一种用微机控制的多管微电极电泳仪

自50年代末Curtis发明多管玻璃微电极以来,微电泳给药的方法已经在神经生理学的各个研究领域得到了广泛的应用。同时随着电子技术的长足进步,微电泳设备也不断得到改进。在我国,使用多管微电极的实验室越来越多,但可预置、可检测实际输出电流、性能优越的多通道微电泳设备迄今未见报道。为此,我们利用已被广泛应用的微处理器技术自     

微电泳乙酰胆碱和阿托品对大鼠丘脑束旁核痛敏神经元电活动的影响

在30只大鼠上,用多管微电极细胞外记录和离子微电泳方法,观察了乙酰胆碱(ACh)和阿托品对丘脑束旁核(Pf)神经元电活动的影响。结果表明,微电泳ACh可加强痛敏神经元的电活动,并使部分自发放电神经元对伤害性刺激产生反应。阿托品可以阻断ACh的上述作用。微电泳阿托品能减少痛敏神经元的电活动。这些结果提示,在Pf神经元的活动中,ACh可以直接作用于M受体发挥其兴奋作用。     

缰核痛相关神经元对伤害性刺激和吗啡的反应

目的:观察缰核痛相关神经元对经典镇痛药吗啡的反应,了解缰核的痛觉属性.方法:实验在浅麻醉下的成年大鼠进行.通过脑室插管微量注射,或经五管微电极电泳吗啡、纳络酮、八肽胆囊收缩素(CCK-8)等,并记录缰核内痛相关神经元的单位放电.结果:在内侧缰核、外侧缰核记录的痛相关神经元放电,又可分为痛兴奋性神经元和痛抑制性神经元.在缰核微电泳吗啡后,痛兴奋性神经元以抑制反应为主,痛抑制性神经元以兴奋反应为主.微电泳纳洛酮可以翻转吗啡对缰核的作用.在吗啡耐受大鼠腹腔注射吗啡10 mg/kg,LHb痛相关神经元表现为镇痛效应的数量远大于MHb痛相关神经元的,表明外侧缰核受吗啡的作用程度高于内侧缰核.对吗啡耐受大鼠脑室注入CCK拮抗剂后,再由腹腔注射吗啡,可减弱对吗啡的耐受程度.反之,在腹腔注射吗啡(10 mg/kg)10 min后,侧脑室注射CCK-8(15 ng/10μl),CCK-8可拮抗吗啡对LHb的镇痛作用,但对MHb的拮抗作用不明显.结论:缰核的痛兴奋性神经元和痛抑制性神经元对伤害性(痛)刺激敏感而不易发生适应.其中外侧缰核神经元对吗啡的敏感性高于内侧缰核神经元.     

豚鼠眶外肌中快肌与慢肌纤维的小终板电流

豚鼠眶外肌中有两类不同电活动模式的肌纤维。一类纤维有动作电位,小终板电位时程较短并且较一致;另一类纤维不能产生动作电位,小终板电位时程较长而且多变。用电泳注射普胺天蓝分别标记这两类纤维各6条,并结合胆碱酯酶染色,结果表明,前一类肌纤维都是只有一个神经肌肉接头的快纤维;而另一类肌纤维都是有多个接头的慢纤维。根据双微电极电庄箱位实验结果,计算了上述决、慢肌纤维小终板电流下降相时间常数τ及其电压系数A。实验表明:(1)在静息电位附近,慢肌纤维小终板电流的τ值大于快肌纤维的;(2)慢肌纤维的A值比快肌纤维的小的多,即τ值较少随膜电位变化。本文对上述不同曾加以讨论。     

卵胞内微注射mRNA后胞膜上出现的新离子流

以胞内微注射技术向爪蟾卵内注射羊气管上皮细胞抽提的Poly(A)~ mRNA,以电压钳技术观察卵膜离子流的变化。注射前卵膜上主要有Ca~(2 ),Cl~-,K~ 和Na~ 流,在高钙溶液(10Ca-ND96)中,瞬间的Ca~(2 )激活Cl~-流较大,此离子流可被9-羟蒽阻断。注射mRNA后在9-羟蒽存在的情况下,向浴槽加入1mmol/L 8-Br-cAMP后新出现一个电压敏感的离子流,使电流电压曲线的零电流电位向右移;但在注射去离子水组未见此离子流。表明羊气管上皮里含有cAMP敏感的离子通道,并可被移植到爪蟾卵膜上。     

大鼠旁巨细胞外侧核呼吸神经元的类型及其对某些递质类药物的反应

目的和方法用细胞外记录法和多管微电极微电泳法在36只麻醉自主呼吸的SD大鼠,系统探查旁巨细胞外侧核尾半侧(cPGCL)呼吸神经元(RNs)的类型及该区的递质受体情况。结果在14只大鼠系统探查,记录到39个RNs,包括吸气神经元24个、呼气神经元12个和跨时相神经元3个。在另22只大鼠,观察到微电泳谷氨酸钠(L-Glu)使12／14个RNs兴奋,γ-氨基丁酸(GABA)使全部受试RNs抑制(n=22);对NMDA受体拮抗剂DL-2-氨基-5-磷酸戊酸(AP     

脉冲电泳不同参数对介导GFP基因转化玉米种胚效果的研究

利用脉冲电泳介导绿色荧光蛋白(GFP)基因导入玉米种胚;以GFP基因在种胚中瞬时表达作为外源基因导人种胚细胞的标记,分析了外源．DNA浓度、电泳时间、电压、电流转换时间等脉冲电泳转化参数对种胚发芽率和外源基因导入率的影响。结果表明：脉冲电泳时间对种胚发芽率和外源GFP基因导入率影响最大;通过脉冲电泳可将外源基因导入胚芽细胞,其GFP基因导人种子的频率与各电泳参数均呈二次曲线关系,300μg／ml外源DNA浓度、120min电泳时间、5V电压、2s电流转换时间可作为脉冲电泳介导玉米种胚转化较适宜的参数。     

房室结结区的结细胞也有自律性电活动

一般认为,房室结结区的结细胞没有自律性。最近日本学者Kokubun等人采用双微电极技术在小块兔房室结组织(0.2×0.2×0.2mm)上进行电压固定实验,记录到房室结结区的结细胞有明显的自律性电活动和典型的舒张期去极化。在房室结细胞动作电位期间,记录到四种动态离子电流,即钠电流(i_(Na)),慢内     

50 Hz滤波电路对心肌细胞动作电位波形记录和波形分析的影响

目的 :研究微电极放大器中的 5 0Hz滤波电路对心肌细胞动作电位波形及各项参数的影响。方法 :将心肌细胞动作电位经玻璃微电极、微电极放大器、微分器、A/D转换器输入微型计算机。在使用和不使用微电极放大器中5 0Hz滤波功能两种情况下 ,对心肌细胞动作电位波形进行比较分析 ,并用快速傅立叶变换进行频谱分析。结果 :使用微电极放大器中 5 0Hz滤波功能情况下 ,动作电位波形在 0期严重失真 ,上升时间延长 ,最大上升速度减小 ,其它参数无显著变化。结论 :心肌细胞动作电位波形中含有较大 5 0Hz信号成分 ,在研究心肌细胞动作电位信号时 ,不能使用 5 0Hz滤波器。如果使用 5 0Hz滤波器 ,会造成动作电位波形严重失真 ,影响实验结果     

在梭曼处理的神经肌接头上微电泳乙酰胆碱诱发的终板区再生性去极化

我们曾发现在中毒剂量梭曼处理的神经肌接头上,间接强直刺激诱发出以终板电位(EPP)消失为特征的终板区再生性去极化(RD),产生RD的机理尚未阐明,本文报道在同样条件下,微电泳外源性乙酰胆碱(ACh)诱发出类似RD的终板区再生性去极化。 结果表明,在正常条件下,于终板区微电泳外源性ACh(10ms×180nA,滞留电流为20nA),可记录到乙酰胆碱电位(AChP),0.5～2Hz串微电泳,相对应每次微电泳有一个AChP,高于5～10Hz(持续1～5s)的串