2,4 -D对甘薯体细胞胚胎发生的调控

将来源于‘徐薯18’叶片的胚性愈伤组织,接种在含有不同2,4-D浓度的液体MS培养基中进行悬浮培养,悬浮细胞表现出不同的形态结构、分裂方式和发育途径：2,4-D浓度为1 mg/L时,细胞均等分裂,增殖迅速;不含2,4-D时,细胞多进行不均等分裂,并发育成体细胞胚。不同2,4-D浓度中培养的悬浮细胞,其胞外过氧化物同工酶谱及其随时间变化的方式有很大差异,并与细胞的生长、发育过程密切相关。     

2,4-D浓度对花生体细胞胚发生的影响

选用丰花2号、鲁花11和农大818三个花生品种的胚小叶为外植体,在MSB培养基中分别添加不同浓度的2,4-D(1、5、10、15、20ms／L)作为诱导培养基,以MSB为继代培养基,研究2,4-D浓度对花生体细胞胚胎发生的影响。结果表明：2,4-D浓度对花生胚小叶脱分化及再分化有显著影响,低浓度的2,4-D对外植体脱分化有利,而较高浓度对再分化有利,诱导体细胞胚的最适2,4-D浓度为15mg／L。不同品种的体细胞胚诱导频率存在差异,丰花2号和农大818比鲁花11的体细胞胚诱导频率高;且丰花2号的成苗能力较强,在MSB培养基上即可成苗,鲁花11及农大818成苗能力较差。     

2,4-D、BA对人参体细胞胚胎发生过程的影响研究

以人参芽胞、二年生人参根、实生苗（茎、叶）为外植体研究了体细胞胚的发生条件,并对其发生过程中可溶性蛋白、相关酶活性及内源激素的变化等进行了研究。结果表明,诱导愈伤组织的培养基为MS＋2,4-D4．0mg／L＋BA0．2mg／L;在MS＋2,4-D1．0mg／L＋KT0．2mg／L培养基上继代培养,可获得胚性愈伤组织;在无2,4-D的培养基上可诱导出胚状体。将胚状体转入无任何激素的MS培养基上继续培养,之后转入1／2MS培养基上获得再生植株。在体细胞胚胎发生过程中,可溶性多糖和可溶性淀粉含量在早期胚时较低,可溶性蛋白含量、POD及PPO活性在早期胚时最高;IAA在早期胚时期含量最高,在成熟胚时期ABA含量最高,而ABA／IAA比值在成熟胚时较高,利于体细胞胚的发育成熟。     

培养的胡萝卜细胞的体细胞胚胎发生

培养的植物细胞的体细胞胚胎发生,是研究从单个细胞到完整植株的分化和发育全过程的理想系统,对全能性表达的分子机制更是如此。本综述报告有关体细胞胚胎发生研究的最新进展。     

2,4-D诱导的花生体细胞胚发生的组织学研究

花生成熟胚胚叶在佃附加20mg/L 2,4-D的培养基上诱导20d后,转移至无激素培养基MS0继续培养,可获高频体细胞胚发生。组织学观察表明,体细胞胚起源于胚叶上表皮及表皮下数层细胞,这些细胞脱分化形成细胞质浓厚、细胞核大的胚性细胞团,胚性细胞团继续分裂形成体细胞胚。体细胞胚的发育过程经历球形胚、心形胚、鱼雷胚、子叶胚四个时期。     

2.4-D、6-BA对人参体细胞胚胎发生过程的影响研究

本实验以人参芽胞、二年生人参根、实生苗的茎、叶为外植体研究了体细胞胚的发生条件,并对其发生过程中可溶性蛋白、相关酶活性及内源激素的变化等进行了研究。结果表明,诱导愈伤组织的培养基为MS+2,4-D 4.0mg/L + BA 0.2mg/L;在MS+2,4-D 1.0mg/L + KT 0.2 mg/L培养基上继代培养,可获得胚性愈伤组织;在无2,4-D的培养基上可诱导出胚状体。将胚状体转入无任何激素的MS培养基上继续培养,之后转入1/2MS培养基上获得再生植株。组织细胞学观察表明人参胚状体的起源方式为单细胞起源。在体细胞胚胎发生过程中,多糖和淀粉含量在早期胚时较低,可溶性蛋白含量、POD及PPO活性在早期胚时最高;IAA在早期胚时期含量最高,在成熟胚时期ABA含量最高,而ABA/IAA比值在成熟胚时较高,利于体细胞胚的发育成熟。cDNA-AFLP 分析表明胚状体发育不同时期的人参培养物基因表达不同,从而导致了分化和发育。培养物HPLC分析表明胚胎发生试管苗总皂苷含量比子叶胚时期高4倍多。单体皂苷差异较大。     

甘蔗组织培养中2,4-D对过氧化物酶同工酶的影响

在甘蔗组培育苗中,过氧化物酶同工酶活性与胚性细胞团的分化程度有关。其中的Bo酶带与分化状态密切相关,是分化成苗的必要条件之一。细胞分裂素诱导Bo酶带的出现。2,4-D抑制细胞分裂素对Bo酶带的诱导,使Bo酶带消失,并且改变了过氧化物酶同工酶的组成与活性,抑制分化成苗,促进胚性细胞团的旺盛成长。     

胡萝卜体细胞的胚胎发生与游离氨基酸含量的关系

以胡萝卜的下胚轴为外值体,诱导其胚胎发生。在继代增殖系统中选得了胚胎发生能力快和慢的 M系和 C系,并比较了两系的生长与分化情况。M系愈伤组织的总游离氨基酸含量较高,其精氨酸含量及其占总游离氨基酸的％都高于C系,故而认为内源精氨酸的水平与细胞分化有关。     

楸树体细胞胚胎发生过程中4种同工酶分析

采用不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对楸树体细胞胚胎发生过程中的酯酶(EST)、过氧化物酶(POD)、淀粉酶(AMY)及ATP酶4种同工酶进行分析。结果表明,EST及POD同工酶酶带在楸树体细胞胚胎发生不同时期呈现规律性变化,胚性愈伤组织中EST、POD同工酶酶带较非胚性愈伤组织多且表达活跃,子叶胚时期活性最强,表明这一时期细胞内代谢旺盛。EST、POD、AMY及ATP同工酶在楸树胚性与非胚性愈伤组织中谱带差异明显,表明这4种同工酶与体胚发生具有密切关系,可以作为楸树胚性愈伤组织和体胚发生的重要标志。     

体细胞胚胎发生标记

De Danske Sukkerfabrikker和丹麦皇家农业大学的M.Joersbo等人已分离出一种对胚胎发生细胞有专一性的异过氧化物酶。他们使用琼脂糖凝胶上提取蛋白的等电聚焦法,从无植物生长素的培养基上再培养2～6天的胡萝卜胚胎发生细胞悬浮系中发现了同功酶。而在无胚胎发生细胞系中只发现极小量的同功酶。在培养基中加入2,4-D既抑制了细胞的胚胎发生又抑制了异过氧化物酶的活性。荷兰瓦赫宁根农业大学研究人员P.F.Fransz等人在玉米胚胎发生愈伤组织培养物中     

低温预处理对水曲柳体细胞胚胎发生的影响

用4℃低温预处理未成熟的水曲柳种子0-30d,取出种子内的合子胚为外植体诱导体胚发生,研究低温预处理影响体胚发生的结果表明：低温预处理过的外植体其体胚发生总数和子叶胚发生数均低于未作低温预处理的;随着预处理时间的延长,畸形胚发生数和发生比率与总的体胚发生数和发生率的变化趋势基本相同;处理20d的正常胚发生数和发生比率的绝对数虽然很低,但远高于不作低温预处理的。说明4℃低温预处理对水曲柳体胚发生没有促进作用,对畸形胚的发生也不能控制,总的来讲,适当的低温处理有一定的改善正常体胚发生的潜力。     

胡萝卜体细胞胚胎发生中的细胞组织化学和蛋白质组成变化

研究胡萝卜体细胞胚不同发育阶段的细胞组织化学和蛋白质组成变化的结果表明:胚性愈伤组织主要源自维管束周围的细胞.球胚形成前期,淀粉粒和糊粉粒极性分布已很明显.子叶胚期,芽开始分化,有大量糊粉粒累积.在体细胞胚发育过程中,淀粉粒在胚性愈伤组织形成初期和球胚后期、糊粉粒在胚性愈伤组织形成后期和球胚期各有两次累积高峰.     

胡萝卜体细胞胚胎发生培养物cDNA的分子克隆和选择

从13日龄的胡萝卜Woolc细胞株培养物分离PolyA+mRNA,按Leonard程序合成双链cDNA,将cDNA甲基化、末端变平,并与EcoR I接头连接之后再与λgtll DNA连接构成重组DNA分子,经离体包装,构建得到一个复杂度为1．5×10⁶的cDNA文库。组织特异的cDNA克隆用与胚胎组织抗原特异反应的多克隆抗体进行筛选得到。     

文冠果的体细胞胚胎发生

文冠果种子在MS 6-BA 1.0 mg·L-1 2,4-D 1.0 mg·L-1 NAA 1.0 mg·L-1 3%蔗糖的固体培养基上暗培养,形成愈伤组织,愈伤组织在B5 6-BA0.5mg·L-1 NAA0.5mg·L-1 2%蔗糖的培养基中弱光悬浮培养形成体细胞胚.在蔗糖为1%时,子叶状胚萌发形成完整小植株.细胞学观察表明,文冠果体细胞胚源于胚性愈伤组织的外层细胞,此区域细胞富含淀粉粒.     

落叶松体细胞的胚胎发生

简要回顾了重要用材树种落叶松体细胞胚胎发生的研究历史,并对落叶松体细胞胚胎发生的基本步骤、影响体细胞胚胎发生的因素及其主要应用,进行了综述,同时就落叶松体胚发生的研究趋势作了展望.     

香果树体细胞胚胎发生过程中4种同工酶的研究

用非变性聚丙烯凝胶电泳技术对香果树体细胞胚胎发生及形态建成过程中过氧化物酶(POD)、酯酶(EST)、淀粉酶(AMY)和超氧化物歧化酶(SOD)4种同工酶进行分析.结果表明:香果树体细胞胚胎发生及形态建成过程中,POD、EST、AMY和SOD活性变化与胚性愈伤组织的诱导及体细胞胚的发生发育密切相关.非胚性愈伤组织和胚性愈伤组织酶谱差异明显,胚性愈伤组织中EST和AMY同工酶酶带多且活性高,非胚性愈伤组织中缺乏EST和AMY同工酶表达,AMY同工酶可作为胚性细胞分化和发育的重要标志.香果树体细胞胚形态建成过程中,球形胚时期的AMY、POD、EST同_T酶活性最强,表明这一时期生理代谢旺盛,是体细胞胚形态建成的关键时期;POD、AMY和SOD 3种同工酶的酶谱及表达强弱在形态建成的不同时期呈现有规律的变化,可作为香果树体细胞胚发生发育特定时期的参考标记. 与胚性愈伤组织的诱导及体细胞胚的发生发育密切相关.非胚性愈伤组织和胚性愈伤组织酶谱差异明显,胚性愈伤组织中EST和AMY同工酶酶带多且活性高,非胚性愈伤组织中缺乏EST和AMY同工酶表达,AMY同工酶町作为胚性细胞分化和发育的重要标志.香果树体细胞胚形态建成过程 ,球形胚时期的AMY、POD、EST同_T酶活性最强,表明这一时期生理代谢旺盛,是体细胞胚形态建成的关键时期;POD、AMY和SOD 3种同工酶的酶谱及表达强弱在形态建成的不同时期呈现有规律的变化,可作为香果树体细胞胚发生发育特定时期的参考标记. 与胚性愈伤组织的诱导及体细胞胚的发生发育密切相关.非胚性愈伤组织和胚性愈伤组织     

石刁柏体细胞胚胎发生过程中蛋白质及同工酶变化的研究

本文报道石刁柏胚性愈伤组织的可溶性蛋白质含量与组分、过氧化物酶和酯酶的活力及同工酶带均比其体细胞胚的要少。而在体细胞胚胎发生过程中,过氧化物酶和酯酶活力、可溶性蛋白质含量均以球形胚为最低,子叶分化期胚为最高而呈递增趋势;可溶性蛋白质组分以子叶分化期胚、成熟胚为最多,球形胚、香蕉形胚为最少;过氧化物酶同工酶带以梨形胚为最多,子叶分化期胚、成熟胚为最少;酯酶同工酶则以子叶分化期胚为最多,成熟胚为最少。胚性愈伤组织与体细胞胚均有其特异性可溶性蛋白质及同工酶带,可作为体细胞胚胎发生的分子标记。     

油菜素内酯对陆地棉体细胞胚胎发生的影响

0.01ppmBR能使陆地棉Coker201,312两品种分化产生胚性愈伤组织,并有效地保持该种愈伤组织的生活力和胚胎发生能力。0.01ppmBR 0.5 ppmIAA促进Coker201,312两品种体细胞胚胎发生,0.01ppmBR 0.05ppm 2,4—D能诱导所有供试品种产生疏松黄绿色愈伤组织,2,4—D用量逐步降低或除去后,一些品种便分化产生胚性愈伤组织或体细胞胚状体。     

大豆体细胞胚胎发生影响因素的研究

研究了影响大豆幼胚培养体细胞胚胎发生频率的9个因素。诱导体细胞胚胎发生的适宜幼胚长度为4mm;随着供俸植株发育阶段的提高诱导频率下降;最适基本培养基为 MS 培养基;蔗糖浓度从1.5%提高到9%,诱导频率逐渐下降;过高的维生素 B_1浓度对胚胎发生不利;2,4-D 的诱导效果优于 NAA,适宜的2,4-D 浓度为20ppm;光、暗处理与生长素种类和浓度之间存在交互作用;接种方式对诱导频率影响很大,体细胞胚只在下表皮与培养基接触的幼子叶的上表皮上产生,当上表皮与培养基接触时,两个表皮都不能产生体细胞胚;被试的所有基因型都能被诱导胚胎发生,不同基因型的诱导频率存在差异。