用微量蒽酮法测定肾小管液中的微量菊糖

建立微量菊糖测定方法,是应用肾小管微穿刺技术从肾单位水平进行肾脏生理研究的一个技术基础。本实验对Dirks等人采用的微量蒽酮法作了改进。在752-C型分光光度计的光路上安置一个微量比色管,对10μl容积的蒽酮菊糖反应液进行比色。当菊糖含量在2ng至32ng范围内,菊糖含量与吸光度直线性关系(r>0.999)。菊糖平均回收率为101.2±3.5％,表明整个测定系统是准确的。在蒽酮菊糖反应液中加入一定量的肾小管液对菊糖的测定无明显干扰,因此在实际测定时,可将含菊糖的肾小管液直接与蒽酮试剂反应。在21只大鼠的近曲小管末端作微穿刺,用上述微量蒽酮法测得单个肾单位肾小球滤过率为34.9±1.8nl/min,与文献报道的范围符合,说明本方法适用于肾脏生理的研究。     

常用的几种蒽酮比色定糖法的比较和改进

蒽酮比色法是目前常用的定糖方法,其原理是糖类(包括多糖)在硫酸作用下,脱水生成糠醛或羟甲基糠醛,然后蒽酮与糠醛或羟甲基糠醛经脱水缩合,产生蓝绿色的糠醛衍生物,颜色的深浅即可作为定量的依据。该法具有较高灵敏度,适于微量测定,所需试剂简单,操作也较简便,因而得到普遍采用。     

爬山虎植物多糖含量的比较研究

用蒽酮-硫酸比色法对4种栽培和野生的爬山虎果实多糖含量进行了测定,方差分析结果表明野生与栽培同种问多糖含量差异较小,不同种问多糖含量差异较显著。     

1株结皮真菌胞外多糖的初步研究

探究一株真菌胞外多糖最佳生产时间及其组成成分。通过对其发酵液胞外多糖含量及上清液黏度的测定,确定其最佳产糖时间,并用此条件提取胞外多糖粗品,用蒽酮-比色法测得提取的胞外多糖粗品的糖含量,薄层色谱法对所得的胞外多糖进行组分分析。当发酵至第5天时该株真菌的生物量、胞外多糖产量及发酵液的黏度均达到最高峰,分别为0.606 4 g/60 mL、20.22μg/mL和4.74 mPa/s,并且胞外多糖含量与发酵上清液黏度在一定程度上呈正相关。用蒽酮-比色法测得提取的胞外多糖粗品的糖含量为19.58μg/mL,并用4 mol/L的硫酸完全水解,硅胶G薄层层析,甲醇-氯仿(1:1,体积比)展层,苯胺-二苯胺-磷酸显色,表明其组成成分可能为D-甘露糖、D-半乳糖和D-葡萄糖。该菌株所产的胞外多糖具有提高结皮能力和防沙保水作用,为利用微生物治沙提供参考和种质资源。     

一株结皮真菌胞外多糖的初步研究

探究一株真菌胞外多糖最佳生产时间及其组成成分。通过对其发酵液胞外多糖含量及上清液黏度的测定,确定其最佳产糖时间,并用此条件提取胞外多糖粗品,用蒽酮-比色法测得提取的胞外多糖粗品的糖含量,薄层色谱法对所得的胞外多糖进行组分分析。当发酵至第5天时该株真菌的生物量、胞外多糖产量及发酵液的黏度均达到最高峰,分别为0.606 4 g/60 mL、20.22 μg/mL和4.74 mPa/s,并且胞外多糖含量与发酵上清液黏度在一定程度上呈正相关。用蒽酮-比色法测得提取的胞外多糖粗品的糖含量为19.58 μg/mL,并用4 mol/L的硫酸完全水解,硅胶G薄层层析,甲醇-氯仿(1:1,体积比）展层,苯胺-二苯胺-磷酸显色,表明其组成成分可能为D-甘露糖、D-半乳糖和D-葡萄糖。该菌株所产的胞外多糖具有提高结皮能力和防沙保水作用,为利用微生物治沙提供参考和种质资源。     

蒽酮分光光度法测定海藻多糖总糖含量

本文报道了在室温下用蒽酮分光光度法测定海藻多糖总糖的含量,本法总糖测定的回收率９７．５％－１０３％,标准偏差０．３。本法设备简便,迅速、准确。     

9V型肺炎球菌疫苗中多糖含量微孔板蒽酮-硫酸检测方法的建立及验证

目的建立微孔板蒽酮-硫酸法检测9V型肺炎球菌疫苗中多糖含量的检测方法,并对其进行验证和初步应用。方法通过对蒽酮-硫酸方法的改进,建立检测9V型肺炎球菌疫苗中多糖含量稳定可靠的微孔板蒽酮-硫酸法。分别对蒽酮-硫酸法中硫酸溶液浓度、加热时间进行优化,并对建立的方法进行特异性、线性、精密度及准确度的验证。结果最佳硫酸溶液比例为6∶1(浓硫酸∶水),最佳加热时间为10 min。在检测9V型肺炎球菌多糖、多糖衍生物及多糖蛋白结合物中多糖含量时,此方法特异性强;在20~120μg/m L范围内,标准曲线线性良好(r20.995);实验内及实验间均具有良好的精密度(CV值分别为2.92%~3.32%和3.10%~4.06%);准确度试验中3个质量浓度的回收率均在96.17%~106.63%之间。结论微孔板蒽酮-硫酸法可被用来有效、准确、稳定地检测9V型肺炎球菌多糖、多糖衍生物及多糖蛋白结合物中多糖的含量,该方法较传统蒽酮-硫酸法操作简便快捷,节约样品、试剂等材料,非常适用于相关的疫苗生产过程中的质量控制。     

天然产物中的糖含量测定方法正确性的研究

通过蒽酮-硫酸法和苯酚-硫酸法,采用不同的标准单糖以及不同的单糖组成比来测定天然产物中的糖含量,得到一种比较准确性高的方法,即按多糖中单糖组成比为标准来测定。     

基于微孔板比色法的总糖含量测定方法的建立及应用

采用单因素试验和响应面优化法研究了微孔板法高通量检测总糖含量的方法,并进行了方法学考察,研究了不同离子、氨基酸和蛋白质等对该方法测定的影响。并以微生物多糖、枸杞多糖、可溶性淀粉和多种单糖为试受对象,与传统在比色管中的硫酸蒽酮比色法和苯酚硫酸比色法测定结果进行了比较。结果表明,反应体系总体积为230μL,其中150μL浓硫酸,30μL 5%苯酚水溶液,在85℃水浴20 min,在此条件下,在490 nm处的光吸收值与葡萄糖浓度呈线性相关,拟合线性回归方程相关系数R2为0.994 1,线性范围为10~100 nmol/well。该方法相对标准偏差为0.4%,加标回收率在102.7%~104.10%之间。精密度试验、稳定性试验和干扰性试验进一步说明此方法简便快捷、准确可靠、干扰性小,能应用于总糖含量的高效测定。     

丛枝菌根真菌对滇重楼根茎中碳氮代谢的影响

目的:研究不同丛枝菌根真菌对滇重楼根茎内多糖类和总氨基酸含量的影响,为丛枝菌根真菌(AMF)的筛选提供科学依据.方法:采用蒽酮硫酸比色法测定滇重楼根茎内的多糖含量,色谱分析法测定滇重楼根茎内的总氨基酸含量,比较分析了不同AMF对滇重楼根茎内多糖和总氨基酸含量的影响.结果:滇重楼根茎内多糖和总氨基酸含量因接种不同AMF而...     

蒽酮-硫酸法测定核桃隔膜多糖含量

采用蒽酮-硫酸比色法测定核桃隔膜多糖平均含量4.89%,样品液在2h内显色稳定,重复性较好,平均回收率为100.1%,RSD为1.56%(n=3)。此方法快速、简便、灵敏,能满足常规分析要求。     

高效液相法与硫酸-蒽酮法测定猪苓多糖含量比较

本研究目的是比较高效液相法与硫酸-蒽酮法在测定猪苓多糖含量上的差异。为此,研究采用水提醇沉、Sevag法除蛋白、透析和冷冻干燥制备相对纯化的猪苓多糖,通过凝胶渗透色谱及高效液相法对猪苓多糖的相对分子量分布、组成及含量进行研究,用硫酸-蒽酮分光光度法测定猪苓颗粒中猪苓多糖的含量。结果显示,猪苓多糖数均相对分子质量为48,232,重均相对分子质量为117,506,分子范围2.44,可能由海藻糖和葡萄糖组成,其含量分别为6.05%和62.28%。硫酸-蒽酮法侧的猪苓多糖含量为87.9%。对于猪苓多糖含量测定,高效液相法优于硫酸-蒽酮法。     

不同产地枸杞子中多糖含量的比较研究

目的：建立枸杞子中多糖的测定方法，比较不同产地枸杞子中多糖含量的差异。方法：采用蒽酮-硫酸法测定宁夏、青海、新疆等3个产地86批次枸杞子中多糖的含量，分析差异，并进行方法学考察。结果：方法线性关系、回收率、精密度及重复性测定结果均符合要求，不同产地枸杞子中多糖含量范围为1.71%～4.56%，多糖含量高低顺序为青海>新疆>宁夏。结论：蒽酮-硫酸法可用于枸杞子多糖含量的测定，不同产地的枸杞子中多糖含量有一定差异，其中青海产地枸杞子中的多糖含量最高。     

爬山虎多糖提取与含量的测定

建立石油醚去脂-80%乙醇去杂-热水提取-乙醇沉淀-氯仿、正丁醇去蛋白质-活性碳去色素的提取工艺,从爬山虎中提取多糖,用蒽酮-硫酸法比色测定多糖的含量,研究结果表明,此方法简便、供试液显色稳定、重现性较好,回收率为:99.36%,RSD=5.08%,熟果、茎、叶的多糖含量为:4.68%、22.71%、11.71%.     

人参细胞培养物中水溶性多糖的研究——分离,纯化及分子量测定

对于我国的传统珍贵药材人参(Panax ginseng)中的人参多糖的研究报道已有不少,而且已得到了应用。我们曾对人参细胞培养物中水溶性多糖(PCS)的提取、理化性质及其组成和药理进行了初步的研究,结果表明与人参多糖有许多相似之处。本文对 PCS 进行了分离、纯化及分子量测定的研究。将提取获得的 PCS 用 Sevag 法除去其中的蛋白之后,通过 Sephadex G-100柱进行分离,经洗脱,同时以蒽酮比色法鉴定多糖部位,将 PCS 分离得到了 PC_1和 PC_2。     

超声波辅助象拔蚌多糖提取及抗氧化活性研究

采用蒽酮比色法测定多糖含量。基于超声时间、温度、固液比单因素对象拔蚌多糖提取率影响的基础上,设计三因素三水平正交实验研究象拔蚌多糖最佳提取工艺。并测定象拔蚌多糖的总抗氧化活性和羟自由基清除活性。结果表明,影响多糖提取的首要因素是固液比,其次是超声时间和超声温度。象拔蚌多糖最佳提取条件为:温度60℃、超声时间30 min、固液比1:12。象拔蚌多糖总抗氧化活性和羟自由基清除活性均与浓度有明显的量效关系,表明超声辅助法是象拔蚌多糖提取的一种有效方法,高浓度象拔蚌多糖具有较强的抗氧化活性。     

组培霍山石斛、野生霍山石斛及河南石斛多糖及乙醇溶出物动态积累规律研究

为了揭示不同种源的霍山石斛及其近缘种河南石斛多糖和醇溶性浸出物含量的动态变化规律,为霍山石斛和河南石斛规范化种植及品种鉴定提供依据,采用蒽酮-浓硫酸比色法和醇溶性浸出物热浸法对1~4年株龄的野生霍山石斛、组培霍山石斛和河南石斛的多糖和浸出物含量进行测定。结果表明,不同株龄的组培霍山石斛、野生霍山石斛和河南石斛的多糖、浸出物含量均存在极显著差异。以多糖含量为标准,三者均以生长2年采收为宜,以醇溶物为标准,以栽培三年采收最好。以多糖和醇溶出物总量计,组培霍山石斛以2年采收为宜,野生霍山石斛及河南石斛以3年株龄品质最佳。     

金樱子多糖单糖组成的TMS柱前衍生化/GC-MS研究

探讨金樱子多糖的含量及其单糖组成,为金樱子质量评价及临床用药提供参考依据。本文采用水提-醇沉法获得金樱子多糖,以葡萄糖为标准品,蒽酮-硫酸比色法测定多糖含量;多糖酸解后经三甲基硅烷(TMS)衍生化,以标准品单糖为对照,采用气-质联用法(GC-MS)测定多糖的单糖组成。结果表明,本实验条件下,测得金樱子多糖提取得率为29.38%;金樱子多糖中单糖由阿拉伯糖、鼠李糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖、果糖组成,其中葡萄糖、甘露糖、果糖和半乳糖在金樱子多糖中占比较大,分别为65.03%、7.36%、16.11%及8.87%。     

祁白术多糖提取工艺研究

以蒽酮-硫酸比色法测多糖含量,以正交优选工艺条件进行验证提取并加样测定回收率,结果显示：水提最佳条件为料液比1∶10、水浴100℃、恒温3 h,沉淀得率为48.41%,可溶性糖含量为43.83%,可溶性糖得率为21.22%;水提后醇沉条件为药液浓缩为1.5mL药液/g生药、醇沉浓度达到90%、4℃冰箱24h,醇沉得率为31.28%。水提法料液比、水提温度影响有显著性（P〈0.05）、醇沉法醇沉浓度影响有显著性（P〈0.05）。工艺验证实验平均得率31.55%,RSD=1.57%;加样回收率平均98.00%,以优选工艺方法提取、较稳定可行。     

不同种源的太子参多糖含量及其单糖组成GC-MS研究

研究不同种源太子参多糖含量以及单糖组成差异,为太子参质量评价和临床用药提供参考依据,采用水提-醇沉法提取太子参多糖,以葡萄糖为标品,蒽酮-硫酸比色法测定多糖含量。盐酸甲醇水解、三甲基硅烷(TMS)柱前衍生、气-质联用法(GC-MS)分析不同种源太子参多糖的单糖组成。结果表明,组培太子参与野生太子参多糖的含量分别为19.05±1.38%、22.63±2.18%;不同种源太子参多糖均由葡萄糖、果糖、甘露糖、半乳糖、半乳糖醛酸、阿拉伯糖、鼠李糖七种单糖组成,但单糖的比例明显不同。如以多糖含量为标准,野生太子参多糖含量高于组培太子参,品质更佳;多糖中单糖比例不同,提示不同种源的太子参多糖结构可能存在不同。