农杆菌介导的单子叶植物转基因研究进展

农杆菌介导法是目前应用最为广泛的植物转基因方法。简单介绍了农杆菌遗传转化的原理,并从农杆菌携带外源基因进入植物的角度对农杆菌转化单子叶植物的关键和相关影响因素进行了论述,同时对近年来利用农杆菌介导法转化的单子叶植物的成功范例做了总结。     

农杆菌介导的植物基因转化研究进展

农杆菌介导的植物基因转佛当今植物基因转化的主要方法之一,因而深受关注,本文从农力介导的基因转化机理,植物对农杆菌侵染的反应,转基因植物的遗传表达,以及农杆菌对单子叶植物的转化等方面论述了该领域的最新研究进展,并提出了进一步研究的方向。     

农杆菌介导的单子叶植物遗传转化研究进展

根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)Ti质粒转化系统的建立使植物遗传工程进入了一个飞速发展的时期。近年来,发根农杆菌(A.rhizogenes)Ri质粒毛根转化系统的研究十分迅速,展示了美好的前景,农杆菌介导的植物遗传转化已成为目前研究和应用最广泛的系统。但是,农杆菌的宿主范围一般仅限于双子叶植物和一些裸子植物,这就直接防碍着这种比较完善的基因转移技术在单子叶植物,尤其是禾谷类作物转化的应用。本文介绍了农杆菌介导的单子叶植物遗传转化的进展;对扩大农杆菌宿主范围、实现对单子叶植物转化的途径进行了探讨。 (一)农杆菌介导的单子叶植物转化的方法 目前建立的单子叶植物基因转移系统有:(1)农杆菌载体系统;(2)外源DNA     

植物转基因方法概述

综述了植物基因转化的不同方法。植物基因转化方法主要包括直接基因转移和农杆菌介导的转化,直接基因转移又包括PEG介导、电激介导和基因枪方法。相比之下,农杆菌转化方法具有明显的优势;本文对其方法和机制作了较为全面的介绍。     

影响农杆菌介导植物基因转化的因素问题

简要综述了农杆菌介导的植物基因转化的机理及其特点,着重分析了影响农杆菌介导植物基因转化的各种因素。     

参与在农杆菌介导遗传转化过程中的植物因子研究进展

随着农杆菌介导遗传转化过程中农杆菌一方转化机理的阐明,人们现在已经将目光转向了参与在农杆菌介导遗传转化过程中的植物因子。应用拟南芥突变体分析,酵母双杂交和cDNA的扩增片段长度多态性等技术人们已经部分阐明了参与在农杆菌向植物细胞的附着,TDNA的加工和转运,T链复合体向细胞核的转运,TDNA的整合等过程中的植物因子,并对植物基因对于农杆菌侵染的响应有了初步的了解。这些结果的获得不仅有助于人们加深对农杆菌介导遗传转化机理的认识而且有助于进一步扩大农杆菌介导遗传转化这一技术的应用范围 。     

农杆菌属介导的植物细胞遗传转化研究现状

自20实际70年代末提出农杆菌属介导产生转基因植物以来,已相继有很多农作物和园艺植物被农杆菌成功转化。在一些发达国家已有大量种植的转基因经济作物如玉米、大豆、棉花、马铃薯、番茄等。但越来越多的经济作物以及园林树木和园艺植物对粒子轰击等转化方法无效或效果不佳,因而农杆菌因其介导的遗传转化率较高就越来越受到重视。但是,农杆菌介导的转基因在表达稳定性和可预见性方面仍然存在诸多问题。本文介绍了有关农杆菌分子生物学的基础研究及提高农杆菌介导的遗传转化效率的研究进展。     

发根农杆菌介导的药用植物遗传转化研究进展

发根农杆菌介导的植物遗传转人旨近年来发展起来的一项新的植物遗传转化技术。本文就发根农杆菌Ｒ１闰的结构、发根农杆菌介导的植物遗传转化的方法和步骤,以及运用这一技术获得药用植物次生代谢产物的研究进展作一全面介绍。     

农杆菌介导法与基因枪轰击法结合在植物遗传转化上的应用

根癌农杆菌介导法(Agrohacterium mediated transformation)和基因枪轰击法( particle bombardment transformation)是植物遗传转化的主要方法。两种方法各有优缺点．农杆菌介导法是一种天然的植物遗传转化系统,外源基因在转基因植物中的拷贝数低,遗传稳定性好;基因枪转化法不受材料基因型的限制。通过结合两种方法的优点,发展了3种农杆菌介导和基因枪轰击法相结合的遗传转化方法,分别为农杆枪法、基因枪轰击／农杆菌感染法、金粉或钨粉包裹菌体细胞作为微弹轰击法。对3种结合转化方法的技术途径、原理、转化受体及研究进展等方面进行了综述。     

根癌农杆菌介导法在禾本科植物遗传转化中的应用

在植物基因工程中,农杆菌质粒介导的遗传转化是比较完善与有效的基因转移方法,但在单子叶植物中应用较少。文章介绍了农杆菌介导遗传转化技术在禾本科植物改良中的研究进展,并对此法的应用前景作了分析。     

Agrobacterium-mediated transformation leads to improved gene replacement efficiency in Aspergillus awamori

In this study, the efficiency of gene replacement in Aspergillus awamori between Agrobacterium-mediated transformation and CaCl(2)/PEG-mediated transformation was compared. For the genes, pyrG and gfaA, it was found that the homologous recombination frequencies obtained by Agrobacterium-mediated transformation were 3- to 6-fold higher than the frequencies obtained with CaCl(2)/PEG protoplast transformation. For the pyrG gene, it was found that Agrobacterium-mediated transformation allowed an efficient homologous recombination with shorter DNA flanks than CaCl(2)/PEG protoplast transformation. Finally, the addition of the dominant amdS marker as a second selection marker to the gene replacement cassette led to a further 2-fold enrichment in transformants with gene replacement events, resulting in a gene replacement frequency of 55%. Based on the data it can be concluded that Agrobacterium-mediated transformation is an efficient tool for gene replacement and that the amdS gene can be successfully used as a second selection marker to select transformants with putative gene replacement.     

根癌农杆菌介导的水稻转化研究进展

农杆菌介导的水稻基因转化是水稻基因转化的热门。本文对由农杆菌介导转化获得的水稻品系（品种）,影响农杆菌介导转化的因素,农村菌浸染的方法,外源基因的检测和遗传等方面作综合论述,并提出了农杆菌介导转化水稻的前景。     

农杆菌介导的玉米遗传转化系统研究进展

摘要: 农杆菌介导的遗传转化由于具有独特的优点, 一直受到育种家、分子生物学家和微生物学家的重视, 因此近10年发展很快。玉米是重要的粮食作物, 农杆菌介导的玉米遗传转化也取得了重大成就。文章就近年来玉米遗传转化取得的进展、影响转化的重要因素作一小结, 并就目前转化存在的问题和前景作简单的讨论。     

根癌农杆菌介导转化番茄的影响因素

综述影响根癌农杆菌介导番茄转化效率的因素,包括根癌农杆菌菌株类型、Vir基因的活化、选择标记基因、植物基因型、外植体类型、培养基中是否附加植物激素和抑菌抗生素、菌液浓度、侵染时间长短,是否预培养和共培养天数等;同时不同的培养方式也是影响番茄转化效率的主要因素,包括液体培养法、农杆菌介导的floral-dip转化法、超声波辅助农杆菌介导法、农杆菌介导与基因枪轰击结合法等.     

针叶松遗传转化操作的研究进展(英文)

1986年从火炬松方面获得了首例针叶松愈伤组织以后,针叶松遗传转化研究取得了明显的进展。1991年从Larix decidua方面获得了第一个转基因再生植株。最近,通过农瘤杆菌介导的转化方式在Larix kaempferi ( L. Decidua杂交树种上获得了转基因针叶松,通过鸟枪法在Picea glauca、Picea mariana、Picea abies、Larix laricina、Pinus radiata上亦获得了转基因植株。已经有多种办法用于转化针叶松。本文就目前在针叶松上所用的遗传转化方法??诸如：T－DNA转化法、农瘤杆菌介导转法化、鸟枪法、电转化法等给以粗略的评论。     

Agrobacterium-mediated In-planta transformation of bread wheat (Triticum aestivum L.)

Journal of Plant Biochemistry and Biotechnology - Agrobacterium-mediated in-planta transformation method allows efficient plant transformation without tissue culture. In the present study, a tissue...     

Agrobacterium-mediated transient GUS gene expression in buffel grass (Cenchrus ciliaris L.)

The study was conducted to standardize a protocol for Agrobacterium-mediated genetic transformation of buffel grass (Cenchrus ciliaris L.). Embryogenic calli, produced from one-year-old mature seeds of buffel grass, were used as target cells for Agrobacterium-mediated transformation. A. tumefaciens strain LBA4404, harbouring pCAMBIA-1301 or pCAMBIA-2301, was used for co-cultivation with embryogenic calli from three genotypes (IG-3108, IG-9757 and IG-97101). Co-culturing of calli with Agrobacterium for 30 minutes, followed by co-cultivation with 0.1 mM acetosyringone for 3 days was found to be optimum for maximum transformation efficiency. Presence of acetosyringone during co-cultivation was found to be necessary for transformation. Transient GUS (beta-glucuronidase) gene expression was used to monitor T-DNA delivery into the target cells. Significant genotypic variations in response to transformation were observed among the tested genotypes. A very high frequency (63.3%) of GUS gene expression was obtained following Agrobacterium-mediated gene transfer into embryogenic calli. The standardized protocol would be useful for Agrobacterium-mediated genetic transformation of buffel grass with genes of agronomic importance.     

单子叶植物RNA干扰和过表达Gateway载体的构建

基因枪和农杆菌介导的遗传转化是目前常用的两种单子叶植物遗传转化方法。载体的发展和改良是提高植物遗传转化效率的重要基础,RNA干扰载体和过表达载体是目前通过遗传转化研究植物基因功能的主要工具。Gateway克隆技术是一种基于lambda噬菌体特异位点重组特性的通用克隆技术,该技术可以将大批目的基因方便、快捷地连接到受体载体上。本文利用Gateway技术结合传统酶切、连接方法,构建了适用于单子叶植物基因枪和农杆菌转化的RNA干扰Gateway载体pAHC-PSK-RNAi、pClean-G185-RNAi和过表达Gateway载体pAHC-PSK-OE和pClean-G185-OE,为利用基因枪和农杆菌介导的遗传转化,在小麦和水稻等单子叶植物中进行规模化基因功能研究奠定了基础。