珠美海棠组织培养开发研究总结报告

本研究共进行了12年(前6年在中国果树所进行,后6年在天津农学院进行)。经研究证明了珠美海棠(Malus Zumi)是一种非常有经济价值的用生物技术可以直接开发利用的野生果树资源。实验证明,用果树组织培养技术可以快速繁殖珠美海棠,并保持其种质不变。可以成批量的工厂化生产苗木.周年可以生产,而且试管苗移栽成活率可达90%以上。并且对珠美海棠生物学特性进行了深入的研究,特别是耐盐碱特性,用试管内培养基、水培、土培、大田试     

珠美海棠试管苗的土壤支撑生根培养和带坨移栽

以粘壤土做培养基支撑物,选用只含有0．5mg·L^-1IBA和15g·L^-1蔗糖的液体培养基,珠关海棠试管苗茎段生根培养的结果显示,试管苗生根率可达到100．0％,明显高于琼脂支撑培养,根长也显著提高,并且长出正常的根毛。土支撑培养生根的珠美海棠试管苗开瓶炼苗21d后带坨移入营养钵中,移栽后不喷雾、并毋需覆盖塑膜、午后空气相对湿度控制在50％-65％,其成活率达到92．2％;在开瓶炼苗21d后,黑暗中叶片气孔的关闭率从26．7％增加到88．5％。     

白萼吊钟海棠的组织培养与快速繁殖

以带节茎段为外植体进行了白萼吊钟海棠(Fuchsia alba-coccineaHort.)的组织培养和快速繁殖研究,对外植体的灭菌方法以及在试管苗增殖和生根培养过程中不同浓度的激素配比进行了筛选,同时研究了抑制试管苗褐化和玻璃化的方法。结果表明,最适宜白萼吊钟海棠外植体灭菌的方法是用0.1%HgC l2处理4~6 m in;MS培养基中不加NH4NO3可完全消除试管苗玻璃化现象;MS培养基中加入1.0 g.L-1PVP,可基本抑制试管苗褐化;试管苗增殖的最佳培养基为含0.8 mg.L-16-BA、0.10 mg.L-1NAA和1.0 g.L-1PVP的MS培养基;试管苗生根的最适培养基为含0.1~0.2 mg.L-1NAA和1.0 g.L-1PVP的1/2 MS培养基。     

彩纹海棠的快速繁殖研究

彩纹海棠叶片培养在MS基本培养基中,研究植物的激素、培养基的物理性质对器官形成的影响及试管苗移栽技术等.试验结果表明细胞分裂素BA促进芽的形成和增殖。BA和NAA配合使用,对叶片形成芽有增效作用。通过继代培养,能繁殖大量无根苗。将无根苗转入含有NAA0.2mg/L或IBA ling/L的1/2MS培养基中,诱导生根形成完整植株。诱导叶片形成芽应采用固体培养基;而液体静置培养则有利于促进芽发育成苗和生根。试管苗移栽获得成功,幼苗生长良好。     

珠美海棠组培芽苗气培生根的某些生理基础

珠美海棠组培芽苗经８次以上继代分化,分化苗生长６０－８０ｄ,再经各处理后进行气培生根培养１５ｄ即可生根,生根率达８０％以上。     

珠美海棠组培芽苗气培生根的某些生理基础(简报)

珠美海棠组培芽苗经8次以上继代分化,分化苗生长60～80d,再经各处理后进行气培生根培养15d即可生根,生根率率达80％以上。     

丽格海棠胚性愈伤组织诱导与植株再生

以丽格海棠幼嫩叶柄为外植体,采用培养基④(MS培养基,4.0 mg/L 2,4-D,0.5 mg/L6-BA)为胚性愈伤组织诱导培养基,诱导率达86%;以培养基③(MS培养基,3.0 mg/L 2,4-D,0.2 mg/L 6-BA)为胚性愈伤组织增殖培养基进行扩增;胚状体分化培养基为培养基⑥(MS培养基,2.0 mg/L 6-BA,0.2 mg/L NAA,0.2 mg/L IBA),分化率达100%;对幼根发育不良的胚性植株,在培养基⑩(MS培养基,0.1 mg/L IAA)上进行生根培养,生根率100%,平均根数3~5条,带侧根,长约2~3 cm。试管苗在森林土:蛭石:河沙=1:1:1的基质中生长良好,成活率100%。培养基中均附加3%蔗糖、0.6%琼脂,pH值为5.8~6.0。     

斑花杓兰试管苗根茎繁殖

为保护斑花杓兰Cypripedium guttatumu种质、实现栽培,以其根茎为材料,采用组织培养方法,进行试管苗培养、根茎继代繁殖培养、试管苗扦插和定植研究。结果表明：1/2MS＋蔗糖16 g/L＋ABT 2号10 mg/L＋IAA 0.4 mg/L是根茎试管苗培养的理想培养基,且这种以炉灰渣为支持物的培养基也是试管苗根茎继代繁殖培养的理想培养基;在温室苗床上试管苗根茎段扦插成活率为96.5%,繁殖速度比移栽提高2.2倍;根茎扦插试管苗定植的成活率为96.8%。定植成活的根茎试管苗保持了野生斑花杓兰的所有植物学性状。     

小金海棠叶片的组织培养与快速繁殖

1植物名称苹果(砧木)小金海棠(Malus xiaojinensis Cheng et.Jiang). 2材料类别组培苗. 3培养条件以MS为基本培养基.(1)起始和增殖培养基:MS 6-BA 0.2 mg·L-1(单位下同) IAA0.5 3%蔗糖 6.5 g·L-1琼脂;(2)生长培养基:MS 6-BA 0.6 NAA 0.2 GA3 0.3 3%蔗糖 7 g·L-1琼脂;(3)再生培养基:MS 6-BA 1.0 NAA 1.0 TDZ4.0 3%蔗糖 7 g·L-1琼脂;(4)生根培养基:1/2MS IAA 1.0 3%蔗糖 6 g·L-1琼脂.培养基pH调整至5.8,121℃、0.11 MPa灭菌20 min.培养温度为(25±2)℃,光照时间14 h·d-1,光强为40μmol·m-2·s-1.     

中国苹果属植物染色体研究

本文报道了中国苹果属Malus Mill．21种36类型的核型和6个多倍体类型的减数分裂联会构 型。 (木+多)(木+衣)海棠组Sect．Docyniopsis和花楸苹果组Sect．Sorbomalus中的滇池海棠系Ser． Yunnanenses 属2A型,陇东海棠系Ser．Kansuenses中的变叶海棠M．toringoides和花叶海棠M． transitoria属2A、2B则,三叶海棠系Ser．Sieboldianae属2B型,苹果组Sect．Malus中的苹果系 Ser．Pumilae和山荆子系Ser．Baccatae除小金海棠M．xiaojinensis 2B型外,均属3B型。减数分 裂观察结果有同源四倍体,节段异源三倍体和异源三倍体类型。本文还讨论了种类间在核型上的差异、栽培种的起源,核型的演化趋势以及无融合生殖类型的分类学处理。     

NaCl和等渗聚乙二醇对苹果属植物游离脯氨酸含量的影响

测定了不同耐盐性苹果属植物珠眉海棠、小金海棠和山定子幼苗各部位的游离脯氨酸含量,结果表明,NaCl胁迫下苹果属植物游离脯氨酸含量增加均大于等渗PEG处理,NaCl和等渗PEG处理对耐盐种的游离脯氨酸含量影响较小,高盐度下盐敏感种的游离脯氨酸含量持续大量增加。     

香附子块茎试管苗繁殖

以香附子块茎为材料,用组织培养的方法,进行试管苗繁殖研究。结果表明,1/3MS+炉灰渣培养基是块茎生长芽培养的适宜培养基;1/2MS+ZT 0.6 mg/L+NAA 0.1 mg/L是生长芽分化和继代分化繁殖培养的适宜培养基;1/2MS+ABT 2号6 mg/L+IAA 0.4 mg/L是生根和试管苗微型块茎培养的适宜培养基。培养30 d试管苗移栽成活率96%;培养60 d试管苗移栽成活率89.7%;种植的块茎发芽率99.8%;试管苗和微型块茎定植的成活率在99%以上;定植试管苗保持了香附子的植物学特征。     

琼脂浓度、pH值及接种苗大小对文心兰试管苗增殖的影响

探讨了培养基中琼脂浓度、pH值和接种苗大小对文心兰试管苗增殖及生长发育的影响。结果表明：培养基中使用的琼脂浓度不仅对文心兰试管苗的增殖有影响,而且对试管苗后期的生长发育也有影响,在琼脂粉使用量达6．0g/L时,增殖率明显降低,后期苗生长发育不良;接种苗的大小对试管苗的增殖率影响较大,小苗易于形成丛生芽苗和原球茎,增殖系数可达7．07,而大苗则不能形成丛生芽苗也无原球茎形成;培养基的pH值在5,2～6．5范围内,试管苗增殖率差异不明显,试管苗的生长发育均正常。     

葡萄试管苗光自养培养快速繁殖

葡萄是世界上栽培面积和总产量都占第一位的果树。有关葡萄茎尖培养、侧芽培养和无 病毒苗的试管繁殖都有报道。但是试管苗移栽成活率一般较低而且很不稳定,这就使葡萄试管苗(特别是脱病毒试管苗)快速繁殖在生产上的应用受到很大限制。本试验利用光自养培养获得的葡萄试管苗生长发育正常,移栽前练苗时培养基不易污染,可适当延长练苗时间,并且,此试管苗对移栽后的环境条件具有很强的适应能力,成活率高,生长速度快。我们     

苹果矮化砧木‘JM7’的组织培养及其离体叶片不定梢再生

以苹果优良矮化砧木‘JM7’ （Malus prunifolia×M. pumila ‘Malling 9’）为试材, 研究了基本培养基对试管苗增殖生长的影响、蔗糖浓度对试管苗生根的影响及基本培养基、细胞分裂素种类和浓度对离体叶片不定梢再生的影响。结果表明： 基本培养基MS比QL显著提高增殖梢数, 但QL比MS更有利于获得健壮生长的绿苗。3%蔗糖浓度比2%的不定根发生速度快。叶片不定梢再生最适宜的基本培养基是QL。在QL培养基上, 6-BA和TDZ对离体叶片不定梢再生率的影响无显著差异, 但6-BA诱导产生的不定芽在不定梢诱导培养基上可直接伸长生长形成不定梢, 而TDZ诱导产生的不定芽需转移到不加TDZ而加低浓度6-BA的培养基上形成伸长生长的不定梢。     

湖北海棠原生质体培养获得愈伤组织

对湖北海棠成熟胚下胚轴诱导愈伤组织并建立悬浮细胞系,用０．５％纤维麦０和０．２％果胶酶分离悬浮系细胞,将酶解的原生质体培养在附加激素和有机成分的ＭＴ培养基中,采用液体浅层培养,获得了愈伤组织。     

“固液双层”培养法诱导马铃薯‘米拉’试管薯的研究

该研究以马铃薯‘米拉’品种的脱毒试管苗为材料,采用"固液双层"的培养方式,通过正交试验对其试管苗壮苗生长阶段和试管薯诱导阶段的培养基进行优化,并通过单因素试验研究蔗糖浓度、光照条件和CCC浓度对试管薯结薯的影响。结果表明:在"固液双层"培养中,‘米拉’壮苗培养阶段优化的培养基为改良MS培养基(硝酸铵为2 000 mg·L~(-1)、硝酸钾为2 000 mg·L~(-1))+500 mg·L~(-1)CCC+0.1%活性炭+0.1mg·L~(-1)DA-6+1 mg·L~(-1)6-BA+0.1 mg·L~(-1)NAA+3%蔗糖+6 g·L~(-1)琼脂,pH 5.8。试管薯诱导及生长阶段优化的培养基为MS_1培养基(微量元素和铁盐的用量为MS培养基的2倍)+1.5%活性炭+4 mg·L~(-1)6-BA+8%蔗糖。在试管薯诱导阶段,弱光4 h·d~(-1)培养诱导的试管薯,结薯指数、大薯率、薯块重量均优于暗培养。"固液双层"培养是一种低成本的方法,在组织培养室内就可以大量繁殖‘米拉’试管薯,并且能增加原种的数量,这种方法也能用于马铃薯其他栽培品种试管薯的诱导。     

丽格海棠的组织培养

由于丽格海棠通过扦插获得的量有限,进口种子的价格又很昂贵,所以以它的叶、茎、花茎、叶柄等营养器官作为外植体,进行组织培养来快速获得丽格海棠。通过诱导芽分化和诱导愈伤两种途径,研究不同植物生长调节剂及浓度,对外植体萌发和生根的影响。研究表明基本培养基为MS,最佳分化培养基为6-BA1．00mg／L NAA0．10mg／L;最佳生根培养基为1／2MS NAA0．mg/L;花土：沙子=1：1,是丽格海棠最佳的驯化移栽基质,在该基质中生根苗移栽成活率达90％。     

供氮水平对不同砧穗组合苹果叶片衰老及~(13)C、~(15)N分配利用的影响

砂培条件下,以2年生烟富3/八棱海棠(乔化)、烟富3/M7(半矮化)和烟富3/M26/八棱海棠(矮化)为试材,采用C、N双标记示踪技术,研究供氮水平(0N、25%N和100%N,100%N为Hoagland完全营养液中的N量)对不同砧穗组合苹果叶片衰老及~(13)C、~(15)N分配利用的影响.结果表明:在秋梢停长期,在同一氮素胁迫(0N和25%N)下植株叶片的叶绿素、氮含量和光合速率均以烟富3/八棱海棠最大,其次是烟富3/M7,烟富3/M26/八棱海棠最小,而正常氮素处理(100%N)均以烟富3/M26/八棱海棠最大,其次是烟富3/M7,烟富3/八棱海棠最小;在同一氮素胁迫水平下叶片的SOD和CAT活性均为烟富3/八棱海棠烟富3/M7烟富3/M26/八棱海棠,而正常氮素水平均为烟富3/M26/八棱海棠烟富3/M7烟富3/八棱海棠;在同一氮素水平下,3种砧穗组合苹果植株根和叶片的~(15)N、~(13)C分配率存在显著差异,氮素胁迫处理植株根的~(15)N、~(13)C分配率最高,表现为烟富3/八棱海棠烟富3/M7烟富3/M26/八棱海棠,而正常氮素处理植株叶片的~(15)N、~(13)C分配率最高,表现为烟富3/M26/八棱海棠烟富3/M7烟富3/八棱海棠.在不同氮素水平下,3种砧穗组合苹果植株氮肥利用率存在显著差异,且均以烟富3/八棱海棠植株最大,分别为44.3%、37.5%和31.4%,其次是烟富3/M7,分别为38.8%、30.7%和26.6%,烟富3/M26/八棱海棠最小,分别为32.0%、27.2%和22.5%.     

湖北海棠原生质体培养获得愈伤组织(简报)

由湖北海棠成熟胚下胚轴诱导愈伤组织并建立悬浮细胞系,用0．5％纤维素酶R－10和0．2％果胶酶分离悬浮系细胞,将酶解的原生质体培养在附加激素和有机成分的MT培养基中,采用液体浅层培养,获得了愈伤组织。