由大林姬鼠棕背(鼠平)检出流行性出血热相关抗原

本文为1982年5～6月在吉林省延边地区和龙县长红林场82公里处某施工部队临时驻地的 HFRS 暴发流行的病原学调查。用免疫荧光法对现场扑获的102只野鼠(其中大林姬鼠57只、棕背(鼠平)16只、花鼠12只、东方田鼠9只、红背鼠、平4只、黑线姬鼠3只、鼠兔1只)进行了 HFRS 相关抗原的检出,其中大林姬鼠阳性21只,带毒率21.1%(12/57);棕背鼠平阳性2只、带毒率为12.5%(2/16)。确定了大林姬鼠、棕背(鼠平)为此次暴发流行的病毒抗原的贮存宿主。在我国首次发现大林姬鼠、棕背(鼠平)携带 HFRS 病毒抗原。为该病的流行病学调查、预防和临床治疗提供了病原依据。可供今后对本病传染源的进一步调查及流行规律观察参考。本文还对 HFRS 病毒抗原在鼠类中寄生的脏器和细胞进行了免疫荧光定位观察,并进行了讨论。     

中华姬鼠与大林姬鼠的同工酶差异

中华姬鼠（Ａｐｏｄｅｍｕｓｄｒａｃｏ）和大林姬鼠（Ａｐｏｄｅｍｕｓｐｅｎｉｎｓｕｌａｅ）是形态学上十分相似的两种鼠类。为了对两种姬鼠的分类提供生物化学方面的依据,采用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳方法比较和分析了两种姬鼠的ＬＤＨ同工酶、ＥＳＴ同工酶和ＳＯＤ同工酶的差异。结果表明,两种姬鼠的ＬＤＨ同工酶酶谱基本相似,而ＥＳＴ同工酶和ＳＯＤ同工酶酶谱则存在明显的种间差异。根据ＥＳＴ同工酶Ａ２带的有无和ＳＯＤ同工酶主带等电点的差别,能将两种姬鼠很容易区分开来。     

北京地区中华姬鼠与大林姬鼠的数量分类研究

利用主成分分析、系统聚类分析和非参数检验,对采自北京地区的88只姬鼠标本（黑线姬鼠Apodemus agrarius除外）的10个形态分类指标进行了分析,以便确定出最具种问特异性的形态分类特征并给出定量判别标准．结果表明：除黑线姬鼠外,北京地区另有中华姬鼠（A．draco）和大林姬鼠（A．peninsulae）两种姬鼠;门齿孔后缘距上臼齿列前缘水平线的距离（x9）、上领M^1后内侧齿突向舌侧突出的程度（x1）及其与第2横嵴内侧齿突的相对大小（x2）是区分后两种姬鼠的最有效的形态分类指标;3个指标的种间界限大致为：中华姬鼠x9〈0．4mm,01≥0．2mm,x2≥0．6;大林姬鼠x9≥0．4mm,x1〈0．2mm,x2〈0．6．     

中华姬鼠与大林姬鼠头骨的几何形态学研究

中华姬鼠Apodemus draco和大林姬鼠A.peninsulae形态与习性相似,北京地区的这两种鼠都存在还是只有大林姬鼠存在一直存在争议.通过新兴的几何形态测量技术对北京地区捕获的137只姬鼠头骨与黑龙汀的9只大林姬鼠头骨进行背面和侧面的形态对比分析.系统聚类分析结果、主成分分析结果和判别函数分析结果显示,北京地...     

流行性出血热病毒在黑线姬鼠和大白鼠中水平与垂直感染的研究

南朝鲜型出血热(KHF)病毒是1976年李镐旺等人在南朝鲜京几道洞斗川邑松内里采集的黑线姬鼠的肺组织里首次发现的。其抗原能与出血热恢复期病人的血清发生特异反应。1978年,李氏从KHF病人血液中分离出同样的抗原,并在黑线姬鼠体上传代培养成功。1981年,French等人首次将这种病毒在人的肺癌组织培养     

从狗肺中分离到流行性出血热病毒

1984—1985年,从安徽省EHF疫区收集78只狗肺,用IFAT检测,5只EHF抗原阳性,阳性率为6.4％,并从EHF抗原阳性的狗肺中分离到两株EHFV,从而首次证明狗可自然感染EHFV。狗有捕食鼠类的习性,与人接触密切,其传播EHF的作用需要进一步研究。     

大林姬鼠肥满度的研究

我们在研究红背(鼠平)(Clethrionomys rutilus)(夏武平、孙崇潞,1963)时,已经证明应用肥满度作为鼠类对环境适度的指标是可行的,能够看出该项指标季节的和逐年的变化以及它与种群密度的关系。所以现在再对大林姬鼠(Apodemus speciosus peninsulae Thomas)进行同样的研究。     

大林姬鼠的核型与B染色体研究

采用骨髓染色体制片法 ,对分布于吉林长白山、山东泰山和陕西秦岭的大林姬鼠的染色体组型、C -带、G -带和减数分裂的染色体行为进行了观察分析。发现 3个地区标本的染色体数目存在着显著差异。东北标本的 2n =48～ 51 ,A组染色体为 48条 ,均由端着丝粒染色体组成 ,同时具有 1～ 3条B染色体 ,其形态为中着丝粒染色体 ;山东标本的 2n =53～ 62 ,A染色体同样为 48条端着丝粒染色体组成 ,具 5～ 1 4条B染色体 ,其中 1条为较大的中着丝粒染色体 ,其余为小的中着丝粒和点状染色体。秦岭标本 2n =48～ 49,A染色体为 48条端着丝粒染色体 ,具 1条形态很小的端着丝粒B染色体。3地标本的B染色体均存在个体间和个体内变异。长白山标本B染色体的细胞克隆数目为 1～ 2 ,泰山标本为 1～ 3。在 3地标本中 ,中着丝粒B染色体呈现C -带阴性 ,点状B染色体呈中度深染。通过对减数分裂的观察 ,多数B染色体是以单价体的形式存在。中国长白山种群的B染色体数目和形态与朝鲜种群相似。与欧洲种群存在着显著差异。泰山种群的B染色体数目和形态与朝鲜种群及欧洲种群均存在显著差异。泰山种群与秦岭标本同属华北亚种 ,但它们的B染色体形态和数目差别很大。     

流行性出血热病毒核酸的提取

本文报告流行性出血热R22和A9株病毒培养,同位素标记及核酸提取的初步研究,並获得了该病毒核酸的3个片段即L、M、S、分子量分别约为:3.8、1.9和0.86×10~5道尔顿,不论用20～70％蔗糖密度梯度离心提纯的病毒,或用30％蔗糖垫层离心的粗制病毒,均获同样结果,但多数情况下,用蔗糖密度梯度离心时,除病毒峰外,还发现主要由细胞组份(即线粒体和核糖体等)组成的另一峰,并经常影响病毒RNA的提取,对如何获得纯净病毒及其核酸进行了讨论。     

流行性出血热病毒的细胞融合作用

我们的实验结果揭示流行性出血热病毒(EHFV)在酸性条件下可导致感染细胞发生融合,细胞间隙消失,细胞界限不清,细胞和细胞连在一起,形成多核的巨细胞体,姬姆薩染色比未融合细胞浅。融合液(Eagle’s基础培养液,含0.2％BSA,20mmol/L HEPES),用1.0NNaOH调pH至5.0—6.0时,细胞融合最甚,几乎所有的感染细胞都     

黑龙江省大林姬鼠中汉坦病毒的分离及其S基因序列分析

为了研究黑龙江省大林姬鼠携带汉坦病毒(HV)的分子特征,对黑龙江省大林姬鼠分离株NA33的S基因进行了扩增和序列分析。结果表明,NA33株S基因全长由1 693nt组成,TA含量丰富,编码N蛋白的ORF起始于37nt,终止于1 326nt,编码的蛋白长429aa,符合HTN型编码。与HV参考毒株进行比较,NA33与Amur类汉坦病毒同源性最高,与其它HTN型相对较低,与SEO等同源性更低。N蛋白进化树分析表明,NA33位于Amur类病毒所在支系,并且与俄罗斯远东和吉林大林姬鼠分离株亲缘关系更接近,体现了一定的宿主依赖性和地理簇集性。序列分析发现,NA33的N蛋白具有Amur类汉坦病毒保守的氨基酸位点。黑龙江省大林姬鼠携带Amur类汉坦病毒,是重要的传染源。     

流行性出血热病毒R22株cDNA克隆及其特异性鉴定

用家鼠型流行性出血热病毒R22株RNA,经polyA接尾,以Oligo-dT做引物,合成cDNA。用pUC18为载体转染E.coli Mc1061,建立cDNA克隆。再经菌落杂交,选择病毒特异性的5个阳性克隆制成缺口翻译探针,与病毒RNA3个片段进行反杂交,确定RNA片段的特异性。结果表明,3个克隆为中(M)片段的cDNA,另两个分别为大(L)和小(S)片段cDNA。核苷酸序列分析证明,克隆的DNA中含病毒特异的核苷酸序列。     

流行性出血热病毒的蚀斑形成技术

国外已有报道,流行性出血热病毒(EHFV)能在Vero-E6细胞上形成蚀斑。由于蚀斑试验和蚀斑减少试验用于测定病毒滴度及中和抗体效价较其它方法准确,且特异性高,适用于测定出血热病毒间抗原性差异,感染或免疫后中和抗体水平。但由于EHFV在细胞内繁殖培养时间较长,蚀斑形成的细胞培养条件要求较高,目前国内尚未见成功的报道。我们基本     

实验小鼠流行性出血热病毒的监测

流行性出血热(EHF)是一种主要经过啮齿动物,特别是鼠类传播的人畜共患急性病毒性疾病。在卫生部医学实验动物微生物控制标准中,是一级实验动物应排除的病毒,必须进行定期监测,以便采取有效的预防措施,保证实验动物质量。本文采用间接免疫荧光法,对小鼠进行血清病毒抗体监测。实验动物计有昆明种、BALB/C、C3H、C57BL/G、615和NIH小鼠,均来源于成渝两地医学单位,开放环境中饲养;自眼眶采血,分离血清;抗原细胞片来自中国药品生物制品检定所;羊抗兔免疫血清由四川省卫生防疫站提供;羊抗鼠IgG荧光抗体购自北京军事医学科学院(批号8901);…     

中国和日本分离的几株流行性出血热病毒的抗原性比较

采用间接免疫荧光法(IFA)和ELISA法比较了几株中国和日本流行性出血热病毒(EHFV)的抗原性,IFA法不能区分大鼠属和姬鼠属来源的病毒,ELISA竞争试验表明,大鼠型病毒(R22、SR-11和TR-352株)与姬鼠型病毒(A 9株)存在弱单向交叉反应,交叉ELISA证实,A 9株与R22株、SR-11株和TR-352株均有较显著的抗原性差异,但R22,SR-11和TR-352株彼此间抗原性相近,本文讨论了有关EHFV抗原性比较中的一些问题。     

流行性出血热病毒单克隆抗体的特性鉴定及其对病毒结构蛋白作用的初步研究

本文运用放射免疫沉淀法(RIP)、Western-blot及ELSA夹心法,对一组针对流行性出血热病毒(EHFV)L99株、C4株的单克隆抗体(McAb)进行特性鉴定,其中4株McAb针对糖蛋白G2,29株针对核壳蛋白(NP),1株针对糖蛋白G1和NP。微量中和试验和血凝抑制(HI)试验分析表明,虽绝大多数抗NP McAb既无中和活性亦无HI活性,但有1株例外。具有明显的中和活性和HI活性,提示EHFV核壳蛋白上可能存在中和抗原和血凝抗原决定簇。2株抗G2 McAb具有较高的HI活性,1株抗G2 McAb有较低的中和活性和较高的HI活性,另一株抗G2 McAb仅具有中和活性,表明EHFV糖蛋白G2上存在独立的中和与血凝抗原决定簇,也可能存在具有中和、血凝双重功能的决定簇。竞争ELISA分析显示。G2蛋白上某些中和位点和血凝位点虽然独立分布,但在某一区域可能相当靠近或有部分重叠。