可以用作非病毒载体的TB蛋白

康内尔大学医学院(New York,NY)的科研人员们发现了一种叫做侵染素的蛋白,该蛋白可以作为一种试剂向细胞释放疫苗、治疗剂及基因治疗剂。 1993年研究人员成功地克隆了结核(TB)基因,侵染素即为该基因所表达。他们将该基因称作“分枝杆菌入口”(Mycobacterium Entry,MCE),因为侵染素可以通过TB进入哺乳动物细胞。 迄今为止,科研人员们已经发现该蛋白能够包被中空的膝乳珠并将其释放到体细胞中。如果这种珠粒     

TB4的翻译后修饰及其功能调控

肌动蛋白单体隔离肽胸腺素β4(thymosin beta 4,TB4)是一种十分重要的胸腺素β类小分子多肽,广泛分布于机体的组织细胞中.自发现TB4以来,人们对它的研究就不曾间断,发现其拥有多种生物学功能,如结合肌动蛋白单体、抑制微丝的形成、抑制炎症和调节血管再生等.成熟的TB4仅由43个氨基酸残基组成,却拥有如此多样...     

T SPOT TB技术用于结核的辅助诊断

近年来,我国结核病的发病率有上升趋势,临床上经常会遇到一些症状不典型的结核病和肺外结核病,而目前可用于诊断结核病的方法有限,同时又缺乏快速敏感的实验室技术,为结核病的早期诊断与治疗带来困难.酶联免疫斑点法(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT)技术是一种新型的免疫酶技术,从单细胞水平检测分泌抗体细胞或分泌细胞因子细胞[1].由ELISPOT发展而来的T SPOT TB(结核感染T细胞斑点试验)技术用于检测结核感染后特异性T细胞分泌的γ干扰素(IFN-γ),并据此结果判断是否感染结核.     

苦荞过敏蛋白TB22的原核表达及纯化

为了确定苦荞主要过敏原蛋白TB22的抗原决定簇,揭示其致敏机制,为以后的分子改造及育种改良打下基础,需要在体外微生物体系中获得大量的纯化蛋白。以pQE31为表达载体,M15为表达菌株,使用IPTG诱导,在37℃获得了以包涵体形式存在的表达产物。经WesternBlotting检测,证明表达条带N端带有Histidinetag。使用8molL尿素初步纯化后,目的蛋白含量达到40%以上。进一步HitrapChelatingHP亲和纯化,表达蛋白的纯度达到90%以上。建立了适合重组TB22纯化的基本方法,得到了纯化的包涵体,为抗TB22抗体的制备及其抗原决定簇的研究奠定了基础。     

结核分枝杆菌分泌蛋白TB10.4的功能和应用

近年来,结核的发病率又呈上升趋势,传统的结核疫苗已无法起到有效的保护作用。结核分枝杆菌分泌蛋白由于具有良好的免疫保护性因而备受关注。结核分泌蛋白TB10.4是免疫主导的蛋白,能够激发有效的免疫反应,因而成为研究结核新疫苗靶抗原之一。本文就近几年结核分枝杆菌TB10.4的相关研究作一综述。     

基因修饰的BCG能更好地保护小鼠抵御TB

BCG是抵抗结核病的最佳疫苗,也是唯一的疫苗,但它是不十分完善的.BCG可抵御儿童的结核病,却不能保护成年人.欧洲的科学家用基因修饰来制造BCG的减弱病毒在小鼠中研究,开发出一种疫苗,其保护性似乎比BCG要更好.他们将该研究报道于2005年9月1日的Journal of Clinical Investigati     

Periodic Active Case Finding for TB: When to Look?

Objective

To investigate the factors influencing the performance and cost-efficacy of periodic rounds of active case finding (ACF) for TB.

Methods

A mathematical model of TB dynamics and periodic ACF (PACF) in the HIV era, simplified by assuming constant prevalence of latent TB infection, is analyzed for features that control intervention outcome, measured as cases averted and cases found. Explanatory variables include baseline TB incidence, interval between PACF rounds, and different routine and PACF case-detection rates among HIV-infected and uninfected TB cases.

Findings

PACF can be cost-saving over a 10 year time frame if the cost-per-round is lower than a threshold proportional to initial incidence and cost-per-case-treated. More cases are averted at higher baseline incidence rates, when more potent PACF strategies are used, intervals between PACF rounds are shorter, and when the ratio of HIV-negative to positive TB cases detected is higher. More costly approaches, e.g. radiographic screening, can be as cost-effective as less costly alternatives if PACF case-detection is higher and/or implementation less frequent.

Conclusion

Periodic ACF can both improve control and save medium-term health care costs in high TB burden settings. Greater costs of highly effective PACF at frequent (e.g. yearly) intervals may be offset by higher numbers of cases averted in populations with high baseline TB incidence, higher prevalence of HIV-uninfected cases, higher costs per-case-treated, and more effective routine case-detection. Less intensive approaches may still be cost-neutral or cost-saving in populations lacking one or more of these key determinants.     

BRC1/TB1基因调控植物分枝的研究进展

植物分枝是决定其形态建成的重要因素,是由叶腋内的腋芽发育成枝条的过程,该过程受光照、营养及内源激素等多种因素的调控。近年来的研究发现,TCP(TEOSINTE BRANCHED1,CYCLOIDEA,PCF)转录因子家族成员BRC1/TB1可响应并整合多种信号来调控植物的分枝。该文总结了BRC1/TB1对光照、营养及不同激素的响应特征,及其在调控植物分枝过程中发挥的核心作用等研究成果,并重点对BRC1/TB1基因上下游调控网络的相关研究进行综述,且对未来的研究方向进行了展望,旨在为后续分枝调控方面的研究提供信息,也为今后创制符合人们期望的优良种质提供参考依据。     

改进兔抗BCG血清的特异性以检测TB抗原

本研究以免疫印迹方法证实兔抗BCG与其它细菌抗原(金葡菌、表葡菌,克雷伯氏菌、大肠杆菌)的交叉反应,并以亲和吸附方法将金葡菌交叉反应抗体从市售抗BCG中加以去除。这样在检测脑脊液及其它样本中TB抗原时的假阳性率就可以降低,兔抗BCG的特异性将会增加。我们建立了竞争抑制的ELlSA方法,可以检测ng水平的分枝杆菌的抗原,     

Method for assessing IFN-γ responses in guinea pigs during TB vaccine trials

Aims: We sought to develop a new method that enables the assessment of the immune response of guinea pigs during TB vaccine evaluation studies, without the need to cull or anaesthetize animals. Method and Results: Guinea pigs were vaccinated with five different formulations of oral BCG. One week prior to challenge with Mycobacterium bovis, blood (50–200 μl) was taken from the ears of vaccinated subjects. Host RNA was isolated and amplified following antigenic restimulation of PBMCs for 24 h with 30 μg of bovine PPD. The up‐ or down‐regulation of γ‐interferon (IFN‐γ), a key cytokine involved in protection against tuberculosis, was assessed using real‐time PCR. The relative expression of prechallenge IFN‐γ mRNA in the vaccinated groups (n = 5) correlated (P < 0·001) with protection against M. bovis challenge. Conclusion: We have demonstrated that it is possible to take blood samples and track IFN‐γ responses in guinea pigs that then go on to be exposed to M. bovis, thus providing prechallenge vaccine uptake information. Significance and Impact of the Study: This methodology will also be applicable for tracking the immune responses of vaccinated guinea pigs over time that then go on to be challenged with M. tuberculosis during human TB vaccine evaluation studies.     

凋亡抑制因子Survivin在大肠杆菌TB1中的表达纯化及鉴定

 本文旨在克隆凋亡抑制因子Survivin基因,并在大肠杆菌中进行可溶性表达与初步纯化. 采用RT-PCR法,扩增人凋亡抑制因子survivin cDNA,并克隆入原核表达载体pMAL p2X中,转化TB1大肠杆菌感受态细胞.经0.3 mmol/L IPTG诱导2 h后,收集菌体蛋白,进行SDS-PAGE、ELISA及Western 印迹鉴定. 实验获得凋亡抑制因子survivin编码区cDNA,以构建的原核表达载体pMAL-p2X survivin转化菌株后,可表达凋亡抑制因子survivin和麦芽糖结合蛋白(MBP)的融合蛋白,相对分子质量(Mr) 为58 000.并成功利用Factor Xa将融合蛋白裂解开.ELISA和Western 印迹表明,融合蛋白能与抗凋亡抑制因子survivin单克隆抗体特异性结合.获得的凋亡抑制因子survivin全长cDNA可在大肠杆菌TB1中以MBP survivin融合蛋白的形式表达,成功地将survivin目的蛋白和MBP蛋白分离,为深入研究survivin的结构和功能奠定了基础.     

转化生长因子-β_1单克隆抗体TB21的生物学特性(英文)

转化生长因子-β_1(TGF-β_1)是转化生长因子家族中的一个重要成员,具有多种生物学功能,特别是调节细胞的生长和分化,参与细胞外基质合成,创伤愈合和胚胎形态发生等生物学过程。近年来,发展了一些抗TGF-β_1多克隆抗体和个别重组人TGF-β_1的单克隆抗体,对研究各种细胞的TGF-β_1的合成,定位和其它生物学效应发挥了作用。本文报道了抗人血小板TGF-β_1单克隆抗体TB 21的制备及其主要生物学特性,尤其是它对TGF-β_1免疫识别的专一性,以及调变对TGF-β_1敏感细胞的生长和增殖抑制的活性。结果表明,TB_(21)单克隆抗体为IgG_1亚型;对TGF-β_1有较高亲和力,亲和常数(Kaff)为1.47×10~8M~(-1);Westernblot 显示TB_(21)抗体能专一地结合25 Kd 成熟型分子和其12.5 Kd 的单体分子,对CCL/64细胞生长抑制和对NRK-49 F 成纤维细胞软琼脂集落形成的鉴定都证明TB21单抗对TGF-β_1的生物学效应有专一性的中和作用,可用于TGF-β_1的有关生物学研究。