对叶百部化学成分液相行为研究北大核心CSCD

本文对对叶百部化学成分HPLC行为进行了细致研究并尝试了一种新的HPLC测定方法,全面考察了流动相组成及pH值变化对百部生物碱及非生物碱HPLC行为的影响,并首次应用pH梯度洗脱HPLC色谱法进行不同产地对叶百部非生物碱成分比较分析。结果表明流动相组成及pH值变化对对叶百部化学成分HPLC行为有较大影响,尤其是pH值对生物碱色谱峰峰形及非生物碱色谱峰保留时间影响更大。HPLC图谱显示不同产地对叶百部生物碱成分差异显著,非生物碱成分相似度较高。同时发现,本文所应用pH梯度洗脱HPLC色谱法在实现较好色谱峰分离基础上,有效抑制基线漂移。     

伊枯草菌素A发酵过程中游离氨基酸的HPLC分析

建立一种快速、高效测定游离氨基酸含量的异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生高效液相色谱法,并利用此方法分析检测iturin A发酵过程中游离氨基酸的动态变化。以异硫氰酸苯酯(PITC)为衍生化试剂,采用Venusil-AA(4.6 mm×250 mm,5μm)氨基酸分析专用柱,并优化HPLC检测色谱条件。结果表明:梯度洗脱程序、流动相pH值、色谱柱温对分析时间、色谱峰分离及峰型具有重要影响。当最优色谱条件为:流动相A为0.1 mol/L无水乙酸钠缓冲溶液(pH6.4±0.1)-乙腈(66∶5),流动相B为乙腈-水(4∶1),流速1.0 mL/min,检测波长254 nm,色谱柱温40℃,梯度程序洗脱,35 min内可完全分离16种氨基酸,且各氨基酸在一定浓度范围内线性关系良好(R2均大于0.9986),加标回收率在83.84%-108.02%之间,RSD值均小于2.77%。该方法耗时短、操作简便、准确可靠,具有良好的精密度和稳定性。通过此方法研究分析伊枯草菌素A发酵过程中各游离氨基酸含量变化规律,发现其氨基酸浓度变化规律大致分为三类。     

冬凌草二萜类成分的化学指纹图谱研究及评价

为了建立冬凌草(Rabdosia rubescens)二萜类成分的HPLC指纹图谱,并通过指纹图谱对来自不同产地和不同类型的冬凌草进行评价,本研究以10批太行山产冬凌草HPLC色谱图为参照,建立了冬凌草二萜类成分的指纹图谱,色谱条件为,色谱柱:phenomsil C18(250 ×4.6 mm,5 μm)柱;流动相:甲醇:0.5％磷酸水溶液梯度洗脱;柱温:30℃;检测波长:238 nm;流速:0.8 mL/min.通过化学成分指纹图谱相似度分析以及主成分分析方法,综合评价不同产地冬凌草样品质量的差异.结果表明冬凌草种质资源出现多种分化,不同地区冬凌草二萜类成分差异明显;不同变异类型冬凌草二萜类成分也发生了变化,但没有明显规律性.     

不同产地桔梗HPLC指纹图谱及化学模式识别研究

为建立桔梗HPLC指纹图谱并对其质量控制方法进行探讨。研究采用YMC Hydrosphere C₁₈分析色谱柱(250×4.6 mm,5μm),以水和乙腈为流动相进行梯度洗脱,检测波长210 nm。建立不同产地15批桔梗药材HPLC指纹图谱。采用相似度评价、聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘判别分析等化学模式识别方法对不同产地桔梗质量及其控制方法进行分析和评价。建立的桔梗HPLC指纹图谱共标定21个共有峰,并通过对照品指认其中7个成分;不同产地桔梗相似度在0.927～0.991之间;聚类分析和主成分分析结果都将15批桔梗分为3类,利用正交偏最小二乘判别分析筛选出造成桔梗差异的13个色谱峰。本研究建立的HPLC指纹图谱结合化学模式识别的方法简便准确,能够为桔梗的质量控制和品质评价提供依据。     

芦荟的HPLC指纹图谱建立、化学模式识别分析及其含量测定

采用Phenomenex C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以甲醇-乙腈-0.3％磷酸水为流动相进行梯度洗脱,建立芦荟的指纹图谱.运用化学模式识别方法对不同产地芦荟药材质量控制方法进行评价.结果表明:12批芦荟HPLC指纹图谱共标定23个共有峰,并通过对照品指认其中6个成分;除了广西的3批药材之外,...     

不同产地西洋参皂甙成分的HPLC分析

以西洋参的主要皂甙成分人参皂甙Re和Rb1为标准对照品 ,建立西洋参药材的HPLC定量分析技术 ,并参考人参皂甙Rc,Rd及Rg2 的相对峰面积进行主成分分析。色谱条件为 :C18柱 (5 μm ,3.9× 15 0mm) ,乙腈 :水流动相 ,二元梯度洗脱 ,检测波长 2 0 3nm。结果表明 ,就皂甙成分的组成与含量而言通过人参皂甙Re和Rb1的含量测定和皂甙的主成分分析 ,不同产地的西洋参药材皂甙成分存在一定的差别。吉林省靖宇县产的西洋参与进口品最为接近。     

毛脉酸模不同生长发育期HPLC色谱指纹图谱研究

采用HPLC-DAD方法,梯度洗脱,对10批不同生长发育期毛脉酸模根样品进行主成分分析。色谱条件为:Planetsil C18分析柱(5μm, 200 mm×4.6 mm),预柱Phenomenex ODS-C18(4×3.0 mm ID),柱温40℃,流动相A为甲醇;流动相B为水(磷酸调pH值为2.0),流动相A从30%甲醇到100%甲醇,时间为0~50 min,检测波长254 nm。10批毛脉酸模样品得到的色谱指纹图谱有27个共有峰,其特征峰指纹图谱可分为Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ三组:第Ⅰ组包括0~17 min(1~14号峰),第Ⅱ组包括17~35 min(15~24号峰),第Ⅲ组包括35~50 min(25~27号峰)。HPLC-DAD方法分析毛脉酸模主成分,方法准确可靠,其本身具有多成分同时定性的优势;27个共有峰的出峰先后顺序及相对含量极具特征性、专属性,重复性好,形成了毛脉酸模特有的HPLC色谱指纹图谱,可作为毛脉酸模内在质量评价、鉴定及其最佳采收期确定提供科学依据。     

雪莲培养物高效液相色谱指纹图谱研究

目的:采用高效液相色谱法(HPLC)建立雪莲培养物指纹图谱。方法:以紫丁香苷为参照物,采用梯度洗脱HPLC法建立雪莲培养物指纹图谱,并进行相似度评价和聚类分析。色谱柱为CAPCELL PAK C18(4.6 mm×250mm,5μm),流动相A为0.1%TFA/水,流动相B为0.1%TFA/乙腈,梯度洗脱,检测波长260 nm。结果:建立了雪莲培养物指纹图谱,方法的精密度、稳定性、重现性较好,共标示出9个共有峰。结论:该法为雪莲培养物的鉴定提供了依据,其指纹图谱可用于雪莲培养物的质量控制。     

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术的江西特产中药茶芎化学成分研究

茶芎是江西省九江地区的特产中药材之一,其药效物质基础尚不明确,故采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS/MS)对茶芎的化学成分进行快速分析及鉴定。采用Titank C₁₈(100 mm×2.1 mm, 1.8μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.25 mL/min,进样量为3μL;选择电喷雾离子源分别在正、负离子模式下扫描分析,通过保留时间、精确相对分子质量和二级质谱裂解碎片,对所得成分的主要色谱峰进行鉴定。结果显示从茶芎中共鉴定出72个化学成分,主要包括苯酞类成分33个,有机酸类成分32个,生物碱类成分5个,其他类成分2个。该研究建立的UPLC-Q-TOF-MS/MS方法可以快速准确且较全面地分析鉴定茶芎中的化学成分,可为其质量控制及药效物质基础研究提供科学依据。     

鹅不食草液相色谱指纹图谱及化学成分表征

目的:建立鹅不食草的HPLC指纹图谱,并对其化学成分进行表征。方法:指纹图谱采用Alltima~(TM)C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温为35℃,流动相为乙腈-0.2%磷酸溶液,梯度洗脱;流速为1.0 m L/min;检测波长为290 nm,进样量为20μL。成分表征采用UPLC-QTOF-MS分析,Waters ACQUITY HSS T3(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱,0.1%甲酸乙腈(A)-0.1%甲酸水(B)梯度洗脱,ESI离子源,正离子与负离子模式下采集数据。结果:通过12批鹅不食草的HPLC指纹图谱分析,确定了13个特征峰,12批样品的相似度在0.837~0.997之间;UPLC-QTOF-MS鉴别出26个化学成分,其中Dulcoside A、Kaurane pentanedioic acid derivative及3’,4’-didesulphatedcarboxyatractyloside等二萜苷类化合物系首次在鹅不食草药材中发现。结论:本研究建立的HPLC指纹图谱和化学成分表征信息具有"全息"特征,可为鹅不食草药材整体质量评价提供科学依据。     

坚龙胆环烯醚萜甙的HPLC分析

应用HPLC分析方法,建立了坚龙胆中5个主要环烯醚萜甙的含量测定方法。在ZORBAXSB—C18色谱柱,乙腈-0．2％磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1．0mL/min,柱温为40℃,检测波长254nm的色谱条件下,化合物得到良好的分离,并具线性相关。本方法操作简便,重现性好,灵敏度高。对不同产地的样品进行比较分析的结果表明,产地对坚龙胆中环烯醚萜甙的组成和含量有显著的影响。     

陕西秦艽药源植物及秦艽药材HPLC的比较研究

目的:系统比较研究秦艽药材与其药原植物间主要化学成分的差异。方法:高效液相色谱法,色谱柱:Diamonsil C18(200 mm×4.6 mm,5um);洗脱条件:乙腈-水溶液梯度洗脱;检测波长:240 nm;柱温:30℃;流速:0.5 mL.min-1。结果:陇县、太白秦艽中龙胆苦苷含量明显高于市售秦艽药材;通过确定7个共有峰建立陕西秦艽HPLC指纹图谱,所测定的29批秦艽药材具有很高的相似度,而秦艽伪品相似度较低。采用HPLC各峰面积及其相对之比进行聚类分析结果显示,采自太白的10个样本和陇县的8个样本分别聚为两支,表明秦艽化学成分含量与其地理分布存在密切关系。结论:本实验建立的指纹图谱可用于秦艽及其药材鉴别和质量控制;聚类分析可以鉴别秦艽产地。     

对叶百部药材中四种主要生物碱的分布规律

目的:了解百部药材中主要生物碱的含量和分布规律,为百部药材的质量控制提供依据。方法:采用反向HPLC-ELSD方法对百部药材中4种主要生物碱金刚大碱、百部新碱、新对叶百部碱和对叶百部碱的含量就行了测定,以0.1%三乙胺-甲醇(43∶57)为流动相,Agilent C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温30℃,流速1m L/min;ELSD漂移管温度为80℃,氮气流速为2.1 m L/min,增益为8。结果:83批百部药材含金刚大碱、百部新碱、新对叶百部碱和对叶百部碱的药材分别有27、48、22和48批,其平均含量分别为1.98、4.75、3.73和5.34 mg/g;含有1~4种生物碱的药材分别有38、28、17和0批次,其中对叶百部碱与其余三种生物碱中任意一种同时出现的概率较高;购于安徽亳州和广州清平药市的药材不含新对叶百部碱。结论:本文建立的含量测定方法简便、准确、可靠;含量测定结果说明4种生物碱在药材中的分布具有趋单性,仅含一种生物碱的药材占45.8%,含2种及以上生物碱的药材占54.2%。本文研究结果对于对照品短缺情况下,对购买百部药材化学成分的预测具有一定的指导意义。     

黄连-黄芩药对化学成分的UPLC-PDA-MS分析

本文建立了黄连-黄芩药对化学成分的UPLC-PDA-MS分析方法。实验采用ACQUITY UPLC BEH C18柱,流动相为0.05%甲酸水和甲醇梯度洗脱;检测波长280 nm;MS一级全扫描模式。综合分析标准品及不同样品的色谱峰保留时间、紫外光谱及MS一级全扫描质谱图,归属了黄连-黄芩提取液中的12个主要色谱峰,鉴别出8种成分,推断出2种成分,同时对鉴别出的8种成分进行了定量,被测成分在线性范围内均具有良好的线性关系(r≥0.9991),精密度、重复性的RSD均小于5.0%,加样回收率基本在95%～105%内。本方法快捷、准确,重复性好,能同时测定8个主要化学成分,可较全面地控制黄连-黄芩药对化学成分的含量。     

大黄药材蒽醌成分的HPLC指纹图谱研究

以大黄酚为参照物,利用高效液相色谱梯度洗脱,测定了10批大黄样品,建立以大黄药材蒽醌及衍生物成分为特征的指纹图谱,色谱柱为YMC-ODS-AQC18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈(A)-0.2%磷酸水(B),检测波长270 nm,柱温25℃,流速1.0 mL/min,通过高压液相指纹色谱分析,鉴定了13个色谱峰的化学成分,找出24个共有峰,相似度均大于0.92。本文所建立的方法可作为大黄药材质量控制。     

伤口愈合肽HPLC分析方法的研究

目的：研究高效液相色谱法（HPLC）分析伤口愈合肽的方法。方法：HPLC测定用Kromasil-C18色谱柱（250mm＊4.6mm,5滋m）,拟确定的色谱条件为：二元线性梯度洗脱,流动相A：0.1%三氟乙酸水溶液;流动相B：0.1%三氟乙酸50%乙腈,流速为1ml/min,检测波长为215nm。结果：线性梯度洗脱条件：起始流动相为A70%：B30%,洗脱最终流动相为A30%：B70%;伤口愈合肽浓度在0.1-0.3mg/ml内,其标准曲线的相关系数为R2=0.9998,回归方程为：y=237.19x-0.3249;日内、日间相对标准偏差都不大于2%;重复性的相对标准偏差都小于药典规定的2.0%。结论：该方法稳定性、重复性良好,符合伤口愈合肽新药研究的实验检测要求。     

HPLC法测定葛花中鸢尾苷的含量

目的：测定8个产地葛花中鸢尾苷的含量,建立葛花中鸢尾苷含量测定的HPLC方法。方法：采用GRACEC18（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱,流动相为乙腈-水梯度洗脱,流速为0.8mL/min,紫外检测波长为265nm;柱温为室温。结果：鸢尾苷的峰面积（Y）与浓度（X）在11.8～236.4μg/mL范围内具有良好线性关系,Y=34920X-1156.5,r=0.9995（n=7）;平均加样回收率为103.66%,RSD〈2%（n=9）;测得8批不同产地的葛花药材中鸢尾苷含量在37.00～113.1mg/g。结论：建立了高效液相色谱法测定葛花中鸢尾苷含量的方法,该法准确、可靠,可用于葛花中主要成分鸢尾苷的含量测定;不同产地葛花中均检测到鸢尾苷,但其含量有一定区别。     

基于指纹图谱结合化学模式识别法评价不同产地睡莲花药材质量CSCD

建立睡莲花HPLC指纹图谱,并对5种成分进行含量测定,结合化学模式识别法,综合分析各产区睡莲花药材的成分差异,为睡莲花药材的进一步开发利用奠定基础。采用Waters C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),以乙腈(A)-0.2%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长273 nm、350 nm。在273 nm下标定23个共有峰,指认了5种化学成分,350 nm标定17个共有峰,指认了4种化学成分。对15批样品聚类分析,在273 nm下分为4类,350 nm下分为3类。正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)共找到273 nm的10个可能影响睡莲花药材质量的差异性标志物。15批样品相似度为0.972~0.999,表明不同批次睡莲花样品存在差异。该方法可有效评价不同产地睡莲花药材的质量差异,为其质量控制提供参考。     

太行山区酸枣叶化学成分的UPLC-QTOF-MS分析

为评价冀南太行山产酸枣叶的质量,本研究采用超高效液相色谱-串联四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术对其化学成分进行系统分析。选用反相WatersBEHAmide(100mm×2.1mm,1.7μm)色谱柱,乙腈与水(含0.5%甲酸)作为流动相二元线性梯度洗脱,检测波长340nm,流速0.20mL/min,柱温40℃;以G2Q-TOF联用系统进行检测。通过得到的样品电喷雾-质谱(ESI-MS)正离子和负离子扫描模式下的准分子离子峰、碎片信息、保留时间,并结合相关文献,从酸枣叶中共鉴定出53个化合物,其中包括黄酮10个、三萜皂苷14个、三萜酸13个、生物碱3个、脂肪酸和有机酸13个。分析结果表明,UPLC-Q-TOF-MS技术可快速、灵敏地鉴定冀南太行山区酸枣叶中的化学成分,可为有效控制该药材质量,为阐明其药效物质基础提供理论依据。     

小鼠肠道菌群HPLC分析中色谱分离条件的优化

研究了在小鼠肠道菌群的高效离子交换色谱（HPLC）分析中,不同色谱分离条件对分离效果的影响,确立了最佳色谱条件：样品上样于Toyopearl TSKgel SuperQ-650c强阴离子交换树脂柱,以0.02mol/L哌嗪-HCl缓冲液（pH8.0）平衡,洗脱盐浓度为1.0mol/L NaCl,洗脱梯度为0.1-0.5mol/L NaCl线性梯度洗脱80min,再经0.5-0.75mol/L NaCl线性梯度洗脱25min,流速1mL/min,进样量为1mL。小鼠肠道菌群HPLC分析方法的建立,为深入研究小鼠肠道菌群的组成和动态变化奠定了基础。