濒危植物紫斑牡丹胚离体培养

以MS为基本培养基 ,添加不同浓度的BA、NAA及其组合 ,对濒危植物紫斑牡丹的胚进行体外培养。实验结果显示在没有添加任何激素的培养基上 ,离体胚生长类似种子萌发时胚的生长模式 ,子叶扩大伸长 ,达到约种子大小时停顿 ,根伸长生长极其显著 ;BA促进子叶膨大生长 ,当BA浓度增大时根生长受到抑制 ;NAA促进愈伤组织形成 ,抑制根生长。 0 .1mg·L- 1BA促进紫斑牡丹胚的胚轴、根生长 ,有利于幼苗形成。     

芥蓝组织培养及再生体系的建立

以黄花芥蓝的子叶、子叶柄和带柄子叶为外植体,在不同的BAP和NAA浓度的组合诱导下,获得再生植株.研究结果表明,在测试激素浓度下,带柄子叶为外植体的再生率最一致,其最适BAP和NAA浓度分别为3.0mg/L和1.0mg/L;较低浓度的BAP和NAA有利于子叶再生,其最适BAP和NAA浓度分别为2.0mg/L和1.0mg/L;子叶柄只有在较高的BAP和NAA浓度下才能再生,但再生率依然很低.     

禿杉组织培养研究

本文详细报道了从秃杉(Taiwania flousiana Gaussen)离体胚诱导不定芽、不定根及从无菌苗茎端培养再生植株的过程。诱导不定芽要求较低的蔗糖浓度(以3％最好);同时BA是必须的,在附加0.1—3 mg/1 BA的White培养基上,从离体胚的子叶或胚轴上诱导了不定芽的发生(以1 mg/1最好);NAA与BA结合使用,对不定芽诱导无促进作用;适当提高光照有利于不定芽的诱导。在诱导不定芽的同时,在子叶表面还观察到有许多无结构的“不定突起”。不定芽起源于子叶表皮下1—2层细胞。IBA对诱导离体胚上产生不定根效果较好。在有或无生长素的培养基上,从生长1月龄的无菌苗茎端培养获得了不定根的产生,在加有细胞分裂索的培养基上,从无菌苗上产生了腋芽。     

茎瘤芥(榨菜)高效离体再生体系的建立

利用离体培养技术,以榨菜的3个主栽品种的子叶、带柄子叶和下胚轴为外植体,对影响榨菜植株再生的关键因素进行了优化.结果表明,培养25d不定芽的分化率最高;最佳不定芽诱导的激素组合为6-BA 2 mg/L+NAA 0.2 mg/L,其中带柄子叶不定芽的分化率达94.4％;“蔺市草腰子”和“郫县榨菜”容易诱导不定芽,而“永安小叶”不容易被诱导,说明基因型的影响比较大;不定根的最佳诱导激素为NAA 0.2 mg/L,其生根率为83.4％.榨菜高效离体再生体系的成功建立,为榨菜遗传转化、突变体筛选和种质资源保存打下了基础.     

花楸合子胚诱导体细胞胚胎发生研究

分别以完整成熟胚、切去一个子叶的成熟胚和切下的子叶为外植体,以MS为基本诱导培养基、1/2MS为基本分化培养基,进行了花楸体细胞胚胎发生研究。结果表明:以完整合子胚作为外植体的体胚诱导率最高,为100%,最佳植物生长调节剂组合为5 mg.L-1NAA+2 mg.L-16-BA;NAA和6-BA浓度及二者的交互作用对愈伤组织和体胚诱导率的影响极显著;光照配合延长继代间隔时间有利于体胚发生。实体观察结果表明,花楸体胚发生方式有直接发生和间接发生两种;体胚发育经历了球形期、心形期、鱼雷形期和子叶期。组织学观察结果表明,体胚具有两极性,子叶期体胚结构完整。     

甘蓝型油菜高效离体再生体系的建立

以甘蓝型油菜(Brassica napusL.)HC8为材料,从无菌苗苗龄、预培养基激素浓度、预培养天数、6-BA及NAA的浓度等方面对影响油菜组织培养的因素进行了分析研究,建立了甘蓝型油菜品系HC8的离体再生技术体系。结果表明,该油菜组织培养的最佳苗龄为5 d;最佳预培养时间为5 d,最佳2,4-D浓度为1.0 mg/L;子叶最佳诱导培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/LNAA+3.5 mg/L AgNO3或MS+3.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+3.5 mg/L AgNO3,该条件下子叶愈伤组织诱导率最高可达100%,再生频率及分化频率分别可达88.0%和108.33%;下胚轴最佳诱导培养基为MS+4.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA+3.5 mg/L AgNO3,子叶愈伤组织诱导率最高可达95.24%,再生频率及分化频率分别可达81.82%和104.55%;最佳生根培养基为MS+0.5 mg/L NAA,生根率最高为90.0%。     

萝卜带柄子叶高频再生体系的建立

以11份萝卜（Raphanus sativus）基因型为材料进行子叶离体培养研究,筛选出具有较高再生率的基因型进行实验,考察基因型、外植体类型、激素配比和苗龄等因素对萝卜再生的影响。结果表明：萝卜离体再生的最佳外植体为全子叶-叶柄,最适苗龄为4天,最适培养基为MS＋6mg·L-16-BA＋0.05mg·L-1NAA,再生率高达86.95%,再生系数为1.80。该研究为进行萝卜遗传转化实验奠定了良好基础。     

壳寡糖对不结球白菜子叶离体培养再生体系的影响

以不结球白菜（Brassica campestris L．ssp．chinensis Makino）子叶为外植体,考察壳寡糖对不结球白菜子叶离体培养再生体系的影响。在添加外源激素6．BA和NAA的条件下,比较了不同浓度（0．5、1．0、2．0和10．0mg·L^-1）壳寡糖对不结球白菜子叶形成愈伤组织、再生芽和再生不定根的影响。实验结果表明,低浓度的壳寡糖能促进子叶形成愈伤组织、再生芽。壳寡糖促进子叶形成愈伤组织和再生芽的最适浓度为0．5mg·L^-1,与其他浓度壳寡糖处理组相比,该浓度壳寡糖促进了子叶愈伤组织的形成,使出愈率达到92％。此外,该浓度壳寡糖能提高子叶的芽再生频率,使再生率达到80％,同时再生芽长度、叶绿素含量及外植体总鲜重达到最大,均显著高于对照组。然而,壳寡糖对再生芽生根有抑制作用,形成的不定根数目、平均根长和最长根长度均小于对照组。     

Narciclasine与植物激素的相互作用研究

主要研究了天然生物活性物质Narciclasine(NCS)与植物激素的相互作用。发现NCS对于IAA刺激小麦胚芽鞘伸长过程、GA3对大麦胚乳中α-淀粉两诱导作用及6-BA对离体萝卜子叶光下增大以及转绿过程的促进作用,均显示出一定的抑制作用,而且其抑制强度均随浓度的增加而增加。对于不同的生理过程,NCS表现出不同的抑制强度,其中对离体萝卜子叶光下转绿过程的抑制作用较强。对于离体子叶的光下增大和转绿过程,不同植物激素的表现不同,6-BA和GA3对离体子叶增大及光下转绿具有促进作用;ABA和NCS则显示出一定的抑制作用。     

强德勒红心柚离体培养与植株再生体系的建立

以强德勒红心柚（Citrus grandis Osbeckcv. Chandler）种子萌发的无菌苗为材料,选取子叶、子叶节段、上胚轴、带芽的茎段进行离体培养研究。结果表明：子叶节段是诱导丛生芽的最佳外植体,诱导率100%;诱导丛生芽的最佳培养基为MS＋6-BA2.0mg/L＋NAA0.05mg/L＋蔗糖30g/L＋活性炭0.4g/L,丛生芽增殖可达11.2倍;最适生根培养基为1/2MS＋NAA0.5mg/L,生根率达100%,移栽15d后成活率100%。     

锡金海棠子叶再生体系的建立

锡金海[Malussikkimensis（Wenz．）Koehne]是我国稀有植物和优良苹果砧木种质资源。本研究探讨了影响锡金海棠离体再生的条件,建立了锡金海棠子叶高效离体再生体系。结果表明,子叶再生体系的最佳诱导培养基SC＋0．1mg·L-1 NAA＋2．0mg·L-1 TDZ,最佳分化培养基SC＋0．1mg·L-1 NAA＋1．5mg·L-1 TDZ,最佳继代增殖培养基SC＋2．0mg·L-1 6-BA＋0．2mg·L-1 NAA,最佳生根培养基为1／2MS＋I．0mg·L-1 IBA。炼苗后,移入珍珠岩、花生壳与草炭（1：1：1）的基质中,20d移栽成活率高达90％。     

钾对离体黄瓜子叶生根及根生长的促进作用（简报）

0.134～40.2mmol/L的KCI明显促进离体黄瓜子叶的生根、根长和根鲜重的增加。0.134～13.4mmol/L的KCl则抑制离体黄瓜子叶IAA氧化酶的活性。1.34mmol/L的高锰酸钾、酒石酸钾和邻苯二甲酸氢钾也促进离体黄瓜子叶的生根。     

NCS对离体萝卜子叶转绿期间叶绿素荧光参数及类囊体膜蛋白复合物的影响

用PAM 2000型便携式荧光测定系统测定了不同浓度N arc iclas ine(NCS)处理的离体萝卜子叶的荧光动力学参数:初始荧光(F0)、光化学淬灭(qP)、光系统Ⅱ最大光化学效率(Fv/Fm)、光合电子传递速率(ETR).结果表明,NCS对各种叶绿素荧光参数均显示出明显的抑制作用,而且NCS的抑制作用随其浓度的增加而逐渐增强;利用蓝绿温和胶电泳技术分析萝卜子叶类囊体膜蛋白复合物发现,转绿期间叶绿体中光系统Ⅱ(PSⅡ)和光系统捕光色素蛋白复合体的含量增加均被NCS抑制.表明从水仙鳞茎分泌物中分离提取的生物活性物质NCS能够明显抑制离体萝卜子叶的光下转绿,而且NCS对离体萝卜子叶光下转绿的抑制是多位点的.     

1,4—二取代酰氨基硫脲类化合物(DATCDs)的植物生理效应与应用研究——Ⅴ.DATCD-A对离体黄瓜子叶扩张及核酸代谢的影响

本实验以离体黄瓜子叶为材料,研究了 DATCD—A 对子叶扩张及核酸代谢的影响。结果表明,DATCD—A 可显著地促进离体黄化子叶扩张,使其鲜重明显增加;并且在处理后期逐渐提高子叶干重。在离体子叶扩张变绿的过程中,DATCD—A 促进离体黄化子叶 RNA、DNA 含量和 DNA/RNA 比率明显上升,且 RNA 的增加发生在 DNA 合成增加之前。凝胶电泳证明,RNA 的增加主要是25s 和18s 的 rRNA。     

NCS对离体萝卜子叶微体中酶活性及细胞超微结构的影响

研究了天然生物活性物质narciclasine(NCS)对离体萝卜子叶光下生长发育期间叶绿素含量变化、异柠檬酸裂解酶及羟基丙酮酸还原酶活性的影响;并对萝卜子叶细胞的超微结构变化进行了观察。结果表明,NCS明显抑制光下培养的离体萝卜子叶叶绿素含量及鲜重增加,对异柠檬酸裂解酶及羟基丙酮酸还原酶活性也显示出明显的抑制作用。电镜观察显示,NCS对蛋白体及脂质体的降解、叶绿体的发育也表现出强烈的抑制效应。NCS的各种抑制作用均随其浓度的增加而增加,而且高浓度的NCS(10^-5mol／L)基本上完全阻止了离体萝卜子叶的光下生长及其转绿。     

影响大白菜高效离体培养再生的因素

大白菜的4日龄子叶和6日龄下胚轴外植体在MS 4～6 mg*L-1 6-BA 0.5 mg*L-1 NAA 5～10 mg*L-1 AgNO3培养基上3～4周后分化出不定芽,带柄子叶和子叶圆片最高再生频率均可达到80%～90%,下胚轴再生频率为40%～55%,在1/2MS 0.2 mg*L-1 IBA培养基上100%生根,据此建立了大白菜离体培养再生系统.     

苦参碱对植物生长的刺激作用

应用植物激素生物试法测定了苦参碱（matrine)的某些植物生长调节活性,实验结果表明：苦参碱明显促进了离体黄瓜子叶鲜重和干重的增加;苦参碱降低了光下（5000lx,26℃）培养的离体黄瓜子叶的总叶绿素含量,但促进了离体黄瓜子叶的光合作用;苦参碱还显著促进了在暗中（25℃）培养的离体黄瓜子叶的生根作用和根的生长,这些现象说明苦参碱具有某些明显的植物生长刺激活性。     

苦参碱对植物生长的刺激作用

应用植物激素生物试法测定了苦参碱（matrine)的某些植物生长调节活性,实验结果表明：苦参碱明显促进了离体黄瓜子叶鲜重和干重的增加;苦参碱降低了光下（5000lx,26℃）培养的离体黄瓜子叶的总叶绿素含量,但促进了离体黄瓜子叶的光合作用;苦参碱还显著促进了在暗中（25℃）培养的离体黄瓜子叶的生根作用和根的生长,这些现象说明苦参碱具有某些明显的植物生长刺激活性。     

大白菜霜霉病菌寄生霜霉孢子囊的保藏方法

通过离体子叶冷冻法、离体叶片冷冻法和10%二甲基亚砜+5%脱脂乳冷冻法等3种方法来保藏大白菜霜霉病菌寄生霜霉,并采用离体子叶接种法测定孢子囊的致病力,以筛选出一种较好的保藏方法。结果表明,保藏6个月后,离体子叶冷冻法和离体叶片冷冻法保藏的孢子囊的萌发率、发病率和病情指数均较高;而10%二甲基亚砜+5%脱脂乳冷冻法保藏6个月后仅有2.16%的孢子囊能够萌发,菌株致病力丧失,发病率和病情指数均为0。保藏12个月后,离体子叶冷冻法保藏效果最好,孢子囊萌发率达到62.22%,发病率为90%,病情指数为48.89;离体叶片冷冻法保藏的孢子囊的致病力较弱;10%二甲基亚砜+5%脱脂乳冷冻法保藏12个月的孢子囊全部失活。此外,采用离体子叶冷冻法保藏12个月的32株寄生霜霉复壮成功率达到了93.75%。离体子叶冷冻法适用于寄生霜霉的保藏,其孢子囊可长时间保持较高的萌发率。     

金花茶子叶在离体培养中胚状体的发生和小植株的形成

研究了金花茶(Camellia chrysantha(Hu)Tuyama)子叶在离体培养中体细胞胚状体发生的条件。在MS基本培养基中附加苄基嘌呤(BA)或苄基嘌呤与萘乙酸(NAA)组合,诱导了胚状体发生。组织学观察表明,胚状体起源于子叶的表皮细胞。在增添细胞分裂素和生长素的MS或改良B_5液体培养基里振荡培养,明显地促进了胚状体根的生长和茎的发育。胚状体在继代培养中能保持旺盛的再生能力。已得到两个繁殖率较高的胚状体无性系。在合适的条件下,胚状体能长成正常的小植株。