银杏植物各部位及银杏组织培养细胞中银杏内酯B和白果内酯含量的初步研究

用高压液相色谱法对五年生扦插银杏各部位及银杏组织培养细胞中银杏内酯B和白果内酯的含量进行了测定.结果表明银杏内酯B和白果内酯在银杏植物各部位的含量差异很大.银杏内酯B在银杏叶中含量最高,白果内酯在银杏侧根中含量最高.在6,7-v培养基下银杏组织培养细胞中同时测出银杏内酯B和白果内酯,提示用植物组织培养方法有可能同时产生银杏内酯B和白果内酯.     

高效液相色谱分析银杏萜内酯的含量

用高效液相色谱法测定银杏叶及提取物中银杏内酯中Ａ、Ｂ、Ｃ和白果内酯的含量。采用Ｃ１８分离柱,示差检测器,甲醇：水（３３：６７）为流动相,方法回收率平均达９７％以上,变异系数（ＣＶ）为２．１％。     

银杏叶中银杏内酯B及白果内酯的分离鉴定

前文中作者已报道从我国特有植物银杏(Ginkgo biloba L.)的叶子中分到银杏内酯A及C(ginkgolide A,C),本文报道从银杏叶中分到的另外二个结晶,经理化性质、薄层层析、红外光谱及质谱分析,鉴定结晶Ⅲ为银杏内酯B(ginkgolide B),结晶Ⅳ为白果内酯(bilobalide),后者为国内首次分离。     

高效液相色谱分析银杏萜内酯的含量

用高效液相色谱法测定银杏叶及提取物中银杏内酯Ａ、Ｂ、Ｃ和白果内酯的含量。采用Ｃ１８分离柱,示差检测器,甲醇：水（３３：６７）为流动相,方法回收率平均达９７％以上,变异系数（ＣＶ）为２．１％。     

银杏内酯的研究进展

银杏内酯是从裸子类植物银杏中提取的化合物,属于二萜类内酯,主要分为银杏内酯A、B、C、J、K、L和M (ginkgolide A, B, C, J, K, L, M)及属于倍半萜内酯的白果内酯(bilobalide, BB),具有拮抗血小板活化因子受体的功能。其中银杏内酯B (ginkgolide B, GB)是生理活性最强的。目前银杏内酯主要从银杏叶和根的提取,少量可由生物合成提供。因其丰富的药理作用和微弱的副作用而被广泛用于抗氧化、保护心脑血管系统、保护神经系统等方面。近年来在治疗癌症方面的研究也取得了重大进展,发现银杏内酯可以抑制多种肿瘤,有望将其大量运用于癌症治疗。     

银杏萜内酯的分布与矮壮素对其生物合成的调节

银杏萜内酯分为银杏内酯A、B、C、J、M(ginkgolide A、B、C、J、M)和白果内酯(bilobalide),主要存在于银杏叶与根内,近年的研究指出银杏萜内酯分别在银杏叶和根中生物合成[1],Cartayrade等人[2]通过叶片生根实验发现生根叶片的银杏萜内酯含量显著高于未生根叶,因而认为银杏萜内酯是在根部合成,然后运输到叶中积累,目前对此还缺乏进一步的研究报道.     

气相色谱法测定银杏内酯衍生物中有机溶剂残留量

建立了气相色谱法测定银杏内酯衍生物中甲醇、丙酮、乙腈、乙酸乙酯等有机溶剂残留量的方法.以苯为内标,样品经溶解直接进样测定,色谱柱为CP-SIL 24CB 毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm).有机溶剂添加回收率在96.9%～99.6%之间,有机溶剂的最小检出限在0.29～0.48 μg /mL之间.该方法快速、准确、操作简便,能满足银杏内酯酯衍生物中甲醇等有机溶剂残留的定量检测.     

银杏叶内酯成分的指纹图谱研究

以白果内酯为参照物,应用HPLC法建立银杏叶药材的内酯指纹图谱研究。采用：色谱柱：Kromasil C18（250mm～4．6mm,5μm）;流动相：甲醇-四氢呋喃-水梯度洗脱;检测器：蒸发光散射检测器;柱温：35℃;流速：O．8mL／min。本方法精密度和重复性试验均符合《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求（暂行）》中要求,主要指纹峰9个。     

银杏雄株叶片萜内酯类化合物的HPLC检测分析

目的:银杏叶萜内酯类化合物具重要的药用与保健开发利用价值.方法:在银杏最佳采叶期随机采取银杏叶片,经超声波70%乙醇水溶液提取、石油醚与正己烷萃取,再经ADS-17大孔树脂柱与酸性氧化铝柱纯化,以水∶甲醇∶四氢呋喃=7∶2∶1(V/V)为流动相,采用Waters ODS C18 柱 (250mm ×416mm,5μm)进行HPLC分析:0.6ml/min流速、219nm检测波长、26℃检测温度、15μl进样量.结果: GA、GB、GC和BB分别在23～460μg/ml、21～420μg/ml、22～440μg/ml和27～540μg/ml范围内呈线性相关,最小检出量0.5μg,回收率90.74%～102.38%,RSD 1.63%～4.2%.GBE3得率1%,GA 、GB、 GC 、BB占GBE3的12 55%,超过GBE761的6% 国际标准.结论:该HPLC检测分析技术与方法适用于银杏叶片萜内酯类化合物的提取、纯化和检测.     

银杏落叶化学成分研究

采用硅胶与Sephadex LH-20柱色谱等手段从银杏落叶中分离得到22个化合物,通过理化性质和波谱数据分别鉴定为白果醇(1)、二十八烷酸(2)、棕榈酸(3)、三十七烷(4)、二十四烷(5)、4,10-二十九烷二醇(6)、β-谷甾醇(7)、胡萝卜苷(8)、银杏内酯A(9)、银杏内酯B(10)、银杏内酯C(11)、白果内酯(12)、对羟基苯甲酸(13)、莽草酸(14)、芫花素(15)、芹菜素(16)、银杏素(17)、异银杏素(18)、金松双黄酮(19)、白果黄素(20)、芦丁(21)和甘露醇(22),其中化合物2、4～6和22为首次从该种植物中分离得到,这些研究为银杏落叶及银杏资源的综合利用奠定了基础。     

不同银杏无性系叶药用成分差异及聚类分析

运用HPLC技术分析了54个银杏(Ginkgo biloba)无性系叶总黄酮和萜内酯及其组分含量的差异,并进行了聚类。结果表明,银杏无性系间叶中总黄酮、萜内酯及其组分含量存在遗传变异,且萜内酯及其组分含量的变异系数明显高于总黄酮及其组分。总黄酮含量较高的无性系有18、42、32和50号,其槲皮素、异鼠李素、山奈酚含量均较高。萜内酯含量较高的无性系为13、42、33、51和65号,其银杏内酯A(GA)、银杏内酯B(GB)、银杏内酯C(GC)及白果内酯(BB)含量均较高。通过对总黄酮-萜内酯进行联合复选,显示叶中总黄酮和萜内酯含量均较高的无性系为13、65、33、51、18、32和42号。这些无性系可通过嫁接、扦插直接在银杏采叶园进行推广种植,或作为叶用银杏新品种的育种材料。     

银杏内酯C分子烙印聚合物的制备

以混合银杏内酯为模板分子,它们与单体AA预识别的过程中,利用其在识别性能上的差异,制备了对银杏内酯C有优先选择识别作用的分子烙印聚合物.用红外光谱表征了分子烙印聚合物,并通过紫外光谱和高效液相色谱对其选择吸附性能进行分析.结果表明,所制备的分子烙印聚合物的最大吸附量为15.5 mg/g,混合银杏内酯经MIP选择性吸附后,银杏内酯C的含量提高了12.16%.     

银杏叶萜内酯含量的变化及其与叶绿素荧光特性的关系

为探究银杏(Ginkgo biloba)叶萜类内酯含量和光合同化作用的关系,对其内酯含量和叶绿素荧光特性进行了研究。结果表明,不同采收时间银杏叶中白果内酯和银杏内酯含量有显著差异,总体上,5月份含量较低,此后逐渐升高,8月份达到高峰,然后快速下降,10月底最低;与此同时,银杏叶片的光合色素以及叶绿素荧光参数也呈现周期性变化。白果内酯以及萜内酯含量与叶绿素荧光参数Y(NPQ)之间呈极显著正相关关系,因此,可以通过银杏叶片的叶绿素荧光参数预测白果内酯和萜内酯含量。     

银杏细胞悬浮培养及其银杏内酯产生的研究

对银杏细胞悬浮培养及其次生代谢产物银杏内酯的产生进行了研究。考察了各种理化因子对细胞生长及银杏内酯产生的影响;对培养物中银杏内酯进行了定性及定量测定。HPLC测定结果显示,银杏悬浮细胞培养物中银杏内酯的含量可达0.0099%。     

银杏悬浮培养细胞的生长、分化与萜内酯化合物的积累

研究了来源于银杏种子胚和幼苗茎的悬浮细胞的生长、分化和培养物中的白果内酯、银杏内酯A和B的含量变化。结果表明：在悬浮培养中,细胞聚集而成的细胞团大小、细胞中叶绿体的分化、外植体来源都影响培养物中的萜内酯的种类和含量,胚来源的悬浮细胞培养物中,银杏内酯B仅存在于直径<2mm的小细胞团悬浮培养中,且在<1 mm的细胞团中的含量最高,达0.437 mg /g(DW);而直径>3mm的细胞团悬浮培养物中只含有白果内酯和银杏内酯A。相同大小的悬浮细胞团中,胚来源的细胞中萜内酯含量高于茎来源的细胞。     

银杏细胞固定化培养及银杏内酯的产生

探讨利用银杏 (GinkgobilobaL .)细胞固定化培养方法 ,大规模生产药用成分银杏内酯类化合物的可能性。考察了植物生长调节剂对银杏固定化培养细胞生长及发酵液中银杏内酯类成分产生的影响。结果显示 ,最优培养基生长调节剂配比为 2 ,4 D 8 0mg L KT 0 0 4mg L NAA 0 4mg L。优化培养后 ,固定化细胞最高生物量出现在第 1 2d ,为 0 4gDW 瓶。发酵液中银杏内酯含量 :GKA在 2 2d时最高 (2 0 0 μg L) ,GKB在 1 8d时最高 (1 2 2 μg L) ,GKC在 1 8d时最高 (5 0 9μg L)。     

柴达木栽培和野生枸杞子中东莨菪内酯含量的测定

建立测定枸杞子中东莨菪内酯的HPLC方法,并进行方法学考察。利用所建立的方法对柴达木栽培和野生枸杞子的东莨菪内酯含量进行测定。以Diamonsil C18柱为分析柱,甲醇-0.05%磷酸溶液(35∶65)为流动相,流速:1 m L/min,柱温:30℃,检测波长:344 nm;研究发现,枸杞子中东莨菪内酯在0.026~1.040μg(R2=0.9996)范围内成良好的线性关系;平均加样回收率(n=6)为96.1%,RSD=2.0%。该方法准确、可靠、重现性好,适用于枸杞子中东莨菪内酯的含量测定。测定结果表明,柴达木栽培枸杞子具有很整齐的品质优良性,而野生枸杞子品质差异很大,适宜于选择性的开发。     

银杏致密细胞团颗粒悬浮培养生产银杏内酯研究

以MS培养基上培养的银杏高产细胞系MH－3为材料,SH培养基为出发培养基,通过优化营养元素和激素配比,建立银杏致密细胞团悬浮培养体系,在培养过程中添加前体异戊二烯和香叶醇有助于提高银杏内酯产量。结果表明：颗粒粒径大小影响银杏内酯的产生,选用0．8SH培养基,添加浓度为3mg/L的2,4－D和2mg/L的6－BA,致密颗粒的平均粒径为3．36mm,细胞中银杏内酯的含量为557μg/g.dw.在培养过程中的10d添加100mg/L的香叶醇,细胞中银杏内酯的含量达到676μg/g.dw。     

银杏内酯B 对星形胶质细胞氧化损伤的保护作用

目的:探讨银杏内酯B对过氧化氢(H_2O_2)诱导的星形胶质细胞损伤的保护作用及可能机制。方法:星形胶质细胞传代培养,分为阴性对照组(以正常培养液培养),氧化损伤组(100μmol·L~(-1)的H_2O_2作用12 h),银杏内酯B低剂量组(1×10~(-6) mol·L~(-1)银杏内酯B孵育24 h后,加入H_2O_2作用12 h)和银杏内酯B高剂量组(1×10~(-4) mol·L~(-1)银杏内酯B孵育24 h后,加入H_2O_2作用12 h),MTT比色法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞活性氧(ROS)水平,分光光度计检测上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、如谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)的含量。结果:银杏内酯B能抑制氧化损伤引起的细胞活性的下降,降低星形胶质细胞内ROS的生成,促进SOD、GSH-Px水平的升高及MDA水平的下降。结论:银杏内酯B通过提高细胞内SOD、GSH-Px含量,降低细胞内MDA含量发挥其较强的抗氧化作用,从而为其用于治疗神经系统疾病提供可靠的实验依据。     

顺式藁苯内酯口服给药在大鼠血浆和脑内的药动学特性(英文)

建立大鼠血浆和脑中Z-槀苯内酯(LIG)浓度测定的高效液相色谱法。采用Agilent Hypersil ODS C18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-5%异丙醇水溶液(60:40,v/v),流速为1.0mL/min,检测波长为280nm。血浆与脑中槀苯内酯浓度线性检测范围分别为93.75~3750ng/m(r=0.9999)和93.75~3750ng/g(r=0.9997),日内及日间精密度RSD10%。本法适用于大鼠口服LIG后血浆及脑中药物浓度的研究。