忍冬木层孔菌多糖的提取工艺优化及其体外抗氧化活性研究

忍冬木层孔菌(Phellinus lonicerinus(Bond.) Bond.et Sing)为湖北等地习用的桑黄品种,也是土家族常用药,多糖是其主要活性成分。为了研究忍冬木层孔菌子实体多糖(Phellinus lonicerinus polysaccharide, PLP)的提取工艺及其体外抗氧化活性,采用冷凝回流提取法在单因素实验结果的基础上,进行Box-Behnken响应面分析,确定PLP的最佳提取工艺,并通过测定忍冬木层孔菌多糖(PLP30、PLP60、PLP85、PLPA1和PLPA2)的还原能力、对DPPH、ABTS、羟基自由基的清除能力、对酪氨酸酶活性的抑制能力。结果显示PLP最佳提取工艺的参数为：料液比1∶20 g/mL、提取时间120 min、提取温度100℃,此条件下PLP提取率为(3.16±0.05)%;五种多糖对DPPH、ABTS和羟基自由基均具有较强的清除作用,且具有较强的还原力,其对ABTS自由基清除作用和还原力均与浓度呈量效关系。表明忍冬木层孔菌子实体多糖具有良好的体外抗氧化和一定的酪氨酸酶活性抑制能力。     

中国木层孔菌属三个新记录种

报道了木层孔菌属Phellinus 3个中国新记录种。赤杨木层孔菌Phellinus alni典型特征为菌盖具有较宽的同心环带和清晰的密集环纹菌核;黑木层孔菌P. nigricans具有较大的担孢子;东方木层孔菌P. orienticus具有平伏的子实体,担孢子相对较小。对这3个种进行了详细的描述和显微结构绘图。     

新组合欧氏拟木层孔菌——“西方拟木层孔菌”的合法名称

拟木层孔菌属Phellinopsis是最近从木层孔菌属Phellinus中独立出来的一个属。拟木层孔菌属的全部4个种中,只有西方拟木层孔菌P. occidentalis在中国没有分布。简要回顾了西方拟木层孔菌这一名称的历史,其基元异名西方层孔菌Fomes occidentalis属于无效发表,因此将西方拟木层孔菌处理为无效名称,并将该名称所代表种的合法名称欧氏木层孔菌Phellinus overholtsii组合为欧氏拟木层孔菌Phellinopsis overholtsii。     

7种木层孔菌属真菌的培养特性

描述了7种木层孔蓖属（Phellinus)真菌的培养特性,它们是淡黄木层孔菌（P.gilvus),火木层孔菌（P.igniarius),裂蹄木层孔菌（P.linteus),松木层孔菌（P.pini),冷杉木层孔菌（P.pinivar.abietis) ,苹果木层孔菌（P.pomaceus)和稀硬木层孔菌（P.robustus)。     

茶藨子叶孔菌子实体(忍冬)的化学成分研究(英文)

从茶藨子叶孔菌(忍冬)中分离了8个化合物,通过波谱法和理化性质分别鉴定为豆甾醇(1),二十八酸(2),β-谷甾醇(3),麦角甾醇(4),麦角甾醇过氧化物(5),壬二酸(6),烟酸(7),原儿茶酸(8)。化合物1,3,6均为首次从该属真菌中分到。     

云衫针层孔菌化学成分的研究

从云衫针层孔菌Ｐｈｅｌｌｉｎｕｓ ｙａｍａｎｏｉ（Ｔａｍｚ．）ｓｈａｗ分离得到１２个化合物,借助光谱分析鉴定为：８,１１,１３－ａｂｉｅｔａｄｉｅｎ－１８－ｏｉｃ ａｃｉｄ（１）,１,２－ｂｅｎｚｅｎｅｄｉ－ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄｂｉｓ（２－ｅｔｈｙｌ－ｈｅｘｙｌ）ｅｓｔｅｒ（２）,ｅｒｇｏｓｔｅｒｏｌ ｐｅｒｏｘｉｄｅ（３）,ｅｒｇｏｓｔａ ７,２２（Ｅ）－ｉｄｅｎ－３－ｏｌ（４）,ｅｒｇｏｓｔａ ７,２２（Ｚ）－ｄｉｅｎ－３－ｏｌ（５）,ｏｃｔａｄｅｃａｎｏｉｃ ａｃｉｄ－１,３－ｐｒｏｐａｎｅｄｉｙｌ ｅｓｔｅｒ（６）,ｏｃｔａｄｅｃａｎｏｉｃ ａｃｉｄ（７）,８（１９）,１４－ｌａｂｄａｄｉｅｎ－１３－ｏｌ（８）,ｅｒｇｏｓｔａ－４,６,８（１４）,２２－ｔｅｔｒａｅｎ－３－ｏｎｅ（９）,化合     

木蹄层孔菌子实体化学成分及对肿瘤细胞的抑制作用的研究

运用硅胶、sephadex LH-20等柱色谱,从木蹄层孔菌子实体的乙醇提取物分离得到12个化合物,通过单体的理化性质、NMR和MS技术鉴定单体的结构为3-十六碳酸酯-7,22-二烯麦角甾醇（1）,十八烷酸（2）,棕榈酸（3）,7,22-二烯麦角甾-3-酮（4）,麦角甾-7,22-二烯-3-醇（5）,5,8-过氧麦角甾-6,22-二烯-3-醇（6）,3,3-二甲氧基-7,22-二烯麦角烷（7）,28-乙酰白桦脂醇（8）,白桦脂醇（9）,β-羟基十八烷酸（10）,9,10-二羟基十八烷酸（11）,瑞香素（12）。采用Alamar Blue法检测单体化合物对人肺癌细胞NCI-H 460和人胃癌细胞SGC-7901的抑制活性。结果表明,化合物4对NCI-H 460细胞株的抑制活性最高,化合物9对SGC-7901的抑制活性最高。     

忍冬木层孔菌液体培养过程中多酚含量及抗氧化活性研究

忍冬木层孔菌是木层孔菌属的一种药用真菌,目前对它的研究少有报道。以液体培养为基础,研究忍冬木层孔菌培养过程中生物量、胞内外多酚含量的变化,以及胞内外提取物抗氧化活性的变化。结果显示,菌丝体生物量在培养168–216h时达到最大值（8.33g/L）;胞内多酚和胞外多酚含量分别在216h和168h时达到最大值（15.60mg GAE/g和106.76mg GAE/L）;液体培养胞内外提取物的抗氧化活性与多酚含量正相关,多酚含量高时提取物对DPPH[1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl radical 2,2-Diphenyl-1-(2,4,6-trinitrophenyl)hydrazyl]自由基的抑制率也高。     

7种木层孔菌属真菌的培养特性*

描述了7种木层孔菌属 (Phellinus) 真菌的培养特性。它们是淡黄木层孔菌（P. gilvus）,火木层孔菌（P. igniarius）,裂蹄木层孔菌（P. linteus）,松木层孔菌（P. pini）,冷杉木层孔菌(P. pini var.abietis),苹果木层孔菌 (P. pomaceus) 和稀硬木层孔菌（P.robustus）。     

三种木层孔菌子实体不同溶剂提取物抗氧化活性的研究

以抗坏血酸为阳性对照,分别对桑木层孔菌Phellinus mori、鲍姆木层孔菌Phellinus baumii和瓦宁木层孔菌Phellinus vaninii野生子实体甲醇提取物(ME)、氯仿提取物(CE)、乙酸乙酯提取物(EAE)、正丁醇提取物(BE)和热水提取物(WE)的体外清除DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)自由基、羟自由基和总抗氧化能力进行了检测。结果表明,3种木层孔菌的不同溶剂提取物都具有体外抗氧化活性。3种菌EAE清除DPPH自由基能力较强,其中瓦宁木层孔菌EAE清除DPPH自由基能力最强,IC50为10.65μg/mL。3种木层孔菌热水浸提物清除羟自由基的能力较强,鲍姆木层孔菌WE的清除率最高,1mg/mL时达到73.52%。另外,3种木层孔菌不同提取物总抗氧化能力和清除DPPH自由基能力基本相同,瓦宁木层孔菌BE的总抗氧化能力最强,1mg/mL时达到了167.7U/mL。3种木层孔菌相比,瓦宁木层孔菌不同提取物的体外抗氧化能力最强,其次是鲍姆木层孔菌,桑木层孔菌的体外抗氧化能力最弱。     

红缘拟层孔菌化学成分与药理活性研究概述

对红缘拟层孔菌的化学成分、药理活性、菌丝发酵和木质素降解作用等方面的研究进行了综述。化学成分研究表明,红缘拟层孔菌含有多种三萜类、多糖类、脑苷脂类、挥发性等成分;药理活性研究表明,红缘拟层孔菌具有抗肿瘤、抗氧化、抗糖尿病、抗炎镇痛、抑菌、保肝等药理作用;菌丝发酵研究表明,红缘拟层孔菌菌丝发酵的最佳碳源为葡萄糖,氮源为酵母膏和麦芽汁。此外,红缘拟层孔菌对纤维素有降解作用。     

山野木层孔菌子实体中抑制H22荷瘤小鼠肿瘤的活性成分研究

采用梯度提取法对山野木层孔菌子实体进行提取,得到石油醚层、甲醇层及水层3 种提取物及石油醚层中获得化合物4,6,8(14),22(23)-四烯-3-酮-麦角甾烷,并采用H22 荷瘤小鼠进行体内抗肿瘤活性研究,以抑瘤率、免疫器官指数、免疫因子为指标检测抗肿瘤活性。结果表明,石油醚高剂量组（100mg/kg）、单体化合物中剂量组（7.5mg/kg）抑制率分别为62.21%、57.67%;脾指数、胸腺指数均高于对照组和环磷酰胺（CTX）组,白介素-2（IL-2）的含量明显高于对照组和环磷酰胺（CTX）组（P＜0.01）;肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量明显低于对照组（P＜0.01）。因此认为上述石油醚提取物和单体化合物对H22荷瘤小鼠肿瘤有抑制作用,并且均能改善小鼠的免疫功能。     

桑木层孔菌液体培养条件的研究

对桑木层孔菌(Phellinus mori)液体发酵条件进行了研究,以生物量和胞外多糖为指标,通过L16(45)和L9(34)正交表进行了两次正交试验,筛选出桑木层孔菌最适液体培养条件为:麦芽糖30 g/L,酵母浸粉和蛋白胨15 g/L(质量比2 1),KH2PO4和CaCl25.5 g/L(质量比1 1),初始pH6.0;通过单因素试验筛选出最适装液量为120 mL/250 mL,最适接种量为10%。在此条件下液体发酵培养7 d后,桑木层孔菌生物量达到23.375 g/L,胞外多糖产量达到3.993 g/L。     

中药隐孔菌的化学成分

隐孔菌(Cryptopotus(Peck)Hubbard)是《滇南本草》、《秦岭巴山天然药物志》、《新华本草纲要》和《中国药用孢子植物》等药物专著收载的生药。味微苦,性平。有止咳、平喘、解毒及抗肿瘤等功效。关于隐孔菌的化学成分除隐孔酸外,均未见有关报道。为开发利用隐孔菌的新药源,进行了隐孔菌的化学成分分析。     

火木层孔菌发酵菌粉及其组分对小鼠移植性肝癌H22的体内生长作用

采用肝癌H22荷瘤小鼠的肿瘤模型,对火木层孔菌(桑黄)Phellinus igniarius发酵菌粉及其各提取物组分的体内抗肿瘤活性进行评价。结果表明,火木层孔菌发酵菌粉及其各提取物组分对荷瘤小鼠肝癌H22都具有一定的抗肿瘤作用并能延长荷瘤小鼠生存期,其中,火木层孔菌发酵菌粉(1,000mg/kg/d)及其组分I(I多糖组分)(360mg/kg/d)具有较为显著的抗肿瘤作用,抑瘤率分别为33.5%和40.3%。组织病理学研究结果表明在菌粉及其多糖组分作用后,肿瘤细胞坏死细胞明显增多,免疫组化检测表明火木层孔菌发酵菌粉及其多糖组分能明显的降低瘤组织中Bcl-2基因蛋白的表达,提高小鼠瘤组织中的Bax基因蛋白的表达。火木层孔菌发酵菌粉及其多糖组分具有较好的体内抗肿瘤活性。     

两类木蹄层孔菌在酶蛋白水平上的遗传分化

木蹄层孔菌（Ｆｏｍｅｓ ｆｏｍｅｎｔａｒｉｕｓ）在中国东北和日本存在子实体形态不同、寄主范围明显有别的两个类型：小型和大型。用多位点分析方法研究了两者间的遗传分化状况。从两类４１个菌株的４种酶系统中检测出９个基因位点,其中８个位点上的绝大多数酶谱型都不为两者所共有,显示两个类型间的基因交流已极少发生。根据酶谱型频率得出两者间的遗传距离Ｄ＝０．９６５,属于典型的种间遗传分化。上述酶基因分化证据结合子     

竹黄菌与竹红菌的化学成分及细胞毒活性比较研究

为研究竹黄菌与竹红菌化学成分及细胞毒活性的差异,本研究通过高效液相色谱(HPLC)分析结合常规色谱方法,分离鉴定了两种真菌的6个相同成分,分别为3个主要成分竹红菌甲素(1)、竹红菌乙素(2)和竹红菌丙素(3),以及3,6,8-三羟基-1-甲基口山酮(7)、3,8-二羟基-6-甲氧基-1-甲基口山酮(8)和过氧麦角甾醇(9)。另外,从竹黄菌中还分离得到11,11′-二去氧沃替西林(5)、麦角甾-7,22E-二烯-3β,5α,6β-三醇(10)和麦角甾-7,22E-二烯-2β,3α,9α-三醇(11),并首次从竹红菌中分离得到竹红菌丁素(4)、灰黄霉素(6)、化合物7和8。活性筛选发现,化合物5对三株肿瘤细胞NCI-H1975、HepG2和MCF-7有很强细胞毒活性,化合物1有较强细胞毒活性,而化合物6活性较弱。     

檵木化学成分研究

采用硅胶柱、ODS和凝胶柱色谱进行分离纯化,通过理化方法和波谱分析进行结构鉴定。从檵木(Loro-petalum chinense(R.Br.)oliver)茎叶中分离并鉴定了六个化合物:植物醇(1)、glycerol 1-(14-methlpentadecano-ate)(2)、methyl-(7R,8R)-4-hydroxy-8′,9′-dinor-4′,7-epoxy-8,3′-neolignan-7′-ate(3)、trans-p-coumaric acid ethylester(4)、落叶松树脂酸(laricinolic acid)(5)、tiliroside(6)。除化合物1外,其余化合物均为首次从檵木中分离得到,化合物2、3首次从该属中分离得到。     

两类木蹄层孔菌在酶蛋白水平上的遗传分化

木蹄层孔菌（Ｆｊｏｍｅｓ　ｆｏｍｅｎｔａｒｉｕｓ）在中国东北和日本存在子实体形态不同、寄主范围明显有别的两个类型：小型和大型。用多位点分析方法研究了两者间的遗传分化状况。从两类４１个菌株的４种酶系统中检测出９个基因位点,其中８个位点上的绝大多数酶谱型都不为两者所共有,显示两个类型间的基因交流已极少发生。根据酶谱型频率得出两者间的遗传距离Ｄ＝０．９６５,属于典型的种间遗传分化。上述酶基因分化证据结合子实体形态的显著差异,提示两类木蹄层孔菌是各自独立的种。两个类型的群体在遗传多样性参数上无显著差异,可能暗示两者在起源演化上的同步性。酯酶系统有２个位点上的酶谱为不同类型所特有且稳定而清晰,可作为分子标记用于两类木蹄层孔菌的无子实体鉴定。     

光照和pH对忍冬纤孔菌液体培养的影响

以液体培养为基础,研究不同光照和培养液初始pH条件下,忍冬纤孔菌培养过程中生物量、胞内外多酚含量,以及胞内外提取物抗氧化活性的变化。结果显示,24h光照轻微抑制菌丝体的生长,但能促进胞内外多酚的形成和提取物对DPPH自由基的抑制;在初始培养液pH5.3条件下,菌丝体生物量最高,胞内外多酚含量和提取物活性最高。