提高α—淀粉酶摇瓶发酵单位的几点改进

我们在对BF7658α—淀粉酶菌种进行诱变筛选时发现:摇瓶发酵时通气状况的好坏对酶的发酵单位影响很大。而常规的三角形摇瓶和摇床给筛选工作带来许多限制,不利于取得稳定的发酵数据。经过多次摸索,我们对上述设备作了一些改进,不仅保证了发酵结果的稳定性而且发现能大大地提高α—淀粉酶的发酵单位。     

活性干酵母SOD摇瓶发酵条件的研究

研究了营养与环境条件对耐高温酒精活性干酵母（ＴＨ－ＡＡＤＹ）ＳＯＤ摇瓶发酵的影响。实验结果表明,初糖浓度,金属离子、ＰＨ值、通气量（装液量）和培养时间等均对ＡＡＤＹ摇瓶发酵的生物量和ＳＯＤ含量有较大的影响。在实步优化的发酵条件下,细胞生物量为３９．６ｇ／Ｌ,菌体ＳＯＤ含量为１９４８Ｕ／ｇ,发酵液产酶能力为７．７万Ｕ／Ｌ。     

多拷贝毕赤酵母重组菌表达GCL摇瓶优化和高密度发酵

目的:构建高效表达白地霉脂肪酶的毕赤酵母重组菌株,并对筛选得到的菌株进行摇瓶发酵条件优化和分批补料高密度发酵工艺研究。方法:将诱导型表达载体pPIC9K-gcl电转化至毕赤酵母GS115。通过橄榄油-罗丹明B平板和摇瓶发酵筛选高脂肪酶活力的重组菌株,运用基于TaqMan探针的实时荧光定量PCR 法确定其拷贝数,并对菌株进行摇瓶发酵条件优化。在此基础上,研究重组菌在3L 发酵罐中的高密度发酵工艺。结果:筛选得到一株具有3 个白地霉脂肪酶基因拷贝的菌株GS115/pPIC9K-gcl 78#,初始酶活力为220 U/ml。当摇瓶发酵条件为甲醇诱导96 h,每24 h甲醇添加量1 %,接种量2 %,培养基初始pH 7.0,500 ml摇瓶装液量50 ml,甲醇诱导温度25℃ 时酶活力达735 U/ml。3L 发酵罐高密度发酵176.5 h,酶活力达到3360 U/ml,总蛋白含量达到4.30 g/L,且发酵过程中细胞活性一直保持在96 % 以上。结论:基因拷贝数与重组菌株的产酶水平呈正相关,摇瓶优化可显著提高重组菌株的产酶能力,为白地霉脂肪酶的工业化生产奠定了技术基础。     

L-蛋氨酸及甲醇浓度对毕赤酵母摇瓶发酵生产S-腺苷蛋氨酸的影响

利用甲醇传感器及高效液相色谱检测毕赤酵母摇瓶发酵过程的甲醇浓度及S-腺苷蛋氨酸(SAM)浓度,发现L-蛋氨酸浓度及甲醇浓度对毕赤酵母细胞生长及合成S-腺苷蛋氨酸具有影响,据此对摇瓶发酵过程的L-蛋氨酸浓度及甲醇浓度进行优化。优化结果表明:当L-蛋氨酸浓度为7.5 g/L时,最适于SAM积累,产量达到0.83 g/L;进而利用甲醇传感器对发酵过程的甲醇浓度进行检测及控制,考察不同甲醇浓度对SAM产量的影响,毕赤酵母产SAM的最佳甲醇浓度为15 g/L,在此浓度下SAM的产量达到1.41 g/L,比对照实验增加了21%。     

碱性果胶裂解酶摇瓶发酵条件的研究

利用碱性果胶裂解酶生产菌株Bacillus subtilis WSH02-02进行摇瓶发酵优化,确定了最适种子斜面培养基、种子摇瓶培养基和发酵摇瓶培养基等培养条件,经14h的摇瓶发酵,酶活最高达到8．29U／mL。     

栀子蓝色素摇瓶生产条件的优化研究

对栀子蓝色素摇瓶发酵生产的培养基配方进行了优化研究。结果表明,在栀子基质溶液中添加１．５％的可溶性淀粉、０．７５％的胰蛋白胨和０．１０％的ＭｇＳＯ４,可使栀子蓝色素的摇瓶产量提高１５．６％。     

毕赤酵母表达巴曲酶发酵条件的优化研究

目的对表达重组巴曲酶的巴斯德毕赤酵母的发酵条件进行优化,确定最佳的发酵控制条件以获得重组巴曲酶的最高表达量。方法通过多因素正交实验确定巴曲酶发酵培养的最适培养条件。结果表达温度在25℃,pH值为7．0,加入甲醇的量为10g／L时为最优发酵条件,诱导表达时间为84-96h。结论重组巴曲酶可以开发为止血药,代替临床应用的从蛇毒中提取的巴曲酶。     

葡聚糖酶高产菌株的诱变筛选及其摇瓶发酵条件的初步研究

从土壤中分离出的一株产葡聚糖酶酶活31 U／ml的野生菌株,经UV、^60Co、LiCl诱变筛选后得到了产葡聚糖酶高产菌株SB126,经发酵条件优化试验后检测其酶活达到85U／ml,较野生菌株提高了近两倍。葡聚糖酶摇瓶较适发酵条件为：装量30ml(250m1)、转速180r／min、pH7．0、温度30℃、接种量8％、发酵周期5d。     

高产番茄红素链霉菌选育及摇瓶发酵研究

番茄红素的抗氧化能力目前在类胡萝卜素中最强,是近年来国际上功能食品成分研究的热点。在国内首次利用龟裂链霉菌（Streptomyces rimosus）发酵生产番茄红素,建立了分光光度计法和HPLC法等番茄红素测定方法;以一株龟裂链霉菌Fc作为出发菌株,进行紫外诱变,筛选到一株突变高产菌株Fc’,其番茄红素产量较出发菌株提高2.5倍;通过摇瓶发酵实验优化培养条件,使菌株Fc’的番茄红素产量达到230 mg/L,并且在不添加任何阻断剂的情况下,利用链霉菌发酵可获得纯度较高的番茄红素。该结果为今后利用链霉菌工业化生产番茄红素奠定了良好基础。     

香槟酒酵母的发酵性能试验研究

对16株香槟酒酵母的发酵性能进行试验.结果表明,C₁、C₃、C₄菌株的性能优良,具有发酵活性高,泡沫细腻,絮凝性强等优点,适于香槟酒(起泡酒)二次发酵。     

耐高温酵母菌株的分离、鉴定及其酒精发酵初步研究

从 38 1个自然样品中筛选得到 2株耐高温酵母THFY 4和THFY 1 6。THFY 4能够在51℃ ,含 30 %葡萄糖的培养基中生长 ;THFY 1 6能够在 45℃ ,30 %葡萄糖的培养基中生长。经初步鉴定 ,THFY 4为克鲁维属酵母 ,THFY 1 6为酵母属酵母。进一步的 37℃发酵实验证明 ,THFY 4在静置条件下的发酵性能很差 ,发酵 60h只能从 2 0 %的葡萄糖产生 4 88% (v v)的酒精 ;而THFY 1 6在相同的条件下从 2 0 %的葡萄糖中产生 1 1 44%     

酵母菌株和发酵条件对酒精连续发酵的影响

从多株酒精酵母菌种中筛选出S．cerevisiaeKG作为连续发酵菌株,该菌株经耐酸驯化,提高了抵抗不利环境的能力。本论文还探讨了二氧化碳、氧气对酒精发酵过程的影响,认为氧气最一关键性的影响因素。在另一方面,在酒精连续发酵过程中使用带有细胞循环的双罐系统,酒精生产强度达到30．5g／L·h。     

海藻酸铝固定化酵母生产高浓度酒精的研究

以海藻酸铝凝胶代替海藻酸钙,可使固定化酵母使用寿命显著延长,其海藻酸铝凝胶耐磷酸盐能力比海藻酸钙凝胶提高六倍以上。用海藻酸铝固定化增殖酵母进行分批发酵酒精,成熟醪中酒精含量由３．５％－９．０％（Ｖ／Ｖ）提高到１１．０％（Ｖ／Ｖ）左右。在１．１Ｌ的两个多层生物反应器中,装入海藻酸铝固定化增殖酵母,采用逐步提高糖浓度方法,进行连续发酵,成熟醪接收器中酒精浓度平均为１０．３％（Ｖ／Ｖ）,总糖利用率为９２．４％。     

十三烷1,13—二羧酸的发酵研究

热带假丝酵母(C.tropicalis)NP-6-126是经过紫外线和亚硝酸反复诱变筛选培育出来的,它是生产十三烷1,13一二羧酸(DC_(15)的优良生产突变株,尿素和硝酸钾浓度对其产酸有明显影响。尿素浓度在0.15％～0.21％范围内对产酸有利,尤其是0.18％最佳,浓度增大,明显抑制DC_(15)的产生和积累;硝酸钾的加入,也明显促进DC_(15)产量的提高,0.6％～0.9％硝酸钾浓度较合适。于16L自动控制罐发酵7d,DC_(15)达到130g/L,放大到2500L罐,在最佳条件下,连续5批,发酵6d,DC_(15)产量平均达到176g/L,正十五烷(nC_(15)转化率平均为52.5％,后处理总收率平均为80.6％,DC_(15)的纯度平均为95.83％。     

CASA酵母固定化方法的研究

为了增加同定化酵母的使用时间,本文在交联海藻酸钙包埋法的基础上,引入柠檬酸强化剂,制成柠檬酸强化海藻酸钙固定化酵母。它的机械强度与海藻酸钙无差別。由于柠檬酸的络合作用,阻止了钙离子的溶出,因此,在磷酸缓冲液中稳定。载体内微环境的改变,提高了发酵活性,使发酵时间缩短为16小时。     

植酸酶固体发酵条件的研究

黑曲霉Ｇ２.１．１．１．４菌株在产生植酸酶时受无机磷的反馈阻遏,并且植酸酶的产生与淀粉酶的产生存在相互抑制。对植酸酶固体发酵进行调控和通过响应面分析优化发酵条件,提高了植酸酶产量。最适发酵条件下,植酸酶（ＰｈｙｔＡ）的产量可达６２．１ｕ／ｇ．干基。     

改性酵母葡聚糖—CMG的结构特征

本文采用凝胶过滤色谱法,对两种不同工艺方法制备的羧甲基酵母葡聚糖(MA和MW)的分子量进行了测定。采用~(13)C-NMR光谱,研究了酵母葡聚糖和羧甲基葡聚糖的主链的连接方式和羧甲基在葡聚糖分子中的分布。研究结果发现,MA的分子量略大于MW,它们的分子量均在10~5数量级。酵母葡聚糖是以β-(1-3)连接为主的。羧甲基化取代主要发生在C_5位的羟基上。     

EFFECTS OF YEAST,FERMENTATION TIME,AND PRESERVATION METHODS ON TARHANA

The physicochemical properties of tarhana soup produced with different dough treatments, fermentation times, and preservation methods were examined. Tarhana doughs were prepared with yogurt (control) or baker's yeast (Saccharomyces cerevisiae) and fermented for 3 days. Samples were taken at 24, 48, and 72 hr. Samples were then preserved via one of four methods: sun dried, dried in the shade, vacumn dried, and frozen. Frozen samples produced lower organic acid levels after 72 hr of fermentation in both control (0.68 g/100 g) and yeast (0.61 g/100 g) applications than samples that were dried (0.94 g/100 g control samples; 0.81 g/100 g samples with yeast). Increasing fermentation time resulted in a significant effect on the formation of organic acid in the tarhana (p < .01). At 72 hr of fermentation, total acidity increased 11%, 17%, and 23% for tarhana samples vacumn-dried, sun-dried, and dried in the shade, respectively. Preservation methods also affected the moisture, ash, crude protein, total acidity, pH, salt, fat, reducing sugar levels, and the sensory assestment of tarhana soup (p < .01). Sensory characteristics were not significantly affected by baker's yeast in any of the preservation methods used (p > .01). However, sensory scores for tarhana prepared from the samples dried in a sheltered area showed a reduction in color desireablilty as the fermentation time increased. The soup prepared from frozen tarhana (72 hr fermentation, with yeast) had the highest scores with respect to color, mouth feel, flavor, and overall acceptability. Vacuum-dried samples' scores in these areas were also high in comparison to the two other drying methods.     

圈养一例小熊猫骨骼中几种微量元素的测定

本文报道了用原子吸收光谱测定一例圈养小熊猫骨骼中Ｚｎ、Ｃｕ、Ｍｎ、Ｃａ、Ｍｇ、Ｆｅ、Ｋ等元素含量的结果。