p53家族及其通路相关蛋白调节母性生殖的新功能

p53是一种重要的抗癌基因,同时它也是机体感受环境压力并进行相应调节的关键基因之一。最近的研究发现东亚人群p53 Arg72Pro受到冬季温度自然选择,表明p53可能在生殖中发挥作用。同时,p53及其通路中的癌基因鼠双微体2(Murinedoubleminute2,Mdm2)、MdmX和Hausp(Herpesvirus-associated ubiquitin-specific protease)基因的单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphisms,SNP)与女性生殖疾病易感性相关。P53蛋白通过其DNA结合区(DNA-binding domain,DBD)调控白血病抑制因子(Leukaemiainhibitory factor,LIF)表达,从而影响胚胎植入过程,实现其在母性生殖中的作用。p53通路中Mdm2、MdmX和Hausp可以调控P53蛋白的表达水平和活性,同时还可以在胚胎植入时准确的调控p53的表达水平,促进胚胎植入;P53家族成员P63、P73具有P53相似的DBD区,但P63和P73是通过别的途径影响到母性生殖;在卵母细胞受到射线或者化学损伤后,P63能促进其凋亡,减少畸型的产生;P73能影响纺锤体复合物的组装,而纺锤体复合物缺失将导致胚泡质量低下,微管结合的动粒缺失和细胞非整倍性的增加。文章主要综述了p53家族、p53通路中的相关蛋白对母性生殖的影响,为提高IVF-ET成功指出了新方法,同时也为不明原因的不孕患者提供了新的诊断思路,将有助于制定合理的个性化治疗不孕方案。     

p63与p21在鼻咽癌细胞中的表达及相互作用的初步研究

鼻咽癌是中国南方地区常见的恶性肿瘤,p63是新发现的p53家族成员.本研究利用免疫组化方法对p63、p53及p21基因在鼻咽癌中的表达进行了检测,发现三者在鼻咽癌中均有表达;并利用染色质免疫共沉淀(ChIP)的方法对p63及p21的相互作用进行了初步研究,发现P63蛋白能与p21基因启动子区域的一个位点结合.     

p53基因5/6外显子突变与广西肝癌高发区肝癌家族聚集性的相关性

为了研究p53基因5/6外显子突变与广西肝癌高发地区肝癌家族聚集性的关系。研究采用配对方法,选取肝癌高发家族、肝癌单发家族和无癌家族中未发生肝癌的家族成员各130例作为研究对象,同时选取上述高发地区肝癌患者30例作为肝癌组对照。应用PCR-SSCP技术检测研究对象外周血细胞DNA中p53基因5/6外显子的突变情况并进行基因测序。研究发现三组家族成员中p53基因5/6外显子的突变率为0%。肝癌组中p53基因5/6外显子的总突变率为10%(3/30)。肝癌组p53基因5/6外显子的总突变率与肝癌家族组间突变率比较,差异均具有统计学意义(p0.05)。综上,p53基因5/6外显子突变可能不是广西肝癌高发区肝癌家族聚集性的遗传易感因素,广西肝癌高发区肝癌家族成员中可能尚未发生p53基因5/6外显子突变或较为罕见,肝癌患者中出现的p53基因5/6外显子突变可能是在后天多因素的影响下发生,从而参与了肝癌的发生发展。     

p63基因的结构与功能

p63基因是肿瘤抑制基因p53家族成员之一,与p53基因表现出高度同源性.较之p53基因,p63基因更为复杂.p63的两个不同启动子和多种内含子剪接方式,导致p63基因编码产生多种亚型P63蛋白.这些P63亚型蛋白,在不同的组织不同的发育阶段发挥不同的生物学功能.本文就p63基因结构、p63在细胞周期和凋亡中的作用,以及在表皮发育中的功能等方面的研究进展作一概述.     

载体介导的小干扰RNA诱导p53基因的沉默

目的:筛选有效抑制p53基因表达的靶位点,以研究其在哺乳动物细胞中的功能.方法:用Ambion公司的RNA干扰(RNAi)设计软件设计了3段针对野生型p53基因的长度为19 nt的反向重复序列,在人工退火条件下形成双链,将其构建到pSilencer3.1-H1 neo载体上,与pcDNA3.1-HA-p53(野生型)载体共转染Cos7及293T细胞,用Western blot检测HA-p53蛋白质的表达;将pCMV-GFP-p53与p53-RNAi或空载体共转入Cos7细胞,于激光扫描共聚焦显微镜下比较GFP-p53的表达;将p53-RNAi和空载体分别转入BEL-7405-p53-RE-luc 细胞,在不同剂量化疗药物阿霉素的作用下,通过活体成像仪观察内源p53的表达;利用G418(neo)筛选获得稳定整合p53-RNAi的H460细胞(p53野生型)株,用流式细胞仪分析正常及p53基因沉默细胞的周期变化.结果:筛选到一个有效的p53基因沉默位点,并在H460细胞中得到p53基因沉默的稳定细胞株.结论:获得了有效的p53基因RNAi位点,为进一步研究p53基因在细胞中的功能提供了有力的工具.     

p53对restin基因转录表达的调控作用

restin基因是Zhu等人从全反式维甲酸(all-trans retinoic acid, ATRA)诱导肿瘤细胞分化时克隆得到的一种黑色素瘤抗原相关基因. 前期研究表明, 该基因与细胞周期阻滞有关. 由于p53在细胞增殖调控中占据重要地位, 并且与维甲酸具有诱导关系, 因此本研究试图揭示维甲酸诱导restin基因表达是否与p53有关. 将p53转染真核细胞, 研究restin与p53的表达关系. 结果表明p53能诱导restin基因转录增加. 进一步分析发现, restin基因5¢端上游约2 kb基因组序列中存在p53蛋白结合位点. 扩增该序列构建荧光报告系统, 检测到该报告系统可以接受维甲酸的诱导调控. 在此基础上, 研究p53对缺失p53结合位点的截短体报告质粒和p53结合位点突变后的报告质粒的作用, 结果显示p53调控restin基因的表达与该基因上游序列区中的p53结合位点无关, 推测p53对restin基因的表达调控可能还存在其他分子的相互作用.     

p63与肿瘤发生调控网络研究进展

p63是p53家族成员之一,由于启动子和选择性剪切的不同,编码两类功能相异的蛋白异构体(TAp63与△Np63),在多种鳞状上皮源性肿瘤中发生表达改变,与肿瘤发生发展关系密切。p63作为转录因子通过调节下游靶基因及激活多种信号通路而发挥作用。由于p63的两类异构体功能相悖,当△Np63-TAp63表达动态平衡偏倚时,可引起细胞生物学行为的改变,但调控关系复杂,许多机制并未明了。该文结合当前研究进展,对p63各亚型的结构特点、活性调节及其参与细胞增殖、分化、凋亡和黏附迁移等几方面的调控作用作一综述,并对其未来研究方向进行了展望。     

p73基因在血液系统恶性肿瘤中的生物学行为

p73是肿瘤抑制基因p53家族新成员.它表达多种具有不同功能特点的蛋白质异构体.综述p73蛋白的分子结构、功能以及在血液系统恶性肿瘤中的生物学行为,旨在探索p73与血液系统恶性肿瘤的关系,为血液系统恶性肿瘤的诊断、治疗及预后提供理论依据.     

p73基因研究进展

新近发现的p53家族成员－p53基因,其结构和功能均与p53有相似之处。p53蛋白可与多种病毒,胞内信号分子,p53蛋白及其他调节蛋白作用,参与粒细胞分化及T细胞凋亡等多种生理过程;还不清楚p53介否作为一种抑癌基因。     

人心脏低维动力学模型的计算机模拟

心脏窦房结与异位心室搏动非线性相互作用,导致调制并行收缩反常节律。本文从新的低维动力学心脏模型（双参量圆周映射）出发,研究由周期性到不规则、混沌动力学过渡的性质。模型的数值实验揭示出在双参量空间不同区域中,某些特征性步入混沌的道路和总体标度关系。一个明显特征是,在双参量空间宽广范围内观察到无穷层次的嵌套结构,即嵌在混沌带中的周期递加序列。而且,出现周期性的位置或者周期窗口的宽度,均存在普适的标度关系。另一方面,在参量空间一部分,包含相互交叠的不同周期性稳定轨道,有极复杂图象。本文结果显示,运用数值方法计算李雅普诺夫指数谱,可以基本上确定人心脏圆周映射的二维分岔结构和标度性质。