细胞因子用作疫苗佐剂：抗原特异性应答与多克隆应答的区别

细胞因子用作疫苗佐剂：抗原特异性应答与多克隆应答的区别导论世界范围内的发病率和死亡率与各种微生物引起的感染直接相关,设法抑制该病原菌的生长直到降低此感染的传播已受到广泛重视,在各种方法中,发展疫苗最为主要,这里,最关键的是要产生合适的免疫应答,例如：...     

脑型肌酸激酶抗原的处理方法对小鼠免疫应答的影响

CK-BB免疫抗原性弱,经成二醛处理后可使BALB/C及F_1(BALA/C×ICR)小鼠产生较强的抗体反应,并建立了产生抗CK-BB单克隆抗体的杂交瘤株。     

新的快速抗原法诊断肺炎球菌性脑膜炎

对细菌性脑膜炎的传统诊断方法通常不够快速、敏感,无法指导最初的抗微生物治疗。肺炎双球菌是群体获得性细菌性脑膜炎最常见的主要原因,同时,由于对第三代先锋霉素抗药性的普遍增强,使治疗变得复杂。作将新的快速抗原试验,即快速免疫层析膜检测技术用于对细菌性脑膜炎的可疑患脑脊液和尿液的检测,发现该试验对肺炎球菌的诊断有高度敏感性和特异性。这一试验可依照当地肺炎球菌抗药性比率指导对细菌性脑膜炎的最初治疗。     

针对多糖抗原的非胸腺依赖性和胸腺依赖性免疫应答

针对荚膜多糖的特异性抗体对荚膜包裹的细菌引起的侵袭性疾病有保护作用。然而,在个体发育的晚些时候才发展这种针对多糖抗原的应答能力.尽管b型流感嗜血杆菌联合疫苗已成功地用于临床并在婴儿中证明是有效的,但对新生期针对多糖抗原的低应答的确切机制知之甚少。本文将抗原分为非胸腺依赖性抗原(TI)和胸腺依赖性抗原     

诱导免疫应答的肿瘤抗原

肿瘤抗原可以诱导机体的免疫应答,是肿瘤的免疫治疗中多肽疫苗的分子基础,近十年来发展起来的肿瘤疫苗筛选方法,利用肿瘤抗原特异性T细胞或抗体识别肿瘤抗原,为临床肿瘤免疫治疗提供了大量备选抗原分子。文中总结了肿瘤抗原的种类,及迄今几乎所有被证明的含有T细胞识别表位的抗原分子及其血清学反应性,为临床肿瘤疫苗的选择提供了依据。     

小鼠杂交瘤单克隆抗体快速制备技术研究进展

小鼠杂交瘤单克隆抗体来源稳定、后期易制备、产量高,是免疫学中使用最为普遍的抗体.传统的耗时费力的杂交瘤制备技术无法满足日益增长的市场需求.文中从抗原设计筛选、B细胞富集与筛选、骨髓瘤细胞的改造、融合技术的改进、阳性杂交瘤细胞筛选及单克隆抗体性能快速测定中所涉及的快速制备技术方面进行阐述,以期为系统化的小鼠杂交瘤单克隆抗...     

可溶性和颗粒性抗原在中枢淋巴系统运输的动力学和铝佐剂对它的调节

<正>铝佐剂可以有效地增强免疫应答。尽管铝佐剂是大多数人或动物疫苗的一种成分,但它的作用机理至今仍然不清楚。我们运用绵羊淋巴套管插入模型对可溶性抗原和颗粒性抗原的运输情况从注射位点进行直接实时测量。铝佐剂不能改变注射位点抗原     

新一代佐剂的研发——从参照经验到合理化设计

正佐剂是现代疫苗开发的重要一环。尽管佐剂有着数十年的发展历程,但当前仅有少数几种类型的佐剂能够用于人用疫苗。为了更好地理解有些佐剂能够成功应用而另一些被舍弃的原因,我们会讨论几种成功应用的第一代佐剂的共同属性。接下来,将评估第二代佐剂的当前发展趋势,包括设计合理、配方适宜的合成免疫增强剂所具有的潜在优势。最后,讨论下一代佐剂值得具有的属性。自始至终,都     

一种快速简便的酵母菌制备法

经过多次实验,我们找出一种制备酵母菌的快速而简便的方法——利用干酵母制备酵母菌悬液。酵母菌未经染色时在显微镜下是无色透明的,不利于观察,但用美蓝染色后观察效果较好,并且可借此鉴定酵母菌的死活。     

黄曲霉素毒B1的免疫检测Ⅰ.抗原的制备

黄曲霉素Ｂ１抗原的制备是ＡＦＢ１免疫检测的第一步。研究了回流温度和时间对黄曲霉毒素Ｂ１肟产生的影响,通过统计分析得到８５℃,回流２ｈＡＦＢ１Ｏ的产率最高,为８９％,。在此基础上进一步研究了ＡＦＢ１Ｏ与载体蛋白－牛血清蛋白（ＢＳＡ）反应的起始摩尔比对产物摩尔比的影响,随着反应起始摩尔比的增加,产物的摩尔比也稍有增加,但是增中幅度不显著,而ＡＦＢ１Ｏ的利用率则随着起始摩尔比的增加而减少,选择２０：１为     

重组鼠疫菌V抗原的纯化及其豚鼠免疫保护力初探

采用Ni^2 亲和层析方法,对用工程化大肠杆菌BL21(DE3)表达的重组鼠疫菌v抗原进行纯化,目标蛋白纯度达到90％以上。以氢氧化铝凝胶配制吸附疫苗,经二针次肌内注射免疫实验豚鼠后,对皮下注射400个致死剂量(MLD)强毒鼠疫菌攻击有一定保护效力,存活率为20％。结果表明,重组鼠疫菌V抗原有望作为改进的F1 V亚单位疫苗的主要成分。     

双歧杆菌处理体对弱抗原免疫应答的影响

目的：探讨双歧杆菌菌处理体在疫苗免疫中的载体／佐剂作用及对诱导免疫应答的影响。方法：将双歧杆菌菌处理体偶联乙肝病毒基因工程表面抗原(HBsAg)成拟菌颗粒免疫C57 BL／6小鼠,二次免疫后5w,ELISA方法测定小鼠血清抗-HBS的阳性率及抗体效价;MTT方法测定免疫小鼠NK的杀伤活性;RT—PCR方法测定免疫小鼠脾淋巴细胞中γ干扰素(IFN-γ)的表达;生物活性方法测定该小鼠腹腔巨噬细胞α干扰素(IFN—α)分泌,并与抗原对照组、商业乙肝疫苗组、完全福氏佐剂组(CFA)进行比较,评定菌处理体佐剂疫苗的效果。初步探讨菌处理体用于疫苗的机制。结果：菌处理体疫苗组抗-HBS的阳性率与效价、NK杀伤活性、IFN—α体内诱生水平与商业疫苗对照组比较差异有显著性(P＜0．05),与CFA比较差异无显著性(P＞0．05),在菌处理组及CFA组IFN—γ表达阳性,其他两组为阴性。结论：菌处理体佐剂具有明显增强弱抗原疫苗诱导免疫应答的作用。     

铅螯合物人工抗原的制备与鉴定

以双功能螯合剂异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸(ITCBE)螯合铅离子,制备得半抗原Pb-ITCBE,然后再分别与载体蛋白KLH或BSA偶联制备得免疫原Pb-ITCBE-KLH与包被抗原Pb-ITCBE-BSA,ITCBE-BSA.用二喹啉甲酸法测3种抗原的浓度,分析半抗原、抗原与载体蛋白的紫外吸收光谱,利用SDS-PAGE对3种抗原的分子量进行鉴定,用三硝基苯磺酸法检测3种抗原中的赖氨酸残基的ε-NH2被半抗原替换的程度,用石墨炉原子分光吸收法检测抗原中铅的含量.研究结果表明,免疫原与包被抗原制备成功,Pb-ITCBE-KLH、Pb-ITCBE-BSA、ITCBE-BSA的浓度依次为6.47± 0.08 mg/ml,6.68± 0.06 mg/ml,5.57± 0.05 mg/ml;抗原与载体蛋白的紫外吸收光谱的特征各不相同;SDS-PAGE的结果显示3种抗原的分子量均不同于各自的载体蛋白;抗原中载体蛋白ε-氨基的替换程度依次为1.86± 0.74 %、55.53± 1.13%、54.19± 1.34%;铅的含量依次为15.64± 0.11 μg/ml,17.33± 0.15 μg/ml,0 μg/ml.     

大肠杆菌质粒DNA PCR模板的快速制备

在分子遗传学的研究中要频繁地用到ＰＣＲ的方法。本文基于粗糙脉孢霉的方法[1] 发展了快速制备大肠杆菌质粒ＤＮＡＰＣＲ模板的程序 ,具有良好的重复性 ,为分子遗传学研究提供了快速有效的方法。收稿日期 :2 0 0 1 - 1 0 - 2 0 ;修回日期 :2 0 0 1 - 1 1 - 2 1基金项目 :广东省自然科学基金 (Ｎｏ.980 30 3) ;国家自然科学基金 (Ｎｏ .30 0 70 4 2 0 ) ;教育部高等学校骨干教师计划资助项目 (Ｎｏ.2 0 0 0 - 0 61 -31 4 30 1 )作者简介 :罗樨 (1 977- ) ,女 ,硕士 ,从事生物钟研究。图 1　质粒ＤＮＡＰＣＲ扩增结果1 ＤＬ2 0 0 0分子量标…     

HCV多表位抗原基因重组减毒口服活菌苗的研究

把丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)复合多表位抗原基因PCX与β半乳糖苷酶基因(GZ)融合后,构建重组减毒鼠伤寒沙门氏菌口服活菌苗SL3261(pWR/PCX),免疫小鼠及家兔后,于第6周始可检测到低水平的抗GZPCX IgG(1∶200),至3月时最高滴度分别达1∶800及1∶25 600,均显著高于宿主菌SL3261组及空白对照组。在免疫小鼠的肠道灌洗液中可检测到抗GZPCX sIgA\.GZPCX抗原可促进免疫小鼠及家兔淋巴细胞增殖,诱发明显的迟发性超敏反应(DTH)。口服免疫后小鼠体重出现一过性下降,但未见其它明显的毒性作用,安全性较好。本研究从新的角度探讨了HCV复合多表位重组口服活菌苗的可行性,为HCV疫苗的研究提供新的实验依据。     

采用亲和层析结合制备凝胶电泳获得高纯度的重组抗原蛋白用于制备蛋白质芯片

为了得到制备抗原芯片所需的高纯度重组抗原蛋白,需要建立一套适合于多种重组抗原表达和纯化的技术路线．采用了亲和层析结合制备胶电泳的方法,对16种用于构建蛋白质芯片的食管癌相关抗原基因进行了克隆重组并在大肠杆菌中进行了表达．对高表达的重组蛋白首先制备包涵体,然后采用Ni-Sepharose亲和层析得到初步纯化的蛋白质,最后使用SDS-PAGE制备胶电泳作进一步纯化．经过透析复性后,用于制备蛋白质芯片．采用亲和层析纯化重组蛋白,得率为71% ,纯度约为70%;在SDS-PAGE制备胶进一步纯化后,得率为32%,纯度为95%,经过透析和复性后,最终得率为21%,纯度为95%．得到的重组蛋白RPS4在ELISA检测中可以和血清中识别RPS4 的自身抗体起反应,并且,采用精纯抗原制备的蛋白质芯片,在检测抗原与抗体这一对反应中也具有较高的敏感性和特异性,适合大规模血清抗体的检测．研究表明,采用亲和层析结合制备凝胶电泳纯化抗原蛋白,是一条简便快捷,适合需要量不大,但对纯度要求比较高的蛋白质芯片制备的技术路线．     

快速制备水稻基因组DNA PCR模板的煮沸法

文章发展了一个采用煮沸法快速制备水稻基因组DNA PCR模板的程序,成功地从水稻基因组扩增到了相应基因。