介绍以甲基紫配成Schiff试剂显示DNA染色方法

介绍以甲基紫配成Ｓｃｈｉｆｆ试剂显示ＤＮＡ染色方法邢惠清,田玉旺,丁华野,刘芳龄,黄晓南,邓永江（北京军区总医院病理科,北京１００７００）ＤＮＡ组化染色技术是病理诊断中常用的染色方法,特别是在图像分析ＤＮＡ含量和倍体时,应用更广。在实际应用过程中,发...     

介绍一种非放射性标记的原位杂交新方法

在病理诊断和科研工作中,原位杂交是一种常用的检测技术。原位杂交组织化学方法是将核酸分子杂交技术与组织细胞原位显示某种特定ＤＮＡｍＲＮＡ及其产物的定性定量及变化规律相结合的一种新技术。目前,在检测特异ｍＲＮＡ的原位杂交组织细胞化学中多采用同位素标记的探...     

天青Ⅰ显示细胞核DNA组织化学新技术及其应用

天青Ⅰ显示细胞核ＤＮＡ组织化学新技术及其应用田玉旺邢惠清邓永江黄晓南（北京军区总医院病理科北京１００７００）细胞核ＤＮＡ含量的测定是直接反映肿瘤增殖能力的重要生物学指标。目前肿瘤细胞核ＤＮＡ图像定量分析已成为一门新兴的检测技术并广泛应用于临床,常采用...     

基于全偏振成像的数字病理方法

数字病理技术能够对病理切片进行高分辨率数字化,并利用计算机和数据技术对数字化图像进行定量分析和特征识别,以便降低病理医师的工作强度,提高诊断客观性和准确性,实现病理辅助诊断.全偏振显微成像是正在迅速发展的一类成像技术,具有不依赖染色、不造成损伤、富含亚细胞超分辨微观结构特征信息等优点,可在不同解剖学层次和空间尺度针对生物医学样本的微观结构进行定量表征,或对生命过程进行原位、在体的动态观测,在临床病理诊断等领域已经展示出了十分诱人的应用潜力.本文从数字病理图像分析技术的概念和方法出发,简要介绍偏振成像方法以及基于偏振成像技术的数字病理图像分析方法的前瞻性研究成果,目的是展示偏振数字病理的概念、技术、方法和初步应用,并展望其潜在的应用前景和未来发展方向.     

DNA重组技术和海洋生物

ＤＮＡ重组技术和海洋生物徐洵（国家海洋局第三海洋研究所厦门３６１００５）ＤＮＡ重组技术是将遗传物质──ＤＮＡ按人们设定的方案重新组合,并在受体细胞中进行复制和表达的技术。ＤＮＡ重组技术也可理解为基因工程。自１９５３年ＤＮＡ双螺旋结构的提出,生物学进入了分子生物学时代。     

一种鉴别差异表达基因的新方法：———cDNA示差分析技术

ｃＤＮＡ示差分析技术是继ｍＲＮＡ差异显示技术之后又一种鉴别差异表达基因的方法。该技术利用双链ＤＮＡ模板在ＰＣＲ时呈指数扩增,而单链ＤＮＡ模板为线性扩增原原理,先用常见的限制性内切酶将实验组与对照组消化成平均长度为２５６ｂｐ的ｃＤＮＡ片段,再用ＰＣＲ技术使用组的ｃＤＮＡ片段富集,随后进行３次差减杂交去除共有基因,最后扩增实验组中的特异表达的基因。本概述了该技术的原理、基本方法及其应用前景。     

分子间三链DNA的应用

自Ｄｅｒｖａｎ等１９８７年首先证实三链ＤＮＡ的形成可介导对靶ＤＮＡ的特异切割以来,有关三链ＤＮＡ的研究进展和奶快。本综述了近几年分子间三链ＤＮＡ在基因表达调控、染色体作图、基因分离及定点诱变等方面的应用,并对三链ＤＮＡ应用中存在的几个问题及相应的解决方法作了简单介绍。     

分子生物学技术在结核诊断和流行病学研究中的应用

结核是当今世界范围内致残和致死的几个主要传染病之一,每年会导致３００多万人死亡。诊断基础为罗琼氏培养基或选择性培养基培养,金胺Ｏ染色,萋纳氏染色,镜检,需２～８周。这就迫切要求分子生物学技术在结核快速诊断中的应用。本文综述了ＤＮＡ杂交、ＤＮＡ指纹图、脉冲场凝胶电泳和ＰＣＲ在结核诊断和流行病学研究中的应用,同时,评述了用分子生物学技术检查结核耐药基因的适用性     

免疫聚合酶链反应技术的建立及其对甲胎蛋白的检测

免疫ＰＣＲ是一种新的具高敏感性的抗原检测技术,它类似传统的ＥＬＩＳＡ法,若与抗体连接的酶用ＤＮＡ片段代替,则该ＤＮＡ片段可用于ＰＣＲ扩增。以链酶亲合素搭桥将生物素标记的抗体与ＤＮＡ相连建立了免疫ＰＣＲ技术,并将其用于检测甲胎蛋白（ＡＦＰ）,其敏感性比ＥＬＩＳＡ法高１０４。因此,免疫ＰＣＲ有可能作为一种具高敏感性的检测手段用于临床早期诊断     

RAPD分析快速鉴定双歧杆菌

本文应用ＲＡＰＤ技术,选用１１种引物,以嗜酸乳杆菌为对照,对６种１３珠双歧杆菌菌株基因组ＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增,分析其ＤＮＡ指纹图谱,并计算其相似性指数。结果表明,双歧杆菌和非双歧杆菌之间,其相似性指数有显著差异;选择合适的引物进行扩增,双歧杆菌不同种间和同种不同株间可表现不同的ＤＮＡ指纹图谱。本文还对ＲＡＰＤ技术应用于双歧杆菌分类鉴定的可能性进行讨论。     

关于植物随机引物扩增多态性DNA标记的可靠性问题

随机扩增多态性ＤＮＡ（ｒａｎｄｏｍａｍｐｌｉｆｉｅｄｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃＤＮＡ,ＲＡＰＤ）技术是由Ｗｉｌｌｉａｍｓ等［１］首先创立的一种ＤＮＡ分子标记技术。由于ＲＡＰＤ技术具有快速、简便、通用性好,对ＤＮＡ的需求量小,质量要求低等优点,一经问世,就受到了广泛的注意,并被成功地用于动物、植物、人和微生物的遗传多样性检测、基因定位、品系鉴定、医学诊断、遗传图谱构建和系统学研究等。在ＲＡＰＤ分子标记的应用研究过程中,人们得出了两种截然不同的结论：一部分人认为ＲＡＰＤ标记的遗传符合孟德尔分离规律,稳定…     

中国5种珍稀绢蝶非损伤取样的mtDNA序列及系统进化

应用非损伤性取样ＤＮＡ测序技术测定了４种来自云南白马雪山和１种来自新疆天山的５种珍稀绢蝶的线粒体ＤＮＡ细胞色素ｂ基因部分ＤＮＡ序列。在获得的４３３ｂｐ的序列中,Ａ＋Ｔ约占７５．４％,其中４０个核苷酸位点存在变异（约９．２４％）。ＤＮＡ一级序列数据显示,该５种绢蝶间ＤＮＡ序列变异丰富。ＰＡＵＰ３．１．１（简约法）数据分析软件构建该５个种绢蝶的分子系统树显示,爱珂绢蝶和巴裔绢蝶的亲缘关系比较接近,阿波     

石蜡包时组织的DNA提取及其在免疫球蛋白基因重排…

基因重排分析在淋巴瘤诊断中具有重要意义。文章应用改良ＤＮＡ提取方法。从３０例淋巴生性病变石蜡包埋组织获得的ＤＮＡ虽有不同程度的降解,但适于ＰＣＲ扩增Ｉｇ重链箕因重排分析;约１／３病例提出高分子量ＤＮＡ,可用于ＤＮＡ印迹杂交。因此,石蜡包埋组织同样可为某些疾患,如淋巴瘤凝难和罕见病例的回顾性分子病理学研究提供基因诊断的ＤＮＡ来源。     

显示DNA的改良染色在图象分析系统中的应用

在人体和动物组织中的核酸染色技术应用较为深入，通过图象分析系统对ＤＮＡ含量测定，而提供了可靠的依据。为了能够使ＤＮＡ组化染色技术，更好的适应图象分析系统的定量研究需要，因此我们对显示ＤＮＡ的染色方法进行了实验对照研究。选用在室温下的高浓度盐酸对细胞水解充足作用，而得到较好效果。改进了Ｓｃｈｉｆｆ＇Ｓ染色液配制，减少染色时间和程序，结果证明了染色稳定可靠，色彩对比度较强，适用于图象分析系统的应用。     

人血小板生成素重组载体的构建与体外表达

应用基因克隆技术,以人ＴＰＯｃＤＮＡ为目的基因,构建真核细胞表达重组体ＶＲＴＰＯ,藉脂质体将其转染于ＮＩＨ３Ｔ３细胞,应用ＰＣＲ、ＲＴ－ＰＣＲ及Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹等技术对其转染及表达情况进行鉴定．结果表明：ＶＲＴＰＯ构建成功,在ＮＩＨ３Ｔ３细胞可表达人ＴＰＯ,为应用人ＴＰＯｃＤＮＡ进行质粒ＤＮＡ骨骼肌直接注射于动物体内的基因治疗研究奠定了基础     

激光作用质粒DNA和小牛胸腺DNA的AFM研究

激光作用质粒ＤＮＡ和小牛胸腺ＤＮＡ产生损伤效应,导致ＤＮＡ结构变化,利用一种改进的试样制备过程和纳米显微镜--原子力显微镜（ＡＦＭ）能够获得可重现的激光作用质粒ＤＮＡ和小牛胸腺ＤＮＡ的ＡＦＭ图象,显示它们的特殊的表面结构。     

DNA免疫及其在微生物学中的应用

ＤＮＡ免疫是直接将目的基因注入机体以表达目的抗原,并诱生免疫应答的一项新技术。本文对ＤＮＡ免疫技术的起始、目前的应用及发展前景作了综述及评价。     

免疫聚合酶链反应技术的建立及其对甲脂蛋白的检测

免疫ＰＣＲ是一种新的具高敏感性的抗原检测技术,它类似传统的ＥＬＩＳＡ法,若与抗体连接的酶用ＤＮＡ片段代替,则该ＤＮＡ片段可用于ＰＣＲ扩增。因此,免疫ＰＣＲ有可能作为一种具高敏感性的检测手段用于临床早期诊断。     

多聚酶链反应技术诊断结核病的进展

多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术在结核病诊断上发展迅速。本文就①结核菌ＤＮＡ提取技术;②引物的设计;③用于诊断结核的ＰＣＲ方法;④ＰＣＲ产物的检测方法;⑤ＰＣＲ的敏感性和特异性;⑥ＰＣＲ临床应用和注意事项等方面,简述该技术在结核病诊断中应用的进展和需要进一步研究的问题。     

彩超检查在肾脏恶性肿瘤诊断及治疗中的应用

目的:探讨应用彩超在肾脏恶性肿瘤诊断及治疗中的应用效果。方法:回顾分析2006年1月~2010年12月在我院采用彩超确诊的肾脏恶性肿瘤138例,所有患者均采用LOGIQ-7彩色多普勒超声诊断仪进行检测并行手术治疗,术后均行病理检查。结果:138例患者彩超影像显示瘤体内具有丰富的动静脉血流信号,诊断为肾脏恶性肿瘤,与病理诊断完全相符。结论:彩超检查可以明确肾脏肿瘤的性质和范围,以供临床决定手术方式,也可用于术后复查。