均高于HMP;两者再经透析、Sevag法脱蛋白、乙醇分级沉淀、SephadexG-100柱层析纯化,得子实体纯多糖hfp-1和菌丝体纯多糖hmp-2,经HPLC检测hfp-1和hmp-2为单一均匀多糖,气相色谱分析表明hfp-1的单糖组成为阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖,摩尔比为：0.12:0.04:1.00:0.71;hmp-2的单糖组成为阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖,磨尔比为：0.25:0.41:0.31:1.00:0.29。紫外光谱分析表明组成中不含核酸和蛋白质,红外光谱分析二者均有多糖特征吸收峰,hfp-1有β-型连接的吸收峰,hmp-2无明显的β-型连接的吸收峰;经HPLC进行分子量测定,hfp-1的分子量为54000,hmp-2的分子量为68000,猴头菌子实体多糖和菌丝体多糖在化学组成上有一定的差异。     

猴头菌子实体和菌丝体多糖的分离纯化与理化特征的比较*

人工栽培的猴头菌子实体和固体培养的菌丝体分别经热水提取,浓缩、醇析后得子实体粗多糖（HFP）和菌丝体粗多糖（HMP）,HFP的得率和多糖含量均高于HMP;两者再经透析、Sevag法脱蛋白、乙醇分级沉淀、SephadexG-100柱层析纯化,得子实体纯多糖hfp-1和菌丝体纯多糖 hmp-2,经HPLC检测hfp-1和hmp-2为单一均匀多糖。气相色谱分析表明hfp-1的单糖组成为阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖,摩尔比为：0.12：0.04：1.00：0.71;hmp-2的单糖组成为阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖,摩尔比为：0.25：0.41：0.31：1.00：0.29。紫外光谱分析表明组成中不含核酸和蛋白质,红外光谱分析二者均有多糖特征吸收峰,hfp-1有β-型连接的吸收峰,hmp-2无明显的β-型连接的吸收峰;经HPLC进行分子量测定,hfp-1的分子量为54000,hmp-2的分子量为68000。猴头菌子实体多糖和菌丝体多糖在化学组成上有一定的差异。     

细脚拟青霉菌丝体多糖纯化及组成分析

通过DE-52纤维素柱和Sephedex G-100葡聚糖凝胶柱,对细脚拟青霉Paecilomyces tenuipes菌丝体粗多糖进行纯化,得到PtPs1和PtPs2,应用离子色谱HPAEC-PAD对纯多糖PtPs1和PtPs2的单糖组成进行分析,证实均由葡萄糖、半乳糖和甘露糖三种单糖组成,经红外扫描确定PtPs1和PtPs2均为α型吡喃糖。     

蝉虫草子实体与发酵菌丝体胞内多糖成分分析

比较蝉虫草子实体、孢梗束、虫体以及蝉虫草发酵菌丝体的胞内多糖含量、单糖组成和分子量差异,结果表明,蝉虫草子实体与发酵菌丝中胞内多糖的含量和组成均存在差异。葡萄糖、半乳糖和甘露糖是蝉虫草发酵菌丝体和子实体粗多糖中主要的3种单糖,阿拉伯糖和木糖是子实体粗多糖中的特征性单糖,而果糖属于菌丝体的特征性单糖。子实体粗多糖中高分子量组分（>1×10 ⁶Da）的相对含量明显高于菌丝体粗多糖。本研究对提升蝉虫草发酵多糖产品品质、促进蝉虫草开发应用具有参考价值。     

香菇菌丝体多糖LeBDl—1的分离纯化和分析

香菇(Lentinula edodes)465菌株用添加啤酒发酵醪泥的培养基发酵培养10d后,菌丝体经洗涤、热水浸提、乙醇沉淀,再经DEAE-纤维素柱(CI—型)分离和Sephadex G—100柱层析纯化,得到白色絮状多糖LeBD1—1。经醋酸纤维薄膜电泳和HPLC检测纯度,LeBD1—1为均一成分。HPLC法测得分子量为130000Da,红外光谱测定其糖苷键为α型。经完全酸水解后用硅胶薄层层析和气相色谱法分析单糖组成,LeBD1—1中含D-甘露糖、D-葡萄糖、D-半乳糖、D-木糖和D-阿拉伯糖,各单糖摩尔比为2.45:1.00:0.03:0.08:0.10,是一种以含甘露糖为主的杂多糖。     

金樱子多糖单糖组成的TMS柱前衍生化/GC-MS研究

探讨金樱子多糖的含量及其单糖组成,为金樱子质量评价及临床用药提供参考依据。本文采用水提-醇沉法获得金樱子多糖,以葡萄糖为标准品,蒽酮-硫酸比色法测定多糖含量;多糖酸解后经三甲基硅烷(TMS)衍生化,以标准品单糖为对照,采用气-质联用法(GC-MS)测定多糖的单糖组成。结果表明,本实验条件下,测得金樱子多糖提取得率为29.38%;金樱子多糖中单糖由阿拉伯糖、鼠李糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖、果糖组成,其中葡萄糖、甘露糖、果糖和半乳糖在金樱子多糖中占比较大,分别为65.03%、7.36%、16.11%及8.87%。     

灵芝子实体、菌丝体及孢子粉中多糖成分差异比较研究

为探讨灵芝子实体、菌丝体和孢子粉3种材料中多糖成分的差异,分别运用苯酚硫酸法进行多糖含量测定,运用离子色谱分析其酸水解后单糖组成,并运用HPLC分析各多糖图谱及经α-淀粉酶和β-1,3-葡聚糖酶处理后HPLC图谱的变化,结果发现,灵芝菌丝体中多糖含量最高,达到3.81%,孢子粉多糖含量为1.8%,灵芝子实体中多糖含量最低,仅为0.59%;水解后的单糖组成及摩尔比也有差异,子实体的单糖主要为葡萄糖和半乳糖,菌丝体和孢子粉的单糖主要为葡萄糖;HPLC图谱显示3种多糖出峰位置和分子量也不同,酶解效果表明多糖结构也相差较大。各样品多糖对小鼠巨噬细胞RAW264.7释放NO的产量的影响上,菌丝体与子实体多糖都表现出了很好的活性,而孢子粉多糖却呈现出较低活性。实验结果表明灵芝子实体、菌丝体和孢子粉3种材料的多糖成分差异大,在医药保健品使用中应区分使用。     

葡萄糖-1-磷酸对灵芝多糖合成的影响

在以葡萄糖为唯一碳源进行灵芝液态发酵时,通过添加不同浓度的代谢中间产物葡萄糖-1-磷酸,研究其对灵芝胞外多糖产量、单糖组成、合成途径相关酶的影响,从而确定影响灵芝多糖单糖组成的关键酶。结果显示,添加葡萄糖-1-磷酸对灵芝多糖产量和多糖的单糖组成并无明显影响。在检测的3种灵芝多糖合成关键酶中,葡萄糖-1-磷酸的添加抑制磷酸葡萄糖变位酶(PGM)、磷酸葡萄糖异构酶(PGI)的酶活,对磷酸甘露糖异构酶(PMI)无明显影响。此外,通过相关性分析后发现,发酵过程中半乳糖和甘露糖比例的变化分别与PGM和PGI、PMI具有相关性。本文结果对实现灵芝多糖代谢的灵活调控提供有益的参考。     

小刺猴头菌液体体深层培养过程中多糖积累及其特征的研究

本文探讨了所升环流反应器培养小刺猴头菌过程中的菌体生物量、胞内外真菌多糖的积累规律,与同一菌株复元的子实体多糖的含量、组成分别进行分析对比,得到液体深层培养菌丝体多糖的含量为０．０９１８ｇ／ｇ,而子实体仅为０．０３７８ｇ／ｇ,发酵液为多糖含量达０．２８５ｇ／ｌ,它们的单糖构成比例均相同,即葡萄糖：甘露糖：半乳糖＝２０．２：５．２：１,但液体深层培养的菌丝体多糖与人工栽培的子实体多糖的电荷性能不同。     

仙草多糖的分离纯化及鉴定

仙草(Mesona Chiliensis Benth)是我国的一种民间草药。用0.5％NaHCO_3抽提,乙醇沉淀得到了仙草多糖的粗品。经过H_2O_2脱色处理,Sephadex G-75柱层析和硫酸—苯酚法收集单一峰部分,得到仙草多糖纯品(简称MCPS),薄层层析、凝胶电泳和醋纤薄膜电泳证明其为均一性多糖。红外光谱扫描表明,它具有典型的多糖吸收峰。HPLC法测得相对分子量为4.3×10~4,经薄层层析确定MCPS的单糖组成为葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、木糖、鼠李糖,半乳糖醛酸及一种未知单糖。药理实验表明,它具有免疫促进作用与抑瘤效应。     

不同种源的太子参多糖含量及其单糖组成GC-MS研究

研究不同种源太子参多糖含量以及单糖组成差异,为太子参质量评价和临床用药提供参考依据,采用水提-醇沉法提取太子参多糖,以葡萄糖为标品,蒽酮-硫酸比色法测定多糖含量。盐酸甲醇水解、三甲基硅烷(TMS)柱前衍生、气-质联用法(GC-MS)分析不同种源太子参多糖的单糖组成。结果表明,组培太子参与野生太子参多糖的含量分别为19.05±1.38%、22.63±2.18%;不同种源太子参多糖均由葡萄糖、果糖、甘露糖、半乳糖、半乳糖醛酸、阿拉伯糖、鼠李糖七种单糖组成,但单糖的比例明显不同。如以多糖含量为标准,野生太子参多糖含量高于组培太子参,品质更佳;多糖中单糖比例不同,提示不同种源的太子参多糖结构可能存在不同。     

以豆浆为培养基的三种药食用真菌发酵过程多糖变化的研究

为研究豆浆对药食用真菌发酵产多糖的影响,对灵芝、金耳、冬虫夏草三种真菌以豆浆为培养基得到的多糖进行了结构和离子交换层析分析。研究结果表明,三种药食用真菌多糖的结构和性质具有较大差异,在单糖组成方面,葡萄糖、阿拉伯糖和半乳糖三种主要单糖的摩尔百分比具有较大差异,同时多糖中不同分子量的各个组分比例也有较大差异。红外光谱图分析结果显示,金耳和灵芝发酵液较虫草发酵液,多糖峰型变化较大,但二者峰型较相似。三种真菌多糖经离子交换柱分离纯化后发现,三种多糖都是由中性和酸性多糖组成,但冬虫夏草发酵液中的中性多糖比例远低于酸性多糖,而金耳和灵芝多糖中酸性多糖比例高于中性多糖。本研究以豆浆为培养基探究三种药食用真菌发酵多糖结构的变化,不仅为多糖结构研究提供理论支持,还为真菌豆浆发酵产品的开发奠定良好的实践基础。     

小刺猴头菌液体深层培养过程中多糖积累及其特征的研究

本文探讨了气升环流反应器培养小刺猴头菌过程中菌体生物量、胞内外真菌多糖的积累规律,与同一菌株复元的子实体多糖的含量、组成分别进行分析对比,得到液体深层培养菌丝体多糖的含量为0．0918g／g（干）,而子实体仅为外0．378g／g（干）,发酵液中多糖含量达0．285g／l,它们的单糖构成比例均相同,即葡萄糖：甘露糖：半乳糖＝20．2：5．2：1,但液体深层培养的菌丝体多糖与人工栽培的子实体多糖的电荷性能不同。     

小刺猴头菌丝体多糖的结构研究

对小刺猴头过滤掉发酵液的发酵菌丝体,水提和碱提后获得的均一组分多糖HMP-w1.1和HMP-a1.1进行结构性质的研究。结果表明:HMP-w1.1是分子量为36.3 kD的α型吡喃糖,单糖组成为甘露糖(Man),葡萄糖(Glc),半乳糖(Gal),岩藻糖(Fuc);HMP-a1.1是分子量为42.8 kD的β型吡喃糖,单糖组成为甘露糖(Man),半乳糖醛酸(GalUA),葡萄糖(Glc),半乳糖(Gal),岩藻糖(Fuc)。综合高碘酸氧化和Smith降解的试验结果,推断HMP-w1.1的糖苷键构型可能为1→、1→4、1→4,6、1→6、1→2、1→2,6;HMP-a1.1的糖苷键构型可能为1→6、1→2、1→2,6。     

马齿苋多糖的研究

用苯酚硫酸法对马齿苋多糖含量进行测定,设计正交实验确定马齿苋多糖提取的最佳工艺,马齿苋多糖的提取率高达9.23%。将其多糖分离纯化,进行理化性质试验测试,利用纸层析和气相色谱对马齿苋多糖中的单糖组成做了分析,马齿苋多糖中的单糖组成有葡萄糖、半乳糖、甘露糖、果糖、木糖、阿拉伯糖。     

两种灵芝孢子粉多糖的分离纯化和结构

本文采用水提醇沉法从灵芝孢子粉中提取其粗多糖,经Sepharose CL-6B凝胶柱层析分离得两种主要成分LBPI和LBPII,经高效液相色谱鉴定,均为高均一性成分,分子量分别为9.17×10 ⁴和1.86×10 ⁴;经酸水解、乙酰化和气相色谱分析,确定LBPI的单糖组成为甘露糖、半乳糖和葡萄糖,LBPII的单糖组成为鼠李糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖;通过高碘酸氧化、甲基化和GC-MS进行结构分析,确定LBPI中葡萄糖残基连接方式为1→、1→4,6和1→3,6连接,半乳糖残基为1→6连接,甘露糖残基为1→3,6连接,LBPII中鼠李糖残基连接方式为1→连接,葡萄糖残基为1→、1→4、1→6、1→4,6和1→3,6连接,半乳糖残基为1→6连接,甘露糖残基为1→2,3,6连接。综上,两种多糖LBPI和LBPII均为多分支的中型杂多糖,但两者的单糖组成和连接方式存在差异,这两种多糖成分均为首次报道,可望为灵芝孢子粉的成分、活性研究和资源开发提供理论依据。     

深层培养云芝菌丝体蛋白多糖的提取及性质

采用水、３％草酸和０．２ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠为溶剂分别提取深层培养的云芝〔Ｐｏｌｙｓｔｉｃｔｕｓｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ（Ｌ．）Ｆｒ．〕菌丝体蛋白多糖,其得率分别为菌丝体干重的２０％、４９％和１９％。提取的粗多糖经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ１００柱层析进一步分离、纯化,纯化的多糖经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后呈现一个斑点,在ＳｅｐｈａｄｅｘＧ１００柱层析中有一个对称峰,紫外及红外光谱分析和蛋白质含量测定表明该多糖为蛋白多糖,其蛋白质和多糖含量在水提多糖中分别为１３％和６２％、在酸提多糖中分别为５％和９１％。在碱提多糖中分别为３％和８１％。组成该多糖的主要单糖是葡萄糖和木糖。     

5个不同灵芝种菌丝体多糖理化性质及免疫活性研究

对灵芝属G.lucidum,G.tsugae,G.oerstedii,G.resinaceum,G.subamboinens5个不同种用同一条件进行了液体发酵培养、多糖提取、理化性质及免疫活性的分析。结果表明,5种灵芝的菌丝体多糖得率相差较大,以G.oerstedii最高,但各多糖提取物分子量分布相似,单糖组成均以葡萄糖为主,并含半乳糖、甘露糖、盐酸氨基葡萄糖、岩藻糖。5种多糖提取物均能显著增强小鼠巨噬细胞Raw264.7吞噬作用、释放NO,但以G.subamboinens菌丝体多糖提取物的活性最强。这些多糖提取物还均能促进小鼠脾细胞的增殖,并对ConA诱导的淋巴细胞增殖有抑制作用。研究表明灵芝属内其他3个物种的菌丝体多糖提取物理化特征与G.lucidum和G.tsugae接近,并同样具有免疫调节作用。     

宁夏中宁地区灵武长枣果实多糖的单糖成分GC-MS分析

研究宁夏中宁地区灵武长枣果实多糖的单糖成分,为不同地区灵武长枣的开发利用提供试验依据。以不同发育时期中宁产灵武长枣果实为试验材料,采用热水浸提法和气相色谱-质谱联用法(GC-MS)等,探讨不同发育时期果实多糖含量变化规律及其单糖组成成分。结果表明,不同发育时期中宁产灵武长枣果实粗多糖得率分别为:膨大前期0.43%、快速膨大期0.527%、着色期0.80%和完熟期0.618%;果实粗多糖经DEAE-52均得到Ju-0、Ju-1、Ju-2、Ju-3 4个多糖级分,其中Ju-2含量为最高,表明果实多糖的主要形式为酸性多糖;不同发育时期果实各精制多糖总共含有阿拉伯糖、鼠李糖、核糖、岩藻糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸10种单糖,不含果糖,以阿拉伯糖、半乳糖、核糖、鼠李糖、糖醛酸含量较高,岩藻糖、葡萄糖含量次之,木糖、甘露糖含量较低,但其含量各组分有差异。精制多糖含量随着果实的发育进程总体呈现上升趋势;不同发育时期中宁产灵武长枣果实各精制多糖中单糖组成及含量各不相同。