外周血循环RNA、微小RNA与肿瘤诊断*

循环核酸(circulating nucleic acid, CNA)是指存在于血液(血清或血浆)等体液中的细胞外游离DNA和RNA,与生理和病理状态下的细胞代谢密切相关,循环DNA和RNA水平的检测及其在基因诊断等方面的应用对于恶性肿瘤等疾病的诊断和监测具有十分重要的意义。近期人们在进行循环DNA、RNA分子检测的同时,在循环微小RNA(microRNA, miRNA)方面也做了许多的工作,研究结果使得与肿瘤相关的核酸分子检测这一领域变的更加让人振奋。在血液中检出肿瘤特异性的miRNA并将其作为肿瘤的生物学标志对于早期诊断肿瘤具有至关重要的意义。     

母体外周血游离RNA分子特性及其在无创产前检测中的潜在应用

胎儿游离DNA在母体外周血血浆中的发现颠覆性地改变现有的无创产前检测方法,例如基于孕妇外周血血浆DNA对胎儿染色体异常的无创检测在全球范围内快速得到了认可和广泛应用。受到胎儿游离DNA研究成果的鼓舞,科学家也陆续展开了关于孕妇外周血中胎儿游离RNA的研究。现将集中讨论血浆RNA的特性及其潜在的应用。     

晚期胃肠道肿瘤患者血浆游离DNA片段的检测、定量

目的探讨肿瘤患者循环血液中DNA改变,及对提高肿瘤患者治愈率和生存率的临床实际意义。方法随机采集了2004年10月~12月大连医科大学附属二院经病理确诊的初治晚期胃、大肠癌患者的血标本18份,门诊健康体检者血标本16份,通过酚/氯仿提取法定量检测两组的血浆DNA片段,进行对照比较,分析健康人与晚期胃肠道肿瘤患者血浆游离DNA片段水平的差异、晚期胃肠道肿瘤患者血浆游离DNA片段水平与预后相关指标的相关性。结果晚期胃肠道肿瘤组血浆游离DNA片段水平高于正常健康对照组,其血浆游离DNA片段的均值分别为(346.3±81.62)μg/m l与(27.6±6.91)μg/m l,差异有显著性;胃癌、大肠癌患者两组间的血浆游离DNA片段差异无显著性,均值分别为:(350.8±110.92)μg/m l与(357.1±126.26)μg/m l;在预后相关指标的各因素中,晚期胃肠道肿瘤患者的血浆游离DNA片段水平与免疫状态、是否存在远处转移有明显相关性,其中与免疫状态呈负相关,与远处转移呈正相关。结论晚期胃肠道肿瘤患者血中的游离DNA片段水平较健康人高,可能与患者自身状态、病理分型、疾病状态有关;游离DNA片段可以作为检测晚期胃肠道肿瘤的特异性指标,还可以替代免疫状态及是否存在远处转移等指标评价远期预后,并有取材方便、检测时间短、可以定量分析的优点,对临床有一定的指导意义和应用价值。     

人体游离循环DNA的研究进展

游离循环DNA是一种细胞外游离状态的DNA, 在动植物及人的体液中都检测到了它的存在。对游离循环DNA的检测已经应用在疾病的监控、胎儿的产前诊断及肿瘤的研究中。文章介绍了循环DNA的生物学特征, 并对近年来游离循环DNA的研究和应用进展做了简单的回顾。     

Cell:新型血检技术或可扩大液体活检的范围

正当细胞死亡后,其并不会消失地无影无踪,相反其会以游离DNA的形式留下一下"指纹"痕迹,而在人类机体中,这些小型的DNA片段就会在血液中被发现;近些年来游离DNA的研究领域应运而生了一种称之为"液体活检"的新技术,该技术可以诊断并且监测某些癌症,鉴别出胎儿机体异常,并且评估移植器官的健康性,进行这些操作仅需要简单的抽血就可以完成,尽管这些检测潜力巨大,但目前其所检测的范围却非常有限。发表在Cell上的一篇报道中,华盛顿大学的科学家就表示他们开发了一种新方法可以克服当前液体活检技术的局限性,从而就以帮助鉴别     

非小细胞肺癌患者血中DNA片段的检测、定量及临床意义的研究

目的探讨非小细胞肺癌患者血中游离DNA片段在临床上早期诊断、分期、预后方面的意义。方法随机采集2004年10月至12月大连医科大学附属二院经病理确诊的初治Ⅲ、Ⅳ期非小细胞肺癌患者的血标本15份,门诊健康体检者血标本15份,通过酚/氯仿提取法定量检测两组的血浆DNA片段,进行对照比较,分析非小细胞肺癌组内各因素(包括与诊断相关的肿瘤标记物,与预后相关的年龄、性别、一般状况及病理类型、疾病分期、免疫指标、是否转移等)与血浆游离DNA片段水平的相关性。结果非小细胞肺癌组血浆游离DNA片段水平高于正常健康对照组,其血浆游离DNA片段的均值分别为:(384.8±99.36)μg/ml与(13.9±3.60)μg/ml,差异有显著性,Ⅲ期与Ⅳ期非小细胞肺癌患者的血浆游离DNA片段差异有显著性,均值分别为:(290.4±91.82)μg/ml与(481.2±196.44)μg/ml,且非小细胞肺癌患者的血浆游离DNA片段与肿瘤标记物CA199、CYFRA21-1、ALP呈正相关性;在预后因素分析中,显示非小细胞肺癌患者的血浆游离DNA片段水平与一般状态、免疫状态、病理类型及是否存在远处转移等因素有明显相关性,其中与一般状态、免疫状态呈负相关,与远处转移呈正相关,与性别、年龄、治疗疗效等因素无相关性。结论非小细胞肺癌患者血中的游离DNA片段水平较健康人高,且不同病期有一定差异,可能与患者自身状态、病理分型、疾病状态有关;游离DNA片段可以作为检测非小细胞肺癌的特异性指标,还可以替代一般状态、免疫状态、病理类型、是否存在远处转移等指标评价远期预后,并有取材方便、检测时间短、可以定量分析的优点,对临床有一定的指导意义和应用价值。     

血浆中氨基酸检测技术探讨

在血浆中检测游离氨基酸含量是临床诊断的重要手段之一。本文讨论了液相色谱法、氨基酸分析法、液质联用技术等几种血浆中氨基酸的检测技术,并介绍这些技术在氨基酸检测中的应用,为建立血浆中游离氨基酸的分析方法提供参考依据。     

无创产前DNA检测可有效筛查唐氏综合症降低出生缺陷

为了探究无创产前DNA检测筛查唐氏综合症降低出生缺陷的效果,本研究选择2012年4月至2017年12月我院收治的孕期产检6 192例孕妇作为研究对象,应用DNA测序方法对孕妇血浆中胎儿游离DNA进行染色体非整倍体检测,并检测其灵敏度和特异性,同时采用羊水核型分析两种结果。研究显示,阳性共73例,69例做了进一步检查,显示40例胎儿染色体检查核型正常继续妊娠,29例染色体异常。比较不同年龄组的孕妇血清学筛查唐氏综合征高风险情况,研究表明随着孕妇年龄的增加,DS阳性率逐渐降低(p0.05);血清学筛查后胎儿游离DNA (cffDNA)检测与染色体核型分析的阳性例数基本一致(p0.05)。本研究表明,采用产前无创检测胎儿游离DNA操作方便,检测灵敏度和特异性高,不会对胎儿的正常发育造成不良影响,且阳性检测率与羊水核染色体核型结果基本相同,是无创产前诊断唐氏综合征的重要方法,值得在临床上推广使用。     

基于电化学生物传感器的核酸肿瘤标志物检测研究进展

肿瘤生物标志物可以实现对癌症的早期诊断,监测肿瘤的发展和预后.随着高通量测序技术的发展,各种类型的核酸被发现与肿瘤的发生发展相关,可作为核酸肿瘤标志物,而且它们对癌症的早期诊断有着重要意义.由于核酸大都具有不稳定性、表达的动态性和低丰度等特点,因此快速灵敏并特异地检测该类肿瘤标志物就显得尤为重要.电化学生物传感器作为一类快速发展的检测方法能够满足这些需求.与传统的检测方法相比,电化学分析法彰显高效、灵敏、简便等优点,而且电化学检测设备装置轻便、廉价且易于微型化和集成化.近年来,用于检测核酸的电化学生物传感器取得了相当大的发展,在精准医疗中具有潜在的应用前景.本文从各种类型的核酸肿瘤标志物入手,介绍检测核酸标志物的电化学传感器在近年来的发展情况,特别是对电化学传感器体系中的探针设计和信号放大策略两个方面进行重点介绍.     

酵母生物工程及生物催化

在生物转化中,人们利用了生物催化剂所具有的显著特性。在温和条件下,这些生物催化剂无论是以游离状态或是以固定化形式起作用,它们都具有独特的专一性和高度的催化活性。多少世纪以来,人们就把酶的这些特性用在生物工程制品中。