超声波辅助象拔蚌多糖提取及抗氧化活性研究

采用蒽酮比色法测定多糖含量。基于超声时间、温度、固液比单因素对象拔蚌多糖提取率影响的基础上,设计三因素三水平正交实验研究象拔蚌多糖最佳提取工艺。并测定象拔蚌多糖的总抗氧化活性和羟自由基清除活性。结果表明,影响多糖提取的首要因素是固液比,其次是超声时间和超声温度。象拔蚌多糖最佳提取条件为:温度60℃、超声时间30 min、固液比1:12。象拔蚌多糖总抗氧化活性和羟自由基清除活性均与浓度有明显的量效关系,表明超声辅助法是象拔蚌多糖提取的一种有效方法,高浓度象拔蚌多糖具有较强的抗氧化活性。     

柴胡多糖的结构和抗氧化活性分析

用超声波辅助提取法从柴胡中提取、分离得到多糖SAP3。高效液相色谱法测定其相对分子质量,红外光谱、气相色谱和原子力显微镜对其结构进行初步分析。结果表明:柴胡多糖SAP3是组分均一的多糖,由鼠李糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成,平均相对分子质量为3.3×105。红外光谱分析表明:柴胡多糖具有一般多糖类物质的特征吸收峰,单糖残基以吡喃环的形式存在。原子力显微镜显示柴胡多糖糖链具有分支结构,并缠绕形成环状结构。在0.2~1.2 mg/mL的实验浓度范围内,随着多糖质量浓度的升高,柴胡多糖SAP3对.OH的清除率逐渐增大,最大清除率可达45.2%。     

碱提工艺对茶树菇多糖形貌特征和构象及其生物活性的影响

利用传统水提及碱提的方法得到茶树菇粗多糖S-ACP和J-ACP,经CTAB法和Sephadex G-150凝胶层析法对其分离纯化,分别得到S-ACP2-1和S-ACP2-2以及J-ACP2-1和J-ACP2-2两组主要组分,用扫描电子显微镜（SEM）和原子力显微镜（AFM）对多糖的形貌进行表征并测定其体外抗氧化活性和抗肿瘤活性;对多糖S-ACP2-2、J-ACP2-2进行刚果红实验测定及圆二色谱仪（CD）分析。SEM观测结果：S-ACP2-1为较粗的表面光滑的丝状,J-ACP2-1呈较细的有少量碎屑的丝状;S-ACP2-2为较大的片状,J-ACP2-2在大的片状周围有很多细小的碎屑。AFM观测结果：碱液可以使多糖分子部分断裂成小片段。刚果红实验：S-ACP2-2、J-ACP2-2在水溶液中为自由卷曲构型。CD分析：S-ACP2-2的空间构型中有序结构较少,J-ACP2-2在水溶液中为无序构型。对比4种多糖的活性,碱液作用的多糖J-ACP2-2活性高于S-ACP2-2。     

超声波及脱蛋白处理对猴头菌子实体多糖提取效果的影响

本研究以猴头菌子实体为供试材料,在采用水提醇沉法进行多糖提取的过程中,系统研究了超声波和脱蛋白处理两个关键工艺环节对多糖提取效果的影响。研究结果表明：采用超声波辅助处理可提高猴头菌多糖提取率,降低多糖的纯度,使部分由蒸馏水洗脱获得的HEFP-α组分与全部0.1mol/L NaCl洗脱获得的HEFP-β组分经Sephacryl-S400洗脱后的曲线的小峰面积增加,也使主峰处的吸光值出现偏移。3种脱蛋白方法中,复合法对蛋白的除去效率最高,但多糖的保留率最低;亚铁氰化钾-乙酸锌法操作简便且蛋白除去率与多糖保留率均较高,但会使HEFP-β-2组分的含量和回收率降低;Sevage法蛋白脱除效率最低,多糖组分的保留率相对较高,且柱洗脱后发现经Sephacryl-S400凝胶柱分离后获得的主峰整体峰值较高,该方法较为适合多糖活性组分未知时的蛋白脱除。这一研究结果将会为该类大型真菌子实体的大分子生物活性物质的提取以及相关产品的开发提供重要的参考依据。     

超声波辅助提取山茱萸多糖的实验研究

在单因素实验基础上,采用正交设计和方差分析,研究超声时间、提取温度、料液比对山茱萸多糖提取得率的影响,以山茱萸多糖提取得率作为评价指标,筛选出最佳提取条件为:超声波预处理40 min,提取温度80℃,料液比1∶30。在此条件下,山茱萸多糖平均提取得率为5.29%;超声法提取与传统热水醇沉法比较,山茱萸多糖提取得率无显著性差异,但耗能较少,提取效率更高。超声波辅助提取法可作为山茱萸多糖提取的一种有效方法。     

沙棘果皮多糖清除氧自由基的活性研究

沙棘(Hippophae rhamnosides)果皮经80℃恒温水浴提取, 乙醇沉淀得粗多糖。Sevag法去蛋白,经50%和70%乙醇分级, 得3种级分沙棘多糖H1、H2和H3; 以Fenton 反应, 即H2O2/Fe2+/水杨酸为.OH产生和检测体系; 以邻苯三酚/EDTA/Tris-HCl为O2 -. 产生体系, 对沙棘多糖H1、H2和H3进行抗氧自由基活 性研究。结果表明, 沙棘多糖对.OH和O2 -. 有较显著的清除能力。不同级分多糖H1、H2和H3浓度达200mg.mL-1时, 对.OH的清除率分别为44.9%、49.0%和26.4%, 抗O2-. 活性分别为36.9%,15.4%和23.1%。多糖质量浓度增大时,两种自由基清除率增加, 且呈量效关系。     

沙棘果皮多糖清除氧自由基的活性研究

沙棘(Hippophae rhamnosides)果皮经80℃恒温水浴提取,乙醇沉淀得粗多糖.Sevag法去蛋白,经50%和70%乙醇分级,得3种级分沙棘多糖H1、H2和H3;以Fenton反应,即H2O2/Fe2 /水杨酸为·OH产生和检测体系;以邻苯三酚/EDTA/Tris-HCl为O2-.产生体系,对沙棘多糖H1、H2和H3进行抗氧自由基活性研究.结果表明,沙棘多糖对·OH和O2-.有较显著的清除能力.不同级分多糖H1、H2和H3浓度达200μg·mL-1时,对·OH的清除率分别为44.9%、49.0%和26.4%,抗O2-.活性分别为36.9%,15.4%和23.1%.多糖质量浓度增大时,两种自由基清除率增加,且呈量效关系.     

超声波法提取大枣多糖工艺的优化

为了进一步提高大枣多糖的提取效率,本文通过正交试验优化了超声波法提取大枣多糖的工艺条件。考察的因素包括料液比、超声功率、超声时间和浸提温度。结果显示超声波法提取大枣多糖的最佳提取工艺条件为:料液比1∶30、超声功率80W、超声时间10min,浸提温度80℃。在此工艺条件下大枣多糖的提取率达到6.97%。该工艺条件下提取率较高,因此适合于提取大枣中的多糖类化合物。     

利用傅立叶红外光谱和原子力显微镜研究超声提取对鸡腿菇多糖结构的影响

利用沸水浴法和超声辅助提取法提取鸡腿菇粗多糖,分别得到对应的多糖水浴提取的多糖(WCP)和超声提取的多糖(UCP)。采用苯酚硫酸法测得WCP和UCP中的总糖质量分数分别为87.997%和72.937%。用季铵盐沉淀法和Sephadex G 200凝胶层析法对WCP和UCP进行分离纯化,得WCP3 1、UCP3 1 2个主要组分,用傅立叶红外光谱(FTIR)和原子力显微镜(AFM)对提取多糖的结构进行表征。结果显示:WCP3 1和UCP3 1均具有一般多糖类物质的特征吸收峰,WCP3 1和UCP3 1的单糖残基均以β吡喃环存在,但超声波可导致部分C O双键断裂形成C—O链接;WCP3 1呈现大量的近似螺旋聚集体和少量球状聚集体,但是UCP3 1是较小的分散球状聚集体,说明超声波可断裂多糖的分子链间或链内氢键,导致近似螺旋聚集体的降解。     

雪松松针多糖超声波酶法提取及其抗氧化性

为优化雪松松针多糖超声波酶法的提取工艺,并研究多糖结构及其抗氧化性。通过响应面法分析确定最佳提取参数为:3. 0 g松针粉末,液料比20∶1(m L∶g),提取温度80℃,超声功率560 W,超声时间47 min,纤维素酶用量12 FPU/g原料,提取两次,多糖得率高达10. 39%。采用高效液相色谱、红外光谱和核磁共振光谱等对松针多糖进行了结构表征,松针多糖以β-糖苷键为主要连接方式,并由葡萄糖、果糖、阿拉伯糖和半乳糖等单糖组成。体外抗氧化性研究结果表明:松针粗多糖对羟基自由基(·OH)和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)的清除能力远高于纯化多糖,呈现出良好的量效关系,粗多糖对·OH和DPPH·的半抑制浓度IC50分别为0. 47 g/L和0. 076 g/L。     

金樱子多糖的抗氧化作用

目的：探讨金樱子多糖(PRL)体外抗氧化作用。方法：邻苯三酚自氧化法测定PRL清除超氧阴离子自由基效果;比色法测定PRL对羟自由基诱导红细胞溶血、脂质过氧化反应的影响。结果：PRL能显著清除超氧阴离子自由基、押制羟自由基对细胞膜的破坏而引起的溶血和脂质过氧化产物的形成。结论：PRL具有显著的抗氧化作用。     

滑子菇多糖的体外生物活性初步研究

为了研究滑子菇水提粗多糖(PNP)的体外生物活性,对滑子菇多糖的总还原力、清除1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH·)和由Fe2+诱发的脂质过氧化反应的抑制作用进行研究,采用MTT比色法和胎盘蓝细胞计数检测对滑子菇水提粗多糖的体外抑制K562细胞生长作用进行了研究,采用流失细胞术对滑子菇多糖作用人白血病K562细胞后的细胞周期进行了研究。结果表明:滑子菇水提粗多糖PNP具有一定的还原能力;在高质量浓度(800μg/mL)时具有接近于Vc清除DPPH·的能力,达41.28%;PNP对Fe2+诱发的脂质过氧化反应具有一定的抑制作用,并且随着浓度的增加抑制作用逐渐增强,但总的增长趋势不大;MTT实验表明PNP对K562细胞的体外增长有抑制作用,在质量浓度为800μg/mL和作用时间为48 h时,可达到最高的抑制率35.03%。流式细胞术对细胞周期的检测表明滑子菇多糖能够阻滞人白血病K562细胞于G1期。     

百合皂苷的提取、纯化及其对自由基的清除作用

本文用正交实验法对百合总皂甙的提取工艺中温度、乙醇浓度、固液比例、回流时间和提取次数5个因素进行研究,优选出简便可靠、且适合工业化生产的百合总皂甙的提取工艺。其最佳提取工艺条件是:温度为60℃,乙醇浓度为70%,固液比例为1∶6,提取时间3h,提取次数3次。以溴邻苯三酚红(BPR)为显色剂,基于Co(II)H2O2体系反应产生的羟自由基(·OH)使溴邻苯三酚红(BPR)的颜色发生变化,采用756型紫外可见分光光度计测定其吸光度的变化值,研究百合皂苷在此体系中清除羟自由基的作用,对照实验表明:百合总皂苷提取物对羟自由基的清除作用比人参皂苷强。     

阿魏菇深层发酵菌丝体多糖提取工艺优化研究

以液体深层培养的阿魏菇新鲜菌丝体为原料,使用均匀正交设计的试验方法优化了阿魏菇多糖提取工艺。实验结果表明：在菌丝密度为100～250mg／mL(鲜重)范围内,超声波破壁时间为18min、热水浸提时间为4h、提取温度为70℃的提取工艺,多糖提取率可达到：0．914％(鲜重)。     

冷杉侧耳多糖提取工艺优化及体外抗氧化活性

【背景】冷杉侧耳（Pleurotus abieticola）是一种新型食药用真菌,具有潜在的经济价值。【目的】更好地开发利用冷杉侧耳中的多糖成分,挖掘潜在的功能性食品。【方法】采用响应面分析法对冷杉侧耳多糖的提取工艺进行优化,并通过设置不同浓度梯度的多糖和Vc （阳性对照）考察该多糖的1,1-二苯基-2-苦基肼自由基（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl free radical,DPPH）、2,2''-联氮-双-3-乙基苯并噻唑林-6-磺硫（2,2''-azinobis-3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate,ABTS）和羟基自由基（hydroxyl radical,·OH）的清除能力及铁离子还原能力来评价冷杉侧耳多糖的体外抗氧化活性。【结果】最佳提取工艺：提取时间122.62 min,提取温度60.27℃,液料比28.87：1（体积质量比）,在该条件下,冷杉侧耳纯多糖提取率达到极大值2.39%。该多糖在浓度为1 mg/mL时,DPPH自由基清除率为49.42%,ABTS自由基清除率为88.37%,羟基自由基清除率为19.87%,铁离子还原力为0.273。【结论】本研究为更高效地开发与利用冷杉侧耳多糖提供了理论依据,为进一步挖掘其生物活性及多糖产品打下了基础。     

艾叶多糖提取率影响因素分析及提取条件优化

艾叶是菊科(Compositae)植物艾(Artemisia argyi Lévl.et Vant.)的干燥叶,为常用中药材之一,药用历史悠久,具有苦燥辛散、理气血、温经脉、逐寒湿、止冷痛等功效,为重要的妇科用药,可用于治疗脘腹冷痛、经寒不调、宫冷不孕等证.此外,利用艾叶预防瘟疫已有悠久的历史.现代药理研究表明:艾叶是一种广谱抗菌抗病毒中药,对多种病毒和细菌有抑制和杀伤作用,对呼吸系统疾病以及心血管等慢性疾病有一定的防治作用[1-3].因此,将艾叶中的有效成分分别提取和纯化并加以分析以及功能检测,具有深远意义.     

广东石豆兰多糖的提取工艺及其抗氧化活性

为优化广东石豆兰多糖的提取工艺并评价其抗氧化活性。在单因素试验基础上,采用正交设计和方差分析,研究液料比、提取温度、时间及沉淀多糖的乙醇浓度对石豆兰多糖浸提量的影响并优化了工艺条件,确定最优条件为液料比50∶1 (mL/g),提取温度90℃,时间6 h,醇沉浓度为95%,此条件下多糖提取量为79.060 mg/g,RSD为0.132%。抗氧化结果表明广东石豆兰多糖的总还原力为L-抗坏血酸的3.46%;对DPPH、·OH、·O■自由基半清除浓度(EC₅₀)分别为2769.58、594.60、586.94μg/mL,其清除能力分别是L-抗坏血酸的0.68%、47.17%和29.00%;对Fe²⁺的半螯合浓度(EC₅₀)为160.83μg/mL,螯合能力是EDTA的2.12%。本研究结果为石豆兰多糖的提取及进一步开发利用提供参考依据。     

虫草多糖的分离、纯化和初步药效活性研究

以虫草发酵菌丝体为原料提取虫草多糖并对多糖进行结构鉴定和初步药效活性研究。采用水提醇沉和离子交换纤维素进行分离得到两种虫草多糖,HPLC测定相对分子质量,紫外光谱、红外光谱、部分酸水解、甲基化分析和高效液相色谱等方法研究单糖组成及连接方式,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT）检测虫草多糖的活性。经分离得到中性（CPSl）、酸性（CPS2）两种成分,相对分子质量分别为2．56×10^4,9．91×10^;单糖组成：CPSln,（葡萄糖）：n（甘露糖）：n（半乳糖）：n（阿拉伯糖）=46：36：18：l;CPS2／n,（葡萄糖）：n,（甘露糖）：n（半乳糖）：n（半乳糖酸）：n（木糖）：n（阿拉伯糖）：n（鼠李糖）=30：25：14：4：3：3：1。红外谱揭示均含-a-键。CPSl主链含（1→6）糖苷键的高度分支的葡甘露半乳聚糖,另有少量葡萄糖分支点在2,3,4位。CPS2主链含葡萄糖（Glc）、甘露糖（Man）、半乳糖（Gal）,分支点主要在3位,侧链含多种单糖。CPSl和CPS2都对顺铂（CDDP）损伤的vero细胞有一定保护作用。