八字地老虎血球细胞系的建立

由八字地老虎Xestia c-nigrum血细胞建立了一株细胞系,命名为NEAU-Xc-960716H,原代培养90余天,现已传至70余代。细胞多为圆形,部分梭形,细胞群体倍增时间约为63 h。具有典型的鳞翅目昆虫染色体特征,数量多,形态为短杆状和球形。酯酶同工酶谱为5条主带,与同种昆虫（八字地老虎）的胚胎细胞系(NEAU-Xc-730E)酯酶图谱稍有不同,而与草地夜蛾细胞系(IPLB-SF-21)的酯酶图谱完全不同。该细胞系可以被八字地老虎核型多角体病毒XcNPV感染,但感染率较低。     

光周期对小地老虎生长发育及繁殖的影响

【目的】探明光周期对小地老虎Agrotis ypsilon(Rottemberg)生长发育及繁殖的影响。【方法】在实验条件下观察了5个光周期(0L︰24D,8L︰16D,12L︰12D,16L︰8D和24L︰0D)下小地老虎的生长发育和繁殖情况。【结果】随着光照时间增加,小地老虎生长速度加快,发育历期缩短,孵化率、存活率、羽化率、产卵量先增大后降低。其卵、幼虫、蛹和成虫的最适光周期分别为12L︰12D或16L︰8D、16L︰8D、0L︰24D以及12L︰12D。综合来说,光周期16L︰8D最适合小地老虎的生长发育。【结论】研究结果初步揭示了不同光周期对小地老虎生长发育及繁殖状况存在显著的影响,并且不同虫态对光周期变化也呈现不同的变化规律。     

八字地老虎核型多角体病毒对宿主的弱化作用

八字地老虎核型多角体病毒(Amathes c-nigrum nucleopolyhedrovirus,简称AnNPV)接种八字地老虎3龄初幼虫,感染3d-6d,体重明显小于对照幼虫,发育历期显著延长,幼虫蜕皮和化蛹严重受阻.4龄幼虫感染病毒后1-2天取食量未减少,从第3天开始食量显著减少,从感染至第6天,单头幼虫总取食量为696.1mg,比对照幼虫总取食量的1313.2mg减少47.0%.     

不同食料植物对棉铃虫生长发育和繁殖的影响

报道了棉花、烟草、番茄和辣椒4种植物对棉铃虫Helicoverpa armigera生长发育和繁殖的影响。棉铃虫成虫喜欢在番茄上产卵,在辣椒上的着卵量最少。初孵幼虫喜选食嫩棉叶,选食辣椒嫩叶的虫数最少。4组幼虫取食嫩叶时的平均相对生长速率都有显著差异,顺序为棉叶组>烟叶组>番茄叶组>辣椒叶组。幼虫存活率以取食棉花时最高,取食番茄时最低。棉花组成虫的产卵量最高,烟草组的产卵量最低。取食棉花的棉铃虫种群增长的速度约为取食番茄时的14倍。6龄幼虫能有效利用和转化棉铃、烟草蒴果、辣椒果实,而对番茄果实的利用和转化效率较低。棉铃虫可分别以这4种植物的不同器官为食完成世代循环。其中,棉花是最适宜的寄主,辣椒和番茄是较不适宜的寄主。     

甘蓝夜蛾和八字地老虎肌动蛋白基因的克隆与序列分析

肌动蛋白是细胞骨架微丝的主要组成成分,在肌肉收缩、细胞骨架形成、细胞移动等方面起重要作用。以鳞翅目夜蛾科昆虫甘蓝夜蛾Mamestra brassicae L.和八字地老虎Agrotis c-nigrum 3龄幼虫整个虫体为材料提取总RNA,利用RT-PCR和cDNA末端快速扩增技术(RACE),分别扩增得到2种昆虫的肌动蛋白的cDNA序列,甘蓝夜蛾肌动蛋白的cDNA序列含有1441个碱基,而八字地老虎肌动蛋白的cDNA序列含有1411个碱基。2种昆虫的该基因的cDNA序列均包括1个1131个碱基的开放阅读框,编码1个含376个氨基酸的蛋白。甘蓝夜蛾肌动蛋白分子量约为41.8kDa;八字地老虎肌动蛋白分子量约为41.9kDa。Prosite软件分析结果表明,甘蓝夜蛾和八字地老虎肌动蛋白氨基酸序列中存在3个肌动蛋白特征片段。GenBank数据库搜索及序列比对结果表明,甘蓝夜蛾肌动蛋白属于肌肉特异型肌动蛋白,八字地老虎肌动蛋白属于细胞质特异型肌动蛋白。2个基因的cDNA序列已经登录GenBank并获得登录号,甘蓝夜蛾肌动蛋白cDNA序列登录号为EU035314,八字地老虎肌动蛋白cDNA序列登录号为EU035315。利用RT-PCR技术在八字地老虎4龄、5龄、6龄幼虫、蛹期4个不同发育阶段和6龄期的肠道、体壁、脂肪体3种不同组织中都检测到了肌动蛋白基因在mRNA水平的表达。     

不同食料植物对棉古毒蛾生长发育和繁殖的影响

在恒温(28±1)℃、恒湿(80±5)%RH条件下,研究了莲雾、芒果、荔枝、龙眼、毛叶枣、木菠萝等6种食料植物对棉古毒蛾的生长发育和繁殖的影响。结果表明,棉古毒蛾能在这6种食料植物上完成其世代循环。其发育历期、雌蛹重、存活率、成虫繁殖力和寿命等,在6种寄主植物间均存在显著差异,其中莲雾和芒果是最适宜的寄主植物,荔枝和龙眼是不适宜的寄主植物。     

不同寄主植物对小地老虎生长发育和保护酶活性的影响

通过室内饲养和生物化学测定,研究了白菜(Brassica campestris ssp.Pekinensis)、大豆(Glycine max Merrill)和玉米(Zea mays L.)3种寄主植物的营养差异及对小地老虎Agrotis ypsilon(Rottemberg)幼虫发育、成虫产卵、成活率及6龄幼虫体内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活力的影响。结果表明:供试3种寄主植物的可溶性蛋白、可溶性糖和含水量差异显著。与取食玉米和白菜的个体相比,取食大豆的小地老虎幼虫历期、蛹期较短,分别为43.02 d和11.87 d;雌虫成虫寿命最长,为15.92 d;单雌产卵量最高,为936.67粒。但后代卵的孵化率以取食玉米的最低。取食3种寄主植物的幼虫和蛹的成活率由高到低依次为取食大豆>取食白菜>取食玉米。幼虫体内CAT活力没有显著差异,但SOD、POD活力由高到低依次为取食大豆>取食白菜>取食玉米。     

幼虫密度对桑螟生长发育和繁殖的影响

【目的】本研究旨在了解桑螟Diaphania pyloalis幼虫不同饲养密度对其生长发育和繁殖的影响。【方法】本研究测定了室内同一条件下5个幼虫密度(130, 650, 1 300, 1 950和2 600头/m²)下桑螟生长发育和繁殖指标,包括发育历期、幼虫存活率、化蛹率、成虫羽化率、蛹重、产卵期、单雌产卵量等。【结果】幼虫密度对桑螟的生长发育和繁殖均产生不同程度影响,幼虫密度偏低或偏高都不利于桑螟生长发育和繁殖。其中以1 300和1 950头/m² 2种幼虫密度下的桑螟幼虫生长发育和成虫繁殖状态均最佳且两密度下各项指标无明显差异,1 300头/m²密度下,桑螟的幼虫历期、蛹历期和成虫历期分别为11.32, 6.33和5.31 d; 1 950头/m²密度下,桑螟的幼虫历期、蛹历期和成虫历期分别为11.50, 6.00和5.47 d。1 300头/m²幼虫密度下,桑螟化蛹率、成虫羽化率和幼虫存活率分别为86.67%, 100%和86.67%, 1 950头/m^2<...     

温度对桃蛀螟生长发育和繁殖的影响

为了明确温度对桃蛀螟Conogethes punctiferalis (Guenée)生长发育和繁殖的影响, 本实验在恒温条件（15, 19, 23, 27和31℃共5个温度梯度）下, 以板栗为寄主食料, 研究了温度对桃蛀螟实验种群生长发育和繁殖的影响。结果表明： 温度对桃蛀螟各虫态的发育历期、 存活率、 蛹重以及种群繁殖力有显著影响。在15~27℃范围内, 各虫态的发育历期均随温度的升高而缩短, 发育速率与温度呈显著正相关。但是, 当温度上升至31℃时, 幼虫生长发育受到抑制, 其发育历期比27℃时延长了1.11 d, 而卵期、 蛹期和产卵前期仍符合随温度升高趋于缩短的趋势。此外, 15℃下桃蛀螟5龄幼虫发育停滞, 表明老熟幼虫的发育起点温度高于其他低龄幼虫。桃蛀螟世代存活率随环境温度变化的大小顺序为23℃>27℃>19℃>31℃, 其中, 23~27℃的存活率较高, 为54.44%~63.56%, 31℃时为4.30%, 说明温度过高或过低均不利于其生长发育。成虫产卵量在23℃时最高, 单雌平均产卵量达55.00粒, 其次为19℃和27℃, 单雌平均产卵量分别为43.30和39.70粒; 31℃下产卵量最少, 仅为20.90粒。由直接最优法计算得到桃蛀螟卵期、 幼虫期、 蛹期、 产卵前期及全世代的发育起点温度分别为10.37, 10.06, 14.27, 7.47和11.85℃, 有效积温依次为70.84, 287.71, 118.42, 58.33和509.06日度。研究结果为桃蛀螟发生期的预测预报提供了基础参考数据, 对指导生产实践有实际的应用意义。     

温度对美洲斑潜蝇发育、存活和繁殖的影响

在恒温１５,２０,２５,３０和３５℃下,对美洲斑潜蝇在菜豆上的发育和繁殖做了研究。结果表明,在１５￣３５℃范围内,未成熟期各虫态（卵、幼虫和蛹）的发育历期随温度的升高而缩短,发育速率呈逻辑斯蒂曲线变化;卵期孵化率在２５℃中最高;各温度下幼虫期存活率最高,低温１５℃和高温３５℃对蛹的存活有显示抑制作用,１５℃时蛹的死亡率达３９．６％。成虫寿命一般在２０ｄ以内,与温度呈直线负相关;繁殖力最高可达２８１     

斜纹夜蛾取食四种植物对马尼拉侧沟茧蜂发育和繁殖的影响

研究斜纹夜蛾Spodoptera litura幼虫取食4种植物后对马尼拉侧沟茧蜂Microplitis manilae生长发育和繁殖的影响,为利用该蜂开展斜纹夜蛾的生物防治提供理论依据。在人工气候箱内(26℃±1℃、RH 65%±5%、L∶D=12∶12)研究了斜纹夜蛾取食豇豆Vigna unguiculata、芋艿Colocasia esculenta、烟草Nicotiana tabacum和芥蓝Brassica alboglabra 4种植物对马尼拉侧沟茧蜂的生长发育和繁殖的影响。结果表明:马尼拉侧沟茧蜂寄生取食豇豆的夜蛾幼虫,其幼虫期最短,化蛹率、羽化率和累计存活率最高,性比最低,寿命最长;寄生取食烟草的夜蛾幼虫,其幼虫期最长,化蛹率、羽化率和累计存活率最低,蛹重最轻,蛹期最长;从取食芥蓝的斜纹夜蛾幼虫体内育出的雌蜂产卵量最高,但成蜂寿命最短;斜纹夜蛾取食4种植物对雌蜂个体大小无显著影响,但取食烟草的夜蛾幼虫体内育出的雄蜂个体最小。马尼拉侧沟茧蜂寄生取食不同植物的斜纹夜蛾幼虫,马尼拉侧沟茧蜂的发育和繁殖存在显著差异。     

小地老虎隐花色素基因cryptochromel和cryptochrome2的克隆及mRNA表达分析

隐花色素（cryptochrome,cry）是一类广泛存在于生物体内的蓝光和近紫外光受体,介导生物对蓝光的一系列反应并能导引生物钟。本研究利用RT—PCR和RACE方法获得了小地老虎Agrotisypsiloncryl和cry2基因,分别命名为Aycryl和Aycry2。Aycryl基因（GenBankNo．JQ616846）读码框1587bp,编码528个氨基酸,预测分子量60．5ku,等电点6．68。Aycry2基因（GenBankNo．JQ616847）读码框2439bp,编码812个氨基酸,预测分子量92．1ku,等电点8．45。保守区分析表明：Aycryl和Aycry2均含有FAD结合位点的PHR区域和c末端保守区域。氨基酸序列比对分析表明,小地老虎的AyCRY1和AyCRY2分别与其它鳞翅目昆虫的CRY1和CRY2有很高的一致性,其中与棉铃虫HelicoverpaaFmigera的一致性最高,分别为89．5％和73．8％。NJ聚类分析结果表明昆虫含有两类CRY,即CRY1和CRY2,它们可分别以目为单位进行聚类,其中AyCRY1和AyCRY2分别与其它鳞翅目昆虫的CRY1和CRY2聚到一起。以室内饲养的小地老虎为材料,以3h为间隔检测了Aycry1和Aycry2的24h昼夜表达变化,结果表明这2个基因均表现出一定的昼夜节律性。Aycry1和Aycry2表达趋势白天高于晚上,表达峰值出现在ZT7（Zeitgebertime）。方差分析其昼夜波动差异不显著。     

小地老虎的交配行为和能力

在温度为(25±1)℃、相对湿度为70%±7%、光周期(L∶D)为14∶10h的条件下对小地老虎Agrotis ypsilon(Rottemberg)的交配行为和能力进行研究。结果表明:成虫在羽化后1d才进行交配。雄蛾和雌蛾都可以多次交配。交配能力受性比的影响很大,当1头雄蛾仅与1头雌蛾相处时,其交配能力低;当1头雄蛾与多于2头的雌蛾在一起时或1头雌蛾与多于2头的雄蛾在一起时,交配能力则显著增加。还讨论了该研究结果应用的可能性。     

The Masc gene product controls masculinization in the black cutworm,Agrotis ipsilon

Sex determination has been studied in the model lepidopteran species Bombyx mori, but it remains poorly understood in lepidopteran pests. In the present study, we identified and characterized the Masculinizer (Masc) gene in a Noctuidae pest species, Agrotis ipsilon. Sequence analysis revealed that AiMasc encodes a protein of 658 amino acids that has two CCCH-type zinc finger domains and two conserved cysteine residues (Cys-277 and Cys-280). We assessed the masculinizing activity AiMasc in BmN cells and found that/z'Masc induced expression of the male-specific doublesex isoform. Disruption of Masc via clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR)/CRISPR-associated protein 9 (Cas9) in A. ipsilon caused abnormalities in abdominal segments and external genitalia, resulting in male-specific sterility. These results suggest that Masc participates in the process of sex determination in A. ipsilon. Successful identification of sex-determination gene in a pest species may enable the development of novel genetic approaches for pest control.     

幼虫密度对甜菜夜蛾生长发育与繁殖的影响

为了研究甜菜夜蛾Spodoptera exigua(Hübner)幼虫的密度对其发育及繁殖的影响,本实验观察了5种幼虫密度下（1,5,10,20,30头/瓶）,幼虫发育和成虫繁殖情况。结果表明：幼虫和蛹历期、存活率和蛹重均差异显著。幼虫和蛹历期均以20头/瓶的最短,1头/瓶的最长,其余随幼虫密度增加而延长;幼虫至蛹存活率以10头/瓶的最高,其余随幼虫密度增加而降低;1头/瓶的蛹最重,显著高于其他密度的,其余随幼虫密度增加而下降。尽管密度间成虫羽化率和产卵前期均无显著差异,但成虫产卵量、寿命和畸形率差异显著。1头/瓶的产卵量最多,其次为10头/瓶的,其余随幼虫密度增加而减少,30头/瓶的产卵量显著少于其他密度的; 密度在1～20头/瓶范围内,雌蛾寿命均较短,显著短于30头/瓶的,而雄蛾寿命以5头/瓶的最短,显著短于其他密度的（10头/瓶除外）,10头/瓶的次之,其余密度间差异不显著;不同幼虫密度下羽化的成虫畸形率差异显著,10头/瓶的最低,其余随幼虫密度增加而升高; 生命表结果表明甜菜夜蛾在10头/瓶下世代存活率和种群增长指数均最高,幼虫密度过低或过高均不利于种群增长;世代存活率（S）和种群增长指数（I）与幼虫密度之间的关系均呈抛物线关系：S =－0.2087x²+2.5694x+211.52 (R²=0.88),I=－0.0552x²+0.9166x+54.168 (R²=0.95)。结果提示幼虫密度影响甜菜夜蛾种群动态的重要生态因子之一。     

Influence of host plants on development, fecundity and egg hatchability of the arctiid moth Diacrisia casignetum

Measurements were made of the differences between sunflower and climbing hempweed leaves for development, fecundity and egg hatchability of Diacrisia casignetum Kollar. Developmental time and weight gains of sunflower-fed larvae were respectively longer and greater than those of hempweed-fed ones. The development time and weight gain, attributable to differences in host plants, were statistically heterogeneous (P<0.05-<0.10). Relative fecundity and egg hatchability of sunflower reared insects were greater than those of hempweed reared ones, and these were also statistically heterogeneous (P<0.1 and <0.05, respectively). Hempweed leaves contained relatively high titres of phenols and low ratios of proteins to phenols. Ovaries were heavier in insects reared on sunflower than on hempweed, whereas the level of phenols incorporated into the ovary was higher in insects fed on hempweed than those on sunflower. The differences in these parameters may be due to variations in nutritional quality of these hosts and incorporation of ingested phenolic materials to ovary and insect biomass.

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Résumé L'étude a porté sur l'évaluation de l'influence des feuilles de tournesol (Helianthus annuus) et de Mikana cordata sur le développement, la fécondité et l'éclosion des oeufs de D. casignetum Kollaz. La durée de développement et le gain de poids sur tournesol étaient plus importants que sur M. cordata. La durée de développement était statistiquement hétérogène (P<0.05), ce qui peut être dû à des différences entre plantes. La fécondité et le taux d'éclosion chez les insectes élevés sur tournesol étaient plus élevés que ceux observés sur M. cordata, dont les résultats étaient aussi hétérogènes (P<0.1 et<0.05 respectivement). Les feuilles de M. cordata contenaient des taux relativement élevés de phénols et des rapports protéines sur phénols bas. Tout ceci suggère que les différences observées sont attribuables à des variations dans la qualité nutritive de ces hôtes et dans l'incorporation à la biomasse de l'insecte de matériaux phénologiques ingérés.

     

小地老虎隐花色素基因cryptochrome1和cryptochrome2的克隆及mRNA表达分析

隐花色素(cryptochrome,cry)是一类广泛存在于生物体内的蓝光和近紫外光受体,介导生物对蓝光的一系列反应并能导引生物钟。本研究利用RT-PCR和RACE方法获得了小地老虎Agrotis ypsilon cry1和cry2基因,分别命名为Aycry1和Aycry2。Aycry1基因(GenBank No.JQ616846)读码框1 587 bp,编码528个氨基酸,预测分子量60.5 ku,等电点6.68。Aycry2基因(GenBank No.JQ616847)读码框2 439 bp,编码812个氨基酸,预测分子量92.1ku,等电点8.45。保守区分析表明:Aycry1和Aycry2均含有FAD结合位点的PHR区域和C末端保守区域。氨基酸序列比对分析表明,小地老虎的AyCRY1和AyCRY2分别与其它鳞翅目昆虫的CRY1和CRY2有很高的一致性,其中与棉铃虫Helicoverpa armigera的一致性最高,分别为89.5%和73.8%。NJ聚类分析结果表明昆虫含有两类CRY,即CRY1和CRY2,它们可分别以目为单位进行聚类,其中AyCRY1和AyCRY2分别与其它鳞翅目昆虫的CRY1和CRY2聚到一起。以室内饲养的小地老虎为材料,以3 h为间隔检测了Aycry1和Aycry2的24 h昼夜表达变化,结果表明这2个基因均表现出一定的昼夜节律性。Aycry1和Aycry2表达趋势白天高于晚上,表达峰值出现在ZT7(Zeitgeber time)。方差分析其昼夜波动差异不显著。     

温度对传粉甲虫——棉露尾甲生长发育、存活及繁殖的影响

在光照周期为 12 L:12 D、土壤含水量为 15 %的 5种恒温条件下 (15℃、2 0℃、2 5℃、30℃和 35℃ ) ,以丝瓜花为饲料研究了棉露尾甲未成熟期 (卵期、幼虫期和蛹期 )的生长发育和存活情况 ;同时 ,在同样的光照和温度、棉球保湿的条件下 ,研究了温度对成虫寿命及繁殖的影响情况。结果表明 ,未成熟期各虫态发育速率随温度呈抛物线变化 ,30℃时发育速率最大 ;15℃时卵孵化率最高 ,2 0～ 30℃时 ,幼虫存活率、蛹羽化率显著高于低温 (15℃ )和高温 (30℃ ) ,平均分别可达 96 .3%和 93.2 % ,低温和高温对其有明显的抑制作用 ;成虫寿命同温度之间呈负的线性关系 ,雌虫寿命普遍长于雄虫 ,30℃时雌虫的产卵期最长 ,繁殖力最大 ,最高可达 14 6粒 /雌 ,产卵期和产卵量与温度之间呈抛物线关系