圆叶节节菜的化学成分研究

从圆叶节节菜地上部分乙酸乙酯层中分离得到8个化合物,经波谱学方法分别鉴定为pomolic acid 3β-acetate(1),7-oxo-β-sitosterol(2),6β-hydroxystigmast-4-en-3-one(3),esculetin(4),phyllemblin(5),1,2-O-di-galloylglycerol(6),apigenin(7),quercetin(8),以上化合物均为首次从该植物中分离得到。化合物(6)在GK,SIRT1激动活性及DPPIV,11β-HSD抑制活性等抗糖尿病体外活性测试中均无明显的活性。     

3β-羟基类固醇脱氢酶基因的克隆表达及其性质研究

目的:构建3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)异源表达系统,进一步探究其酶学性质。方法:通过分子生物学方法克隆来源于Mycobacterium neoaurum菌株的3β-羟基类固醇基因,构建重组质粒,运用HPLC方法检测酶反应体系的产物。结果:本实验构建了表达载体pet28a-hsd。优化诱导表达条件,发现3β-HSD异源表达的最适温度为16℃~25℃,37℃时蛋白表达为包涵体。此外,同一温度下不同IPTG浓度诱导的表达结果差异不大。利用纯化后的蛋白进行酶特性的研究,结果表明在3β-HSD酶反应体系中,30℃达到较高的酶活性;pH 7.5~9.0之间,酶活力较强,pH低于7.0时,酶活性明显下降;有机助溶剂DMSO对酶反应有抑制作用;Fe~(3+)和Cu~(2+)对酶反应有抑制作用。结论:本实验探究了分枝杆菌中3β-羟基类固醇脱氢酶的相关性质,为进一步研究该酶在类固醇代谢中的功能提供基础。     

钙、铝金属元素螯合对燕麦多肽DPP4抑制活性的影响

目的：研究多肽LQAFEPLR（LQ8）和EFLLAGNNK（EF9）与金属元素螯合后,多肽金属螯合物的活性及水解后结构的变化。方法：测定多肽LQ8和EF9与钙和铝分别螯合后,对二肽基肽酶IV（DPP4）抑制活性,并将多肽进行体外模拟水解,测定体外模拟水解产物对DPP4的抑制活性的变化,测定多肽螯合金属元素前后和水解前后的傅里叶红外光谱。结果：多肽LQ8和EF9分别螯合钙和铝后,EF9-Ca和EF9-Al对DPP4的抑制活性升高,LQ8-Ca和EF9-Ca在的红外光谱在酰胺I带发生红移;LQ8和EF9的水解产物LQ8-H和EF9-H对DPP4的活性显著下降,水解产物的红外光谱发生了变化,而多肽金属螯合物的DPP4抑制活性基本不会随着水解而发生变化,且其红外光谱图基本保持不变。结论：合成多肽LQ8和EF9的金属螯合物可抑制多肽发生水解,保持多肽的活性。     

红豆树枝条化学成分及抗炎活性研究

采用D101大孔吸附树脂、硅胶、凝胶和制备高效液相色谱等柱色谱方法,对红豆树枝条70％乙醇水提取物进行系统分离,并结合现代波谱学手段对分离的化学成分进行结构鉴定,从中分离鉴定11个黄酮及其苷类化合物.分别为3',4',7-三羟基-5-甲氧基异黄酮(1)、3',4',5,7-四羟基二氢异黄酮(2)、染料木苷-5,4 '-...     

肾上腺皮质细胞的单层培养方法

目的: 体外单层培养大鼠肾上腺皮质细胞,以便为肾上腺皮质细胞的有关实验提供必要条件.方法: 采用胶原酶Ⅱ、透明质酸酶消化等步骤分离Wistar大鼠的肾上腺皮质细胞;分离的细胞于含15% NBS的DMEM培养基、37℃、5% CO2的环境中培养,3β-羟基类固醇脱氢酶特异染色鉴定.结果: 培养的肾上腺皮质细胞呈梭形,胞体较大、有少量突起,3β-羟基类固醇脱氢酶特异染色后胞体显著着蓝色.肾上腺皮质细胞不呈典型的"S"形增殖趋势,适于作原代培养.上皮样细胞和成纤维样细胞同时存在.结论: 通过细胞形态观察及特异酶染色鉴定,本文培养的细胞为大鼠肾上腺皮质细胞.     

小鼠17β-hsd10的克隆、表达及双抗夹心ELISA方法的建立

原核表达小鼠17β-羟基类固醇脱氢酶(17β-hsd10),制备抗17β-hsd10多克隆抗体,建立17β-hsd10双抗夹心酶联免疫检测方法 (Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)。采用RT-PCR技术克隆得到小鼠肝脏17β-hsd 10基因,构建原核表达体系p ET15b-17β-hsd10/Escherichia coli BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白表达,并优化表达条件;目的蛋白用His融合蛋白纯化柱(His-Binding-resin)纯化并免疫BALB/c小鼠和新西兰大耳白兔,免疫血清总Ig G采用硫酸铵沉淀法纯化,用获得的高效价鼠源和兔源两种多克隆抗体,建立17β-hsd10双抗夹心酶联免疫检测方法。表达蛋白约为29.5 k Da,纯化后浓度为1.5 mg/m L,鼠源和兔源多克隆抗体效价分别为1.25×104和2.5×104,建立的检测方法对于多种羟基类固醇脱氢酶无交叉反应,特异性良好,可检出含量约为0.05-0.1μg/m L的阳性血清。建立的17β-hsd10双抗夹心ELISA方法,简便、快速、敏感,适合实验室研究科研广泛应用。并可能为检测阿尔茨海默病提供新思路和方法。     

沼渣化学成分研究

采用硅胶、凝胶柱层析方法对鸡场沼渣甲醇提取物化学成分进行分离纯化,并结合波谱方法分析鉴定得到6个化合物,分别是:β-谷甾醇(1)、22β-羟基-12-齐墩果烯-3-酮(2)、21β-羟基-β-白檀酮(3)、29-羟基-12-土当归烯-3,22-二酮(4)、17β-雌二醇(5)和S(-)-雌马酚(6)。这些成分均首次从鸡场沼渣中分离得到。有研究表明,21β-羟基-β-白檀酮在IC5027.4μM就具有很好的抗肠贾第虫(Giardia intestinalis)活性。许多流行病学研究和动物实验、体外实验表明,S(-)-雌马酚有助于妇女更年期症状的改善、保护心血管、缓解骨质疏松症及抗乳腺癌、前列腺癌等保护作用。     

白菊木树皮的化学成分及其抗炎活性研究

为了解白菊木[Gochnatia decora(Kurz)A.L.Cabrera]的化学成分,从其树皮甲醇提取物的石油醚萃取部位分离出11个化合物,分别鉴定为木栓酮(1)、木栓醇(2)、齐墩果酸(3)、齐墩果烯(4)、豆甾醇(5)、β-谷甾醇(6)、棕榈酸(7)、正十五烷酸(8)、十四烷酸-1-甘油酯(9)、对羟基苯甲酸甲酯(10)和没食子酸甲酯(11),所有化合物均为首次从白菊木属植物中发现。采用脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7产生一氧化氮(NO)模型和中性粒细胞弹性蛋白酶抑制试验对单体化合物1~4进行了抗炎活性测试,结果表明,化合物1、3和4具有明显的NO抑制活性(IC5010μmol L–1),化合物2、3和4具有一定的中性粒细胞弹性蛋白酶抑制活性。     

鹊肾树心材的化学成分及体外抗菌活性研究

本文研究鹊肾树Streblus asper心材的乙酸乙酯部分化学成分及体外抗菌活性.运用正相硅胶柱色谱层析,反相C-18柱色谱层析和Sephadex LH-20分高、纯化,最终得到8个化合物,经波谱解析并结合理化鉴定确定化合物结构为:银杏双黄酮(1)、异黄酮-4′-甲氧基-7-α-L-鼠李糖-(1→6)-β-D-葡萄糖(2)、鼠李柠檬素-3-O-β-D-半乳糖苷(3)、β-香树脂酮(4)、β-谷甾醇(5)、香革酸(6)、山俞酸(7)、二十六烷酸(8).除化合物5外,均为首次从该植物中提取到.此外研究了化合物1-4的抗菌活性,实验表明化合物2具有一定的抑菌活性.     

毛花猕猴桃三萜化学成分的研究

从毛花猕猴桃(Actinindia eriantha Benth)的根部分离到3个三萜成分,经光谱和化学转化证明,R_(18)为2β,3β-二羟基-23-氧代-12-烯-28-乌苏酸,系一新化合物,其余两个成分分别为2α,3β,23-三羟基-12-烯-28-乌苏酸(R_(17))和2α3β-二羟基-12-烯-28-乌苏酸(R_(16))。     

兖州卷柏化学成分及体外抗菌活性研究

本文研究兖州卷柏Selaginella involvens Spring.的化学成分及体外抗菌活性.运用反复色谱层析进行纯化分离得到7个化合物,经波谱解析结合理化鉴定确定化合物结构为:正十六烷酸(1),正十八烷酸(2),β-谷甾醇(3),豆甾醇(4),穗花杉双黄酮(5),β-D-glucopyranoside,(3β)-cholest-5-en-3yl(6),β-香树脂醇(7).化合物1～7均首次从该植物中分离得到,6和7首次从该属植物中分离得到.此外研究了化合物5、6和7的体外抗菌活性.化合物5、6和7可能为兖州卷柏抗肺炎病菌的主要物质基础.     

酪氨酸对未成年大鼠卵巢Δ~5-3β-羟类固醇脱氢酶活性的影响

利用PMSG(妊娠母马血清促性腺激素)及HCG(人羢膜促性腺激素)处理的未成年大鼠卵巢匀浆,通过测定Δ~5-3β-羟类固醇脱氢酶(HSD)活性,研究了酪氨酸影响孕酮的代谢机理。结果表明,同一浓度的酪氨酸(60微克/毫升)加到排卵后不同时间(12—72小时)的卵巢匀浆中,Δ~5-3β-HSD活性增加,并随着时间延长有逐渐增加的趋势。酪氨酸组同对照组间差异非常显著(P<0.001),不同浓度的酪氨酸(30—160微克/毫升)加到排卵后同一时间(24小时)的卵巢匀浆,也能提高Δ~5-3β-HSD活性,酪氨酸组与对照组间差异非常显著(P<0.001)。     

迷迭香水溶性物质及抗菌活性研究

采用硅胶柱色谱等方法对迷迭香水溶性提取物进行分离纯化,用^13C NMR、^1H NMR、Ms等方法鉴定出3个化合物：迷迭香酸（1）、香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸甙（2）、木犀草素（3）,其中香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸甙为首次从该植物中发现。对化合物2进行体外抑菌实验,结果为：对金色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌均有一定的抑菌作用。     

连香树树皮化学成分的研究

从连香树（Cercidiphyllum japonicum Sieb. et Zucc.）树皮中分离到8个化合物。其中7个为黄酮醇,1个为酚酸类成分。经理化测定和波谱解析,分别鉴定为5,7-二羟基-3,8,4′-三甲氧基黄酮 (Ⅰ)、3,5,7-三羟基-8,4′-二甲氧基黄酮 (Ⅱ)、5,7,4′-三羟基-3,8-二甲氧基黄酮 (Ⅲ)、3,5,7,4′-四羟基-8-甲氧基黄酮 (Ⅳ)、3,5,7,4′-四羟基黄酮 (Ⅴ)、5,7-二羟基-8,4′-二甲氧基黄酮-3-O-葡萄糖甙 (Ⅶ)、5,7,4′-三羟基-8-甲氧基黄酮-3-O-葡萄糖甙 (Ⅷ)和没食子酸乙酯 (Ⅵ)。其中化合物Ⅶ为未见报道的新化合物。除化合物Ⅴ外,其余化合物均为首次从该属植物中分得。     

毛头鬼伞子实体化学成分及抗糖尿病活性初探

从毛头鬼伞子实体中萃取得到乙醇、乙酸乙酯、石油醚3种有机提取物,采用α-葡萄糖苷酶活性抑制实验对3种有机提取物的抗糖尿病活性进行评价,结果显示,乙酸乙酯提取物对α-葡萄糖苷酶有较强的抑制活性。采用柱层析技术从乙酸乙酯提取物中分离纯化出10种化合物,经核磁等方法鉴定为：（1）顺,顺-9,12-十八(碳)二烯酸;（2）顺式-9-十八烯酸;（3）(22E,24R)-麦角甾烷-5,7,22-三烯-3β醇;（4）3β-5α-6α-22E-麦角甾-7,22-双烯-3,5,6-三醇-6-亚油酸酯;（5）3β-5α-6α-22E-麦角甾-7,22-双烯-3,5,6-三醇-6-油酸酯;（6）邻苯二甲酸二异丁酯;（7）对羟基苯乙醇;（8）4-羟基苯乙基乙酸酯;（9）3-(4-羟基-3-甲氧苯基)败脂酸;（10）N-反式-3,4亚甲二氧基肉桂酰基-3-甲氧基酪胺。对分离化合物的α-葡萄糖苷酶活性抑制实验结果显示,N-反式-3,4亚甲二氧基肉桂酰基-3-甲氧基酪胺对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制活性,其IC₅₀值为4.17mg/mL。     

分枝杆菌HGMS2中类固醇C20-羟基脱氢酶的鉴定

分枝杆菌常被用作甾体药物中间体生产菌种,然而当前人们对其具体的甾醇降解机制仍然不是很清楚。为了获得C20-羟基甾药中间体,文章直接以RS为底物进行了转化,并通过对转化产物进行TLC、HPLC、LS-MS和核磁分析,初步确定分枝杆菌中存在类固醇C20-羟基脱氢酶（1DHC）参与的代谢途径。同时,基于生物信息学和结构生物学,通过序列和结构比对分析,最终从分枝杆菌中鉴定出了一个与类固醇C20-羟基脱氢酶同源性很高的基因。将该基因在大肠杆菌中异源表达,并对其功能活性进行分析,证明该基因所编码的酶和类固醇C20-羟基脱氢酶具有相同的功能活性。文章首次从分枝杆菌中鉴定出一种类固醇C20-羟基脱氢酶,使研究者对分枝杆菌甾醇代谢机制有了更深入的理解,同时也为新型甾药中间体的制备以及分枝杆菌的改造奠定了理论基础。     

连香树树皮化学成分的研究

从连香树（CercidiphyllumjaponicumSieb.etZucc.）树皮中分离到8个化合物。其中7个为黄酮醇,l个为酚酸类成分。经理化测定和波谱解析,分别鉴定为：5,7-二羟基-3,8,4'-三甲氧基黄酮（Ⅰ）、3,5,7-三羟基-8,4'-二甲氧基黄酮（Ⅱ）、5,7,4'-三羟基-3,8-二甲氧基黄酮（Ⅲ）、3,5,7,4'-四羟基-8-甲氧基黄酮（Ⅳ）、3,5,7,4'-四羟基黄酮（Ⅴ）、5,7-二羟基-8,4'－二甲氧基黄酮-3-O-葡萄糖甙（Ⅶ）、5,7,4'-三羟基-8-甲氧基黄酮-3－O-葡萄糖甙（Ⅷ）和没食子酸乙酯（Ⅵ）。其中化合物Ⅶ为未见报道的新化合物。除化合物Ⅴ外,其余化合物均为首次从该属植物中分得。     

钻地风挥发油化学成分及抗炎活性的研究

为了研究钻地风挥发油的化学成分及其抗炎药效,我们采用水蒸气蒸馏法提取钻地风挥发油并用气相色谱-质谱(GC-MS)技术分析,分别用佛波酯醇(PMA)或二甲苯(xylene)诱导小鼠耳肿胀,在致炎部位外涂钻地风挥发油以观察疗效.从钻地风挥发油中分离并鉴定了24个组分,占总峰面积含量的96.01%,主要由萜类、芳香羟类成分构成,分别为(E)-1,2-亚甲二氧基-4-丙烯基-苯(23.47%),桉树脑(11.503%),芳樟醇(9.558%),β-松油醇(9.201%),α-蒎烯(7.185%)等,实验显示钻地风挥发油外用可以显著抑制佛波酯醇或二甲苯诱导的小鼠耳肿胀.     

柴胡红景天化学成分的研究

采用正相与反相硅胶柱色谱和薄层色谱分离纯化的方法,从景天科红景天属植物柴胡红景天(Rhodiola bupleuroides)根茎70%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部分中分离得到7个化合物,用光谱分析(UV,IR,MS,1H-NMR,13C-NMR)和化学反应鉴定化合物分别为:没食子酸(1)、山奈酚-7-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(2)、草质素-7-O(3″-O-β-D-葡萄糖基)-α-L鼠李糖苷(3)、槲皮素(4)、丁香酸(5)、3,5-二甲氧基-4-羟基-苯甲酸-7-O-β-D-葡萄糖苷(6)、β-谷甾醇(7).以上化合物均为首次从该植物中分离得到,其中化合物5和6为首次从红景天属植物中发现.     

扁桃叶的化学成分研究

从芒果属植物扁桃(Mangifera persiciformis C.Y.Wu et T.L.Ming)叶乙醇提取物乙酸乙酯萃取部位中分离得到7个化合物,经波谱鉴定为没食子酸甲酯(1),没食子酸(2),3,4-二羟基苯甲酸(3),槲皮素(4),山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(5),槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(6)和芒果苷(7).其中化合物1、3、5、6为首次从该植物中分离得到.