阿魏蘑多糖理化性质及免疫活性研究*

以阿魏蘑Pleurotus ferulae Lanzi子实体和菌丝体为试验材料,采用水浸法提取阿魏蘑多糖,分别得到子实体粗多糖A和菌丝体粗多糖B。将A经Sevag法去蛋白、透析、CTAB络合、乙醇沉淀、NaCl溶液溶解、透析,得到多糖A1。紫外光谱分析鉴定多糖A1为均一组分。苯酚—硫酸法测得多糖A1糖含量为82.9%。凝胶渗透色谱法测得多糖A1数均分子量Mn=141088,重均分子量Mw=142897。气相色谱分析多糖A1单糖组成及其摩尔比为Xyl∶Gla∶Glc=1∶1.102∶2.899。巨噬细胞吞噬作用试验、迟发型变态反应试验、白细胞介素-2（IL-2）的诱生与检测试验测得粗多糖A、粗多糖B具有免疫活性。     

九州虫草菌丝体多糖Ck１-A的纯化及其性质研究

九州虫草 Cordyceps byushuensis 菌丝体粗多糖经酶法结合 Sevag 法除蛋白、H2O2 法脱色、透析、乙醇分部沉淀得到 Ck1,Ck1 经 DE-23 柱层析得到多糖 Ck1-A。经紫外扫描、聚丙烯酰胺凝胶电泳、Sepharose 4B 柱层析等方法检测确定 Ck1-A 为均一组分。苯酚-硫酸法测得 Ck1-A 的含糖量为 86.1％,硫酸-咔唑法测得 Ck1-A 含有微量的葡萄糖醛酸。Sepharose 4B 柱层析测得 Ck1-A 的分子量为 927 kDa。红外光谱和核磁共振氢谱的结果均显示 Ckl－A 含有a-型糖苷键。体内实验表明 Ck-1A 对小鼠肉瘤 S180 有明显的抑制作用。     

猴头菌子实体和菌丝体多糖的分离纯化与理化特征的比较

人工栽培的猴头菌子实体和固体培养的菌丝体分别经热水提取,浓缩、醇析后得子实体粗多糖（HFP）和菌丝体粗多糖（HMP）,HFP的得率和多糖含量均高于HMP;两者再经透析、Sevag法脱蛋白、乙醇分级沉淀、SephadexG-100柱层析纯化,得子实体纯多糖hfp-1和菌丝体纯多糖hmp-2,经HPLC检测hfp-1和hmp-2为单一均匀多糖,气相色谱分析表明hfp-1的单糖组成为阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖,摩尔比为：0.12:0.04:1.00:0.71;hmp-2的单糖组成为阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖,磨尔比为：0.25:0.41:0.31:1.00:0.29。紫外光谱分析表明组成中不含核酸和蛋白质,红外光谱分析二者均有多糖特征吸收峰,hfp-1有β-型连接的吸收峰,hmp-2无明显的β-型连接的吸收峰;经HPLC进行分子量测定,hfp-1的分子量为54000,hmp-2的分子量为68000,猴头菌子实体多糖和菌丝体多糖在化学组成上有一定的差异。     

猴头菌子实体和菌丝体多糖的分离纯化与理化特征的比较*

人工栽培的猴头菌子实体和固体培养的菌丝体分别经热水提取,浓缩、醇析后得子实体粗多糖（HFP）和菌丝体粗多糖（HMP）,HFP的得率和多糖含量均高于HMP;两者再经透析、Sevag法脱蛋白、乙醇分级沉淀、SephadexG-100柱层析纯化,得子实体纯多糖hfp-1和菌丝体纯多糖 hmp-2,经HPLC检测hfp-1和hmp-2为单一均匀多糖。气相色谱分析表明hfp-1的单糖组成为阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖,摩尔比为：0.12：0.04：1.00：0.71;hmp-2的单糖组成为阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖,摩尔比为：0.25：0.41：0.31：1.00：0.29。紫外光谱分析表明组成中不含核酸和蛋白质,红外光谱分析二者均有多糖特征吸收峰,hfp-1有β-型连接的吸收峰,hmp-2无明显的β-型连接的吸收峰;经HPLC进行分子量测定,hfp-1的分子量为54000,hmp-2的分子量为68000。猴头菌子实体多糖和菌丝体多糖在化学组成上有一定的差异。     

九州虫草菌丝体多糖Ck1-A的纯化及其性质研究

九州虫草Cordyceps kyushuensis菌丝体粗多糖经酶法结合Sevag法除蛋白、H2O2法脱色、透析、乙醇分部沉淀得到Ck1,Ck1经DE-23柱层析得到多糖Ck1-A.经紫外扫描、聚丙烯酰胺凝胶电泳、Sepharose 4B柱层析等方法检测确定Ck1-A为均一组分.苯酚-硫酸法测得Ck1-A的含糖量为86.1%,硫酸-咔唑法测得Ck1-A含有微量的葡萄糖醛酸.Sepharose 4B柱层析测得Ck1-A的分子量为927 kDa.红外光谱和核磁共振氢谱的结果均显示Ck1-A含有α-型糖苷键.体内实验表明Ck1-A对小鼠肉瘤S180有明显的抑制作用.     

蝉虫草子实体与发酵菌丝体胞内多糖成分分析

比较蝉虫草子实体、孢梗束、虫体以及蝉虫草发酵菌丝体的胞内多糖含量、单糖组成和分子量差异,结果表明,蝉虫草子实体与发酵菌丝中胞内多糖的含量和组成均存在差异。葡萄糖、半乳糖和甘露糖是蝉虫草发酵菌丝体和子实体粗多糖中主要的3种单糖,阿拉伯糖和木糖是子实体粗多糖中的特征性单糖,而果糖属于菌丝体的特征性单糖。子实体粗多糖中高分子量组分（>1×10 ⁶Da）的相对含量明显高于菌丝体粗多糖。本研究对提升蝉虫草发酵多糖产品品质、促进蝉虫草开发应用具有参考价值。     

阿魏侧耳酸提水溶性多糖的研究

从热水浸提过的阿魏侧耳（Pleurotus ferulae）子实体中用3%的三氯乙酸提取出另一种水溶性粗多糖PFA,将PFA经Sevage法脱蛋白、透析、CTAB络合去沉淀后得多糖PF3。苯酚硫酸法测得PF3糖含量为94.1%;用光散射和GPC联机测得PF3重均分子量为1.965×10.6;用IR和GC分析了组成和结构,PF3由鼠李糖、木糖、葡萄糖、半乳糖和甘露糖组成,含有α-糖苷键。同时研究了PF3对核糖核酸酶的抑制作用,表明在浓度5mg/mL时其抑制率可达44.4%。     

九州虫草菌丝体多糖Ck1-A的纯化及其性质研究*

九州虫草Cordyceps kyushuensis 菌丝体粗多糖经酶法结合Sevag法除蛋白、H₂O₂法脱色、透析、乙醇分部沉淀得到Ck₁,Ck₁经DE-23柱层析得到多糖Ck₁-A。经紫外扫描、聚丙烯酰胺凝胶电泳、Sepharose 4B柱层析等方法检测确定Ck₁-A为均一组分。苯酚-硫酸法测得Ck₁-A的含糖量为86.1%,硫酸-咔唑法测得Ck₁-A含有微量的葡萄糖醛酸。Sepharose 4B柱层析测得Ck₁-A的分子量为927 kDa。红外光谱和核磁共振氢谱的结果均显示Ck₁-A含有α-型糖苷键。体内实验表明Ck₁-A对小鼠肉瘤S180有明显的抑制作用。     

金耳子实体和发酵菌丝体多糖的分离、纯化与结构的比较研究

人工段木栽培的金耳（TremellaaurantialbaBandonietZang）子实体和深层培养的金耳菌丝体分别经沸水提取、醇析、透析,Sevape法脱蛋白、SephadexG—100柱层析纯化,得子实体纯多糖TAf和菌丝体纯多糖TAm。玻璃纤维纸电泳表明TAm和TAf为单一均匀多糖。薄层层析表明,TAm的单糖组成为半乳糖、葡萄糖、甘露糖、岩藻糖、鼠李糖。TAf的单糖组成为葡萄糖、甘露糖、木糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸。UV分析表明组成中不含核酸和蛋白质。TAf经乙醇分级分离得TAf－1和TAf－2。TAf－1经SephadexG－100柱层析表明其为单一均匀物质。红外光谱分析证明,TAf－1和TAf－2有多糖吸收峰,存在吡喃环,α-糖苷键和β-糖苷键连接。     

发酵法生产猪苓菌丝体及猪苓多糖的研究

采用经选育的猪苓PU－99菌作为生产菌株,研究了其培养基组成,优化了深层发酵条件。在1吨罐中生产猪苓菌丝体：发酵36h,其菌丝体干重达2．3％,粗多糖含量在31．0％。对得到的猪苓菌丝体进行了有效成分的提取,并测定了猪苓多糖的分子量,分子量为29054,峰面积72．02％。     

人工栽培灵芝中多糖的部分理化性质及免疫调节作用

【背景】灵芝是一种广受关注的药食两用真菌,在中国作为传统药材和健康食品已有几千年历史,近年来中国人工栽培灵芝规模扩展迅速,而多糖被认为是灵芝中最主要的活性成分。【目的】分离和纯化人工栽培灵芝子实体多糖,并对其结构和免疫调节活性进行研究。【方法】采用水提醇沉法提取灵芝子实体多糖(GLP),采用DE-52纤维素柱和Sephadex G-100进行多糖的分离纯化,高效凝胶渗透色谱法测定多糖分子量,1-苯基-3-甲基-5-吡啶啉酮(PMP)柱前衍生法测定单糖组成,红外光谱进行结构分析,噻唑蓝(MTT)比色法测定多糖对小鼠脾细胞增殖的影响,同时评价其对RAW 264.7细胞吞噬能力和细胞因子分泌能力的促进作用。【结果】GLP平均分子量为1.93×10~4 Da,单糖组成包含葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)及甘露糖(Man),占比为Glc:Gal:Man=3.3:1.3:1.0。红外光谱显示,GLP的异头碳为β构型。GLP能直接促进脾细胞的增殖,且能显著增强刀豆蛋白A(Con A)诱导的T淋巴细胞和脂多糖(LPS)诱导的B淋巴细胞的增殖。此外,对于RAW 264.7细胞的吞噬能力及细胞因子分泌具有一定的促进作用。【结论】灵芝多糖可作为一个潜在的免疫调节药物而开发利用。     

牡蛎形拟层孔菌生物学特性、驯化栽培及抗氧化活性

对采自江西省萍乡市的野生牡蛎形拟层孔菌Fomitopsis ostreiformis子实体分离的菌株进行生物学特性的单因素及正交试验,在对其菌丝体最适培养条件研究结果的基础上,对其进行驯化栽培研究。通过水提醇沉法对获得的牡蛎形拟层孔菌栽培子实体进行粗多糖提取,并通过测定其粗多糖对DPPH自由基和羟自由基的清除率,讨论该菌体外抗氧化活性。结果显示：牡蛎形拟层孔菌的最适生长碳源与氮源分别为葡萄糖和酵母浸粉,最适生长pH为5.0-6.0,最适生长温度为35℃,温度因素对其菌丝体生长的影响最大;栽培种接种后,60d左右可形成成熟的子实体;其栽培子实体粗多糖的提取率为10.88%,提取粗多糖中总糖含量为23.87%;粗多糖对DPPH自由基和羟自由基均具有较强的清除率,且均存在一定的量效关系,表明该菌具有较高的抗氧化应用潜力。     

红黄鹅膏子实体不同极性部位及粗多糖对B16细胞活力的影响

为探讨红黄鹅膏子实体不同极性部位和粗多糖对鼠黑色素瘤细胞B16活力的影响,采用MTT法检测红黄鹅膏子实体醇提物石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取部位和水层及水提醇沉得到的粗多糖对B16细胞的抑制活性。结果表明:红黄鹅膏子实体不同极性部位及粗多糖(100⁴00 mg/mL)处理24 h后,其石油醚部位、乙酸乙酯部位和子实体粗多糖对B16细胞活力有明显的抑制作用。红黄鹅膏子实体不同极性部位和粗多糖在一定时间内对B16细胞活力的抑制呈浓度依赖性。     

香菇不同发育阶段子实体多糖的理化性质及体外免疫活性研究

香菇多糖是从香菇菌丝体或子实体中提取纯化得到的高分子葡聚糖,作为香菇主要的生物活性物质,具有提高免疫力、抗病毒、抗氧化和抗真菌等生物活性。本研究对幼菇期、菌褶期、采收期、成熟期和开伞期5个不同发育阶段香菇粗多糖含量、理化性质和体外免疫活性进行比较分析。结果表明,其粗多糖含量、理化性质和体外免疫活性具有明显差异。粗多糖得率呈现先增加后降低的趋势,菌褶期得率最高;粗多糖含量也呈现先增加后降低的趋势,成熟期含量最高;多糖的分子量因发育期不同而有较大差异,发育后期所得粗多糖分子量千万级以上组分的比例增加,分子量百万级和十万级的多糖组分比例降低;不同发育阶段香菇子实体多糖的单糖组成均包含果糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖4种单糖,且都以葡萄糖为主;5个阶段的多糖组分均有较好的体外免疫活性,其中幼菇期粗多糖在浓度500μg/mL时表现出最高的体外免疫活性。本研究探讨了香菇不同发育阶段子实体多糖的理化性质及体外免疫活性,为香菇采收期的确定及香菇多糖的制备与利用提供理论依据。     

火针层孔菌（桑黄）粗多糖对荷瘤小鼠的免疫调节研究

研究了火针层孔菌不同粗多糖对荷瘤小鼠的免疫调节作用。荷瘤小鼠随机分为四组:胞外粗多糖组、菌丝体粗多糖组、子实体粗多糖组和生理盐水阴性对照组。给药10d后测定荷瘤小鼠脾NK细胞活性和脾淋巴细胞的增殖率。结果显示火针层孔菌粗多糖组与阴性对照组相比能够提高小鼠脾NK细胞活性和脾淋巴细胞的增殖率(P<0.01),表明火针层孔菌液体发酵粗多糖和子实体粗多糖对荷瘤小鼠免疫功能均有调节作用。     

小刺猴头菌液体深层培养过程中多糖积累及其特征的研究

本文探讨了气升环流反应器培养小刺猴头菌过程中菌体生物量、胞内外真菌多糖的积累规律,与同一菌株复元的子实体多糖的含量、组成分别进行分析对比,得到液体深层培养菌丝体多糖的含量为0．0918g／g（干）,而子实体仅为外0．378g／g（干）,发酵液中多糖含量达0．285g／l,它们的单糖构成比例均相同,即葡萄糖：甘露糖：半乳糖＝20．2：5．2：1,但液体深层培养的菌丝体多糖与人工栽培的子实体多糖的电荷性能不同。     

金耳子实体和发酵菌丝体多糖的分离纯化与结构的比较研究

人工段木栽培的金耳（ＴｒｅｎｅｌｌａａｕｒａｎｔｉａｌｂａＢａｎｄｏｎｉｅｔＺａｎｇ）子实体和深层培养的金耳菌丝体分别经沸水提取,醇析,透析,Ｓｅｖａｇｅ法脱蛋白,ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００柱层析纯化,得子实体纯多糖ＴＡｆ和菌丝体纯多糖ＡＴｍ。玻璃纤维纸电泳表明ＴＡｍ和ＴＡｆ为单一均匀多糖。糖层层析表明,ＴＡｍ的单糖组成为半乳糖,葡萄糖,甘露糖,岩藻糖,鼠李糖,ＴＡｆ单糖组成为葡萄糖,甘露糖,木糖     

60Co辐射诱变对巴氏蘑菇(姬松茸)子实体多糖组分与结构变化的影响

巴氏蘑菇(姬松茸)原菌株J1和辐射突变株J3子实体粗多糖经水提、醇沉、Sevage法去除蛋白,透析得精多糖ABJ-1和ABJ-3;经紫外扫描和凝胶色谱法检测表明,ABJ-1和ABJ-3均具有较高的纯度。以苯酚-硫酸法测得了ABJ-1和ABJ-3的糖含量分别为47%和76.68%,凯氏定氮法测定其含氮量分别为5.77%和21%。,以凝胶过滤法测定了其分子量均在4万左右。完全酸水解后气相色谱分析显示ABJ-1含有甘露糖、葡萄糖、半乳糖等单糖,ABJ-3含有大量的甘露糖及少量的葡萄糖等单糖。红外光谱和Smith降解后气相色谱分析显示ABJ-1和ABJ-3糖基连接键均以a,1-4糖苷键为主。     

60Co辐射诱变对巴氏蘑菇(姬松茸)子实体多糖组分与结构变化的影响

巴氏蘑菇(姬松茸)原菌株J1和辐射突变株J3子实体粗多糖经水提、醇沉、Sevage法去除蛋白,透析得精多糖ABJ-1和ABJ-3;经紫外扫描和凝胶色谱法检测表明,ABJ-1和ABJ-3均具有较高的纯度。以苯酚-硫酸法测得了ABJ-1和ABJ-3的糖含量分别为47%和76.68%,凯氏定氮法测定其含氮量分别为5.77%和21%。,以凝胶过滤法测定了其分子量均在4万左右。完全酸水解后气相色谱分析显示ABJ-1含有甘露糖、葡萄糖、半乳糖等单糖,ABJ-3含有大量的甘露糖及少量的葡萄糖等单糖。红外光谱和Smith降解后气相色谱分析显示ABJ-1和ABJ-3糖基连接键均以a,1-4糖苷键为主。     

60Co辐射诱变对巴氏蘑菇(姬松茸)子实体多糖组分与结构变化的影响

巴氏蘑菇(姬松茸)原菌株J1和辐射突变株J3子实体粗多糖经水提、醇沉、Sevage法去除蛋白,透析得精多糖ABJ-1和ABJ-3;经紫外扫描和凝胶色谱法检测表明,ABJ-1和ABJ-3均具有较高的纯度。以苯酚-硫酸法测得了ABJ-1和ABJ-3的糖含量分别为47%和76.68%,凯氏定氮法测定其含氮量分别为5.77%和21%。,以凝胶过滤法测定了其分子量均在4万左右。完全酸水解后气相色谱分析显示ABJ-1含有甘露糖、葡萄糖、半乳糖等单糖,ABJ-3含有大量的甘露糖及少量的葡萄糖等单糖。红外光谱和Smith降解后气相色谱分析显示ABJ-1和ABJ-3糖基连接键均以a,1-4糖苷键为主。