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豆豉纤溶酶--一种潜在的新型溶栓药物 总被引:9,自引:0,他引:9
豆豉纤溶酶是一种潜在的新型溶栓药物。该文介绍豆豉纤溶酶产生菌的筛选、诱变;纤溶酶的分离纯化、酶学性质及其分子生物学的研究等:并简述了纤溶酶活性的测定方法;提出了豆豉纤溶酶的研究方向及前景。 相似文献
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目的研究蛇毒纤溶酶在体内过程及药代动力学.方法以125I-蛇毒纤溶酶作示踪剂进行研究.结果静脉注射后,体内血药浓度时程曲线为二房室模型,大鼠体内T1/2β分别为6.1h(低剂量)、6.3h(中剂量)、5.6h(高剂量)、小鼠尾静脉注射后3h,各脏器中放射性活性达到峰值,其值(%)大小顺序为肾(1.34)>肺(1.09)>肝(0.90)=脾(0.90)>心(0.51)>肌肉(0.45)>脑(0.29),125I-蛇毒纤溶酶静脉注射后72h内,尿排泄率为85.6%,粪排泄率为5.4%,胆汗排泄率为12%.结论蛇毒纤溶酶静脉注射后,体内血药浓度时程曲线为二房室模型,主要从尿排泄. 相似文献
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将已构建好的表达载体pGEX-4T-2SAK 转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达融合的沙蚕激酶蛋白,通过GST树脂亲和吸附和凝血酶酶切及冷冻干燥等步骤进行分离纯化,用SDS-PAGE分析要重组的目的蛋白及纯化后的蛋白.纯化后的沙蚕激酶经纤维平板法测定具有溶栓活性.冷冻干燥品经SDS-PAGE分析表明达到电泳纯. 相似文献
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目的研究蛇毒纤溶酶的药理作用.方法分别以低、中、高三个剂量组(5.0、10.0、20.0u/kg体重)研究蛇毒纤溶酶对麻醉犬颈动脉收缩压、舒张压、平均压、心率、心电图各参数、呼吸频率与幅度、凝血时间及复钙时间的影响.结果蛇毒纤溶酶(5.0、10.0、20.0u/kg)对麻醉犬血压、心率、心电、呼吸频率及呼吸幅度均无明显影响;低剂量(5.0u/kg)组蛇毒纤溶酶对犬凝血时间及复钙时间无明显影响,但中高剂量组(10.0、20.0u/kg)蛇毒纤溶酶可明显延长凝血时间及复钙时间,中剂量组对复钙时间的影响恢复较快;蛇毒纤溶酶对小鼠一般行为,机能协调功能及阈下戊巴比妥钠催眠作用无明显影响;对神经系统无明显影响.结论蛇毒纤溶酶能明显延长血液凝固时间及复钙时间,对循环系统、呼吸系统和神经系统无明显副作用.是一种安全有效的抗凝血药物. 相似文献
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蚯蚓纤溶酶组分的抗原性 总被引:11,自引:0,他引:11
以大豆胰蛋白酶抑制剂为配基 ,通过亲和层析制备出的蚯蚓纤溶酶 (EFE)含有 11~ 13个组分 .为了了解这些组分的相互关系 ,用EFE免疫家兔获得了抗血清 .利用该抗血清与已纯化的 10个组分进行免疫双扩散 ,根据形成沉淀线的形状可以将上述 10个组分分为 4大组 .各组内组分之间的沉淀线完全融合 (免疫反应同一性 ) ;组间沉淀线交叉 (免疫反应非同一性 )或为支线 (免疫反应部分同一性 ) .这种按免疫学性质分组与根据分子量大小、氨基酸组成和N端氨基酸序列分组基本吻合 .上述结果为EFE的分类提供了依据 . 相似文献
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目的:获取蚯蚓纤溶酶(EFE)的基因,并对其进行序列分析。方法:从赤子爱胜蚓中提取总RNA,然后利用RT-PCR技术扩增EFE的基因,并将其插入pUCm-T载体,经PCR和酶切鉴定后进行序列测定及分析。结果:DNA序列分析表明,所克隆的EFE基因全长为738bp,其中编码区段为735bp,共编码245个氨基酸残基,成熟肽为238个氨基酸残基。与GenBank中已报道的粉正蚓的EFE序列F-Ⅲ-2的同源性最高,两者在核苷酸序列上有2处不同,即第137位(T→C)和第632位(G→T),密码子也因而分别由GTC、GGT变为GCC、GTT,导致第46位、211位的氨基酸残基分别由缬氨酸、甘氨酸变为丙氨酸和缬氨酸。结论:从赤子爱胜蚓中成功克隆了1条EFE基因F245。序列测定及同源性分析表明,蚯蚓纤溶酶F245与已报道的多条EFE基因序列具有高度同源性,且具备完整的编码区。该序列的克隆为用基因工程的方法生产单一成分的高酶活性EFE奠定了基础。 相似文献
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双胸蚓纤溶酶的纯化及性质 总被引:3,自引:0,他引:3
用硫酸铵分段盐析、超滤膜分级分离及DEAE-纤维素、Sephadex A-25和Sephadex G-50三种柱层析方法从双胸蚓组织的粗提取液中分离纯化出一种纤溶酶,分子量为29kD,由一条肽链组成。此晦具有强烈的溶解纤维蛋白的作用,对家兎实验性血凝块也具有明显的溶解作用。此酶的最适pH为8.0,在pH7.6~8.4之间活力相差不到2%;酶在PH4.7—11.0范围内稳定;酶作用的最适温度为57℃;此酶热稳定性较好,于25~50℃保温3小时,酶活力基本不变,60℃时,活力保留65%。金属离子Na~(+)、K~(+)、Mg~(2+)等可提高此酶的活力,而Hg~(2+)、Ca~(2+)等金属离子对此酶有不同程度的抑制作用。 相似文献
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Suk-Min Ko Byung-Ho Yoo Jong-Min Lim Kwang-Hoon Oh Jae-Il Liu Suk-Weon Kim Jang-Ryol Liu Kwan-Sam Choi Eui-Soo Yoon 《Plant Molecular Biology Reporter》2009,27(4):448-453
The earthworm fibrinolytic enzyme, which belongs to a group of serine proteases with strong fibrinolytic activity, has been
used as an oral drug for prevention and treatment of thrombosis in East Asia. Fibrizyme is a fibrinolytic enzyme isolated
from the earthworm Eisenia andrei. Here we report genetic engineering of tobacco plastids with stable integration of the fibrizyme gene into the tobacco chloroplast
genome. A plastid transformation vector was constructed by introducing various regulatory elements into fibrizyme cDNA. This
vector was delivered by particle bombardment into tobacco leaf explants and plastid-transformed plants were subsequently regenerated
into whole plants through several rounds of selection. We confirmed stable integration of the fibrizyme gene into the tobacco
plastid genome by PCR and Southern blot analyses. Northern and Western blot analyses revealed that mRNA and protein of recombinant
fibrizyme were highly expressed in transformed tobacco plants. 相似文献
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目的:从黄精根际土壤筛选产纤溶酶的放线菌,并对其进行鉴定。方法:采用稀释法分离放线菌,利用纤维蛋白平板法筛选能产生纤溶酶的菌株,根据16SrDNA序列、形态学观察和生理生化特征对纤溶活性高的菌株进行鉴定。结果:菌株XZNUM 00004代谢产物的纤溶酶活性为69U/ml,该酶加热到65℃仍能保留85%的活性。经形态学观察,培养特征、生理生化和分子分类学分析鉴定,与胶样链霉菌(Streptomyces gelaticus)相似性为99%。结论:初步推断XZNUM 00004属于链霉菌属(Streptomyces)。 相似文献
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蚯蚓纤溶酶的分离纯化及部分序列的测定 总被引:2,自引:0,他引:2
以新鲜蚯蚓为原料,经过保温抽提、乙醇沉淀、DEAE-SepharoseFastFlow离子交换层析、Lysine-Sepharose4B亲和层析以及SDS-PAGE制备电泳等纯化步聚,得到一种纯度达95%以上的蚯蚓纤溶酶.该酶具有强烈的溶解纤维蛋白的作用及蛋白酶活性,平板法测得其比活性为90OUK单位/毫克蛋白,TAME法测得其比活性为2500O单位/毫克蛋白.酶学性质研究表明其最适反应温度为65℃,最适反应PH值为8.5.该酶的分子量为33kD,等电点为pH3.5.还对该酶进行了氨基酸组成分析,并测定了其N端部分序列. 相似文献
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R. C. Cotton 《BMJ (Clinical research ed.)》1970,4(5736):683-684
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通过正交设计实验和利用国际上流行的统计分析软件SPSS10.0对蚓纤溶酶的提取结果进行方差分析,考察了提取时间、提取次数和溶剂体积3个因素对提取效果的影响,并考察了硫酸铵盐析的最适浓度段,得到了一条较好的提取工艺。 相似文献