泰山赤鳞鱼同工酶的研究

采用琼脂糖凝胶电泳或聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳（ＰＡＧＥ）技术研究了泰山赤鳞鱼早期发育阶段（受精后０—１２０ｈ）及成体眼、脑、心、肾、肝、肌６种组织中的ＬＤＨ同工酶分化表达谱式。结果表明：（１）赤鳞鱼在胚胎发育过程中Ｌｄｈ－Ａ基因和－Ｂ基因同时表达,形成５种不同形式的四聚体（Ｂ４、ＡＢ３、Ａ２Ｂ２、Ａ３Ｂ、Ａ４）。与大多数硬骨鱼相比,赤鳞鱼ＬＤＨ同工酶具有独特的早期个体发育谱式：在整个胚胎发育时期,Ａ亚基与Ｂ亚基的活性几乎相等。（２）赤鳞鱼的ＬＤＨ同工酶谱具有明显的组织特异性。Ｌｄｈ－Ｃ基因仅在肝脏组织表达,以向阴极迁移的分子形式（ＬＤＨ－Ｃ４）特异地表达。     

暗纹东方同工酶生化表现型的研究

利用聚丙烯酚胺凝胶垂直平板电泳方法,对暗纹东方的心、肝、肾,肌、性腺５种不同组织的７种同工酶（ＥＳＴ、ＬＤＨ、ＰＯＤ、ＭＤＨ、ＳＯＤ、ＳＤＨ、α－ＡＭＹ）进行了研究,讨论了各同工酶的基因表达谱式,观察到ＥＳＴ同工酶存在着多态现象;ＬＤＨ同工酶有二个基因位点,但只表现３条带,Ａ与Ｂ亚基的结合受阻;ＭＤＨ同工酶存在性别差异,说明决定ＭＤＨ同工酶表达的因素在不同性别中存在差异;ＳＯＤ同工酶有３个基因位点。各同工酶酶谱稳定,有组织特异性,倡ＥＳＴ、ＭＤＨ、ＳＯＤ、ＰＯＤ同工酶在各组织器官中又表现出较大的一致性,有利于物种的鉴定。α－ＡＭＹ与ＳＤＨ只在个别组织中有活性,可能与特定组织与器官的形态发生与机能分化有关。     

泰山郝鳞鱼同工酶的研究

采用琼脂糖凝胶电泳或聚丙酰胺垂直板凝胶电泳（ＰＡＧＥ）技术研究了泰赤鳞鱼早期发育阶段（受精后０－１２０ｈ）及成体眼、脑、心、肾、肝、肌６种组织中的ＬＤＨ同工酶分化表达谱式。结果表明：（１）赤鳞鱼在胚胎发育过程中Ｌｄｈ－Ａ基因和－Ｂ基因同时表达,形成５种不同形式的四聚体（Ｂ４、ＡＢ３、Ｂ３Ｂ、Ａ４）。与大多数硬骨鱼相比,赤鳞鱼ＬＤＨ同工酶具有独特的早期个体发育谱式：在整个胚胎发育时期,Ａ亚基与Ｂ亚基     

草鱼同工酶发育遗传学研究——Ⅱ.早期发育过程中的同工酶分析

采用淀粉凝胶电泳技术研究了草鱼早期发育过程中(受精后0—200小时)6种同工酶系统(LDH、MDH、GDH、ADH、IDH、EST)的表达谱式。除了ADH以外,其余5种同工酶系统均具有明显的发育变化谱式。根据早期发育过程中同工酶的变化谱式及其组织分布,草鱼的同工酶可分为三大类型:(1)在未受精卵及早期发育过程中一直存在,并常有较广泛的组织分布;(2)未受精卵及早期发育过程中均不存在,一般仅分布于少数几种组织中;(3)未受精卵及胚胎发育早期不存在,直到早期发育过程中某一特定时期才开始出现。     

社鼠组织器官同工酶的研究

用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳方法,分析了社鼠的肝、肾、心肌、骨骼肌、肺、脾和脑等多种组织器官的ＬＤＨ、ＡＤＨ、ＥＳＴ、和ＳＯＤ４种同工酶,对各组织器官的酶带数目和分布,以及酶活性进行了比较研究。结果表明,社鼠的ＬＤＨ同工酶、ＡＤＨ同工酶和ＥＳＴ同工酶具有比较明显的组织特异性,而ＳＯＤ同工酶的组织特异性较低。肺和脾除ＥＳＴ同工酶活性较高外,脑除ＬＤＨ同工酶活性较高外,其它３种同工酶的活性均较低;而肝和肾中４种同工酶的活性普遍很高。心肌和骨骼肌因氧张力不同而使ＬＤＨ同工酶酶谱存在明显差异,但其它３种同工酶酶谱却非常相似。同工酶的组织特异性与各组织器官所执行的生理功能是相一致的     

黄鳝性逆转过程中同工酶的分析研究 Ⅰ．雌雄个体不同组织的同工酶分析

作者采用三种垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳对雌雄黄鳝６种组织的乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、酯酶（ＥＳＴ）进行了研究。结果表明ＬＤＨ同工酶谱为细带型,可分为３区８条带,其迁移率为Ａ＞Ｂ＞Ｃ,其中Ｃ＿４仅出现在心、脑和肌肉中。ＬＤＨ在肝中表达甚微。ＥＳＴ同工酶显示３区７条带。黄鳝的同工酶有明显的组织特异性,在两性中的表达也存在一定的差异,这种差异ＥＳＴ比ＬＤＨ明显;肝、肾和性腺比其它组织较明显。这两种同工酶在雌性中的表达均比在雄性中强。以上反映了差别的基因活性。本文还讨论了黄鳝同工酶的遗传基础,亚基的组成以及ＬＤＨ迁移率和黄鳝演化地位的关系。     

中华大蟾蜍人工诱发冬眠后组织内LDH同工酶的变化

非冬眠中华大蟾蜍７种组织中分离出３－５种具不同活力的ＬＤＨ轴工酶谱带,Ｌｄｈ－Ａ,Ｌｄｈ－Ｂ基因的表达有一定的组织特异性,其酶谱特征可分为心肌型和骨骼肌型两种类型。经４±１℃低温条件诱眠６周后,脾脏,肺,肝脏和脂肪中的ＬＤＨ同工酶谱带减少,但从Ｌｄｈ－Ａ,Ｌｄｈ－Ｂ两个基因表达能力看,其各组织内表达活性（Ａ：Ｂ规律性）没有产生明显变化。     

两种泥鳅不同核质关系下LDH同工酶基因表达的研究

采用聚丙烯酰胺不连续系统凝胶电泳方法分析了泥鳅和大鳞副泥鳅不同杂交组合不同核质关系下胚发育阶段（0－145h）中乳酸脱氢酶（LDH）同工酶的分化表达谱式,ＬＤＨ同工酶的基因表达随细胞质、细胞核不同及胚胎发育各个时期具有不同的个体发育谱式,以泥鳅卵子为细胞质的Ⅰ、Ⅱ两组,杂交组（Ⅱ）ＬＤＨ同工酶基因在受精后３min至原肠中期雄核基因参与表达与调控,部分基因位点比本交组（Ⅰ）启动与表达的时间要早,两组的管家酶主要来自细胞质。以大鳞副泥鳅为细胞质的Ⅲ、Ⅳ两组,各酶均以细胞质调控为主,其管家酶与泥鳅有很大不同。并具体分析和讨论了不同核质关系ＬＤＨ同工酶基因的表达和调控的时空顺序。     

鳙鱼同工酶发育遗传学研究

采用淀粉或聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析鳙鱼早期发育阶段(从未受精卵到卵黄吸尽期)及成体不同组织(脑、眼、心、肌、肾、肝)中六种同工酶(LDH,MDH,IDH,ADH,SDH,EST)的分化表达模式。鳙鱼同工酶基因的表达具有明显的组织特异性。早期发育阶段,ADH和SDH均无染色活性;LDH、MDH和IDH具有不同的发育变化谱式,而EST酶谱在整个早期发育阶段均无明显变化。与鲢、草鱼相比,鳙鱼早期发育过程中胚胎Ldh-A基因激活的时间被推迟。上述结果可为鳙鱼种群的生化遗传结构分析以及鳙鱼的人工育种提供基础资料。     

青草鲢鳙四种鱼同工酶的比较研究

采用聚丙烯酰氨垂直板状连续电泳方法,对青草鲢鳙６种组织、１０种同工酶和蛋白质进行了电泳研究,并结合作者以前做的工作,对所研究的共２１种同工酶和蛋白质在４种鱼中的组织分布,位点表达及活性作了分析和总结。结果表明：４种鱼同工酶的种内组织分布差异大于种间差异;ＡＤＨ、ＡＭＹ、ＣＡＴ、ＥＳＴ、ＭＥ、ＰＯＸ、ＳＤＨ存在不同程度的种间差异,可作为种类的遗传标记;４种鱼ＭＤＨ、ＧＯＴ、ＡＬＰ、ＡＯ、ＳＯＤ同工酶谱非常相似,只在活性上略有差异;ＬＤＨ、Ｇ６ＰＤＨ和ＣＯＸ的酶谱特征可作为青草和鲢鳙两个亚科的鉴别标记。     

草鱼同工酶发育遗传学研究——Ⅰ.不同组织器官的同工酶分析

采用垂直淀粉凝胶电泳及特异性组织化学染色技术,研究了草鱼成体脑、眼、心、肾、肌、肝等6种组织中的6种同工酶系统(LDH、MDH、GDH、ADH、LDH、EST)的分化表达谱式。结果表明,草鱼的同工酶系统具有明显的组织特异性。与绝大多数硬骨鱼类相比,草鱼的LDH、m-MDH和ADH同工酶具有特殊的表达谱式:m-MDH和ADH均由两个基因座位编码;肾脏在LDH-A_3B与LDH-A_2B_3之间多出1条LDH酶带(LDH-X)。本文还讨论了草鱼同工酶的遗传基础和亚基组成,以及本实验的某些结果与其他作者的结果不相符的原因。     

三种鲫鱼品系同工酶比较研究

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳技术,对彭泽鲫、银鲫D系以及野鲫三种鲫鱼品系的心、肝和肾脏组织的乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、苹果酸酶(ME)、酯酶(EST)和超氧化物歧化酶(SOD)同工酶表型进行了比较研究.结果表明彭泽鲫乳酸脱氢酶同工酶比银鲫D系在肝组织多出二条酶带(LDH7'和LDH8');超氧化物歧化酶在心和肾组织中分别多出一条酶带(SOD12'),表明彭泽鲫和银鲫已在生化水平产生明显的分化,推测它们可能起源于不同的地区,由不同的祖先,独立演化而形成.此外,彭泽鲫和银鲫D系的同工酶电泳图谱都包含野鲫的基本酶带,而彭泽鲫和野鲫的酯酶同工酶电泳图谱尤为相似,推测彭泽鲫和银鲫可能起源于野鲫,而彭泽鲫和野鲫的关系较近,银鲫和野鲫的关系较远.     

四类不同倍性鲫鱼在胚胎发育期间同工酶基因表达的比较分析

Isozyme zymograms of esterase (EST), lactate dehydrogenase (LDH), malate dehydrogenase (MDH) and superoxide dismutase (SOD) were analysed by polyacrylamide gradient gel electrophoresis at different developmental stages of embryogenesis in 4 types of various ploidy crucian carp embryos, including haploids, diploids, natural triploids, and multiple tetraploids, and 2 types of haploid and diploid common carp embryos. Haploid embryos of crucian carp (Carassius auratus) and common carp (Cyprinus carpio) were produced by treating eggs with UV-irradiated milt from blunt snout bream (Megalobrama amblycephala). Natural triploid embryos were obtained from the eggs of gynogenetic silver crucian carp (Carassius auratus gibelio) inseminated with milt from red common carp. Multiple tetraploid embryos were also produced by gynogenesis from eggs of the newly discovered multiple tetraploid females inseminated with milt from red common carp. Gradient gel electrophoresis indicated that the band types and staining intensity of 4 isozymes expressed in haploid embryos of crucian carp and red common carp were similar to that in the correlative diploid embryos. In natural triploid silver crucian carp embryos, the zymograms of MDH and SOD isozymes were identical with that of diploid crucian carp embryos, but the EST and LDH isozymes manifested more new enzyme bands in comparison with diploid embryos. The corresponding expressed products of some bands in the triploid embryos, such as EST5 and EST6, could be observed also in red common carp embryos, which provided evidence for hybrid origin about the gynogenetic fish. The multiple tetraploids incorporated one foreign genome of red common carp, therefore, the effects of genes from the foreign genome could be observed in the multiple tetraploid embryos. Gene expression of the isozymes in the tetraploid embryos was somewhat similar to that in hybrids. Owing to interaction of triploid silver crucian carp genomes and common carp haploid genome, some isozyme bands, such as EST5 and EST6, changed in quantity, and some bands increased, such as s-SOD1, s-SOD2, s-SOD3 and s-SOD4 in the tetraploid embryos. Moreover, the heterogeneity was revealed among embryos developed from gynogenetic eggs of 3 different multiple tetraploid individuals.     

四类不同倍性鲫鱼在胚胎发育期间同工酶基因表达的比较分析

用聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳比较分析了单倍体、二倍体、三倍体和复合四倍体4类不同倍性鲫鱼以及单倍体和二倍体鲤鱼在胚胎发育时期4种同工酶(EST,LDH,MDH,SOD)酶谱。结果表明,单倍体鲫鱼和单倍体鲤鱼胚胎与各自的二倍体胚胎相比,同工酶酶谱看不出差异;天然三倍体银鲫胚胎的MDH和SOD同工酶酶谱与二倍体鲫相似,但EST和LDH同工酶比二倍体增多了酶带,有的酶带如EST5和EST6还可在鲤鱼胚胎中找到相应的表达产物,提供了天然雌核发育三倍体银鲫杂交起源的证据;复合四倍体由于含有鲤鱼的一个外来基因组,其胚胎的基因表达有些与杂种类似,在所分析的4种同工酶酶谱中,都可观察到来自鲤鱼基因的影响。此外,在由源于不同复合四倍体个体的卵子发育形成的胚胎间,还观察到同工酶基因表达的异质性。     

复合四倍体异育银鲫个体间遗传异质性的研究

用聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳,分析比较了４个不同的银鲫雌核发育系,红鲤和复合四倍体异育银鲫鳍的５种不同的同工酶及蛋白表型的差异,表明复合四倍体异育银鲫表型上的差异主要是来自银鲫种内的遗传差异（不同的雌核发育系）。来源于同一个银鲫雌核发育系的复合四倍体异育银鲫,个体间的ＥＳＴ同工酶出现差异,并与父体红鲤的ＥＳＴ同工酶的多态性相关,因此,复合四倍体异育银鲫个体间的异质性也包含了来自父本的遗传影响。在所检测     

黄颡鱼不同组织中同工酶的表达模式

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)及特异性组织化学染色技术,研究了黄颡鱼成体眼、心脏、肾脏、肝脏、肌肉及尾鳍等6种组织中的4种同工酶(LDH、MDH、SOD、EST)分化表达模式。结果表明,黄颡鱼的同工酶EST、SOD、MDH具有明显的组织特异性,LDH无明显的组织差异,并对同工酶的组织表达特异性的生理意义进行分析和讨论。