二酰甘油－蛋白激酶C信使系统在LA90细胞转化中的作用

以ＬＡ９０细胞（ＲＳＶ温度敏感突变株ＬＡ９０转化的小鼠成纤维细胞〕为模型,研究了二酰甘油（ＤＧ）－蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）信使系统在细胞转化中的作用。通过免疫沉淀法观察到ＬＡ９０细胞在允许温度（３３℃）时具有很高的ｐｐ６０ｖ－ｓｒｃ激酶活性,远高于非允许温度（３９℃）,当从３９℃转至３３℃１０分钟,激酶活性就已显著升高。同时运用３Ｈ－甘油掺入并结合板层析分离方法和酶活性测定,发现ＬＡ９０细胞中ＤＧ含量和ＰＫＣ活性在３３℃条件下高于３９℃,当由３９℃转至３３℃１０分钟,细胞内ＤＧ含量和ＰＫＣ活性均明显增加。我们进一步探讨了ＰＫＣ活性与癌基因ｖ－ｓｅｒ、ｐ５３基因表达的相关性,实验表明,ＰＫＣ的激活剂ＴＰＡ可刺激３９℃条件下的ＬＡ９０细胞中ｖ－ｓｒｅ和ｐ５３基因表达,ＰＫＣ选择性抑制剂Ｈ７可抑制３３℃条件下ＬＡ９０细胞中ｖ－ｅｒｃ和ｐ５３基因表达。看来,ｐｐ６０ｖ－ｓｒｃ可通过刺激磷脂酰肌醇（ＰＩ）代谢激活ＤＧ－ＰＫＣ（ｄｉａｃｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌ－ｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＣ）信使系统,后者通过某种途径调控ｖ－ｓｒｃ和ｐ５３等癌基因之表达。因此ＤＧ－ＰＫＣ信使系统可能是ｐｐ６０ｖ－ｓｒｃ转化细胞及被转化细胞维持转     

细胞转化过程中胞内钙离子浓度的变化

使用钙离子荧光探针Ｆｌｕｏ－３ＡＭ和ＤＮＡ荧光染料Ｈｏｅｃｈｓｔ３３３４２联染细胞的方法,利用显微分光光度计ＭＰＶⅡ测量了两种温度敏感细胞—６Ｍ２和ｔｓＲＳＶＮＩＨ３Ｔ３－ＬＡ９０细胞及Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２和转化Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２细胞在不同细胞周期时相内钙的浓度,发现从Ｇ１期到Ｓ期到Ｇ２期,６ｍ２细胞当在３３℃培养时（转化状态）胞内钙的浓度〔Ｃａ＾２＋〕ｉ分别为８５．０,１３８．４２３９．０ｎｍｏｌ     

L615白血病鼠胸腺和脾脏淋巴细胞脱氢酶同工酶的研究

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对比研究了纯系６１５鼠和Ｌ６１５可移植性淋巴细胞型白血病鼠胸腺和脾脏淋巴细胞的葡萄糖－６－磷酸脱氢酶同工酶（ＥＣｌ．１．１．４９,Ｄ－葡萄糖－６－磷酸：ＮＡＤＰ氧化还原酶,Ｇ６ＰＤ）和乳酸脱氢酶同工酶（ＥＣｌ．１．１．２７,Ｌ－乳酸：ＮＡＤ氧化还原酶,ＬＤＨ）。并应用定量细胞化学法对ＬＤＨ和６ＰＤ全酶活性进行了测定。结果：在Ｌ６１５白血病鼠胸腺淋巴细胞中（白血病细胞占４０％）,Ｇ６ＰＤ同工酶谱显示异常,全酶活性明显增高、ＬＤＨ同工酶谱及全酶活性未发生明显变化。Ｌ６１５白血病鼠脾脏淋巴细胞中（白血病细胞占８４％）,Ｇ６ＰＤ和ＬＤＨ同工酶谱均显示异常,同时全酶活性也明显增强。提示：Ｇ６ＰＤ对白血病细胞的恶性增殖和浸润似乎更为敏感。     

前列腺素F2α对大鼠肾小球系膜细胞DNA合成的影响

本实验应用（＾３Ｈ）胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法测定前列腺素Ｆ２α（ＰＧＦ２α）对大鼠肾小球系膜细胞ＤＮＡ合成的作用,测定系膜细胞合成的二脂酰甘油（ＤＡＧ）及磷酸肌醇（ＩＰ）。结果表明,ＰＧＦ２α促进系膜细胞的ＤＮＡ合成、ＤＡＧ及ＩＰ的生成。提示ＰＧＦ２α使系膜细胞的磷脂酶Ｃ活化,产生ＩＰ及ＤＡＧ,激活蛋白激酶Ｃ,从而促进ＤＮＡ合成及细胞增殖。     

可乐定对背根神经节神经元GABA激活电流的抑制作用

本实验在新鲜分离大鼠背根神经节（ＤＲＧ）细胞上应用全细胞膜片的箝记录研究贤上腺素α２－受体激动剂可乐定（ｃｌｏｎｉｄｉｎｅ）对ＧＡＢＡ－激活电流的调制作用。发现缘大多数ＤＲＧ细胞对ＧＡＢＡ（１０＾－６￣１０＾－３ｍｏｌ／Ｌ）敏感（７２／７５）,产生浓度依赖性的内向电流;并且可被ｂｉｃｕｃｕｌｉｎｅ（１０＾－５￣１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ）所阻断。在多数细胞中（５１／７２）预加可乐定（１０＾－８￣１０＾－     

抗旱性不同的两个大豆品种对外源H2O2的响应

两个品种的大豆叶圆片经１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ和１０＾－３ｍｏｌ／Ｌ的Ｈ２Ｏ２处理１２ｈ后,超氧化岐化酶（ＳＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）与谷胱甘肽还原酶（ＧＲ）活性明显增加,但１０＾－２ｍｏｌ／Ｌ的Ｈ２Ｏ２处理却使这些酶活性降低。抗旱性较强的大豆品种小粒豆１号较抗旱性较弱的鲁豆４号能维持较高的叶绿素含量和较高的ＳＯＤ、ＣＡＴ及ＧＲ活性,对Ｈ２Ｏ２的抗性较强。５０μｍｏｌ／Ｌ的亚胺环已酮（ＣＨＭ）能消除     

HLA—G研究进展

ＨＬＡ－Ｇ分子属ＭＨＣ Ⅰ类非典型分子（ＭＨＣ Ⅰｂ）组织特异性地高表达于胎母界面的滋养层细胞,ＭＨＣⅠ、Ⅱ类抗原是缺乏的,ＨＬＡ－Ｇ分子通过ＮＫ细胞受体抑制ＮＫ细胞杀伤性,并作为ＣＤ８＾＋细胞毒抑制性Ｔ细胞的识别和激活因子,抑制ＣＴＬ的杀伤作用,ＨＬＡ－Ｇ在胎母耐受中发挥重要作用。     

构建基因工程菌发酵产生维生素C的前体2-酮基-L-古龙酸

从棒状杆菌ＳＣＢ３０５８克隆得到两个２,５－ＤＫＧ＾＊＊还原酶基因后,构建了两个能够表达２,５－ＤＫＧ还原酶的基因工程大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）ＰＥＴ９ａⅡ和ＤＨ５α（ｐＢＬ４）和一个基因工程欧文氏菌ＥＲ９７。２,５－ＤＫＧ还原酶基因分别受控于ＰＬ或Ｔ７启动子,通过加入ＩＰＴＧ或提高温度进行诱导,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和酶活测定确定它们在诱导后得到了高表达,用细胞抽提液在加入辅酶ＮＡＤＰＨ的体外实验中转     

番茄叶片胞外β-N-乙酰氨基己糖苷酶的部分性质研究

用从系统感染ＴＭＶ（ｔｏｂａｃｃｏ ｍ ｏｓａｉｃ ｖｉｒｕｓ）的番茄叶胞外蛋白提取液中纯化的β－Ｎ－乙酰氨基己糖苷酶为材料,研究了该酶的部分性质。以ｐ－硝基苯基－Ｎ－乙酰－β－Ｄ－氨基葡萄糖苷（ｐＮＰ－β－Ｄ－ＧｌｃＮＡｃ）或ｐ－硝基苯基－Ｎ－乙酰－β－Ｄ－氨基半乳糖苷（ｐＮＰ－β－Ｄ－ＧａｌＮＡｃ）为底物,该酶的最适ｐＨ在４．８—５．０ 之间,最适温度在４４—４７℃之间。对酶的热稳定性研究表明,温度对酶的热变性作用表现为两相变性曲线,Ｋｍ 值分别为０．３６ ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ （ｐＮＰ－β－Ｄ－ＧｌｃＮＡｃ为底物）和０．６７ ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ （ｐＮＰ－β－Ｄ－ＧａｌＮＡｃ 为底物）,Ｎ－乙酰氨基葡萄糖（ＧｌｃＮＡｃ）和Ｎ－乙酰氨基半乳糖（ＧａｌＮＡｃ）是酶活性的竞争性抑制剂,Ａｇ＋ 和Ｈｇ２＋ 是酶活性的强抑制剂,金属离子Ｆｅ２＋ 、Ｆｅ３＋ 和Ｃｕ２＋ 也抑制酶活性。     

人食管鳞状上皮癌糖复合物表达的研究

凝集素可与其相对应的糖复合物特异性结合。在癌症形成过程中细胞表面经历着显著的变化,本文用十种生物素化凝集素即ＵＥＡ－Ｉ、ＲＣＡ－Ｉ、ＤＢＡ、ＰＳＡ、ＰＮＡ、ＢＳＬ、ＬＣＡ、ＷＧＡ、ＣｏｎＡ和ＳＢＡ作为探针,对正常食管上皮和食管鳞状上皮癌进行研究,以确定正常食管上皮和食管鳞状上皮癌中糖复合物的改变,结果发现,ＰＮＡ和ＰＳＡ在正常食管和食管鳞状上皮癌中均无反应,ＲＣＡ－Ｉ、ＤＢＡ、ＢＳＬ、ＬＣＡ、ＣｏｎＡ和ＳＢＡ受体在正常和癌组织中有着特征性变化,ＢＳＬ和ＤＢＡ在食管中无反应,ＬＣＡ、ＳＢＡ和ＲＣＡ－１正常食管和食管鳞状上皮癌中反应方式不同,ＣｏｎＡ和ＷＧＡ则在同一癌组织的不同部位都显示出不同的反应。尽管ＵＥＡ－Ｉ在正常食管和食管鳞状上皮癌均呈阳性反应,但似乎未表现出有意义的变化。上述结果提示食管癌的发生与含α－Ｄ－ＧａｌＮＡｃ（ＤＢＡ和ＳＢＡ）、β－Ｄ－Ｇａｌ／β－Ｎ－ａｃｅｔｙｌ－Ｄ－Ｇａｌａｃｔｏｓａｍｉｎｅ（ＲＣＡ－Ｉ）、α－Ｄ－Ｇｌｃ／α－Ｄ－Ｍａｎ（ＬＣＡ和ＣｏｎＡ）、［β－（１－４）－Ｄ－ＧｌｃＮＡｃ］２／ＮｅｕＮＡｃ（ＷＧＡ）和α－Ｄ－Ｇａｌ（ＢＳＬ）等的糖复合物的改变有较为密切的关系。     

缓激肽抑制大鼠DRG分离神经元的GABA激活电流

本文应用全细胞膜片箝技术在新鲜分离的大鼠背根神经节（ＤＲＧ）神经元上研究缓激肽（ＢＫ）对γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）反应的调制作用。结果发现：在３４个对ＧＡＢＡ反应的细胞中有３１个细胞对ＢＫ敏感。在对ＢＫ敏感并引起内向电流的２７个细胞中预加ＢＫ,对ＧＡＢＡ－激活电流具有明显的抑制作用,如１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ的ＢＫ可抑制ＧＡＢＡ（１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ）激活电流３０％。ＢＫ可将ＧＡＢＡ量效曲线明显下移,并     

人主动脉硫酸乙酰肝素蛋白聚糖对培养的人血管壁细胞生长的作用

通过培养的人主动脉平滑肌细胞（ｈＡＳＭＣ）及脐静脉内皮细胞（ｈＵＶＥＣ）,应用＾３Ｈ－ＴｄＲ参入、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ分析、逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）、放射免疫分析（ＲＩＡ）、和紫外比色法等技术观察了人主动脉中硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（ＨＳＰＧ）对ｈＡＳＭＣ和ｈＵＶＥＣ ＤＮＡ合成的作用及对血小板源生长因子（ＰＧＤＦ）、ＰＧＤＦ受体、转化生长因子β（ＴＧＦ－β）、内皮素－１（ＥＴ－１）或     

SKF38393抑制大鼠DRG分离神经元GABA-激活电流

在大鼠新鲜分离ＤＲＧ神经元标本上应用全细胞膜片箝记录,观察了多巴胺Ｄ１受体的选择性激动剂ＳＫＦ３８３９３ＨＣＩ对ＧＡＢＡ－激活电流的作用。大部分受检细胞对ＧＡＢＡ敏感,１０＾－６－１０＾－３－ｍｏｌ／Ｌ ＧＡＢＡ可于引起呈剂量依赖性的明显去敏感作用的内向电流。     

氧化修饰使HDL促动脉平滑肌细胞胆固醇流出减少

为了研究氧化修饰对高密度脂蛋白（ＨＤＬ）转运细胞胆固醇地＾３Ｈ－胆固醇负荷的培养人动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）分别与天然ＨＤＬ及Ｃｕ＾２＋ａｋｇ ＨＯＣｌ氧化修饰的ＨＤＬ在３７℃温育不同时间后,分别测定细胞＾３Ｈ－胆固醇清除率。结果发现,温育２４ｈ后,经Ｃｕ＾２＋或ＨＯＬｌ氧修饰后的ＨＤＬ其细胞胆因醇清除率分别较天然ＨＤＬ下降了３０．０％和４３．１％（ｐ〈０．０１）。结果还发现,Ｃｕ＾２＋或ＨＯＣｌ氧     

种子引发提高小麦抗渗透胁迫能力的效应

种子经渗透势－０．８ＭＰａ或－１．２ＭＰａＰＥＧ－６０００处理后,抗旱性不同小麦（ＴｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍＬ．）“晋麦３３”和“８４Ｇ６”种子萌发率均有提高,种子电解质外渗率明显降低,种子萌发适应渗透胁迫能力提高,种子可溶蛋白质含量、ＰＡＬ和ＰＯＤ活性显著增加,“晋麦３３”种子ＣＡＴ活性增加,两品种幼苗ＰＡＬ、ＰＯＤ和ＣＡＴ活性也均有提高,但“８４Ｇ６”种子ＣＡＴ活性下降。     

HDL受体和肝性脂酶在肝选择性摄取HDL_2－CE中的协同作用

体外重组３Ｈ－ＣＥ－无ＡｐｏＥ－ＨＤＬ２（ｒＨＤＬ２）保持天然ＨＤＬ２生物活性。大鼠肝窦状隙细胞与ｒＨＤＬ２３７℃培养３ｈ（正常组）;细胞内吞ｃｐｍ为９９５±１４７（ｘ±Ｓ．Ｄ．,ｎ＝２）。细胞进一步９７℃培养２ｈ．释放三氯醋酸（ＴＣＡ）沉淀和ＴＣＡ上清液中ｃｐｍ为７８±３２和１２±９。Ｎ－乙酰咪唑修饰组为３３９±６２、１９±１１和９±５。肝素处理组为５４２±７８、３４±１４和９±８。实验结果提示：（１）肝窦状隙细胞通过ＨＤＬ受体内吞ＨＤＬ２摄取ＨＤＬ２－ＣＥ,并通过逆向胞饮将ＨＤＬ３排出体外．（２）肝性脂酶（ＨＬ）直接介导细胞选择性摄取ＨＤＬ２－ＣＥ,导致ＨＤＬ３生成．（３）ＨＬ和ＨＤＬ受体在介导细胞选择性摄取ＨＤＬ２－ＣＥ中具有协同作用。     

缓激肽对大鼠背根神经节分离神经元ATP激活电流的调制作用

在新鲜分离大鼠背根神经节（ＤＲＧ）的５６个细胞标本上,应用全细胞膜片箝技术进行记录。胞外加缓激肽（ＢＫ,１０＾－６￣１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ）引坊的ＤＲＧ细胞膜反应结果如下：（１）７１．４％的细胞为内向电流,其电流反应的幅值具有明显的浓度信赖性;（２）１２．５％的细胞为外向电流;（３）１６．１％的细胞未引起可检测的膜反应,单独给予ＡＴＰ（１０＾－６￣１０＾－３ｍｏｌ／Ｌ）在大多数受栓细胞（５４／５６）     

湖南尖吻蝮蛇毒两个出血毒素的纯化和理化性质

经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５凝胶过滤,ＱＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－５０和ＣＭ－ＳｅｐｈａｄｅｘＣ－２５离子交换层析的步骤,从湖南产尖吻蝮（Ｄｉｅｎａｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎａｃｕｔｕｓ）蛇毒中纯化出两个出血毒素（ＤａＨＴ－１和ＤａＨＴ－２）．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得分子量均为２３．５ｋＤ,ＩＥＦ－ＰＡＧＥ测得等电点分别为５．６和５．２,两者具有相似的氨基酸组成,其中酸性氨基酸（Ａｓｘ,Ｇｌｘ）分别占２３％和２４％,ＤａＨＴ－１和ＤａＨＴ－２的最小出血剂量（ＭＨＤ）分别为０．５μｇ和０．８μｇ。都具蛋白水解酶活性,无对ＴＡＭＥ,ＢＡＥＥ的水解活性和ＰＬＡ２酶活性．两者的蛋白水解酶活力与出血活性并非正相关．ＤａＨＴ－１和ＤａＨＴ－２的最适温度分别为３５℃和４０℃,最适ｐＨ为６－９,对热均不稳定,温度高于６０℃活性完全丧失。金属离子的分析显示每摩尔毒素蛋白约含０．５ｍｏｌ的Ｚｎ,１ｍｏｌ的Ｃａ,较多的Ｎａ、Ｋ、Ｍｇ,不含Ｃｏ。     

氧化修饰HDL刺激培养人主动脉平滑肌细胞增殖

平滑肌细胞（ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｃｅｌｌ,ＳＭＣ）增殖在动脉粥样硬化（ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ,ＡＳ）形成中起着重要作用。氧化修饰ＨＤＬ（ｏｘｉｄｉｘｅｄ ＨＤＬ,ＯＸ－ＨＤＬ）可刺激＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入培养人动脉ＳＭＣ的ＤＮＡ,促进ＳＭＣ增殖。以四甲工偶氮唑盐９ＭＴＴ）法直接观察ＯＸ－ＨＤＬ对培养人动脉ＳＭＣ增殖细胞数的影响。结果显示,天然ＨＤＬ（ｎａｔｉｖｅ ＨＤＬ Ｎ－ＨＤＬ）对     

乙酰胆碱对培养T细胞功能的作用

本文研究不同浓度（１０＾－１０－１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ）乙酰胆碱（ＡＣｈ）对离体培养的大鼠脾脏Ｔ淋巴细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。实验结果表明：１０＾－９－１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ可显著增强Ｔ细胞由刀豆素Ａ（Ｃ－Ａ）诱导的增殖反应,以１０＾－７－１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ时最强。淋巴细胞先用ＡＣｈ刺激１ｈ或者刺激１ｈ后洗弃ＡＣｈ,再用ＣｏｎＡ诱导６ｈ的Ｔ细胞的增殖。１０＾－７－１０－６ｍｏｌ／Ｌ阿托品可阻