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1.
2.
张丽娟 《微生物学免疫学进展》1988,(3)
<正> 早在80年前就已发现肺炎链球菌溶血素是肺炎链球菌产生的一种巯基激活的细胞溶素,但对其性质和在肺炎链球菌致病性中起的作用一直不清楚。生长在血琼脂平板上的肺炎链球菌菌落可以形成绿色的α溶血环,这种α溶血与肺炎球菌溶血素无关,已经证明加一滴纯化的肺炎球菌溶血素到血琼脂板上可以产生透明的β溶血。目前尚未有准确数据说明肺炎链球菌产生溶血素的频率,但发现从临床分离到的肺炎链球菌99%以上能产生这种溶血素。 相似文献
3.
目的使用重叠PCR方法构建构建△Al46Ply突变体,原核可溶性表达△Al46Ply蛋白,并明确其毒力变化情况;分析肺炎链球菌溶血素(pneumolysin,Ply)在不同血清型肺炎链球菌(streptococcus pneumoniae,SPN)中的表达情况。方法以SPND39型基因组DNA为模板设计合成构建突变体pry基因所需引物;利用重叠PCR方法扩增合成△Al46ply突变体。通过溶血实验分析其溶血活性,利用中和试验验证△A146Ply诱导产生的特异性抗体中和野生Ply毒素溶血能力,并利用Western印迹检测5株不同血清型肺炎链球菌流行菌株中Ply蛋白表达情况。结果突变体基因测序结果显示,Plyl46位密码子GCT3个碱基被缺失,△Al46ply突变体构建成功,并实现了△Al46Ply的可溶性表达,得到纯度〉90%的重组蛋白。△A146Ply蛋白浓度为100000ng/ml亦未表现出溶血活性。△Al46Ply蛋白诱导产生的特异性抗体能够中和野生Ply毒素的溶血活性。Western印迹结果显示,△Al46Ply诱导产生的多克隆抗体可与国内临床常见4株肺炎链球菌有交叉反应。结论△Al46Ply蛋白是一种安全的肺炎链球菌疫苗候选分子,可刺激机体产生具有中和作用的特异性抗体。 相似文献
4.
<正>背景:为了提供抗肺炎球菌性疾病的广谱保护,新型的含有保守的肺炎链球菌蛋白的疫苗正在被人们开发出来。该研究评价了含有肺炎链球菌蛋白肺炎链球菌溶血素类毒素(dply)和三联组氨酸蛋白的Pht D的4种配方制剂在学步儿童中的安全和免疫原性。方法:在这项Ⅱ期临床试验中,采取了多中心,观察者盲性,在捷克的学步儿童(12~23月龄的儿童)中进行。按照随机原则(1∶1∶1∶1∶1)接受 相似文献
5.
肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,SP)普遍定植于呼吸道,是人类重要的侵袭性病原菌之一,是社区获得性肺炎、中耳炎、脑膜炎、菌血症、鼻窦炎的主要病原菌。肺炎链球菌粘附和毒力因子A(pneumococcal adherence and virulence factor A,PavA)是肺炎链球菌早期感染和侵袭过程中关键的毒力因子。体外试验表明,缺失PavA的肺炎链球菌的突变株其粘附和侵入上皮细胞和内皮细胞的能力明显下降。作为一种保护性抗原,其诱导的细胞和体液免疫可以有效的抵抗肺炎链球菌的感染,是肺炎链球菌新一代疫苗的候选蛋白。但是,PavA在肺炎链球菌与人肺上皮细胞交互对话中作用机制的研究尚属空白,本文就肺炎链球菌粘附和毒力因子A得最新研究进展作一综述。 相似文献
6.
肺炎链球菌疫苗研制对于肺炎链球菌感染的防治具有重要意义。常见的荚膜多糖疫苗存在很大缺陷,需要更为有效的疫苗来替代。本文综述肺炎链球菌疫苗研制中的一些进展,包括结合疫苗的研制、几种公认的蛋白疫苗因子的研究进展和新的蛋白疫苗因子的筛选。同时还介绍肺炎链球菌疫苗研制过程中的一些新思路(联合疫苗、活疫苗、DNA疫苗),它们是对肺炎链球菌疫苗研制方法的丰富。 相似文献
7.
动物实验研究表明,抗肺炎球菌荚膜多糖(CPS)抗体能增强对肺炎球菌的吞噬作用,抗肺炎球菌溶血素(PLY)的抗体则能对抗炎症反应,阻止肺炎球菌侵袭。针对PLY的抗体应答是否可通过自然接触途径获得,以及抗PLY抗体与抗CPS抗体在粘膜表面的浓度比较结果如何尚不清楚。 相似文献
8.
【目的】马链球菌兽疫亚种是工业上生产透明质酸的主要菌种,该菌能产生引起宿主细胞溶血的链球菌溶血素S(streptolysin S,SLS)毒素,因而其产品的安全性一直是人们所担心的问题。本实验的目的就是通过基因敲除的方法构建不产SLS的透明质酸生产工程菌,同时探讨溶血素sag A基因缺失对菌株透明质酸合成和其他毒力因子的影响。【方法】利用温度敏感/自杀性质粒p JR700载体系统,构建马链球菌兽疫亚种sag A基因缺失突变株;通过PCR扩增,溶血平板和SLS含量测定等方法确定sag A基因缺失;采用分光光度、SDS-PAGE和细胞毒性试验等分析方法,对野生菌株和sag A基因缺失突变菌株透明质酸含量、透明质酸分子量、溶血素Hylc、透明质酸分解酶、甘油醛-3-磷酸脱氢酶和菌体表面蛋白等相关毒力因子进行对比研究。【结果】获得了透明质酸产量提高30%而溶血活性极低的马链球菌兽疫亚种sag A基因缺失突变株。该突变株与野生菌株相比较,透明质酸分解酶活性增加而透明质酸相对分子量降低,此外,与毒力相关的表面蛋白含量、溶血素Hylc和甘油醛-3-磷酸脱氢酶活性也显著降低。细胞毒性实验结果表明,野生菌株与sag A基因缺失突变菌株的培养物上清液,对细胞活性的影响存在显著差异。【结论】在马链球菌兽疫亚种中sag A不仅是表达溶血素SLS的基因,同时sag A基因对菌株透明质酸合成、透明质酸分解酶、菌体表面蛋白、溶血素Hylc和甘油醛-3-磷酸脱氢酶等都具有调节作用。 相似文献
9.
生物信息分析化脓性链球菌溶血素O(streptolysin O,Slo)蛋白结构表明,Slo蛋白除含有由461氨基酸残基组成的溶血活性结构域Thiol_cytolysin外,在N端还有一跨膜结构域。利用pET101-GENE蛋白表达系统,成功构建出表达具有Slo活性重组蛋白的重组子,采用镍柱亲和层析分离技术,纯化目的蛋白;纯化蛋白SDS-PAGE检测分析表明,重组蛋白与预测的溶血活性结构域的分子量相一致;溶血实验显示,纯化重组蛋白具有溶血活性。以纯化的重组蛋白为免疫原,对大鼠进行4次免疫,所获得免疫血清经 Elisa检测,抗Slo血清效价达到 1 ∶12 800;Western blot检测猪链球菌、马链球菌和化脓性链球菌中的链球菌溶血素结果显示,抗Slo多克隆抗体仅能与化脓性链球菌溶血素O发生反应,表明研究制备的化脓性链球菌溶血素O活性结构重组蛋白抗原具有较好的特异性,所制备的抗原Slo 可用于进一步开发抗链球菌溶血素O(ASO)试剂盒。 相似文献
10.
刘宇阳 《微生物学免疫学进展》2018,(3)
正接种含有肺炎球菌蛋白抗原诸如肺炎球菌溶血素类毒素(d Ply)和组氨酸-三联体蛋白D(Pht D)的配方制剂,可扩大抗肺炎链球菌的肺炎球菌结合疫苗(PCVs)血清型相关的保护作用。在欧洲进行的这项多中心、观察者盲的Ⅱ期临床试验(NCT01204658),评估了两种含10种血清型特异性多糖结合物的观察性疫苗PHi D-CV,其分别含有10μg或30μg的d Ply和Pht D。按1∶1∶1∶ 相似文献
11.
肺炎链球菌自溶素和溶血素基因的PCR法鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
肺炎链球菌是一种致病率和致死率很高的病原菌 ,若无丰富临床检测经验从临床标准中分离鉴定此菌较困难 ,本实验以寡核苷酸引物YH1 YH2、YH7 YH8分别扩增肺炎链球菌自溶素和溶血素基因的 35 4bp和 30 7bp的DNA片段 ,通过改变各种反应条件 ,建立了这两种病原因子基因的PCR检测方法。用此方法对 2 0株肺炎链球菌标准菌株及 7株对照菌株进行了鉴定 ;其扩增产物分别经限制性内切酶TthHB81和和AccI进行酶切以确认扩增产物是否正确 ;用酚 氯仿抽提纯化的全细胞DNA对PCR方法的检测灵敏度进行了测定 ;并利用此方法对 2 8份临床标本分离物进行了鉴定。结果 所有 2 0株肺炎链球菌均可分别用引物YH1 YH2、YH7 YH8扩增出 35 4bp和 30 7bp的DNA片段 ,而对照菌株均呈阴性 ;自溶素及溶血素基因的扩增产物分别经限制性内切酶TthHB81和AccI消化后产生的片段和预期的完全一致 ;两对产物均可从 10fg的全细胞DNA中扩增出目的DNA片段。所建立的两套PCR系统对 2 8份临床标本分离物进行鉴定 ,其中PCR阳性的 15份分离物经生化学特性检查被鉴定为肺炎链球菌。本试验所建立的两套PCR检测系统具有特异性强 ,灵敏度高及操作简单等优点 ,均可用于肺炎链球菌的鉴定。 相似文献
12.
疫苗接种是预防肺炎球菌疾病的一种有效方法。目前,肺炎链球菌上市疫苗包括多糖疫苗(PPSV)和结合疫苗(PCV),它们靶向以荚膜构成为基础的94种肺炎链球菌血清型中最常见的血清型。然而,据报道,PPSV对2岁以下儿童无效,并且PCV诱导了血清型替代,这意味着在广泛接种疫苗后肺炎链球菌菌群发生了变化,非疫苗血清型引起的侵袭性肺炎球菌病的案例增加。因此,开发新型肺炎球菌疫苗以替代或补充目前的基于多糖的疫苗十分必要。 相似文献
13.
<正>现有的获批肺炎疫苗,它们基于荚膜多糖的血清分型,能有效预防肺炎链球菌引起的侵入性疾病,但对于非细菌性肺炎和急性中耳炎(AOM)效果不佳。此前我们报道过,一种三价肺炎链球菌蛋白重组疫苗(PPrV)能够让小鼠模型抵御肺炎。在此,作者使用乳鼠模型,评估了肺炎链球菌蛋白重组疫苗 相似文献
14.
《微生物学免疫学进展》2021,(2)
多糖蛋白结合疫苗(polysaccharide-protein conjugate vaccine)是将病原菌的荚膜多糖与载体蛋白通过共价结合的方式制备而成的疫苗。在上市的多糖蛋白结合疫苗中,载体蛋白(carrier protein)预先接种或共同接种时可能介导免疫干扰,降低结合物中多糖的免疫应答,影响疫苗接种效果。另外,多糖作为疫苗抗原有血清型别的限制,疫苗中所含的血清型别无法保护所有型别的细菌感染。因此,考虑将细菌自身具有保护性的抗原蛋白作为载体蛋白,其中,肺炎链球菌溶血素蛋白、金黄色葡萄球菌蛋白、B群链球菌菌毛蛋白和沙门菌表面蛋白都是目前经过实验室证实的具有免疫原性的载体蛋白。现对这些细菌蛋白的免疫学特性及其作为多糖蛋白结合疫苗载体的可行性作一概述。 相似文献
15.
肺炎链球菌是一种致病率和致死率很高的病原菌,若无丰富临床检测经验从临床标准中分离鉴定此菌较困难,本实验以寡核苷酸引物YH1、YH2、YH7、YH8分别扩增肺炎链球8菌自溶素和溶血素基因的354bp、307bp的DNA片段,通过改变各种反应条件,建立了这两种病原因子基因的PCR检测方法。用经方法对20株肺炎链球菌标准菌株及7株对照菌株进行了鉴定,其扩增产物分别经限制性内切酶TthHB81和和Acel 相似文献
16.
蘑菇子实体内杀虫蛋白质的研究 总被引:5,自引:2,他引:5
许多蘑菇都对昆虫表现出毒性。为了证实与杀虫毒性有关的化合物,对14种蘑菇的毒性在水溶性、热敏性和可透析性等方面进行了研究。研究数据表明,蛋白质对大多数蘑菇子实体的杀虫活性起着重要作用,也许是一种可以用于植物抵抗害虫的基因源。在数种蛋白质中,凝集素和溶血素因不受蛋白酶的影响而成为良好的杀虫剂候选材料。 相似文献
17.
《微生物学免疫学进展》2020,(1)
肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)是引发人类肺炎、中耳炎、脑膜炎的主要病原体。为了预防肺炎链球菌感染,人类已研制出了多种相关的疫苗。目前,常用23价肺炎球菌多糖疫苗(23-valent pneumococcal polysaccharide vaccine,PPV23)预防成人和2岁以上儿童肺炎链球菌的感染,用7价、10价、13价肺炎球菌结合疫苗来预防婴幼儿肺炎链球菌的感染。虽然荚膜多糖类疫苗能预防其所包含的肺炎链球菌血清型的感染,但非疫苗血清型的菌株还是可以在鼻咽部定植,并引起感染,而且结合疫苗研制工艺复杂、价格昂贵,在发展中国家使用还不普及。鉴于上述原因许多疫苗公司开始研发具有保护力强、价格低廉的新型疫苗。近年来,肺炎链球菌全细胞疫苗和肺炎链球菌纯化蛋白疫苗由于其血清非依赖性和较低的生产成本已成为人们关注的焦点。现对肺炎链球菌新型疫苗的研制及临床应用作一概述。 相似文献
18.
《微生物学免疫学进展》2017,(4)
目的建立第二代百日咳疫苗毒性国家标准品(简称二代毒性标准品)。方法选用百日咳疫苗生产菌株(编号CS株CMCC58003)进行发酵罐培养,将收获的百日咳菌液灭活后分装冻干后,作为第二代百日咳国家毒性标准品的候选品(简称候选毒性标准品)。以第一代百日咳疫苗毒性国家标准品为标准(简称一代毒性标准品),由4个单位协作标定候选毒性标准品,采用热加速法考察候选毒性标准品的稳定性。结果共获得检定合格的候选毒性标准品1 800支;经4个实验室协作标定,每支二代毒性标准品LPU为21,HSU为41;且稳定性良好。结论候选毒性标准品各项指标均符合要求,可作为第二代百日咳疫苗毒性国家标准品使用。 相似文献
19.
阐述儿童肺炎链球菌相关溶血尿毒综合征的临床表现、诊断及治疗方法。
回顾性分析1例儿童肺炎链球菌相关溶血尿毒综合征患儿的临床表现、实验室检验、影像学检查、治疗经过及随访结果, 并以“肺炎链球菌相关溶血尿毒综合征”“
患儿为男性, 3岁零5个月, 以发热、咳嗽起病, 有肺炎合并脓胸、胸腔积液, 胸腔积液行肺炎链球菌抗原检测为阳性, 胸腔积液行第二代测序结果为肺炎链球菌, 行血浆置换治疗病情好转, 3 d内血小板恢复, 血尿素氮及肌酐水平在8 d内恢复正常。随访3个月, 病情稳定, 无肾脏损害表现。
儿童重症肺炎合并胸腔积液患者当出现急性溶血性贫血、急性肾衰竭、血小板下降等表现时, 应考虑到肺炎链球菌相关溶血尿毒综合征的可能, 一旦确诊, 应及时采用血浆置换治疗, 效果显著, 预后良好。
20.
由于肺炎链球菌对青霉素等多种抗生素的高水平耐药性以及对万古霉素耐受性的出现,强调了采用其他方法预防肺炎链球菌感染的重要性,即进行免疫接种。应用与在b型流感嗜血杆菌疫苗中所用相同载体蛋白偶联的肺炎链球菌偶联疫苗,与多糖疫苗作比较能较好地增强婴儿和儿童的免疫应答,并且能在世界范围内增强预防肺炎链球菌疾病的能力。本文综述了有关多价肺炎链球菌偶联疫苗临床试验结果,包括对疫苗的评估、为了疫苗的进一步发展而对有效载体蛋白的鉴定、有关临床试用新型疫苗和质量控制,以及预防肺炎链球菌的其他疫苗。 相似文献