急性脑卒中患者肠道菌群研究

通过粪便标本检测急性脑卒中患者肠道菌群变化情况, 探讨急性脑卒中患者肠道菌群结构。

通过高通量二代测序技术对10例健康者(对照组)及10例急性脑卒中患者(疾病组)粪便样本进行菌群结构测序分析。

与对照组比较, 急性脑卒中患者粪便样本中物种OTU信息量显著增加(P < 0.01), 菌群多样性指数(Shannon)和物种均一度指数(Evenness)也有所增加但差异无统计学意义(均P > 0.05)。门水平上, 疾病组患者肠道Bacteroidetes数量较对照组显著增加, Firmicutes数量显著减少(均P < 0.05)。属水平上, 疾病组患者肠道Bacteroides、Bilophila、Butyricimonas比例较对照组显著升高, 而Collinsella、Coprococcus、Clostridium等比例较对照组显著降低(均P < 0.05)。

急性脑卒中患者肠道菌群结构与健康人存在显著差异。

     

呼吸窘迫综合征新生儿肠道菌群的改变

探究呼吸窘迫综合征新生儿肠道菌群的改变,为该类患儿的治疗提供参考。

选取我院2020年4月至2022年4月收治的83例呼吸窘迫综合征新生儿作为试验组,另选我院同期健康新生儿83例作为对照组,收集两组对象粪便标本。对比两组对象肠道菌群的变化情况。

与对照组相比,试验组患儿肠道菌群Chaol指数和Shannon指数显著降低,Ace指数显著升高,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。两组对象肠道厚壁菌门、变形菌门、链球菌属相对丰度对比差异均有统计学意义（均P＜0.05）。

呼吸窘迫综合征新生儿肠道菌群改变较大。

     

氨基酸型肠内营养制剂支持后克罗恩病患者肠道微生物和非靶向代谢组学指标的分析

探讨氨基酸型肠内营养制剂支持后克罗恩病患者的肠道微生物和非靶向代谢组学指标的变化,为该类患者的治疗提供参考。

选择我院收治的20例克罗恩病活动期患者作为研究对象,所有患者均采用氨基酸型肠内营养制剂进行支持治疗。比较患者治疗前后肠道菌群结构、菌群多样性以及非靶向代谢组学检测结果的差异。

治疗后,患者肠道乳杆菌属（t=5.200,P＜0.001）、大肠埃希菌（t=11.974,P＜0.001）、克雷伯菌属（t=15.033,P＜0.001）、糖单胞菌（t=12.166,P＜0.001）、恶臭假单胞菌（t=31.063,P＜0.001）、肠球菌属（t=28.867,P＜0.001）数量均显著升高;同时患者肠道菌群OUTs（t=40.435,P＜0.001）、Observed species（t=5.475,P＜0.001）、Chao1指数（t=12.348,P＜0.001）、Simpson指数（t=2.961,P=0.005）、Shannon指数（t=3.330,P=0.002）均显著升高。相比治疗前,治疗后患者血清以及粪便中的氨基酸、多肽、脂肪酸、胆固醇及碳水化合物水平均显著改善。

氨基酸型肠内营养制剂支持后,克罗恩病患者肠道菌群丰度提高,同时患者脂质代谢的改善可能与氧化应激反应通路相关联。

     

乙型肝炎肝硬化患者肠道菌群改变与HBV-DNA水平的关系

探讨乙型肝炎肝硬化患者肠道菌群变化与乙型肝炎病毒DNA（HBV-DNA）水平的关系,为该类患者的治疗提供参考。

选取2020年2月至2021年8月我院收治的65例乙型肝炎肝硬化患者为肝硬化组,57例慢性乙型肝炎患者为乙型肝炎组,另选取同期体检的55例健康志愿者对照组。采用Illumina MiSeq测序比较3组对象肠道菌群变化、肠道菌群丰度和多样性。采用荧光定量PCR检测肝硬化组、乙型肝炎组患者HBV-DNA水平。采用Pearson分析法分析肝硬化患者肠道菌群数量和HBV-DNA水平的相关性。

和对照组相比,肝硬化组、乙型肝炎组患者肠道双歧杆菌属、乳杆菌属、拟杆菌属和瘤胃球菌属数量下降（均P＜0.05）,而肠杆菌属、肠球菌属、普雷沃菌属和梭菌属数量升高（均P＜0.05）。肝硬化组患者肠道双歧杆菌属数量低于乙型肝炎组（P＜0.05）,而乳杆菌属、瘤胃球菌属、拟杆菌属、肠杆菌属、肠球菌属、普雷沃菌属和梭菌属对比差异均无统计学意义（均P＞0.05）。对照组患者肠道菌群Chao、Shannon指数高于乙型肝炎组和肝硬化组（均P＜0.05）,同时肝硬化组Chao、Shannon指数低于乙型肝炎组（均P＜0.05）。肝硬化组患者HBV-DNA水平高于乙型肝炎组（P＜0.05）。Chao指数、Shannon指数、双歧杆菌属数量与HBV-DNA水平呈显著负相关（均P＜0.05）,乳杆菌属、拟杆菌属、瘤胃球菌属、肠杆菌属、肠球菌属、普雷沃菌属、梭菌属数量与HBV-DNA水平均无显著相关性（均P＞0.05）。

乙型肝炎患者存在不同程度的肠道菌群失调,乙型肝炎肝硬化患者肠道菌群变化更为显著,且乙型肝炎肝硬化患者Chao指数、Shannon指数、双歧杆菌属数量和HBV-DNA水平呈负相关。

     

口服微生态制剂对早产低体重新生儿坏死性小肠结肠炎的预防效果

分析口服微生态制剂预防早产低体重新生儿坏死性小肠结肠炎（NEC）的效果。

采用随机数字表法将我院2021年2月至2022年3月收治入院的82例早产低体重新生儿分为观察组和对照组,各41例。对照组患儿予以常规对症治疗,观察组在此基础上予以口服微生态制剂预防治疗。对比两组早产儿NEC发生率和手术率,干预前后免疫球蛋白（IgG、IgM、IgA）水平变化情况,肠道菌群变化情况。

观察组患儿NEC发生率为7.32%,显著低于对照组的24.39%（P＜0.05）。干预后观察组患儿IgG、IgM、IgA水平高于对照组,组间差异均有统计学意义（均P＜0.05）。干预后观察组患儿肠道细菌总数、球菌总数、杆菌总数高于对照组（均P＜0.05）。干预7 d、14 d后,两组患儿体质量均有所增加,且观察组患儿体质量高于对照组（均P＜0.05）。观察组患儿达到完全肠内营养时间短于对照组（P＜0.05）。

口服微生态制剂可有效降低早产低体重新生儿NEC的发生率,促进早产儿肠道菌群稳定,增强患儿免疫能力,对改善早产低体重新生儿预后具有重要的意义。

     

基于高通量测序分析哮喘小鼠呼吸道菌群的变化

通过高通量测序分析哮喘模型小鼠呼吸道菌群的变化情况。

将12只SPF级BALB/c雄性小鼠随机分为对照组和模型组, 每组6只。采用卵清蛋白致敏方法建立哮喘小鼠模型后, 进行支气管组织切片病理学观察, ELISA法检测血清IgE水平, 测定肺指数, 采集咽拭子后提取DNA行高通量测序分析。

与对照组比较, 模型组小鼠血清IgE水平明显升高(P < 0.05), 肺指数明显上升(P < 0.05), 可见支气管上皮粘膜有水肿, 少量淋巴细胞浸润, 平滑肌增生。模型组小鼠呼吸道菌群与对照组比较, 菌种丰度升高, 厚壁菌门较对照组减少(P < 0.05), 放线菌门和变形菌门增多(P < 0.05), 菌群结构有明显差异。

哮喘小鼠存在呼吸道微生态菌群失衡。

     

不同程度颅脑疾病患者肠道菌群分析

检测不同程度颅脑疾病患者肠道菌群分布情况, 探讨患者肠道菌群分布与疾病的关系, 为该类患者的治疗提供参考。

通过MiSeq PE2x300 bp高通量测序技术对21例重度颅脑损伤患者(G1组, GCS≤8分)和14例轻度颅脑损伤患者(G2组, GCS > 8分)粪便样本中细菌的16S rRNA基因V3-V4可变区进行定性分析, 并对两组患者肠道菌群进行生物学分类比较、多样性分析和组间物种差异分析。

两组患者肠道菌群多样性差异无统计学意义(均P > 0.05)。G1组患者肠道厌氧球菌属(Anaerococcus)、埃希菌-志贺菌属(Escherichia-Shigella)、链球菌属(Streptococcus)、肠球菌属(Enterococcus)、棒状杆菌属(Corynebacterium)数量高于G2组(均P < 0.05)。

颅脑疾病患者肠道菌群紊乱, 其肠道菌群丰度及多样性显著下降, 有害菌数量升高, 有益菌数量下降。

     

电针对脑卒中患者的疗效及其对肠道菌群的影响

探讨电针对脑卒中患者的疗效及对患者肠道菌群丰度的影响,为该类患者的治疗提供参考。

选取我院40例脑卒中患者在中风常规针刺基础上,予以电针治疗（双侧天枢穴、双侧足三里穴、双侧曲池穴）,最后纳入30例患者为观察组,同时另选取30例健康者作为对照组。观察治疗前后患者的神经功能恢复状态（mRS评分）,同时收集患者新鲜粪便标本,用16S rDNA高通量测序技术检测肠道菌群结构。

经电针治疗,30例患者mRS评分显著改善,其中显效26例,治愈2例,无效2例,临床总有效率为93.3%。与对照组比较,脑卒中患者治疗前粪便中拟杆菌门丰度减少,厚壁菌门丰度增加,拟杆菌门/厚壁菌门（B/F）比例显著减少（均P＜0.05）;且梭菌纲作为厚壁菌门下的主要细菌纲其丰度显著增加（P＜0.05）。治疗后观察组患者粪便中拟杆菌门丰度较对照组和同组治疗前均显著增加（均P＜0.05）,厚壁菌门丰度较对照组显著增加,但较治疗前显著减少（均P＜0.05）;B/F比例较对照组减少,而较治疗前显著增加（均P＜0.05）。

电针可有效治疗脑卒中,同时可通过调节肠道B/F比例,增加有益菌,减少炎症相关致病菌,改善肠道菌群结构。

     

川崎病及川崎病冠状动脉病变患儿肠道菌群变化

研究川崎病及川崎病冠状动脉病变患儿肠道菌群变化情况, 为调节其肠道菌群提供参考。

选择我院2018年7月至2020年5月纳入的97例川崎病患儿作为观察对象, 依据超声心动图检查将其中出现冠状动脉病变的45例患儿作为研究组, 另外52例单纯川崎病患儿作为对照组, 检测两组患儿肠道菌群情况。

两组患儿肠道菌群多样性相比差异无统计学意义(P > 0.05), 但研究组患儿肠道菌群丰度高于对照组(P < 0.05)。研究组患儿肠道厚壁菌门占35.85%, 低于对照组的54.06%(P < 0.05)。研究组患儿肠道拟杆菌门占33.57%, 高于对照组的21.30%(P < 0.05)。研究组患儿肠道变形菌门占24.39%, 与对照组的25.21%相比差异无统计学意义(P > 0.05)。研究组患儿肠道乳杆菌属、拟杆菌属、韦荣球菌属分别占3.87%、25.03%、2.75%, 与对照组的21.23%、16.23%、17.95%相比差异均有统计学意义(均P < 0.05)。

川崎病冠状动脉病变患儿肠道菌群状况与单纯川崎病患儿存在显著差异, 合并冠状动脉病变的患儿肠道菌群紊乱更为显著, 应受到临床重视。

     

清胰汤加减对急性胰腺炎患者肠道菌群及肠黏膜功能的影响

探讨清胰汤加减对急性胰腺炎患者肠道菌群及肠黏膜功能的影响,为该类患者的治疗提供参考。

选取我院2020年1月至2022年6月收治的急性胰腺炎患者108例,随机分为联合组（54例）和常规组（54例）。常规组患者采用常规西药治疗,联合组患者给予清胰汤加减联合常规西药治疗。比较2组患者治疗前后的中医症状积分、肠道菌群数量、肠黏膜功能（D-乳酸、二胺氧化酶、内毒素、白介素-6）情况,比较2组患者临床疗效及不良反应。

治疗后,2组患者主症、次症积分均降低,且联合组低于常规组（均P＜0.05）。治疗后,2组患者肠道大肠埃希菌、葡萄球菌属数量均降低,且联合组上述菌群数量均低于常规组（均P＜0.05）。治疗后,2组患者肠道双歧杆菌属、乳杆菌属数量均升高,且联合组上述菌群数量均高于常规组（均P＜0.05）。治疗后,2组患者血清D-乳酸、二胺氧化酶、内毒素、白介素-6水平均降低,且联合组均低于常规组（均P＜0.05）。联合组患者临床有效率高于常规组（96.30% vs 83.33%,P＜0.05）,而2组患者不良反应发生率比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

清胰汤加减对急性胰腺炎患者的治疗效果显著,能够显著改善患者肠黏膜功能,调节肠道菌群水平,安全性较高。

     

血清降钙素原在小儿早期中枢神经系统感染鉴别诊断中的价值

目的研究细菌性脑膜炎和病毒性脑炎患儿血清降钙素原（PCT）水平的变化,探讨其在小儿早期中枢神经系统感染鉴别诊断中的价值。方法采用双抗夹心免疫发光测量法,检测78例早期中枢神经系统感染患儿的血清及脑脊液降钙素原水平,分析它们之间的相关性;并和脑脊液白细胞数、血白细胞数、血清C反应蛋白相对比;PCT阳性细菌性脑膜炎患儿使用抗生素治疗后再测定血清PCT。结果33例急性细菌性脑膜炎患儿的血清降钙素原浓度为（18．46±9．18）ng／mL,45例急性病毒性脑炎的血清降钙素原水平轻度升高（0．58±0．31）ng／mL,P〈0．01,两者相比较差异有统计学意义。细菌性脑膜炎组患儿血清PCT在经过抗生素治疗后较入院时明显下降,两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）。并且在细菌组急性期脑脊液PCT与血清PCT存在正相直线相关性。结论血清降钙素原检测在小儿早期中枢神经系统感染鉴别诊断中有重要应用价值。     

神经外科颅脑手术患者发生术后颅内感染的危险因素及应用中医外科"托法"效果分析

摘要 目的：探讨神经外科颅脑手术患者术后发生颅内感染的危险因素，并研究中医外科"托法"辅助治疗颅内感染的临床疗效。方法：回顾性分析2017年1月到2022年12月在我院神经外科进行颅脑手术的260例患者临床资料，分析影响患者发生术后颅内感染的影响因素。发生术后发生颅内感染的患者在常规抗感染治疗的基础上加用中医"托法"治疗，分析其临床治疗疗效、抗感染治疗后脑脊液白细胞计数、蛋白含量和中性粒细胞，以及血清白介素-8（IL-8），超敏c反应蛋白（hs-CRP）和降钙素（PCT）。结果：260例神经外科颅脑手术患者，术后出现颅内感染的患者有21例，术后颅内感染发生率为8.08%。多因素Logistic回归分析显示：手术时间、脑脊液分流术、脑室外引流以及脑脊液漏是影响神经外科颅脑手术患者术后是否发生颅内感染的独立影响因素。经中医外科"托法"辅助抗感染治疗后，21例术后颅内感染患者脑脊液白细胞计数、蛋白含量和中性粒细胞均较治疗前显著降低（P<0.05），并且血清IL-8、hs-CRP和 PCT均较治疗前降低（P<0.05）。21例术后颅内感染患者治疗总有效率、抗感染治疗时间和总费用分别为90.48%、（11.43±1.57）天和（7571.68±2541.29）元。结论：手术时间、脑脊液分流术、脑室外引流以及脑脊液漏是影响神经外科颅脑手术患者术后是否发生颅内感染的独立影响因素，中医外科"托法"可用于术后颅内感染患者抗感染治疗。     

The Absolute Granulocyte Count in Ascites Fluid: An Aid to the Diagnosis of Spontaneous Bacterial Peritonitis

The absolute granulocyte count of peritoneal fluid was determined for 98 consecutive patients with ascites in order to assess its value as an early indication of bacterial infection. The absolute granulocyte count was found to be more sensitive and specific than either the total leukocyte count or differential count alone. When the absolute granulocyte count in ascites fluid is greater than 250 per cu mm, then it is likely that infection is present.     

脑脊液检查在早产儿及足月儿细菌性脑膜炎的诊断价值

目的:评价脑脊液检查在早产儿及足月儿细菌性脑膜炎诊断中的价值。方法:选取2014年6月1日至2016年12月31日上海市儿童医院新生儿科收治的行腰椎穿刺检查的447例新生儿,回顾性分析新生儿的一般资料、脑脊液常规生化、培养等指标,根据胎龄将患儿分为早产儿167例与足月儿280例,再根据有无患发细菌性脑膜炎分为早产儿细菌性脑膜炎27例(早产儿观察组)、早产儿非细菌性脑膜炎140例(早产儿对照组)、足月儿细菌性脑膜炎38例(足月儿观察组)、足月儿非细菌性脑膜炎242例(足月儿对照组),采用受试者工作特征(ROC)曲线评估蛋白定量、白细胞计数、葡萄糖对早产儿及足月儿细菌性脑膜炎的诊断价值。结果:与同组对照组相比,足月儿观察组和早产儿观察组蛋白定量和白细胞计数均明显升高,而葡萄糖含量显著下降,且差异均具有统计学意义(P0.05);本研究65例细菌性脑膜炎患儿脑脊液培养分离出11株细菌(16.9%)。足月儿脑脊液白细胞计数、蛋白定量以及葡萄糖诊断细菌性脑膜炎的ROC曲线下面积分别为0.995、0.846、0.703。早产儿脑脊液白细胞计数、蛋白定量以及葡萄糖诊断细菌性脑膜炎ROC曲线下面积分别为0.970、0.711、0.705。结论:脑脊液白细胞计数、蛋白定量在足月儿和早产儿细菌性脑膜炎中具有较高的诊断价值。     

Usefulness of Yeast Cell Counting and Lack of Clinical Correlation of the Antifungal Susceptibility Testing Results in Management of Aids-associated Cryptococcal Meningitis

Cryptococcal meningitis is one of the most seriously opportunistic infections in people living with HIV. We evaluated clinical and laboratorial features (minimum inhibitory concentrations for fluconazole, initial fungal burden in cerebrospinal fluid) and risk factors associated with in-hospital mortality. There is no good evidence for the use of minimum inhibitory concentrations for fluconazole in routine practice for the management of cryptococcosis patients. Counting yeast cells at cerebrospinal fluid can predict positive culture by not death. Data from 46 cryptococcal meningitis patients were reviewed, retrospectively. Patients who presented yeast cell count greater than 400 yeast cells/μ in their initial cerebrospinal fluid sample were associated with higher mortality (p = 0.014); moreover, the yeast cell count is an easy and cheap assay, with high values possibly associated to poor prognosis. Additionally, we verified no significant differences between fluconazole susceptibility profile, molecular type, clinical presentation, cytological analyses, time to sterilize the cerebrospinal fluid, agent recovering out of central nervous system, previous diagnosis of cryptococcal meningitis or usage of fluconazole, and overall mortality.     

血清降钙素原与传统感染检测指标对细菌性血流感染的临床诊断价值比较

目的比较血清降钙素原(PCT)和传统感染检测指标在细菌性血流感染中的诊断价值。方法选取我院2018年1月至11月59例血培养显示细菌感染阳性患者为血培养阳性组,选取同期63例血培养阴性患者为血培养阴性组,分析两组患者白细胞(WBC)、中性粒细胞(NEU)计数和血清PCT水平,比较PCT、WBC和NEU对细菌性血流感染的诊断阳性率和ROC曲线下面积。结果两组患者WBC、NEU计数和血清PCT水平差异均有统计学意义(均P<0.05),PCT对细菌性血流感染的诊断阳性率和ROC曲线下面积显著大于WBC和NEU(均P<0.05)。PCT诊断细菌性血流感染的灵敏度为96.6%,特异度为95.2%。结论血清PCT对细菌性血流感染具有较高的诊断价值。     

Estimating the probability of bacterial infection using a novel biomarker among pediatric patients in the emergency department

Context: IL-27 is a novel biomarker to identify bacterial infection in children.

Objective: IL-27 was evaluated among pediatric emergency department (ED) patients and compared with procalcitonin (PCT).

Methods and results: Children undergoing blood, urine, or cerebrospinal fluid cultures had IL-27 and PCT assays performed. Bacterial infection was defined as a positive culture or a clinical diagnosis based on chart review. IL-27 and PCT were increased among patients with bacterial infection and demonstrated comparable AUC’s (0.62 versus 0.61). A decision tree incorporating IL-27, PCT, and white blood cell count improved the AUC (0.80).

Conclusion: IL-27 is a viable candidate biomarker to identify bacterial infection among ED patients and is comparable with PCT.     

Serum procalcitonin and cerebrospinal fluid cytokines level in children with meningitis

AIMS: To determine the level of serum procalcitonin and cerebrospinal fluid cytokines in children with bacterial or viral meningitis and to document the use of these parameters in differential diagnosis. RESULTS: Before the start of antibiotic treatment, serum procalcitonin and tumor necrosis factor alpha levels were found to be higher in acute bacterial meningitis compared with viral meningitis and with the control group. Similarly, cerebrospinal fluid interleukin-6 levels were found to be significantly higher in children with acute bacterial meningitis compared with viral meningitis. However, no significant difference was determined between groups in respect to the cerebrospinal fluid interleukin-8 level. CONCLUSION: Serum procalcitonin and cerebrospinal fluid tumor necrosis factor alpha levels can be used in the early diagnosis of bacterial meningitis. Similarly, they may be useful adjuncts in differential diagnosis of bacterial and viral meningitis.     

急性呼吸道感染患儿白细胞计数、内毒素、C 反应蛋白水平变化及 临床意义

目的:探讨急性呼吸道感染患儿白细胞(WBC)计数、血清内毒素(ET)、C反应蛋白(CRP)水平变化及临床应用价值。方法:对急性呼吸道感染组106例患儿(细菌感染组62例、病毒感染组44例)进行WBC计数、血清ET、CRP水平等指标进行检测,并与正常对照组的40例健康儿童进行比较分析。结果:急性呼吸道感染组患儿WBC计数、血清ET、CRP水平均显著高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);血清ET、CRP水平对诊断脓毒症的敏感性差异无显著性(P>0.05),均显著高于WBC计数,差异具有统计学意义(P<0.05);WBC计数特异性显著高于ET、CRP水平,ET水平特异性显著低于CRP,差异均具有统计学意义(P<0.05);细菌感染组患儿血清ET、CRP水平显著高于病毒感染组,差异具有统计学意义(P<0.05),而两组间WBC计数差异不显著(P>0.05)。结论:测定WBC计数、ET、CRP对急性呼吸道感染患儿具有一定的诊断价值。