促乳素抑制促性腺激素诱导小鼠卵巢的纤蛋白溶酶原激活因子增加和排卵

为进一步研究纤溶酶原激活因子(PA)在排卵中的作用,我们观察了促乳素(PRL)对hCG诱导小鼠卵巢PA增加和排卵的影响。实验结果表明;(1)PRL抑制促性腺激素诱导小鼠排卵。当bCG注射18 h后,在输卵管中发现卵子平均为31.1±6.7,而hCG加PRL组为19.7±4.9;当hCG注射24 h后,输卵管中发现卵子数为32.3±10.8,hCG加PRL组为20.3±5.4;其抑制率分别为36.5％和37％;(2)PRL对排卵的抑制作用是通过抑制促性腺激素对小鼠颗粒细胞(GC)和膜-间质细胞(TIC)PA分泌的结果;(3)在离体实验中PRL也明显抑制促性腺激素对小鼠GC PA分泌的作用。这些结果进一步证实PA在排卵过程中的重要作用。     

炔诺酮庚酸酯对动物移植性肿瘤核酸含量及P~(32)参入肿瘤组织核酸速率的影响

大量实验资料表明,凡生长或分化旺盛的组织(如胚胎细胞、肿瘤等)都有高度的“核酸-蛋白质”的合成过程。而且,细胞分裂旺盛的组织摄取P~(32)增加(薛社普,1964)。因此可以用肿瘤组织核酸含量以及P~(32)摄入速率作为其生长速度的指标。 为了观察长效避孕药炔诺酮庚酸酯(Norethindrone enanthate,简称庚炔诺酮)是否与癌瘤的发生或发展有关系,除去已使用C_(57)纯种小鼠及大鼠长期给药以了解其有无致癌可能外,我们认为还应观察其对肿瘤生长速度与潜伏期的影响。因此,选用了起源于自发乳腺癌的小鼠肉瘤180及大鼠Walker癌作为实验材料,观察了庚炔诺酮及与其配伍应用的长效雌激素对移植性肿瘤和正常组织中核酸含量以及P~(32)参入肿瘤组织核酸速率的影响。     

福斯科林对大鼠排卵的作用及卵巢纤溶酶原激活因子活性影响

利用未成年大鼠研究了福斯科林对大鼠排卵作用及卵巢中纤溶酶原激活因于活性与排卵的关系。实验结果表明23日龄未成年大鼠,预先注射孕马血清,48小时后注射5,10,20,40及80微克五种不同剂量福斯科林,均不能引起动物排卵。当给以20微克及80微克福斯科林,同时增注前列腺素E_240微克,能引起动物排卵,平均排卵数为8.1±3.8个和9.8±6.5个。注射不同剂量福斯科林后,卵巢中纤溶酶原激活因子活性随注射剂量增加而增加,但并不呈线性关系。虽然注射福斯科林和前列腺素E_2能引起动物排卵,但卵巢中纤溶酶原激活因子活性与不排卵及超数排卵动物比较并无显著性差异。实验结果提示,福斯科林不直接引起大鼠排卵,只在与前列腺素E_2合并用药时才引起排卵。卵巢内纤溶酶原激活因子活性随注射福斯科林增加而增加,但不对卵泡破裂起直接作用。     

小鼠排卵前后卵巢纤蛋白溶酶原激活因子活性的变化

给幼龄小鼠注射PMSG刺激滤泡生长,随后注射hCG以诱发排卵。在激素处理的不同时间取出卵巢,制备卵巢匀浆液或从卵巢中分离颗粒细胞和卵丘-卵母细胞复合体,并做离体培养。样品中组织型(tPA)和尿激酶型(uPA)纤蛋白溶酶原激活因子经SDS-凝胶电泳分离,用纤蛋白铺盖技术测定。实验结果表明,注射hCG 8h后15％的受试动物排卵,而卵巢匀浆液和颗粒细胞中tPA和uPA活性分别也在hCG注射后4和8h达到高峰。排卵后酶活性下降。卵丘-卵母细胞复合体主要含tPA,注射hCG 12—24h达到高峰。上述资料证明,tPA和uPA都参入小鼠排卵过程。因为排出的卵子中仍含有大量tPA,卵细胞的tPA除参与排卵外,可能对排卵后的一些生理过程也起重要作用。     

左旋十八甲基炔诺酮对大鼠卵巢颗粒细胞和垂体细胞激素合成及分泌的影响

研究了左旋十八甲基炔诺酮对大鼠卵巢颗粒细胞和垂体细胞激素合成及分泌的直接作用。结果显示左旋十八甲基炔诺酮单独作用于无血清培养的颗粒细胞时,抑制雌二醇的合成,但刺激孕酮的分泌;在与促卵泡素合并处理时,颗粒细胞雌二醇、孕酮的分泌量随着左旋十八甲基炔诺酮浓度的增加而增加。利用促性腺激素生物测定方法证明大鼠整体用左旋十八甲基炔诺酮处理后,垂体中促卵泡素和促黄体生成素活性明显下降;同时外周血清中促卵泡素的活性亦下降。培养的垂体单纯用左旋十八甲基炔诺酮处理后,其培养液经生物测定呈现抑制颗粒细胞雌二醇和孕酮的分泌,促性腺激素释放激素可减弱左旋十八甲基炔诺酮的抑制作用。提示左旋十八甲基炔诺酮除通过垂体卵巢轴系起作用外,还能直接作用于卵巢。     

幼年大鼠诱发排卵过程中卵巢PGS的变化及其生理作用

本实验用未年大白鼠经PMSG/hCG诱发排卵,观察了卵巢PGE_2,PGF_(2a),6-KetoPGF_(1a)和TXB_2在排卵过程中的变化,以及PGS合成抑制剂——消炎痛对大鼠排卵的抑制效应。实验结果表明:消炎痛在1mg/只的剂量下,对于大鼠体内排卵有显著的抑制作用。在hCG注射后19小时,正常组动物排卵数为14.4±4.3个/卵巢;消炎痛组排卵数为2.33±2.7个/卵巢。RIA结     

尿激酶及其抑制物对未成年小鼠排卵的影响

利用未成年小鼠超数排卵方法,研究了纤溶酶原激活因子——尿激酶和它的抑制物——6氨基己酸对排卵的作用。实验结果表明:18日龄小鼠在注射PMSG和hCG条件下,增注尿激酶800U,排卵动物数及平均排卵数与对照组比较有显著性差异。如果仅用PMSG和尿激酶,不能引起动物排卵。21日龄小鼠在注射PMSG后再注射不同剂量hCG情况下增注尿激酶,平均排卵数均比相应对照组有显著性差异,但hCG注射量为l.25IU组,增注尿激酶后,实验组与对照组平均排卵数无显著性差异。用尿激酶抑制剂6氨基己酸可以有效抑制超数排卵的效果。实验结果提示,尿激酶只有在hCG存在条件下对小鼠排卵有促进作用,而尿激酶本身不具有诱发排卵的作用。     

凝结芽胞杆菌对免疫功能影响的实验研究

目的 研究凝结芽胞杆菌（TQ33）对实验动物免疫功能模型的影响。方法 以鸡红细胞混悬液对小鼠腹腔注射,观察TQ33对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响;制备绵羊红细胞（SRBC）,观察血球凝集程度,测定血清溶血素;以靶细胞（YAC-1细胞）与脾细胞（效应细胞）的反应检测TQ33。对小鼠NK细胞活性的影响;采用淋巴细胞转化法观察TQ33对细胞免疫的影响;计算小鼠胸腺／体重及脾脏／体重为脏器系数观察TQ33对小鼠脏器的影响。结果 与对照组比较,TQ33显著增加小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能;对小鼠体液免疫功能有一定的增强作用;可增强小鼠NK细胞活性;对ConA诱导下的小鼠淋巴细胞转化有增强作用;对脏器系数没有显著的影响。结论 凝结芽胞杆菌具有明显的免疫调节作用,预示有良好的应用前景。     

促性腺激素诱导猕猴排卵周期中卵巢纤溶酶原激活因子与抑制因子的变化

在用 PMSG 和 hUG 诱导猕猴排卵过程中,我们研究了 pA 和它的抑制因子 PAI-1与排卵的关系。实验结果表明,由促性腺激素所诱导出的卵巢 tPA 活性的增加与排卵密切相关,在排卵前达到高峰,而排卵后明显下降;uPA 只在排卵后的颗粒细胞大量出现;PAI-1分泌高峰比 tPA 峰值早出现12—24小时;排卵来临时,tPA 的明显上升导致 PAl-1的空然下降。上述实验结果说明,卵巢中 tPA 和 PAI-1活性的这种平衡性的变化可能在排卵机制和维持卵巢的正常生理功能中起重要作用,而 uPA 或许与黄体形成的调节有某些关系。     

酪氨酸对未成年小鼠和大鼠诱发排卵和孕酮含量的影响

本实验室曾证明酪氨酸有抗hCG致孕酮生成作用,同时也发现酪氨酸对大鼠排卵前的颗粒细胞有促进cAMP和甾体激素合成作用,表明酪氨酸对卵巢有逆向的双重作用。本文观察酪氨酸对未成年小鼠和大鼠诱发排卵和血清孕酮含量的影响。结果显示酪氨酸有促进未成年小鼠和大鼠诱发排卵和提高孕酮的作用。苯丙氨酸和色氨酸无此作用。在甲状腺素、去甲肾上腺素和多巴胺等酪氨酸衍生物中,仅多巴胺与酪氨酸的作用相似。     

小鼠卵巢对酪氨酸的摄取与酪氨酸抗hCG致孕酮生成作用

末成年小鼠用PMSG处理后48小时,注射hCG(5单位/10克体重)诱发排卵。在注射hCG后12、24、48、96、144小时,静脉注射~3H-酪氨酸(5μCi/10克体重)5分钟后摘取卵巢,干燥、称重、消化后,加闪烁液测其放射性(以cpm/毫克干重表示)。结果表明,卵巢对~3H-酪氨酸的摄取量,在排卵后显著增加。随着孕酮分泌的增加,卵巢对酪氨酸的摄取亦增加,两者的变化趋势一致。此外,本文证明,卵巢摄取的外源酪氨酸,对hCG诱发的孕酮生成有抑制作用。     

海胆黄多糖SEP对S180的体内抑制作用

研究海胆黄多糖SEP对S180肉瘤的抑制作用及初步机制。MTT法检测SEP对体外培养的S180细胞生长的抑制作用;建立小鼠S180肉瘤模型观察SEP抗肿瘤活性;检测SEP协同ConA/LPS刺激小鼠脾淋巴细胞增殖作用;同时,考察SEP对NK细胞和杀伤性T淋巴细胞(cytotoxic T lym-phocyte,CTL)活性的影响;碳粒廓清检测SEP对小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响。研究表明,海胆黄多糖SEP高中低剂量(16、8、4 mg/kg)显著抑制小鼠180实体瘤生长,增加小鼠脾指数和胸腺指数,协同ConA/LPS刺激小鼠脾淋巴细胞增殖,提高小鼠NK细胞和CTL活性,增强小鼠单核巨噬细胞的吞噬功能,通过免疫调节提高小鼠免疫功能达到抑制S180作用。     

甲醛对雌性小鼠生殖功能及脏器的影响

采用超排卵技术研究甲醛对小鼠卵母细胞的成熟和体外受精以及脏器等的影响.甲醛对小鼠卵母细胞生发泡破裂没有影响,但可以抑制卵母细胞第一极体的释放,影响卵母细胞的存活率和破坏卵母细胞成熟,并可降低体外受精率和超排卵的卵母细胞数量,影响小鼠的正常生殖功能.而且,高剂量的甲醛还对小鼠的肝脏以及卵巢有明显的毒副作用.     

卵巢纤蛋白溶酶原激活因子及其抑制因子的研究

本文综述了近年来作者在研究卵巢纤蛋白溶酶原激活因子(PA)及其抑制因子(PAI)的某些成果。PA是一种高效能蛋白水解酶激活因子,它激活纤蛋白溶酶原成为纤蛋白溶酶,此酶在纤蛋白水解过程中起重要作用。已有证据表明,PA与排卵有关。我们进一步研究发现:(1)在大鼠卵巢体细胞中存在两种PA,即组织型PA(tPA)和尿激酶型PA(uPA);而在卵细胞中只发现tPA;(2)大鼠卵巢tPA明显受促性腺激素和其他激素调节,并在排卵前达到高峰,而uPA没有明显变化;(3)在卵巢体细胞中还发现一种PA的抑制因子(PAI),它与PA结合形成复合体,能部分或完全消除PA活性;(4)只有tPA与大鼠排卵有关;PA和PAI间的相互作用和随激素的波动而引起的动态变化可能对维持卵巢正常生理功能和排卵起重要作用。     

蚯蚓提取物对小鼠肿瘤动物模型的研究

目的 :研究蚯蚓提取物 (EFE)的免疫活性及抗肿瘤作用。方法 :采用小鼠移植性肿瘤S1 80 肉瘤及Heps肝癌的动物模型观察其肿瘤抑制作用。结果 :EFE对S1 80 肉瘤和Heps肝癌细胞的抑制率分别为 36 97%和 4 8 55% ;结论 :它对小鼠实体瘤细胞有明显的抑制作用 (P <0 0 1 )并提示对小鼠的细胞和体液免疫功能有显著增强作用。     

黄芪叶药理作用研究

研究了黄芪叶的药理作用。口服给药观察对D-半孔糖所致衰老小鼠的抗衰老作用及抗氧化作用;对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响;对CCl4引起的小鼠急性肝损伤的影响。结果表明：黄芪叶可提高小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)的活性和降低血清中过氧化脂质(LPO)的含量,能降低血清中谷氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)的活性。对二甲苯引起的小鼠耳肿胀具有抑制作用。黄芪叶具有良好的抗炎、抗衰老作用,能有效地保护肝脏。     

D-半乳糖诱导建立的小鼠多囊卵巢综合征模型

目的研究D-半乳糖诱导ICR中年雌性小鼠多囊卵巢综合征(PCOS)动物模型的卵巢形态学、性激素以及胰岛素水平变化,并探讨D-半乳糖引致小鼠PCOS的意义。方法以D-半乳糖腹腔注射20周龄ICR雌性小鼠8周,观察卵巢形态的变化,检测血糖值及动情周期排卵情况,并采用ELISA法测定血清胰岛素、雌二醇(E2)、促卵泡生长激素(FSH)、睾酮(T)水平。结果 D-半乳糖处理组小鼠的卵巢重量显著高于对照组(P<0.05),有80%(10/12)的单侧或双侧卵巢呈现多囊性扩张,卵巢闭锁增多及颗粒细胞层数减少,并表现为紊乱的动情周期,提示无排卵;与对照组比较,D-半乳糖组小鼠血清T、E2和空腹血糖水平明显升高(P<0.001),FSH水平下降(P<0.0001),空腹血胰岛素水平显著高于对照组(P<0.01),胰岛素敏感指数显著低于对照组(P<0.05)。结论使用D-半乳糖诱导小鼠PCOS模型,无论在影响血清性激素还是卵巢局部形态学改变方面都与临床表现相似,并存在胰岛素抵抗现象,符合PCOS的典型特征,可作为动物模型用于科学研究。     

膜型Tim-3分子促进荷瘤小鼠抗肿瘤免疫应答的研究

目的 研究膜型Tim-3分子对H22肝癌细胞生长的抑制效应,探讨膜型Tim-3分子对荷瘤小鼠免疫系统的影响.方法 以H22肝癌细胞接种于BALB/c小鼠大腿肌肉建立小鼠实体瘤模型,采用原位注射裸DNA的方法在小鼠体内表达膜型Tim-3进行基因治疗,观察Tim-3对肿瘤生长的抑制作用;采用RTPCR技术在肿瘤生长不同时期检测Tim-3对4-1BB、IFN-γ、galectin-9等免疫相关基因表达的影响;流式细胞术检测膜型Tim-3对脾细胞增殖活性及细胞毒活性的影响;观察Tim-3 ＋4-1 BBL协同抗肿瘤作用.结果 体内转染表达Tim-3对肿瘤的生长有明显的抑制作用.流式细胞术结果显示,在小鼠荷瘤早期,Tim-3可提高脾细胞在特异性抗原刺激下的增殖反应和对H22肿瘤细胞的细胞毒作用;Tim-3与4-1BBL协同作用时抗肿瘤作用更加明显.结论 膜型Tim-3可在免疫启动阶段作为正向免疫调节因子增强抗肿瘤免疫应答,并可与4-1 BBL协同产生更强的抑瘤效应.     

前列腺素F（PGF）抗血清对小鼠胚泡着床的影响

本文试图利用自制的PGP抗血清,对小鼠子宫局部进行注射,以观察其对胚泡着床的影响。结果表明,于妊娠第3天(孕卵在输卵管阶段)单侧子宫角注射PGF抗血清,对胚泡着床无影响。而妊娠第4天(胚泡在子宫阶段〕单侧或双侧子宫角注射PGF抗血清,对胚泡着床均有明显的抑制作用。这一结果提示小鼠胚泡着床中PGF起着重要的作用。     

克班宁的镇痛作用部位及作用机制探讨

以探究克班宁的镇痛作用部位并初步明确其镇痛机制为目的。采用小鼠足趾注射甲醛法、热板法及腹腔注射醋酸(扭体法)所致疼痛模型,探讨克班宁的镇痛作用;以小鼠输精管经壁电刺激法,了解克班宁对吗啡受体的影响。结果发现克班宁在3.2 mg/kg时对三种疼痛模型均显示明显的抑制作用,并能明显抑制小鼠输精管经壁电刺激所引起的收缩,且该收缩不能被纳络酮所拮抗。因此,克班宁可能具有中枢样镇痛作用,但作用机制与吗啡受体无关。