小鼠乳腺中瘦素及其受体的表达与作用

瘦素(Leptin)是影响乳腺发育和泌乳的自分泌和旁分泌因子. 为探讨瘦素在乳腺发育、泌乳和退化过程中的调控及作用机理, 本研究应用激光共聚焦显微技术对小鼠乳腺发育、泌乳以及退化过程中瘦素及其长型受体(OB-Rb)蛋白水平的表达定位进行检测, 并采用乳腺组织体外培养和Western blot方法研究了妊娠期、泌乳期和退化期瘦素对乳腺的作用以及乳腺发育各个时期瘦素的信号转导通路. 结果显示, 小鼠乳腺整个发育过程中瘦素和OB-Rb的表达呈显著正相关, 在青春期最高, 妊娠期下降, 泌乳期维持在低水平, 幼仔离乳后乳腺退化, 瘦素和OB-Rb的表达显著上调, 并在乳腺退化13天恢复到青春期水平; 瘦素及其受体的表达部位的变化显示瘦素专一性地诱导OB-Rb的表达, 表明瘦素通过与OB-Rb共同作用调控乳腺发育和泌乳的生理机能; 妊娠期, 瘦素与OB-Rb结合, 通过激活JAK-MAPK信号通路促进乳腺导管上皮细胞的增殖和分化; 泌乳期, 瘦素激活JAK-STAT5信号通路诱导乳腺中b-酪蛋白基因表达; 退化期, 瘦素激活JAK-STAT3信号通路启动乳腺细胞凋亡并参与乳腺组织重建过程.     

体细胞重编程为多能干细胞的研究进展

胚胎干细胞不仅是研究哺乳动物早期胚胎发育、细胞分化、基因表达调控等发育生物学问题的有力工具,还可用于新药评价、细胞治疗等方面的研究.然而,为科学研究而捐献的人类卵子并不能够轻易获得,限制了人类胚胎干细胞相关研究的进展,解决这个问题的理想办法就是找到能够替代胚胎干细胞的其他成体多能细胞.综述了将哺乳动物体细胞诱导为多能干细胞的方法,重点介绍了利用特定的转录因子将体细胞诱导为诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS细胞)的最新进展,详细阐述了转录因子在诱导细胞重编程过程中发挥的作用,以及iPS细胞筛选与鉴定的方法,并展望了iPS细胞的应用前景.     

药物治疗浓度的雌激素对卵巢癌3AO细胞生长的影响

在过去的20年里,人们对于雌激素在不同组织、器官中发挥不同功能的分子机制进行了深入的研究,并取得了非常快的进展。最近的研究表明,雌激素能够抑制包括卵巢癌在内的多种肿瘤细胞的生长。卵巢是女性雌激素的主要来源,多种卵巢细胞表达雌激素受体,其中包括90％以上的卵巢癌起源的卵巢表面上皮细胞。雌激素诱导卵巢癌细胞凋亡的研究非常有实验及临床价值,雌激素调控的凋亡相关的特异性基因的发现对于揭示卵巢癌的发生发展以及针对卵巢癌特异性治疗的研究将会提供巨大的帮助。以人卵巢癌3AO细胞为模型,探讨了药物治疗浓度的雌激素对卵巢癌细胞的凋亡诱导作用以及其可能机制。首先用MTT检测方法观察了雌二醇及其受体拮抗剂ICI 182780对3AO细胞生长的影响。研究发现,高于0．1pmol／L浓度的雌二醇能够抑制3AO细胞的生长,其中5pmol／L浓度的雌二醇处理3AO细胞72h后,对3AO细胞的抑制率达到70％。雌激素受体的拮抗剂ICI 182780不但不能阻断雌激素的效应,它本身也能抑制3AO细胞的生长,并且与雌激素有协同效应,并且经流式细胞术证实雌激素及其受体拮抗剂引起的3AO细胞的死亡为凋亡。雌激素对生长的调控是细胞类型特异性的,其机制可能与细胞内雌激素受体不同亚型的表达有关。细胞内雌激素受体β亚型的表达利于细胞凋亡的发生,细胞内雌激素受体α亚型的表达则会保护细胞免于凋亡的发生。在对雌激素诱导的凋亡发生机制的探讨过程中,我们发现3AO细胞只表达雌激素受体β亚型,而不表达雌激素受体α亚型,并且与α亚型相比,β亚型的表达明显降低,这可以解释为何需要高浓度的雌激素才能够诱导3AO细胞凋亡。我们又观察了大分子BSA标记的雌激素对3AO细胞生长的影响,结果发现这种不能通过细胞膜的雌激素失去了对3AO细胞生长的抑制作用,从而排除了雌激素的膜效应。近来的研究表明,MAPK信号通路在调控细胞的生长过程中发挥了重要的作用,并且参与了雌激素调控细胞生长的过程。接下来我们观察了MAPK信号通路在雌激素诱导3AO细胞生长中的作用。研究发现,p38／MAPK激酶的抑制剂SB203580部分的阻断了雌激素的生长抑制效应,而JNK／MAPK激酶的抑制剂SP600125则能促进雌激素的效应,提示MAPK信号通路参与了雌激素的这种效应。     

小鼠乳腺发育的转录组学研究——怀孕哺乳周期乳腺的关键调控基因

乳腺是哺乳动物特有的器官,90%的发育过程集中在出生之后.此外,在生殖过程中乳腺发育会经历怀孕、哺乳和退化3个阶段(称为怀孕哺乳周期).为了在转录组水平上更好地了解乳腺发育的机制,利用核糖体RNA去除法构建了小鼠乳腺3个时期(怀孕12天、哺乳14天和退化7天)的总RNA文库,每个文库产出的数据量均大于5×107条reads.3个文库分别得到17344,10160和13739个蛋白编码基因以及1803,828和1288个ncRNAs.其中,从怀孕期到哺乳期有4843个差异表达基因(包括749个上调表达的基因和4094个下调表达的基因);从哺乳期到退化期共有4926个差异表达基因(包括4706个上调表达和220个下调表达的基因).此外,还观察到与溶酶体酶相关的基因在哺乳期乳腺中有较高的表达.通过对转录因子及ncRNAs的分析,还得到一些可能在乳腺发育的不同时期有重要调控作用的调控因子基因(如转录因子基因Trps1,Gtf2i,Tcf7l2,Nupr1,Vdr,Rb1和Aebp1;miRNA基因mir-125b,Let-7,mir-146a和mir-15等).     

心脏发育过程中的细胞命运转变及命运决定

胚胎发育过程中,心脏发生起源于生心中胚层(cardiac mesoderm)。在小鼠早期胚胎(E6.5),上胚体(epiblast)在低浓度Nodal诱导下, Eomes出现并激活Mesp1表达。Mesp1作为主调控者(master regulator),激活一系列生心关键转录因子及生心特异基因的表达,促进生心祖细胞的特化及生心区(cardiac field)的形成。之后的心脏形态发生涉及细胞命运的转变,包括流出道分隔过程中神经嵴细胞向间充质细胞转变、内皮细胞向间充质转变及房室通道发育过程中的内皮细胞向间充质转变。最新的研究表明,流出道在分隔成为主动脉和肺动脉根部之前,其中的细胞命运已经被预先设定。此综述文章重点探讨生心祖细胞特化、细胞命运转变与命运预先设定等方面的新进展,调控机制及争议问题。     

Caveolin-1基因沉默促进乳腺上皮细胞ERα36 介导的PI3K/AKT信号通路的激活

Caveolin-1(窖蛋白-1)单倍不足可以促进正常乳腺细胞的早期转化, 与新型雌激素受体亚型ERα36介导的膜始动雌激素信号通路的激活有关, 但是关于其机制并未被研究清楚. 本文利用siRNA技术建立了Caveolin-1低表达而ERα36高表达的稳定传代细胞模型MCF10ACE, 采用基因芯片技术检测了ERα36高表达时雌激素信号通路基因表达谱, 研究了ERα36在雌激素激活的PI3K/AKT信号通路中的作用及其与乳腺细胞转化的关系. 结果表明: (1) Caveolin-1表达降低时可以以雌激素依赖性方式促进ERα36表达增加; (2) ERα36高表达可介导MCF10ACE细胞雌激素抗凋亡信号通路(PI3K/AKT)的激活, 促进其与增殖信号通路MEK/ERK之间的交叉对话, 从而使人乳腺细胞增殖加快, 逐渐转化. 结果提示, Caveolin-1与ERα36相互作用调节膜起始的雌激素信号通路是控制乳腺细胞转化的重要机制.     

乳腺发育及泌乳相关miRNA研究进展

MicroRNA(miRNA)是一种重要的转录后调控的非编码RNA, 参与调控哺乳动物乳腺发育和泌乳。文章总结了乳腺发育和泌乳过程中miRNA表达的时空特异性, 综述了个别miRNA对乳腺发育和泌乳的调节作用, 旨在为乳腺miRNA的研究提供指导, 为利用miRNA促进乳腺健康发育和调控高质高效产乳提供理论基础和研究思路。     

雌激素受体信号转导的研究

雌激素受体(estrogen receptor,ER)是核受体超家族的成员之一,雌激素及其类似物可以通过雌激素受体调控许多基因的表达。目前已经发现的雌激素受体包括两种亚型:ERα和ERβ。二者在不同的细胞类型中,针对不同的基因发挥不同的调控作用,进而引发多种多样的生物学效应。本文旨在就目前对雌激素受体信号转导途径的研究进展作一综述。     

NANOG在哺乳动物早期胚胎发育与干细胞中的功能研究进展

哺乳动物的早期胚胎发育和干细胞多能性由转录因子构成的基因网络所调控。2003年,在胚胎干细胞中发现的重要转录因子NANOG位于基因网络调控中心,对胚胎第二次命运决定和基态多能性的建立至关重要。该文将在NANOG生物学特征的基础上,重点讨论其在早期胚胎发育、胚胎干细胞与诱导性多能干细胞中的功能。     

MUC1粘蛋白在乳腺肿瘤中的表达及其生物学意义

目的　探讨MIC1粘蛋白在乳腺肿瘤组织中的表达特征及其生物学和临床意义。方法　应用免疫组织化学ABC法对 15例乳腺非典型增生 ,15例乳腺良性肿瘤 ,44例乳腺癌 (2 1例含癌旁组织 )染色 ,观察MUC1在不同类型乳腺组织中的表达特征及其与雌激素受体和孕激素受体表达的关系。结果　MUC1在所检测的乳腺组织中均表达 ,但在不同病变乳腺组织中其表达的方式和强度不同。在癌旁和非典型增生组织中只表达在近管腔或腺腔侧的胞膜上 ,胞浆未见表达。在乳腺癌组织中整个胞膜和胞浆均表达 ,且表达强度与细胞的恶性化程度成正相关 (P <0 0 1)。浸润性癌中MUC1表达明显强于原位癌 (P <0 0 0 5 ) ;乳腺癌组织中MUC1的表达强度与雌激素受体的表达成正相关 (P <0 0 5 ) ,与孕激素受体表达无关 (P >0 0 5 )。乳腺癌组织中MUC1有旁分泌现象。结论　MUC1表达水平可反映乳腺肿瘤恶性化程度 ,并可能作为乳腺癌治疗效果判断和预后评价的参考指标。     

乳腺癌干细胞和乳腺癌

肿瘤干细胞既包含干细胞的特性也包含肿瘤细胞的特性。乳腺癌起源于乳腺癌干细胞的说法能够合理地解释乳腺癌的不均一性及其治疗后的复发,这些变异的干细胞可能作为肿瘤预防策略的靶标。而且,由于乳腺癌干细胞能够抵抗辐射治疗和化学治疗,所以要想更好地治疗乳腺癌就需要寻找针对这些干细胞的靶标。我们综述了乳腺癌干细胞的发现、富集和分离、相关的信号途径,以及在乳腺癌治疗中的应用。     

乳腺三维断层技术结合乳腺超声对致密型乳腺病变的诊断价值

摘要 目的：探讨乳腺三维断层技术（DBT）结合乳腺超声(BUS)对致密型乳腺病变的诊断价值。方法：回顾分析2018年6月至2019年4月在我院就诊且有完整病理结果的149例致密型乳腺病变患者的影像资料,对比DBT、BUS两种检查方法的检出率;以病理结果为金标准,分析DBT、BUS、DBT联合BUS三种检查模式的诊断效能。结果：BUS对良性病变的检出率（97.87%）高于DBT（89.36%）,差异有统计学意义（x²=5.697,P＜0.05）;DBT与BUS对恶性病变的检出率分别为98.44%、95.31%,差异无统计学意义（x²=1.032,P>0.05）。DBT诊断致密型乳腺病变的敏感度为90.61%、特异度为93.55％、准确率为91.77％,BUS诊断致密型乳腺病变的敏感度为78.13%、特异度为89.36%、准确率为84.81%,DBT联合BUS诊断致密型乳腺病变的敏感度为95.31%、特异度为95.74%、准确率为95.57%。DBT联合BUS诊断致密型乳腺恶性病变的受试者工作特征曲线（ROC）的曲线下面积（AUC）为0.977,稍高于DBT的AUC（0.951）,明显高于BUS的AUC（0.885）。结论：BUS对良性病变的检出率显著高于DBT,DBT对致密型乳腺病变的诊断效能高于BUS,二者结合能提高病变的检出率与诊断效能。     

Breast capsulorrhaphy

The malposition of breast prostheses without capsular contracture has become an increasingly frequent event. In our experience with 40 patients over the last 5 years, we have found multiple-layer breast capsulorrhaphy to be a simple, safe, and reliable technique. With this method, repositioning of the breast is easier, more accurate, and more permanent than single-layer closures, which attempt ideal correction of the malpositioned implant on the first try.