河套蜜瓜ACC合成cDNA酶片段的克隆和序列分析

１－氨基环丙烷－１－羧酸（ＡＣＣ）合成酶是高等植物中乙烯生物合成的关键酶。以成熟河套蜜瓜果实的ＲＮＡ为模板,经反转录和ＰＣＲ扩增得到预期大小的ＤＮＡ片段,插入到ＰＵＣ１９的ＳｍａＩ位眯后转化Ｅ．ｃｏｌｉＪＭ１０９,筛选出重组子ＰＨＭＡＳ１。离列分析表明获得了６２７ｂｐ的ＡＣＣ合成酶ｃＤＮＡ片段。与已报道的ＡＣＣ合成酶基因相应离理比较有很高的同源性。     

河套蜜瓜ACC合成酶cDNA片段的克隆和序列分析

1-氨基环丙烷-1-羧酸（ACC）合成酶是高等植物中乙烯生物合成的关键酶。以成熟河套蜜瓜（CucumismeloL．cvHetau）果实的RNA为模板,经反转录和PCR扩增得到预期大小的DNA片段,插入到pUC19的SmaⅠ位点后转化E.coliJM109,筛选出重组子pHMAS1。序列分析表明获得了长627bp的ACC合成酶cDNA片段。与已报道的ACC合成酶基因相应序列比较有很高的同源性．     

河套蜜瓜花粉管通道法转化hALR基因

为利用河套蜜瓜为生物反应器生产可用于治疗肝病的蛋白因子,以人胎肝mRNA为模板,经RT-PCR扩增获得了471 bp cDNA片段.克隆到pMD18-T载体,命名为pMD-ALR,测序分析结果与GenBank中报道的hALR编码序列完全相同.酶切回收hALR片段,插入到含有甜瓜果实黄瓜素(Cucumisin)基因启动子的果实特异性表达载体pPZP-CGN中,构建了hALR甜瓜果实特异性表达载体pPZP-CAN.花粉管通道法转化试验大田自花授粉花63朵,收获T0代果实27颗,结实率为42.9%.提取T0代种子无菌苗DNA,经PCR、PCR-southern和斑点杂交检测有13株呈阳性.     

番茄ACC合酶反义基因对河套蜜瓜的转化

河套蜜瓜（CucumismeloLcvHetau）的子叶经预培养。芽诱导和生根培养,获得再生小植株,诱导率达58％。取带有番茄ACC合酶反义基因的双元载体pMQ6／JM109与农杆菌（Agrobacteriumtumefaciens）LBA4404经三亲融合后,与在MS0上萌发5d、并在MS＋1mg／LNAA培养基上预培养3d的子叶共培养48h,然后转入含50mg／L卡那霉素的MS＋6mg／LZT的芽诱导培养基中,1l个月后诱导生芽,待芽长1．5－2cm时转入生根培养基中,1－2周后可诱导产生大量的根,形成完整的转基因小植株。经PCR和分子杂交检测证明,目的基因已整合入河套蜜瓜的基因组中。     

去果河套蜜瓜源叶碳水化合物及其相关酶昼夜变化特征

以河套蜜瓜为试材,在果实迅速膨大期通过去果处理改变库源关系,研究源叶净光合速率,蔗糖、还原糖和淀粉含量及其代谢相关酶活性的昼夜变化规律。结果表明:(1)源叶的净光合速率为单峰曲线,无明显的"光合午休"现象,去果处理对其无影响。(2)源叶中蔗糖和还原糖含量的昼夜变化为单峰曲线,蔗糖磷酸合成酶和蔗糖合成酶合成方向活性的昼夜变化为双峰曲线,蔗糖合成酶分解方向、酸性转化酶和中性转化酶活性的昼夜变化无明显规律,改变库源关系对这些指标均无显著影响;蔗糖含量升高受蔗糖磷酸合成酶和蔗糖合成酶合成方向正调控,而蔗糖含量降低则受多种酶的共同调节。(3)源叶中淀粉含量和腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶活性的昼夜变化为单峰曲线,去果处理可以显著提高淀粉含量和腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶活性,淀粉含量升高受腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶正调控。     

河套蜜瓜果实发育过程中糖积累与蔗糖代谢相关酶的关系

以河套蜜瓜为试材,采用外部形态观测与内部生理指标测定相结合的方法,对其果实发育过程中果实生长模式以及果实中蔗糖、果糖、葡萄糖和淀粉含量以及蔗糖代谢相关酶活性进行测定,以揭示河套蜜瓜果实生长发育过程中糖的代谢积累与相关酶的关系.结果显示:(1)河套蜜瓜果实生长速率呈单"S"曲线,果实发育早期以积累葡萄糖为主,进入成熟期后蔗糖积累量迅速增加,最终由蔗糖和己糖共同构成果实品质.(2)在河套蜜瓜果实成熟期前,蔗糖磷酸合成酶(SPS)活性维持较低水平,进入成熟期后,SPS活性迅速升高;蔗糖合成酶(SS)活性在成熟期前为分解活性大于合成活性,成熟期后表现为合成活性大于分解活性;在整个果实发育期,酸性转化酶(AI)活性较低,中性转化酶(NI)活性始终高于AI.(3)在果实整个发育期,蔗糖含量与蔗糖代谢酶的净活力呈极显著正相关,蔗糖代谢相关酶共同作用决定果实中蔗糖含量.研究表明,在河套蜜瓜果实发育前期,以蔗糖分解代谢为主,且蔗糖合成酶和中性转化酶是催化蔗糖分解的关键酶;果实成熟期间,蔗糖代谢转为合成方向为主,蔗糖合成酶和蔗糖磷酸合成酶在蔗糖积累中起主导作用.     

甜瓜的组织培养与快速繁殖

１植物名称甜瓜（Ｃｕｃｕｍｉｓｍｅｌｏ）品种“状元”。２材料类别顶芽、侧芽。３培养条件初代培养基：（１）ＭＳ＋６－ＢＡ０．２ｍｇ·Ｌ－１（单位下同）＋ＩＡＡ０．２。增殖培养基：（２）ＭＳ＋６－ＢＡＩ＋ＩＡＡ０．２。生根培养基：（３）Ｍｉｌｌｅｒ＋ＩＡＡ０．２;（４）Ｍｉｌｌｅｒ（无激素）。以上培养基ｐＨ均为５．８～６．０。琼脂浓度在（１）、（２）中为０．７％,在（３）、（４）中为０．６％;糖浓度在（１）、（２）中为３％,在（３）、（４）中为２％。培养温度均为（２５±３）℃,光照度２０００ｌｘ,光…     

甜瓜组织培养过程中的染色体数目变异

以甜瓜组织培养过程中产生的不定芽为材料,观察了不同阶段不定芽中染色体数目发生变异的频率,同时比较了在无外加诱变剂的情况下,甜瓜根尖与组培不定芽之间最大分裂相时间的变化。     

朱丽亚甜瓜的组织培养和快速繁殖

1　植物名称　日本引进的甜瓜品种“朱丽亚”(Cu cumismelovar.julia)。2　材料类别　茎段、种子。3　培养条件　种子发芽培养基 :( 1 ) 1 /2MS。茎段生长培养基 :( 2 )MS + 6 BA 2 .0mg·L- 1 (单位下同 ) +NAA 0 .0 5 ;( 3)MS + 6 BA 2 +PP3333.0 +NAA 0 .0 5。所有培养基均附加 0 .7%琼脂和 3%的蔗糖 ,pH 5 .8～ 6.0 ,培养温度为 2 3～ 2 7℃ ,光照 1 2h·d- 1 ,光照度为 2 0 0 0lx左右。4　生长与分化情况4.1　外植体的灭菌　种子用自来水冲洗 3～ 4次后 ,在无菌条件下用 0 .1 %HgCl2 消毒 1 0～ 1 2min ,然后用无菌水洗 4～ …     

“春丰1号”厚皮甜瓜的组织培养和快速繁殖

1植物名称日本引进的厚皮甜瓜（Cu－cumismelovar.reliculatus)品种“春丰1号”。2材料类别种子。3培养条件种子先用75％的乙醇浸30s,再用0．1％的HgCl2浸泡10min,最后用无菌水冲洗4遍后,接种在不添加激素的MS固体琼脂培养基上,7－10d后萌发长成实生苗。将实生苗基部第3和第4节位单节切段,分别接种到不同配方培养基中,生长20d,再将试管苗单节切段,接种在相同的培养基上,25d后统计试管苗数,同时观察试管苗的形态学变化。生根培养是将单节切段接种到生根培养基上,25d后统计生根率和根条数,所有处理的样本量均为10株试管苗,3次…     

芋的组织培养

1植物名称芋,又称芋艿（Colocasiaesculenta）。2材料类别芽。3培养条件培养基：（1）MS＋NAA0．2mg／L（单位下同）＋BA2;（2）MS＋NAAI＋BA4;（3）MS＋NAA2＋BA0．2。琼脂6．5g／L,pH54。光照度500～2000IX,照光12h／d,25C恒温下培养。毛生长与分化情况芋的球茎经清洗后,常规方法灭菌,无菌水洗3次,再以解剖刀切取球茎上的顶芽或腋芽供试验。芽接种于培养基（l）上,2～3个月后芽长大,叶片展开,其基部两侧长出报并成完整小苗。若将纵切一刀的芽接种到培养基（1）上,50d后形成两个芽。芽切块接种在培养基（2）上6个…     

大丽花的组织培养

TissueCultureofDehlja加nnataWEIban－Li,LIYingZhang,HANBi－Wen（CtherofBdhAlu：YllS‘、,CboAgrhalz7,x－xl！nl。,Sdu,hejmp100094）1植物名称大丽花（Dahliapinnata）。2材料类别块根上所生不定芽的嫩叶。3培养条件诱导芽分化培养基为MS＋＊＊AO．5：g·L’（单位下同）：＋6－＊AO．1＋GA。卫;诱导根分化培养基为1／ZMS＋IBA0．l。培养温度25”C左右,光照12h·d’。电生长与分化情况将外植体嫩叶用无菌去离子水冲洗2～3遍,经灭菌后切成3mmX3mm的小块接种于诱导芽分化的MS培养基上。经过10d培养,外植体…     

苔藓植物的组织培养

苔藓植物组织培养起步较早 ,但其组织结构和生活习性与其他高等植物差别较大 ,常规的培养条件对其并不适合 ,因而获得成功的种类较少。苔藓植物组织培养具有一定的学术和应用价值 (如从其愈伤组织中提取次生代谢物质或从其体内寻找抗逆性基因或药用成分等 ) ,深入研究其组织培养是必要的     

甜叶菊的组织培养

TissueCultureofSteviarebaudianumSHENXiu-Li（NortheastAgriculturalUniversity，Harbin150030）1植物名称甜叶菊（Steviarebaudianum），又名甜菊。2材料类别茎尖。3培养条件愈伤组织诱导及芽分化的基本培养基为MS，各处理附加成份依次为：（1）NAA05mg／L（单位下同）＋6－     

蕨的组织培养

TissneCultureofPieridiumaquilinumvar．latiusculumSUJian－Yu,WANGJun,LIJi-Ning,LIANGWen－Yu,HUAZheng－Ji（DepartmentofBiology,NingxiaAgriculturalCollege,Yinchum750105）1植物名称蕨（Pteridiumaquilinumvar.latiusculum。2材料类别带顶芽或不带顶芽的根状茎。3培养条件（1）诱导“绿色小球”（GGB）培养基：互／2MS＋6－BAI．0mg·L－’（单位下同）＋IBAI．0;（2）丛生芽诱导、继代培养基：1／ZMS＋KTI．0;（3）生根培养基：回／ZMS。上述培养基中均加蔗糖2％,NaH。PO;200,活性炭1．5P·L…     

马蹄莲的组织培养

TissueCultureofZantedescltiaaethiopicaQILIWang,HANSu－Ying,YANGYun－Long,ZANGMeng－Yi,ZHANGJing－Tao（fort7wizlofmp,sleZlirzA叶如仪份功U——ndg,了～卯03080至）1植物名称马蹄莲de川b如旧办班规彻仲山）。2材料类别球茎。3培养条件基本培养基为改良MS（其中：NH4NO。,KNO3减半,加KH。PO;25mg／L,生根的MS全量）。附加物（mg／L）：（）6－BA2＋NAA005＋IBA0．05＋LH50＋Vc5;（2）6－BA0．75＋NAA0．2＋IBA02＋LH50＋Vc5;（3）6BA3＋NAA0．2＋LH80＋Vc40;（4）6．BAI．5＋NAA0…     

绿萝叶片的组织培养

绿萝（Epipremnum aureum(Linden et Andre)Bunting）系天南星科（Araceae） 麒麟叶属（Epipremnum）的一种木质藤本植物，常攀援于山石上、墙壁上或它树上附生，分枝多，枝悬垂，园艺上用作荫棚悬挂植物。绿萝的叶片薄革质，翠绿色，一般 （特别是叶面）有多数不规则的黄色斑块，极为美丽，它不仅是庭园观赏植物，而且还可折枝插瓶，经久不萎。本种不易开花，通常都是无性扦插繁殖门。迄今为止，关于绿萝的组织培养，除1986年K·Y．Paek等人报道用Scundapsus aureus(Epipremnum pinnatum)的茎央和腋芽进行培养外，尚未见到其他的报道。     

慈姑的组织培养

1　植物名称　华夏慈姑 (Ｓａｇｉｔｔａｒｉａｔｒｉｆｏｌｉａｖａｒ.ｓｉｎｅｎｓｉｓ)。2　材料类别　茎尖。3　培养条件　启动培养基为 :( 1 )ＭＳ 6 ＢＡ 4ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) ＮＡＡ 1。分化培养基为 :( 2 )ＭＳ 6 ＢＡ 2 ;( 3)ＭＳ 6 ＢＡ 4。培养基加蔗糖     

姜黄花的组织培养

1　植物名称　姜黄花 (Ｃｕｒｃｕｍａｌｏｎｇａ)。2　材料类别　球茎上的不定芽。3　培养条件　愈伤组织诱导培养基 :( 1 )ＭＳ +6 ＢＡ 1 .0ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) +ＮＡＡ 0 .1。芽分化及增殖培养基 :( 2 )ＭＳ + 6 ＢＡ 1 .0 +ＩＡＡ 0 .1 ;( 3)ＭＳ + 6 ＢＡ 1 .0 +ＫＴ 0 .1 +ＮＡＡ 0 .1。诱导生根培养基 :( 4 ) 1 /2ＭＳ +ＮＡＡ 0 .2。上述培养基均加蔗糖 3%、琼脂 0 .8%,ｐＨ 5 .8。培养基 ( 2 )、( 3)、( 4 )中可加入 0 .0 3%活性碳。培养温度为( 2 5± 2 )℃ ,光照度为 1 5 0 0ｌｘ ,光照时间 1 2ｈ·ｄ- 1 。4　生长与分化…