丝瓜籽中蛋白质生物合成抑制蛋白的分离、纯化及性质研究

丝瓜（Ｌｕｆｆａｃｙｌｉｎｄｒｉｃａ）种籽,经捣碎、抽提、硫酸铵分级沉淀,ＣＭ－５２离子交换层析,Ｓｅｐｈａｃｒｙ１Ｓ－１００分子筛,阳离子交换ＦＰＬＣ等步骤,分离到两种单链蛋白质生物合成抑制蛋白：Ｌｕｆｆｉｎ－Ａ和Ｌｕｆｆｉｎ－Ｂ。它们都是等电点接近１０的碱性蛋白,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定分子量分别约为２７ｋｄ和２８ｋｄ,氨基酸组成分析表明两者具很大同源性,但免疫双扩散及ＥＬＩＳＡ检测证明两者的免疫原性有差异。Ｌｕｆｆｉｎｓ对兔网织红细胞裂解液的蛋白质生物合成有强烈的抑制作用,ＩＣ５０分别为１．４×１０－１１ｍｏｌ／Ｌ和２．０×１０－１１ｍｏｌ／Ｌ,比ＴＣＳ的２．９×１０－１０ｍｏｌ／Ｌ低得多。因而,Ｌｕｆｆｉｎｓ很有可能成为肿瘤导向药物的高效＂弹头＂。     

笋瓜籽毒蛋白Maximin—一种新的蛋白质生物合成抑制剂的分离纯化…

笋瓜（Ｃｕｃｕｒｂｉｔａ ｍａｘｉｍａ）种籽经去壳捣碎,乙醚脱脂,硫酸铵分级沉淀,阳离子交换层极及凝胶过滤等步骤,纯化到一种有蛋白质生物合成抑制活性的碱性蛋白,命名为Ｍａｘｉｍｉｎ,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示单一条带,其分子量约为２８ｋＤ。该蛋白对兔网织红细胞裂解液的蛋白生物合成有较强的抑制,ＩＣ５０为４．０×１０＾－１０ｍｏｌ／Ｌ,与天花粉蛋白（ＴＣＳ）毒性相似。从这些特性可见,该蛋白似为单链核糖体失     

笋瓜籽毒蛋白Maximin──一种新的蛋白质生物合成抑制剂的分离纯化及性质

笋瓜（Ｃｕｃｕｒｂｉｔａｍａｘｉｍａ）种籽经去壳捣碎,乙醚脱脂,硫酸铵分级沉淀,阳离子交换层析及凝胶过滤等步骤,纯化到一种有蛋白质生物合成抑制活性的碱性蛋白,命名为Ｍａｘｉｍｉｎ,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示单一条带,其分子量约为２８ｋＤ。该蛋白对兔网织红细胞裂解液的蛋白生物合成有较强的抑制,ＩＣ_（５０）为４．０×１０~（－１０）ｍｏｌ／Ｌ,与天花粉蛋白（ＴＣＳ）毒性相似。从这些特性可见,该蛋白似为单链核糖体失活蛋白（ＲＩＰ）家族中的新成员,可望作为免疫毒素的一种新“弹头”。     

丝瓜核糖体失活蛋白的分离与纯化

采用一种改进的方法,简便快速地从丝瓜(Luffa cylindrica)籽中得到丝瓜蛋白α和β.它们在SDS-PAGE上均呈一区带,其分子量分别为28000和29000.等电聚焦测定等电点均为10.它们对无细胞体系蛋白质合成都有强烈的抑制活性,其ID₅₀分别为10μg/L和50μg/L,是目前发现的单链核糖体失活蛋白中活性最高的.     

蛋白磷酸酶抑制剂变构霉素的生物合成及其抑制位点研究

变构霉素具有很强的蛋白磷酸酶抑制作用和良好的抗菌活性, 尤其是对油菜菌核病的抑制作用。本文综述了近年来有关变构霉素生物合成和蛋白磷酸酶抑制位点方面的最新研究进展。     

栝楼籽中一种新的具有蛋白质生物合成抑制活性的多肽——Trichokirin-S1的分离、纯化和性质

改进了常规的核糖体失活蛋白的分离纯化方案 ,首先采用抽提蛋白体的方法 ,提高了分离效果 ,然后再经硫酸铵分级沉淀、FPLCMonoS阳离子交换层析和Superose12凝胶过滤层析等步骤 ,从栝楼种子中分离到一种新的多肽———trichokirin S1。经MALDI TOFMS质谱分析测得其分子量为 114 2 6。该肽的N端氨基酸序列为PRRKEG GSFDECCSE ,与一种存在于南瓜籽中的小分子核糖体失活蛋白 β moschin具有很高的同源性。trichokirin S1对核糖体失活的机制与天花粉蛋白 (TCS)一致 ,是rRNAN 糖苷酶催化型的 ,对兔网织红细胞裂解液系统蛋白质生物合成有较强的抑制作用 ,IC50 为 0 .71nmol L ,因而有可能开发成免疫毒素的高效“弹头”。     

细胞分裂素生物合成基因在调节一组烟草病理相关蛋白基因表达中…

对一组病理相关蛋白基因在烟草中的表达情况进行了研究,包括;碱性几丁质酶,β－１,３－葡萄糖苷酶,渗透蛋白及伸展蛋白。ＲＮＡ杂交实验表明在正常烟草植株中上述４个基因具有发育和器官专一性的表达。在含有细胞分裂素生物合成基因的转基因烟草丛生芽中,这４个基因的表达受过量合成的内源细胞分裂素和载体效应的共同调节,细胞分裂素降低这些基因的表达,而载体效应则促进它们的表达。     

豆薯种子中两种蛋白质的分离纯化及其性质研究

豆薯（Ｐａｃｈｙｒｒｈｉｚｕｓｅｒｏｓｕｓ）种子经磷酸盐缓冲液抽提,Ｓ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦａｓｔＦｌｏｗ柱,ＤＥ－５２纤维素柱和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５柱层析,提取出两种高纯度的蛋白成分,命名为ＰａｃｈｙｒｉｎＩ和ＩＩ,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得其分子量分别为３３ｋＤ和１４．５ｋＤ,但ＨＰＬＣ分子筛的结果显示ＰａｃｈｙｒｉｎⅡ的分子量为２８ｋＤ,无论在还原条件下,还是在非还原条件下,ＰａｃｈｙｒｉｎＩ     

硒蛋白的生物合成与调控

硒蛋白是硒以硒半胱氨酸(Sec)形式参入形成的蛋白质。Sec作为参入蛋白质的第21种氨基酸,由硒蛋白mRNA上的UGA编码。在原核生物中,Sec参入硒蛋白的相关因子及其参入机制已基本阐明,Sec在SELA、SELB、SELC、SELD及Sec插入序列(SECIS)等的共同作用下参入到蛋白质中。在真核生物中,Sec参入硒蛋白的可能途径是：Ser-tRNA‘^[Ser]Sec。通过磷酸丝氨酰-tRNA^[Ser]Sec。最终转变为Sec-tRNA^[Ser]Sec,并在延伸因子及相关蛋白质因子的作用下参入到硒蛋白中。硒蛋白的合成在翻译前水平、mRNA水平、供硒水平等都受到相应的调控。     

槐糖脂的生物合成、发酵及分离纯化

槐糖脂是一类由酵母菌代谢生产的糖脂型生物表面活性剂,具有优越的表/界面活性和稳定性,且无毒、无刺激、易被生物降解,在众多领域具有良好的应用前景,被认为是最具潜力替代化学表面活性剂的生物表面活性剂之一.历经50余年的研究,槐糖脂的发酵生产工艺日趋成熟,但产品的分离纯化仍是难点.本文系统地综述了槐糖脂的结构、生物合成途径,...     

苦瓜籽蛋白的分离纯化及免疫原性分析

经过NaCl溶液匀浆抽提、硫酸铵分级分离、SP-Sepharose Fast Flow层析、Sephacryl S-100层析、Macro-Cap-SP层析,从苦瓜籽中同时分离纯化出大量的α-苦瓜素和苦瓜抗HIV蛋白30.经SDS-PAGE鉴定,二者均为单一条带,表观分子量为28 kDa.用两种蛋白分别免疫Balb/c...     

小麦内切多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白的分离纯化研究

小麦内切多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白的分离纯化研究郑远旗,杨宗剑,李建吾,周立,吴文莲（四川大学生物系,成都６１００６４）余露（中国科学院成都生物研究所,成都６１００４１）关键词内切多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白;内切多聚半乳糖醛酸酶;纯化;小麦内切多聚半乳糖...     

丝瓜的三聚体G蛋白的初步研究

根据拟南芥（ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｈａｈｌｉａｎａ）ＧＰＡ１的保守区段Ａ设计一对特异引物（５′ｃｔｇｇｇｇａａｔｃｔｇｇａａａａｔｃ３′,５′ｃａｃａｇｃｔｇｔａｃａｃｃｔｃａａａｃ３′）通过ＰＣＲ从丝瓜核基因组中扩增植物的三聚体Ｇ蛋白α亚基编码基因,获得了２个片段（ＬＦＧ１,ＬＦＧ２）,并已克隆和测序（已在ＥＭＢＬ数据库中登记,登记号为：ｙ１５２７０,ｙ１５２７１）．序列分析表明ＬＦＧ１和ＬＦＧ２分别由１５１５ｂｐ和７３２ｂｐ构成,都含有三聚体Ｇ蛋白α亚基编码基因的保守区段Ａ,但也都含有内含子．根据片段的大小及ＰＣＲ的特性,ＬＦＧ１可能是丝瓜三聚体Ｇ蛋白α亚基编码基因上的片段．     

苦瓜核糖体失活蛋白的分离纯化及其抑制烟草花叶病毒活性

目的:探讨分离纯化苦瓜种子核糖体失活蛋白(RIP)的方法,并研究利用纯化后的RIP抑制烟草花叶病毒(TMV)的活性。方法:用盐溶液抽提总蛋白后,经30%～90%的(NH4)2SO4分级沉淀,制成粗提液。用CMSepharoseFastFlow离子交换层析结合SephadexG-75凝胶柱分离纯化RIP。结果与结论:经SDS-PAGE检测及RNAN-糖苷酶活性鉴定,确定最终得到的蛋白为苦瓜RIP;所纯化的RIP对感染黄瓜和番茄的TMV有明显的抑制作用,但RIP的浓度并不与其抑制TMV的活性呈正相关。     

变构菌素生物合成基因簇的研究进展

变构菌素是从Streptomyces griseochromogenes菌株中分离得到的第一个高选择性的蛋白磷酸化酶-1（PP-1）抑制剂。变构菌素及其衍生物在神经系统紊乱、代谢综合症、呼吸系统及相关疾病、免疫抑制、肿瘤治疗等诸多领域都有着广泛的应用前景,因而引起了人们对其生物合成途径的研究兴趣。介绍了近年来变构菌素生物合成途径的研究进展。     

非蛋白氨基酸的生物合成及其生物学作用

解释了蛋白氨基酸和非蛋白氨基酸,并着重论述了非蛋白氨基酸的生物合成及其生物学作用。非蛋白氨基酸的生物合成主要通过基本氨基酸合成后的修饰、代谢及消旋作用产生,其生物学作用主要表现在能合成其他含氮物质、储藏氮和运输氮、储能、组成细菌细胞壁、毒性作用及药物作用等方面。     

伸展蛋白的结构、功能、交联和生物合成

伸展蛋白是细胞壁中一类富含羟脯氨酸、具有Ser-Hyp-Hyp-(X)-Hyp-Hyp特征性结构单位的糖蛋白。它们不仅是初生壁的重要结构成分,而且在细胞的防御及抗病抗逆性中起作用。伸展蛋白过氧化物酶能在体外将伸展蛋白单体交联成多聚体。酪氨酸残基参与交联并形成异二酪氨酸(IDT)。伸展蛋白的合成和翻译后修饰分别在细胞质和内质网等膜系统中进行。