免疫诊断细胞方法(续一)

<正> 二,抗人的T和B淋巴细胞与其它白细胞抗血清的获得 各淋巴细胞群体和其他型白细胞特异性抗血清,首先必须与相应的细胞起反应。此外,这些抗血清应当除去非特异的抗淋巴细胞作用,从而加强其免疫抑制的特异性。用相应的材料通过免疫动物获得抗血清。因输血姙娠和某些疾病出现的抗淋巴细胞抗体也能用作试剂。 (一)抗T淋巴细胞血清(ATC) 的制备 1.免疫动物的材料。 可用胸腺细胞或无细胞的胸腺组织。作     

免疫诊断细胞方法(续六)

<正>四、淋巴细胞毒功能的检定 淋巴细胞的细胞毒功能在体外与异体细胞相互作用时会表现出来。各亚群淋巴细胞在不同条件下可出现细胞毒反应。被某种抗原致敏的淋巴细胞在体外能破坏携带这种抗原的靶细胞。这种效应说明杀伤淋巴细胞属于特殊的T细胞亚群并带有特殊的受体。在混合细胞培养中,非特异的细胞毒作用可使淋巴细胞在抗原和致有丝分裂原的影响下发     

免疫诊断细胞方法(续三)

<正> 检查已处理的红细胞的特异性及其与Ig结合能力。检查已处理的红细胞的特异性及其与相应分类免疫球蛋白的相互作用可用下列方法。①用抗一个类型的免疫球蛋白抗体处理红细胞,仅应与该类免疫球蛋白出现血球凝集,但不与其他类凝集,使用的免疫球蛋白可通过层析法和通过带上特异性抗体免疫吸收剂分离。②用携带抗一个类型的免疫球蛋白抗体     

免疫诊断细胞方法(续五)

<正>6.分离T和B淋巴细胞的方法。 为检查T和B淋巴细胞的一系列特性,应使用仅含1—5％另一型淋巴细胞和其他白细胞的纯悬液,这种悬液是利用T和B淋     

免疫诊断细胞方法(续二)

<正> (一)皮肤试验 皮肤对抗原阳性反应说明存在过敏,如果抗原材料不引起类似反应说明该个体对该抗原不存在过敏。过敏反应的强度不仅决定于淋巴细胞的致敏程度,而且决定于皮肤组织生理学、血管反应和其他因素。广泛存在着对PPD和某些细菌抗原的过敏性。所以过敏试验可以用于评价免疫活性,对全部被试抗原不呈阳性反应说明免疫反应性被抑制(不是对所有的人)。读取4-6小时和24-48小时出现的超敏反应直径。根据充血颜色、出血,浸润的mm~2等程度打0-4个加号。 用抗原作皮肤试验必须在采血为采血作体外试验之后进行,因为甚至给机体注射微量抗原都会改变淋巴细胞反应性。     

免疫诊断细胞方法(续七)

五、致敏淋巴细胞对相应抗原的转化反应 淋巴细胞在刺激物的作用下转化成核体变大的转化细胞是免疫反应的重要现象之一。在非特异刺激物的作用下,如多克隆性致有丝分裂原可使大量的淋巴细胞群体发生反应(8～12%的PHA,23～26％的ConA),因此,细胞转化率高达80%。在抗原和不完全抗原的作用下,只有少部分被致敏的淋巴细胞变成转化细胞。因此细胞转化指数不高(转化率15～30％),在致有丝分裂原作用下淋巴细胞转化首先可用于评价淋巴细胞的活性。但是淋巴细胞对抗原的类似反应,尽     

免疫诊断细胞方法(续完)

<正>(二)测定被刺激淋巴细胞上清液中淋巴因子活性的方法 1、白细胞移动抑制因子的鉴定方法。 籍指示细胞移动抑制来测定上清液淋巴因子活性。为此可用第六章的方法。 (1)白细胞移动抑制的间接反应。 指示细胞 使用人白细胞悬液或豚鼠腹腔渗出液巨噬细胞判定上清液白细胞移动抑制因子的活性。制备这些悬液与制备抑制白细胞移动的直接反应相同。可使用精制巨噬细胞或多核白细胞悬液,因为正是这些细胞对MIF起反应。因此,如果不用精制多核白细胞,则必须注意用于指示白细胞悬液的细胞组成。淋巴细胞占多数的悬液不能用于检     

免疫诊断细胞方法(续四)

<正> (四)有受体与无受体的T和B型淋巴细 胞的检查 1.淋巴细胞各受体的联合检查法。 原理。检查一个型淋巴细胞的抗原或受体,通常不妨碍同时检查该细胞或另一个细胞的其他受体。 白细胞悬液之准备。与检查T和B淋巴胞细的方法相同,可使用纯淋巴细胞悬液或白细胞悬液。     

免疫诊断细胞方法(续九)

<正>七、淋巴活性因子和胸腺刺激素分离制备和检查 原理 淋巴细胞体外培养受到刺激后,上清液出现生物活性因子(淋巴因子),这种因子通常认为是迟发型超敏反应的介质可作为淋巴细胞刺激原的,有可使淋巴细胞致敏的特异性抗原或非异性致有丝分裂原。被致敏的淋巴细胞在该抗原作用下可分泌淋巴因子。     

免疫诊断细胞方法(续八)

<正>(二)用毛细管测定白细胞移动的方法 1.用水平毛细管,细胞在表面上移动的方法测定抗原的效果。 原理 放在毛细管的细胞象在玻璃表面一样形成移动带,白细胞移动比其它细胞好。如培养液中存在致敏淋巴细胞和其它白细胞(粒细胞,巨噬细胞),则加入相应抗原时,致敏淋巴细胞随之分泌出MIF。因此,根据抑制白细胞移动程度可评价抗原对淋巴的致敏效果。     

疟疾的免疫诊断

<正>镜检厚血膜是发现疟疾感染最好的方法,该方法的敏感性通常是每5×10~6个红细胞内有一个疟原虫,一位技术员每天可检查50—60张厚血膜。方法简单,不需要复杂的仪器,是一个令人满意的方法。其最大的不足之处是当有大量标本待检时,需要花费很多时间,并且显微镜诊断的精确性也有限。此外,目前在疟区对氯喹的广泛应用,亦需要有其它的诊断方法。免疫学方法已被广泛应用于各种传染病的实验室诊断。目前已发     

新免疫诊断药CEDIA

山之内制药公司宣布今秋销售利用基因工程分割、制成的酶片段全新的蛋白质工程免疫诊断药CEDIA.应用蛋白质工程的诊断药的实用化在日本还是第一次.CEDIA是美国Microgenics公司开发的技术.用基因工程把β-半乳糖苷酶分割成2个片段,每个片段单独没有酶活性.两者混合后就会自然地聚集,表现出利用酶活性.实际的程序是把测     

细菌性脑膜炎的免疫诊断

<正>细菌性脑膜炎是可怕的传染病之一,尤其是在儿童,具有较高的发病率和死亡率。传统的诊断方法是将脑脊液中的病原菌在适当的培养基中培养,待病原菌生长后再借助于进一步的试验进行鉴定。这些方法本身费时较长,特别是在接受抗生素治疗的病人,常常不能成功,况且,在现场应用也受到很大的限制。最近,人们的注意力已转移到能够直接在病原材料中发观细菌抗原或其它细菌     

肿瘤精准免疫诊断综合评估

近年来,肿瘤免疫治疗(cancer immunotherapies)已成为晚期恶性肿瘤治疗的重要手段之一。肿瘤免疫治疗并不直接攻击癌细胞,而是通过调节人体自身免疫系统来抗击肿瘤,有望像抗生素改变抗感染治疗一样改变肿瘤治疗范式。抗PD-1/L1和抗CTLA-4抗体药物作为肿瘤免疫治疗的代表药物,使晚期癌症患者五年生存率达成了数倍的提升,被认为是真正有希望治愈癌症的治疗方式。然而,肿瘤免疫治疗只对部分患者有效,并且存在耐药、超进展、不良反应等问题。如何准确筛选出最有可能从治疗中获益的人群成为肿瘤免疫治疗研究中的一个重大挑战。目前有多个与免疫治疗相关的生物标志物正在研究中,并且有望被用于临床筛选治疗获益人群;但这些生物标记物也存在很多缺陷。未来,围绕免疫治疗敏感性和副反应的多项指标综合评估可能成为一个趋势。     

单克隆抗体在肿瘤免疫诊断、治疗中的进展

<正>自1975年Kohler与Miltem首次创建用淋巴瘤杂交技术产生单克隆抗体(McAb)以来,已制备出针对多种不同抗原的McAb,广泛地应用于基础和临床医学的许多方面。McAb是直接与抗原分子表面的某一抗原决定簇或表型相作用的一类结构相似的免疫球蛋白(Ig)。杂交瘤源源不断地分泌高效价,特异性强,单一的McAb,解决了多年来免疫测定因抗体不纯效价不高的     

丝虫病免疫诊断的进展——检测丝虫循环抗原

<正>由于常规血检微丝蚴需夜间采血,且微丝蚴密度低时易漏检,所以近几十年来,国内外许多学者相继探讨了多种免疫学试验检测丝虫病人血清中的丝虫抗体,试用于丝虫病的诊断、疗效考核及流行病学监测,虽取得了一定的成果,但还有一些问题应用检测丝虫抗体的方法不能解决。第一,在丝虫感染和可发现丝虫抗体水平之间,总有一段时间间隔,因此产生假阴性结果,对于潜伏期     

细胞吞噬实验方法

应用草履虫作细胞吞噬是普通细胞学实验方法之一。以前我们通常选用墨汁或中性红等,有时将草履虫全部染成黑色或红色,吞噬过程也不太清楚,食物泡及其周围的关系也模糊不清。而且有一定的毒性,导致草履虫死亡的现象。现找到一种比较理想的方法,经几年实践,效果良好,现介绍如下: 1.草履虫的培养(略)     

RD区编码蛋白在结核病免疫诊断中的研究进展

结核病是由结核分枝杆菌引起的威胁人类的重大传染性疾病之一.目前常用诊断方法其灵敏度差和检测周期长难以满足早期诊断的需要,免疫诊断作为其防控的早期诊断技术之一,近年来得到更加广泛的关注.而结核分枝杆菌RD区编码蛋白的发现,促进了结核病免疫诊断的迅速发展.本文对目前RD区编码蛋白在结核病诊断中的研究进展进行了概述.     

TT病毒ORF1基因在大肠杆菌中的表达及TTV酶免疫诊断方法的初步建立

为建立免疫学检测TT病毒抗体的方法,我们表达了硫氧还蛋白与TTV ORF1 497aa～770aa段融合蛋白,采用免疫印迹分析表达产物的抗原性,并以表达产物为抗原检测TTV抗体,结合TTV DNA检测结果分析其抗原特异性。     

丝状真菌细胞凋亡研究方法

<正>细胞凋亡作为细胞调控机制之一,与细胞增殖、细胞分化同等重要,在进化上具有保守性。细胞周期和凋亡通路的失调能引发多种人类疾病,是目前生命科学领域活跃的研究方向(Gougeon 2003;Brown&Attardi 2005)。由于丝状真菌细胞凋亡的表型和生理