高产Y-氨基丁酸酵母菌株的亚硝基胍诱变选育

目的：探讨亚硝基胍诱变选育高产Y-氨基丁酸酵母菌株的方法。方法：使用亚硝基胍对酵母菌株进行诱变;采用含溴甲酚绿的YEPD培养基筛选突变菌,采用薄层层析法和比色法鉴定变异菌株发酵液中的Y-氨基丁酸及其含量;对突变菌株连续继代培养4代,测定各代发酵液中Y-氨基丁酸的含量,鉴定诱变菌株的遗传稳定性：结果：亚硝基胍诱变酵母的最佳浓度为1．0g．L^-1,最佳诱变时间为15min;获得了5株突变菌株,菌落呈绿色;薄层层析法鉴定突变菌株都能产Y-氨基丁酸;诱变菌发酵液中的Y-氨基丁酸含量各异,但高于对照,且增长幅度很大;对突变菌株后代遗传稳定性进行了鉴定,结果表明突变菌株4遗传性较稳定。结论：采用1．0g．L^-1的亚硝基胍溶液处理酵母菌15min,经筛选鉴定,获得了一株遗传稳定的高产Y-氨基丁酸的酵母菌株。     

蛹虫草金属硫蛋白分离纯化及性质研究

研究探讨锌离子胁迫下蛹虫草Cordyceps militaris金属硫蛋白的产生及性质。蛹虫草菌丝体以15g/L Zn2+在10L发酵罐中诱导培养56h后收集,产率为每升发酵液收集12.021g菌丝体（干重）,细胞破碎取上清液通过两次凝胶柱层析,冷冻干燥得到蛹虫草金属硫蛋白纯品。利用Bradford法进行蛋白质含量测定,用银饱和分析法结合原子吸收光谱（AAS）测定MT含量,发酵终点处金属硫蛋白含量为12.876mg/g菌丝体（湿重）。用电喷雾质谱法测得金属硫蛋白的分子量为7 390Da,用Ellman’s方法和火焰原子吸收法分别测得每分子蛋白质含有14个巯基、结合5个Zn原子。氨基酸组成分析结果显示,每分子蛋白质共含57个氨基酸,其中含有13个半胱氨酸,疏水氨基酸占29.8%,且含有组氨酸。以上表明,研究中的蛹虫草金属硫蛋白与哺乳动物金属硫蛋白结构差异较大,但与酵母菌金属硫蛋白结构组成类似。     

一株优良啤酒酵母菌的筛选及性能检测

以朝阳啤酒厂的啤酒酵母菌CY3为出发菌株,在分离培养基中加入0.1%土霉素溶液,以发酵液中双乙酰含量为主要测定指标,同时测定发酵度、发酵速度、死灭温度、凝聚性等指标,从而筛选出1株优良啤酒酵母菌。     

高产γ-氨基丁酸酵母菌株的亚硝基胍诱变选育

目的:探讨亚硝基胍诱变选育高产γ-氨基丁酸酵母菌株的方法。方法:使用亚硝基胍对酵母菌株进行诱变;采用含溴甲酚绿的YEPD培养基筛选突变菌,采用薄层层析法和比色法鉴定变异菌株发酵液中的γ-氨基丁酸及其含量;对突变菌株连续继代培养4代,测定各代发酵液中γ-氨基丁酸的含量,鉴定诱变菌株的遗传稳定性。结果:亚硝基胍诱变酵母的最佳浓度为1.0g.L-1,最佳诱变时间为15min;获得了5株突变菌株,菌落呈绿色;薄层层析法鉴定突变菌株都能产γ-氨基丁酸;诱变菌发酵液中的γ-氨基丁酸含量各异,但高于对照,且增长幅度很大;对突变菌株后代遗传稳定性进行了鉴定,结果表明突变菌株4遗传性较稳定。结论:采用1.0g.L-1的亚硝基胍溶液处理酵母菌15min,经筛选鉴定,获得了一株遗传稳定的高产γ-氨基丁酸的酵母菌株。     

真菌菌丝体和发酵液的氨基酸分析比较

<正> 对云芝等7种真菌的菌丝体和发酵液分别测定17种氨基酸的含量,测定结果表明这些菌丝体中含有丰富的人体8种必需氨基酸,支链氨基酸及精氨酸,而芳香族氨基酸和含硫氨基酸却很低。7种真菌的菌丝体和它们的子实体,和三种食用蛋白(α-酪蛋白,卵白蛋白,大豆球蛋白)及4种粮食产品     

基因工程α-半乳糖苷酶的制备及其性质研究

在获得可分泌表达α 半乳糖苷酶基因工程毕赤酵母菌株的基础上 ,尝试了基因工程α 半乳糖苷酶在 5L发酵罐中的表达以及从发酵液中纯化α 半乳糖苷酶的研究。在 4L无机盐培养基中接种 0 .4LpPIC9K Gal GS115培养物 ,最终得到 3 .5L发酵液。离心所得上清中总蛋白含量为 2 .1g L。根据发酵液中目的蛋白含量高、杂质少等特点 ,设计了如下的纯化流程 :离心→超滤→阳离子交换层析→脱盐→浓缩。纯化后电泳银染结果呈单一蛋白带 ,总回收率 41%。通过测定米氏常数等生化性质对重组酶进行鉴定后 ,完成了人B型红细胞的酶解实验。结果表明 ,从发酵液中纯化的α 半乳糖苷酶可将B型红细胞改造成O型红细胞。本研究同时在数量和质量上为α 半乳糖苷酶在众多领域的广泛应用奠定了基础。     

食用真菌发酵豆浆过程中对豆浆中几种生物活性物质的影响

本实验以灵芝、金耳以及冬虫夏草作为发酵菌种,选用豆浆为基本原料配制培养基,在发酵过程中定时取样并测定其中几种生物活性物质的含量,分析各生物活性物质在发酵过程中的变化。研究结果表明,三种食用真菌发酵豆浆的发酵液中总游离型大豆异黄酮含量在发酵过程中均缓慢上升并分别在发酵72 h、24 h和36 h达到最高,与发酵初期相比分别增加了31.81μg/m L、19.05μg/m L和15.71μg/m L;三种食用真菌发酵液中蛋白质含量随着发酵时间的推移而降低的同时氨基酸含量均有增加,且发酵液中的肽主要是分子量范围在300 Da~1 500 Da之间的具有较高生物活性的小分子肽,发酵液中的必需氨基酸含量以及占总氨基酸含量的比值均有增加。本实验探究了食用真菌发酵豆浆过程中生物活性物质的变化,为日后的富集游离型大豆异黄酮、多肽以及氨基酸等生物活性物质实验提供依据,并为工业化生产提供实践基础。     

头孢霉AL031真菌氨基酸和无机元素分析

从一产生光敏活性物质的头孢霉AL0 31真菌的菌丝体和发酵液中 ,测得 1 6种氨基酸 ,总含量分别为 1 5.53%和 0 .0 1 5%。该真菌菌丝体中含 1 4种无机元素 ,发酵液中有无机元素 1 2种。以上结果 ,为进一步探讨该真菌的开发应用价值提供了依据。     

基于乙醇预处理的发酵液中丙氨酸RP-HPLC检测方法

在用RP-HPLC法C18色谱柱和紫外检测器检测发酵液中丙氨酸时,由于发酵液中存在丙酮酸,而丙酮酸对紫外吸收过强,且两者峰之间有重叠,导致无法准确检测出丙氨酸含量。为解决此问题,本文在RP-HPLC检测前首先对丙氨酸发酵液进行了乙醇沉淀预处理,实现了丙酮酸和丙氨酸在检测进样前的分离,消除了丙酮酸信号对丙氨酸的影响,能准确测定出丙氨酸含量。达到有效分离的发酵液与无水乙醇最佳比例为1∶14;经氨基酸自动分析仪检测发酵液中丙氨酸实际含量为92.60g/L;经RP-HPLC检测,沉淀中丙氨酸的含量为为92.04 g/L,丙氨酸的回收率高达99.40%。本研究利用乙醇对丙氨酸发酵液进行预处理,使RP-HPLC法可以运用于检测发酵液中丙氨酸含量,适用于工厂发酵生产过程中丙氨酸的快速检测。     

30种植物叶蛋白中氨基酸组成及含量的测定与营养价值评价

评价植物叶蛋白的营养价值,既要考虑“量”,看植物叶蛋白含量的高低,也要考虑“质”,看必需氨基酸的含量及配比[1]。作者取叶蛋白含量50%以上的30种植物进行氨基酸含量测定[2],并进行营养价值评价。1　方　　法应用日立83550型氨基酸自动分析仪进行氨基酸含量的测定,并与?..     

一株产碱性蛋白酶芽孢杆菌的筛选、鉴定及应用初探

为了筛选碱性蛋白酶产生菌并探讨其对蛋白质饲料的发酵效果,以肉粉厂表层土壤为菌株分离源,利用脱脂牛奶培养基分离和纯化蛋白酶产生菌,通过形态特征、生理生化和16S rRNA基因序列分析确定菌株的分类地位,并采用L9(33)正交设计研究筛选出的优势菌种的接种量(3％、6％和12％)、种子液培养时间(12 h、24h和48 h...     

小刺猴头菌发酵液小分子指纹图谱与多糖含量相关性研究

试验研究了小刺猴头菌发酵液小分子指纹图谱与多糖含量的相关性。在小刺猴头菌摇床培养发酵液整个发酵周期内取得的样品经石油醚、二氯甲烷和乙酸乙酯依次萃取,HPLC检测分析。选择二氯甲烷层的3种小分子物质含量为主要研究对象,通过SAS软件和SIMCA-P 11.5软件对其与发酵液多糖进行相关性分析。结果表明:发酵液二氯甲烷层的3,4,5号峰小分子与发酵液多糖在含量变化上呈极显著相关(P<0.01)。     

Improved brewing of millet beer – (OYOKPO) and production of single cell proteins from the spent grain

The improved method for preparing Oyokpo a Nigerian fermented beverage from millet, and the preparation of single cell proteins from the spent grain is described. Improvement of the brew was made by controlled malting, mashing and brewing with a pure culture of Saccharomyces cerevisiae. It had a reducing sugar content of 19.73 g/100 ml before fermentation and after fermentation 5.56% alcohol, 0.58 g/100 ml titratable acidity as acetic acid, a final pH of 4.2 and consisted of a yellowish clear liquid, slightly sour. The native brew had a reducing sugar content of 7.37 g/100 ml before fermentation and after fermentation, 2.40% alcohol, 0.43 g/100 ml titratable acidity, a final pH of 3.8 and consisted of a creamy yellowish liquid with a very sour taste. Fermented spent grain gave a higher protein yield compared to unfermented or ground millet. The lipids, proteins and crude fibre were 4.94%, 11.20% and 4.33% respectively for ground millet, 12,79%, 23.77% and 19.46% respectively for unfermented spent grain and 19.61%, 47.28% and 32.09% respectively for fermented spent grain. The high protein and fibre content of the fermented spent grain points to its potential as a feed supplement for ruminants.     

毕赤酵母工程菌表达乙肝表面抗原结合蛋白(SBP)的发酵纯化工艺研究

乙肝表面抗原结合蛋白(HBsAg binding protein,SBP)是以HBsAg为探针,通过人肝cDNA噬菌体表达库筛选的一种人源蛋白。SBP可特异性结合乙肝表面抗原(Hepatitis B virus surface antigen, HBsAg),增强乙肝疫苗的免疫效果,是一种潜在快速高效的免疫佐剂。成功构建了分泌型高表达SBP的毕赤酵母工程菌。对该菌株进行了放大规模发酵表达,并对纯化工艺进行了研究。在发酵实时检测过程中,自诱导剂甲醇加入开始,SBP蛋白的分泌表达量随时间推移而逐渐增加,发现于38h达到最佳水平且此时杂蛋白含量最少,是放罐收集菌液的最佳时间。18L发酵液在低温离心除菌体和沉淀物后可得到15L的上清液,再利用截留量为5kDa的超滤膜包将上清液浓缩至2L,将浓缩后的上清液依次通过S200分子筛柱和TDEAE阴离子交换柱进行分离纯化,可得到300ml浓度为1.125mg/ml、纯度达98%的目标蛋白液,发酵液得率为22.5mg/L;最后将蛋白液定量分装冻干低温保存。所获得的放大规模SBP发酵诱导表达条件和SBP蛋白的分离纯化工艺,为SBP蛋白大规模生产奠定了坚实的基础。     

Popular ovine and caprine fermented milks

Ovine and caprine milk are widely produced in semi-arid countries, and mainly utilised for milk consumption and the manufacture of a wide range of cheeses, fermented milk products (e.g. liquid, viscous, concentrated and dried) and to a lesser degree milk powder. The primary aim of this review is to provide a critical analysis of the main components of milk from different ovine and caprine breeds for the manufacture of fermented milk products, i.e. traditional and industrial. This paper reviews the latest scientific developments in fermented milks, including probiotic products, and recommendations to improve the characteristics of the final product(s). Although ovine milk is successfully used to manufacture many fermented milk products, the solids content of milk from certain breeds of caprine needs to be fortified to enhance the protein content and modify the processing conditions to ensure products acceptable to the consumer.     

Ultrafiltration of fermented broths and solvent extraction of antibiotics

Experiments of ultrafiltration with diafiltration were performed on fermented broths of benzylpenicillin and clavulanic acid produced at pilot scale at CIPAN, SA to achieve solid/liquid separation, antibiotic recovery and soluble protein retention. This study was done using a laboratorial/pilot scale ultrafiltration facility from Paterson Candy International Ltd. whose modules have a tubular configuration. PVDF membranes with a molecular weight cut-off of 100 000 (FP10) and 200 000 (FP200) were assessed. Comparison between solvent extraction of benzylpenicillin and clavulanic acid from filtered broth and ultrafiltered broth was also done. It was concluded that ultrafiltration with diafiltration of fermented broths of antibiotics using the FP10 membrane is a valid alternative to the use of rotary vacuum filters, flocculants and filter aid, deserving a further study to establish the best operating conditions. An economic appraisal also seems to be of paramount importance.To CIPAN-SA in which this work was done and where the fermented broths were produced. To JNICT/FSE for the funding of the project in the scope of which this work was done.     

天然茯苓和液体发酵茯苓粉末的研究

液体发酵茯苓为一种新型的发酵中药。本文在粉末显微特征、多糖、灰分和氨基酸含量等方面,对液体发酵茯苓粉末和天然茯苓粉末展开了研究。研究结果表明二者在显微特征和化学成分等方面均存在较大的差异,探讨了上述差异产生的原因。     

香茅草产香内生真菌的筛选及香气成分分析

从香料植物香茅草(Cumbopogon citratus (DC．)stapf)分离到31株内生真菌,进行液体发酵,有1株产生香味物质,这株菌的发酵提取物采用同时蒸馏萃取装置收集挥发性成分,并用气相色谱/质谱仪对其香味成分进行分离鉴定,共检出74种化合物,其中有乙缩醛二乙醇、柠檬烯、月桂烯、月桂醛等多种香料物质。     

有机物料发酵流体和堆肥对苹果连作土壤环境及平邑甜茶幼苗生物量的影响

为探讨不同有机物料的发酵流体(厌氧发酵产物)和堆肥(有氧发酵产物)对苹果连作土壤环境的影响,以盆栽平邑甜茶幼苗为试验材料,分别设置猪粪+秸秆、鸡粪+秸秆、羊粪+秸秆、猪粪+鸡粪+羊粪+秸秆4个不同有机物料组合并进行厌氧发酵和有氧发酵,并将发酵产物分别施入连作土中,研究其对平邑甜茶幼苗生物量、连作土壤中微生物、土壤酶活性、土壤酚酸等的影响。结果表明:与有机物料堆肥相比,各有机物料发酵流体处理的平邑甜茶幼苗干重、鲜重较高,其中猪粪发酵流体处理显著提高了幼苗干、鲜重,7月份为对照的1.57、1.26倍,9月份为CK的1.55、1.86倍;两类发酵产物均增加了土壤微生物的数量,且发酵流体处理显著增加了土壤中细菌和放线菌的数量,其中羊粪发酵流体效果最明显,分别为CK的2.95倍和2.37倍,在堆肥处理中,真菌数量显著增高;两类发酵产物也影响了土壤中酚酸总量,表现为猪粪、鸡粪发酵流体和猪粪堆肥处理含量下降,至9月份分别下降到CK的0.45、0.39倍和0.36倍。     

液质发酵食品中微生物群落及与乳酸菌间相互作用研究进展

液质发酵食品发酵过程中微生物组成复杂,复杂的微生物发酵体系会影响微生物的生长和代谢,继而改变微生物的群落结构与功能,最终影响液质发酵食品的品质。乳酸菌在食品发酵中对形成风味物质、提高营养价值、抑制腐败菌生长具有重要的作用。本文主要对近年来食醋、酱油和饮料酒等液质发酵食品中微生物群落及与乳酸菌间相互作用关系进行综述,了解液质发酵食品在发酵过程中微生物群落结构和群落中乳酸菌与其他微生物的相互作用类型,探讨乳酸菌在发酵过程中的功能以及乳酸菌与其他微生物之间的相互作用机制。