同工酶差异位点分析在蔬菜杂交种纯度检测中的应用

用１０种同工酶和蛋白质和分析体系,分析了７种重要蔬菜的７１个杂交种与其亲本之间的差异位点以及这些差异位点用于杂交种纯度检测的可能性和存在的问题。试验表明,作物的不同种类,杂交种与亲本之间的亲缘关系以及作物种类的遗传多态性,都会影响同工酶差异位点产生的多寡,从而影响到这一技术是否能用于此种作物的纯度检测,分析了不同同工酶在不同蔬菜中的多态性以及在蔬菜种子纯度检测中的表现。     

利用分子标记技术检测玉米杂种纯度研究

以12份玉米自交系及其组配的8个杂交种为材料,利用分子标记技术进行杂种纯度检测研究。有用RAPD标记方法,从300个随机引物中,筛选确定了8个杂交种种子纯度检测引物,制定了检测标准标记图谱。建立了海禾3纯度分析的SCAR标记,该SCAR标记与RAPD标记在种子纯度检测上结果完全一致。     

辣根过氧化物酶同工酶在不同介质中的动力学

本文研究了辣根过氧化物酶［ＥＣ１．１１．１．７］同工酶的联苯胺动力学。结果表明：其酸性酶和碱性酶的最适ｐＨ均为５．８左右。二者最适有机溶剂浓度略有差异：酸性酶最适乙醇浓度为５０％,最适二氧六环浓度为４０％;而碱性酶则分别为６０％和５０％。在水溶剂中,酸性酶为米氏酶,碱性酶为正协同的别构酶;在有机溶剂（如：乙醇、二氧六环）中,酸性酶为正协同的别构酶,碱性酶则仍为正协同的别构酶。即有机溶剂可能使酶构象     

SRAP标记技术在甜瓜品种亲缘关系和种子纯度鉴定上的应用

利用SRAP分子标记对12份甜瓜材料进行亲缘关系鉴定和F1代杂交种进行纯度检测。结果表明:从40对引物中筛选出13对多态性好的引物,共扩增出78条带,多态性带的比例为50%;聚类分析结果显示,12份甜瓜材料的相似系数在0.263～0.921之间,可将该12份甜瓜材料分为2大类,进一步细分为5类。利用引物Me15-Em7和Me3-Em16对‘红绿早脆’100S杂交种进行纯度检测,杂交种纯度为77%。研究为甜瓜品种间亲缘关系及种子纯度检测提供了可靠的理论依据。     

甜瓜属远缘杂种回交自交群体的过氧化物酶同工酶分析

运用聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,对甜瓜属远缘杂种 (Cucumis× hytivus Chen & Kirkbride)与栽培黄瓜的回交自交群体共 4 6份材料进行了同工酶分析 ,结果表明 :群体内各单株间过氧化物酶酶谱差异较大 ,根据酶带数目及位置的差异可归为 6个类型 ,反映了群体内的遗传多态性。将回交自交群体与普通栽培黄瓜酶谱相比较时发现 ,群体比黄瓜新增了 4条带 ;群体的平均酶带数目 (7.8)比普通栽培黄瓜 (5 .0 )高出 5 6 .0 %。与此同时 ,在酶的活性上群体内也存在很大变异。这说明通过远缘杂交获得的新种对扩大黄瓜的遗传变异 ,改良黄瓜资源具有巨大的潜力。     

构树形成层活动周期中过氧化物酶和酯酶同工酶的变化

同工酶分析表明：在构树（Ｂｒｏｕｓｓｏｎｅｔｉａ ｐａｐｙｒｉｆｅｒａ （Ｌ．） Ｖｅｎｔ．）形成层活动周期中, 形成层区域和木质部中过氧化物酶酶带变化最大,参与ＩＡＡ 浓度调节的酶带在晚材形成前出现,当其它生长停止、韧皮部仍在分化时又消失,完全休眠后, 所有酶带又都出现。在周皮、形成层区域和木质部中,酯酶同工酶酶带变化明显与形成层活动有关,有些酶带只在木栓细胞和／或木质部细胞分化时出现     

基于过氧化物同工酶分析月季种质资源的亲缘关系及杂种真实性

为了提高种质资源利用率,加速月季育种进程,对27份月季种质及3个杂交组合的8个杂交后代,采用过氧化物酶(POD)同工酶方法分析其亲缘关系并进行杂种真实性鉴定。结果表明:月季种质采用POD同工酶分析具有一定的可行性。酶谱分析中,在相对迁移率为0.264~0.858的位点处共获得7条酶带,其中共有酶带3条,特征酶带4条,表明不同月季种质间遗传多样性丰富,但又存在一定同源性。基于酶带特征进行聚类分析,在相似系数为0.57处,可将27份供试材料分为3个大组。合柱组与月季组材料聚在一个大组中,两个组在形态上的相似性再次得到确认。金樱子与硕苞蔷薇分别聚在两个不同的组中,表明二者之间的亲缘关系较远。供试的古老月季品种被聚在两个不同的大组中,与野生种聚成的一组呈平行关系,表明古老月季在起源上的差异较大,可利用其作为杂交亲本进行广泛杂交以选育具有丰富遗传多样性的杂交后代。根据有无父本特征酶带对杂种后代真实性进行鉴定,初步确定2个杂交组合的6个杂交后代中5个为真实杂种,1个为自交种。该研究结果为进一步开展月季遗传育种奠定了基础。     

甜瓜组织培养过程中的染色体数目变异

以甜瓜组织培养过程中产生的不定芽为材料,观察了不同阶段不定芽中染色体数目发生变异的频率,同时比较了在无外加诱变剂的情况下,甜瓜根尖与组培不定芽之间最大分裂相时间的变化。     

胡葱与洋葱、葱过氧化物酶同工酶研究及聚类分析

本文对胡葱与洋葱、葱的功能叶过氧化物酶同工酶电泳图谱分析和聚类分析表明：这三个种及葱的3个交种闻的亲缘关系被区分开来;胡葱与洋葱的亲缘关系比胡葱与大葱的亲缘关系更近。     

黄瓜的冷害及耐冷性

随着蔬菜反季节栽培面积的不断扩大,如何提高黄瓜(Cucumis sativus L.)耐冷性已成为选育新品种的研究重点.系统地综述近几年黄瓜耐冷性的鉴定、获得途径、冷害机理以及遗传和分子遗传学等方面的研究,以促进对黄瓜冷害机制的研究,加速耐冷品种的培育.耐冷性鉴定时要从耐冷指数、低温发芽能力、MDA(丙二醛)含量和电解质渗漏率等几个方面综合鉴定.耐冷性的获得途径主要有冷驯化、激素处理、热激处理和培育耐低温品种,最重要的途径是耐冷品种选育.黄瓜冷害机理包括细胞膜的流动性降低及透性增加,光合作用被抑制,根系吸收减弱,可溶性糖含量减少,淀粉粒积累增加,微管的稳定性受到破坏等.黄瓜低温发芽能力由非加性基因决定,而幼苗时期主要由加性基因控制.黄瓜耐冷的分子遗传学研究进展缓慢,目前已克隆出在低温锻炼中特异表达的功能未知的基因CCRl8.今后还应研究黄瓜低温胁迫时的信号转导系统,以进一步揭示黄瓜的冷害机理;利用野生资源的抗逆性状,拓宽栽培黄瓜的遗传基础,选育适于保护地栽培的耐低温品种.     

摘心时期和留蔓数对甜瓜苗期叶面积扩展和功能叶寿命的影响

以2个厚皮甜瓜和1个薄皮甜瓜品种为材料,研究了摘心时期和留蔓数对苗期叶面积扩展和功能叶寿命的影响.结果表明,厚皮甜瓜苗期叶面积发育快于薄皮甜瓜,早熟厚皮甜瓜品种的叶面积发育快于中晚熟品种;甜瓜真叶净光合速率显著大于子叶,厚皮甜瓜的子叶光合速率高于薄皮甜瓜;摘心时预留子蔓数越多,甜瓜幼苗期叶面积扩展速度越快,但留蔓数增加会促进主蔓叶片衰老.从叶面积扩展速度和叶片功能寿命看,五叶期是甜瓜幼苗主蔓摘心的最佳时期,适宜留蔓数则因品种而异.     

2个甜瓜品种高效再生体系的建立

以甜瓜厚皮品种绿宝石和薄皮品种甘甜一号为材料,研究了5d龄无菌苗的子叶外植体在附加6-BA和IAA的不同浓度组合培养基上的分化情况.结果表明:2个品种在不定芽和愈伤组织的分化上存在着较大的差异,绿宝石在含有6-BA2.0mg·L-1的分化培养基上的不定芽诱导率最高,达93.75%;而甘甜一号品种在含有6-BA1.0mg·L-1和6-BA2.0mg·L-1的分化培养基上的不定芽分化频率均为100%.另外,随着IAA浓度的增大,疏松愈伤组织的分化均有加重的趋势;而提高6-BA的浓度,虽然分化进程有所加快,但玻璃化-褐化程度加重.本项研究为应用转基因技术改良甜瓜品种的重要育种性状奠定了组织培养方面的基础.     

锌锰钛对接种放线菌剂甜瓜幼苗生长及诱导抗病性的影响

以陕甜3号甜瓜幼苗为材料,采用基质育苗、大田栽培法,研究了2种放线菌剂(Act28和康照)育苗接种和育苗移栽双重接种条件下,微量元素锌、锰、钛对甜瓜植株生长及诱导抗病性的影响.结果显示:(1)与单施菌剂相比,在育苗接种Act28并配施微量元素条件下甜瓜植株总鲜重、根鲜重和蔓叶鲜重分别显著增加31.5%、39.5%和31.5%,在双重接种Act28配施微量元素条件下分别显著增加40.5%、17.6%和40.7%.(2)与单纯菌剂接种相比,在育苗接种和双重接种Act28并配施微量元素下甜瓜叶片过氧化物酶活性分别降低4.4%和10.2%,丙二醛含量分别增加10.9%和16.6%;甜瓜叶片多酚氧化酶、过氧化物酶活性及可溶性蛋白含量在育苗接种康照并配施微量元素下分别较育苗接种康照降低2.2%、38.0%和5.0%,丙二醛含量增加17.7%.(3)甜瓜根系多酚氧化酶活性和丙二醛含量在育苗接种Act28配施微量元素处理下较育苗接种分别显著增加30.7%和42.6%,而在Act28双重接种配施微量元素与双重接种处理间无明显变化;甜瓜根系过氧化物酶活性在育苗接种Act28、康照与微量元素配施处理下,分别较2种菌剂育苗接种处理显著降低14.7%、34.3%,苯丙氨酸解氨酶活性分别明显降低14.9%、21.9%.研究表明,菌剂Act28育苗接种或育苗移栽双重接种条件下,锌、锰、钛溶液对甜瓜植株生长具有显著的促进作用,且微量元素效应与接入的菌剂种类及接种方式有关;微量元素溶液对甜瓜防卫酶活性及抗性物质含量等无显著影响或具有一定程度的负效应,从而导致甜瓜诱导抗病性下降.     

‘弥河银瓜’高效植株再生体系的建立

建立了以薄皮甜瓜品种‘弥河银瓜’子叶为外植体的高效再生体系。取生长5d的甜瓜子叶为外植体,置于MS+2.0mg·L-16-BA+0.5mg·L-1IBA+3.5%蔗糖+0.7%琼脂(pH5.8)的诱导培养基上培养,可获得100%芽分化频率。在不定芽伸长过程中,生长调节剂最佳浓度为0.5mg·L-16-BA+0.1mg·L-1IAA。潮霉素是较合适的筛选抗生素。     

黄瓜种子萌发过程中Ca~(2 )分布的变化

采用细胞化学方法 ,研究了黄瓜种子中贮藏Ca2 的分布特点及其在萌发过程中的变化动态。干种子的子叶细胞中贮藏有大量的蛋白体、油脂体 ,Ca2 沉淀颗粒大量分布于胞质、胞间隙以及细胞质膜上。大多数蛋白体中有 1至数个圆球形或椭圆体形含Ca2 的球状晶体。相比之下 ,胚芽和胚根细胞中Ca2 较少。种子萌发早期 ,子叶中的贮藏钙及晶体溶解释放出的Ca2 部分转运到生长发育中的胚芽和胚根中。随着萌发的继续 ,胚根和胚芽细胞中的Ca2 不会持续增多 ,反而下降     

金瓜和白瓜花叶病毒病病原的初步鉴定

崇明是上海出口蔬菜生产基地之一,也是国家级的绿色食品园区之一,具有生产绿色蔬菜商品的生态环境和资源优势。特色出口蔬菜金瓜(Cucurbita pepo L.var.ovifera)、白瓜(Cucumis melo L.var.conomon,又名盐渍菜瓜)1997～1999统计病毒病发病率为23％,被感染的金瓜、白瓜田     

Genetic difference in somatic embryogenesis from seeds in melon (Cucumis melo L.)

Significant differences in somatic embryogenesis from melon seeds were observed among 18 cultivars; especially, cultivars Earl's Favorite and Barnett which produced a large number of somatic embryos. F₁ seeds were obtained by reciprocal crosses between cultivars. Some lines produced a large number of somatic embryos whereas others showed no or poor embryogenic response. Most of the F₁ seeds formed somatic embryos. The frequency of somatic embryogenesis decreased as compared to the parents with the highest potential. Transfer of the frequency of somatic embryogenesis from superior responding cultivars to inferior cultivars was proved. It was difficult to determine the mode of inheritance of somatic embryogenesis because there was a large variation in the range of somatic embryogenesis from F₂ seeds, and cytoplasmic effect was recognized in certain combinations.Abbreviations 2,4-D 2,4-dichlorophenoxyacetic acid - BAP 6-benzylaminopurine