五步蛇毒中低分子量蛇毒类凝血酶的分离纯化

目的 寻找五步蛇毒新的蛇毒类凝血酶组份。方法 用ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－Ｆａｓｔ Ｆｌｏｗ（－ＦＦ）,ｃｍ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－ＦＦ纯化经常规化学提纯的五步蛇毒;以血凝活性和精氨酸酯酶活性（ＢＡＥＥ）检测酶活力;以ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳法测定分子量。结果 得到分子量为１４０００左右的电泳纯蛇毒类凝血酶组份。结论 五步蛇毒中含有低分子量蛇毒类凝血酶。     

乙醇对五步蛇（Agkistrodonacutus）毒毒性的影响

目的为了探索乙醇对五步蛇毒毒性的影响。方法将五步蛇毒不同浓度致死量经不同浓度乙醇体外处理后,选择小白鼠分别给予皮下注射、口服,并将致死量蛇毒于小白鼠皮下注射后立即于局部注射乙醇,观察蛇毒毒性情况。结果使用乙醇体外处理后的五步蛇毒毒性明显下降,小白鼠经皮下注射致死量五步蛇毒后立即在局部注射50％异蛇米酒或75％乙醇0．1～0．2ml有一定的保护作用,口服20倍致死量五步蛇毒未发现有毒性表现。结论五步蛇毒体外经过乙醇处理后毒性明显下降。口服五步蛇毒是安全的。蛇毒进入皮下后立即用乙醇处理有一定的治疗效果。     

注射抗五步蛇毒血清致过敏性休克1例

注射抗五步蛇毒血清致过敏性休克１例唐珍丽（桂林市中医院）抗五步蛇毒血清系用蛇毒免疫后的马血浆精制而成，临床上用于治疗五步蛇咬伤，疗效较好，现将我院在使用过程中引起过敏性休克１例报导如下。徐某，男，３６岁，五步蛇咬伤左拇指８ｈ，于１９８９年５月１１日入...     

蝮蛇毒,五步蛇毒对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

观察吞噬百分率及吞噬指数两指标,结果示,小鼠腹腔注入鸡红细胞后０．５ｈ和２ｈ检测,蝮蛇毒１２μｇ／２０ｇ组和６μｇ／２０ｇ组,两指标均值均明显高于对照组（用生理盐水）;五步蛇毒５０μｇ／２０ｇ组和１０μｇ／２０ｇ组,除０．５ｈ检测见吞噬指数与对照组未出现明显差异外,余项均值均明显高于对照组。认为两种蛇毒均可提高巨噬细胞的吞噬作用     

半夏和滴水珠抗五步蛇毒中毒作用的实验研究

目的研究滴水珠与半夏生药及其提取物抗五步蛇毒的作用。方法将ICR小鼠随机分为半夏生药组、半夏醇提物组、滴水珠生药组、滴水珠醇提物组、空白对照组、阳性对照组及模型组,各组小鼠均灌胃给药7天,并观察各给药组小鼠的体重变化情况;在末次给药1h后于小鼠腹腔注射五步蛇毒,观察各组小鼠的中毒表现,并统计各组小鼠的死亡率,比较各组小鼠的肝脏指数、脾脏指数及胸腺指数,并对各组小鼠血浆纤维蛋白原（FIB）、血浆凝血酶原时间（PT）、凝血酶时间（TT）、活化部分凝血酶时间（APTT）以及血小板（PLT）、红细胞（RBC）和白细胞（WBC）计数进行比较。结果半夏和滴水珠醇提物、半夏和滴水珠生药均可降低五步蛇毒中毒小鼠的死亡率,对五步蛇毒引起的小鼠PT、TT、APTT上升和FIB下降具有显著的抑制作用,与模型组相比P〈0.05;并可影响五步蛇毒中毒小鼠外周血血小板（PLT）、红细胞（RBC）和白细胞（WBC）计数,与模型组相比P〈0.05。但滴水珠和半夏生药可引起小鼠体重下降,并影响肝脏、胸腺和脾脏指数,与空白对照组相比P〈0.05。结论半夏和滴水珠醇提物及半夏和滴水珠生药均具有一定的抗五步蛇毒作用,乙醇提取能降低半夏和滴水珠的毒性。     

五步蛇毒对小鼠免疫功能的影响

目的 探索五步蛇毒对正常小鼠免疫功能的影响.方法 将KM小鼠随机分为5组,分别为空白组、五步蛇毒安全范围内低剂量组(30 mg/kg)、五步蛇毒安全范围内中剂量组(60 mg/kg)、五步蛇毒安全范围内高剂量组(120 mg/kg)(以下简称五步蛇毒低、中、高剂量组)以及西洋参组(30 mg/kg),每组10只.各组小...     

五步蛇毒AAVC-I对人口腔鳞癌细胞的增殖抑制作用

目的观察祁门五步蛇毒抑瘤组分I(Agkistrodon acutus venom component-I, AAVC-I)对人口腔鳞癌Tca8113细胞的增殖抑制及凋亡的影响。方法以离子交换和凝胶过滤法从安徽祁门五步蛇粗毒中分离纯化五步蛇毒AAVC-I。常规培养口腔鳞癌Tca8113细胞,观察正常细胞形态学。实验分为对照组(加入等量细胞培养液)和实验组(分别加入AAVC-I 2.5、5.0、10.0μg/ml)。采用MTT法检测不同浓度(2.5、5.0、10.0μg/ml)的AAVC-I对Tca8113细胞24、48及72 h的增殖抑制率,倒置显微镜观察不同浓度AAVC-I处理后的细胞形态变化,透射电镜及AO/EB双荧光染色观察AAVC-I对细胞凋亡的影响,并与对照组进行比较。结果与对照组比较,实验组AAVC-I对Tca8113细胞增殖具有明显抑制作用(P0.05);AAVC-I处理后,倒置显微镜下可见明显细胞凋亡现象,电镜下可见细胞核染色质、胞质浓缩及凋亡小体;AO/EB双荧光染色可见细胞膜完整,细胞核致密浓染,染成黄绿色荧光的早期凋亡细胞及细胞膜破损,细胞核浓聚及偏移,呈橘红色荧光的晚期凋亡细胞。结论祁门五步蛇毒AAVC-I能抑制人口腔鳞癌Tca8113细胞生长增殖,诱导其凋亡。     

五步蛇毒降纤酶的快速分离与纯化

目的：建立快速分离纯化降纤酶工艺方法适合于规模化生产。方法以五步蛇毒为原料。采用ＥＤＴＡ络合－硫氰酸钾沉淀初步分离与快速离子交换和凝胶层析化相结合。分离纯化出符合新部颁标准的降纤酶成分。结果经初步分离五步蛇粗毒可使出血毒去除９２％,非类凝血酶（ＴＬＥ）成分去除６５．１７％,ＴＬＥ活性回收保持９２．６８％以上。层析组份中至少含有４种ＴＬＥ,其中１种为降酶成分。初步化学分离,。离子交换柱层析和凝胶过滤     

抗五步蛇毒血清治疗五步蛇咬伤175例

报道用精制抗五步蛇毒血清治疗五步蛇咬伤１７５例,治愈１６６例,治愈率为９４．８７％。截肢３例,截指４例,致残率４％。死亡２例,病死率为１．１４％。有效率９８．８６％。     

广西眼镜蛇、银环蛇和五步蛇蛇毒的 体外抑菌作用

目的初步研究广西眼镜蛇、银环蛇和五步蛇蛇毒的体外抑菌作用,并比较各种蛇毒对金黄色葡萄球菌、甲型溶血性链球菌、大肠埃希菌和枯草芽胞杆菌的抑菌效果。方法观测4种菌的生长情况。采用微量肉汤稀释法检测广西眼镜蛇、银环蛇和五步蛇蛇毒对4种细菌的抑菌作用,分析比较不同蛇毒的抑菌效果和孵育时间对抑菌效果的影响。结果广西眼镜蛇和五步蛇蛇毒对金黄色葡萄球菌、甲型溶血性链球菌、大肠埃希菌和枯草芽胞杆菌均有一定的抑制作用,而银环蛇蛇毒未见明显抑制作用(1 280μg/mL)。广西眼镜蛇和五步蛇蛇毒对于4种菌孵育48、72 h的MIC_(80)、MIC_(50)值均比孵育24 h提高2倍或以上。金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和枯草芽胞杆菌的抑菌效果:广西眼镜蛇蛇毒五步蛇蛇毒银环蛇蛇毒;甲型溶血性链球菌的抑菌效果:五步蛇蛇毒广西眼镜蛇蛇毒银环蛇蛇毒。结论广西眼镜蛇和五步蛇蛇毒均具有一定的体外抑菌作用,且对于不同种类的细菌抑菌活性不同,银环蛇蛇毒未发现有明显的体外抑菌作用。     

响应面法优化提取虎耳草总酚及其抑制五步蛇毒PLA2酶活性的相关性

为了探讨虎耳草总酚（TP）与抑制五步蛇毒中磷脂酶A₂（PLA₂）之间的关系,本研究通过单因素试验及Box-Behnken试验对虎耳草TP的提取条件与抑制五步蛇毒中PLA₂活性进行优化,考察各试验因素对超声辅助提取虎耳草TP得率及其对五步蛇毒PLA₂活性抑制率（PIR）的作用,并对虎耳草TP含量与PIR的相关性进行分析。结果表明,响应面法提取虎耳草TP和PIR的最佳工艺条件为：粒径为60目,料液比为1∶50,超声功率为250 W,超声时间为1.8 h。此优化工艺条件下虎耳草TP得率为（8.69±0.46） mg·g^-1,PIR为（40.91±0.21）%;相关性分析结果显示虎耳草TP含量与PIR具有极显著正相关（P<0.01）,说明TP可能为虎耳草抑制五步蛇毒中PLA₂活性的物质基础。     

血小板计数在五步蛇咬伤中的临床意义

目的探讨血小板计数在五步蛇咬伤临床治疗中的指导意义。方法对2006年3月至2009年12月我院收治的77例五步蛇咬伤病人在运用抗蛇毒血清治疗时对病人的血小板计数进行动态监测。蛄果患者入院时的血小板计数越低,抗蛇毒血清用量越大,呈负相关。结论在五步蛇咬伤治疗中,血小板计数可指导抗蛇毒血清的应用剂量。在应用抗蛇毒血清后血小板计数仍较低者．常提示抗蛇毒血清的用量不足,需追加剂量。     

五步蛇毒蛋白C激活剂的纯化与活性分析

目的 研究五步蛇毒蛋白C激活剂(PCA)组分的分离纯化及其抗凝活性.方法 借助DEAE-Cellulose、CM-Sephadex C-50和Sephadex C-75柱层析,以离子交换和凝胶过滤法从皖南产五步蛇粗毒中分离纯化PCA组分;以SDS-PAGE凝胶电泳检测其纯度和分子量,发色底物法(Chromogenic Substrate Assay)测定PCA组分的生色反应能力;测定PCA对正常血浆KPTT和PT的影响.结果 从五步蛇粗毒中纯化的PCA组分经SDS-PAGE测定为单一区带,相对分子质量约为18.5 kD,等电点pH 4.9;发色底物法显示其具有生色反应能力;该PCA 1 mg/L在体外明显延长KPTT,但PT不受影响.结论 采用离子交换和凝胶过滤法,可从皖南产五步蛇毒中分离纯化出高纯度的PCA组分,该组分可抑制内凝途径影响血液凝固过程.     

72例五步蛇咬伤患者的护理体会

五步蛇毒为血循毒 ,属中医“火毒”范畴。五步蛇咬伤人体后 ,由于蛇毒的毒性作用会导致多系统的功能衰竭 ,死亡率较高 ,严重威胁人类生命安全。仔细观察和准确护理是获得治疗五步蛇咬伤良好效果或抢救成功的重要环节之一。本组 72例五步蛇咬伤患者均为我院住院病例 ,全部痊愈出院。现将护理体会报告如下。1　临床资料1 .1　一般资料　本组 72例患者中 ,男 5 2例 ,女2 0例 ;年龄 1 0～ 75岁 ,平均 35岁 ;其中农民 60例 ,从事蛇类经营者 9例 ,厨师 3例。咬伤部位 :上肢 40例 ,下肢 32例。就诊时间最短 1 5 min,最长 5天 ;病程 5～ 2 5天 ,平均…     

抗五步蛇毒血清致血清病30例临床分析

目的探讨抗五步蛇毒血清所致血清病的临床特点,总结其治疗方法及可预防性手段。方法回顾性分析1447例使用抗五步蛇毒血清治疗的毒蛇咬伤患者的临床资料,其中30例患者在治疗后出现血清病症状,采用抗变态反应等治疗。结果 30例患者均治愈,住院治疗时间1~8天,平均3.53天。结论抗五步蛇毒血清致血清病患者及时给予抗变态反应治疗,其预后良好,按规范用药以及临床中早发现并及时处理是防治关键。     

蝮蛇毒抗凝血活酶组份及几种蛇毒粗毒对人红细胞和血小板的作用

蝮蛇毒抗凝血活酶组分及蝗蛇毒、圆斑蝰蛇毒和眼镜蛇毒粗毒,不仅能够水解血浆中的磷脂,而且还能水解完整人红细胞膜和完整人血小板膜上的磷脂。但是五步蛇毒和金环蛇毒粗毒却不能水解完整人血小板膜上的磷脂。 扫描电镜观察表明,由于抗凝血活酶组份和几种蛇毒粗毒的作用,人红细胞和人血小板的形态发生了巨大的变化;人红细胞由正常的双圆盘形变成带刺的小球,人血小板的外形变成蜂窝状。     

一次罕见的五步蛇毒喷射入眼

一次罕见的五步蛇毒喷射入眼１９９１年８月１６日，笔者在剖杀一条１．２千克活五步蛇过程中，突然，从该蛇右侧口中喷射出一柱白黄色的毒液，射中左眼角及左眼皮上。当即用井水冲洗左眼３分钟，５分钟后，局部感到疼痛难忍，眼球发红，随后整个左眼流淡红血水，痛肿加剧...     

五步蛇毒血小板聚集抑制因子cDNA的克隆及表达

采用一步法抽提五步蛇毒腺总ＲＮＡ,通过ＲＴ－ＰＣＲ的扩增出低分子量金属蛋白酶酶原的ｃＤＮＡ,克隆并测定了全序列。根据推导的氨基酸序列,发现其中一个ｃＤＮＡ除编码一个低分子量金属蛋白酶外,羧基端还包括一个血小板聚集抑制因子,这一结果证实了蛇毒金属蛋白酶和血小板聚集抑制因子起源于蛇毒金属蛋白酶酶原的前体。     

制备式等电聚焦鉴定湖南产五步蛇蛇毒磷脂酶A2的等电点及纯度

制备式等电聚焦测得湖南产五步蛇蛇毒磷脂酶Ａ２为单一的吸收峰（ＯＤ２８０）,等电点为５．３２,证明了作者前报道的纯化的磷脂酶Ａ２为纯品     

五步蛇咬伤中毒6例诊治体会

五步蛇（尖吻蝮）是最常见的一种毒蛇。我院１９８９～１９９７年共救治６例五步蛇咬伤患者,均获成功,现报告如下。１．１临床资料１．１一般资料６例中男３例,女３例,年龄最大４９岁,最小１１岁,４例为农民,２例为学生,４例为五步蛇主动攻击被咬伤,２例为捕捉时...