野生大鲵及其人工繁殖后代的遗传多样性分析

中国大鲵（Andrias davidianus）,俗称“娃娃鱼”,隶属两栖纲Amphibia、有尾目Caudata、隐鳃鲵科Cryptobranchidae、大鲵属Andrias“。大鲵是我国特有的珍稀野生动物,是现存的两栖动物中最大的一种。近几十年来,随着人口的膨胀及人类开发自然资源强度的增强,大鲵赖以生存的环境受到严重破坏,种群数量减少,种群内年龄结构趋向小型化。特别是由于大鲵有很高的经济价值,人为的捕杀导致了它的天然资源严重衰竭。随着大鲵人工繁殖及规模化繁育技术的成功,我国大鲵人工繁殖种群的数量在逐年增长,开展大鲵保护遗传学的研究,对大鲵的人工增殖和种质资源管理有重要的意义。     

大鲵精子寿命的初步观察

大鲵(Megalobatrachus davidianus)是我国珍贵的体大有尾两栖动物。每年8—9月产卵繁殖。近年来,在进行大鲵人工繁殖研究过程中,应用人工药物催情,人工授精和人工孵化技术,先后获得了几批大鲵苗;由于各种原因,出苗率     

大鲵早期胚胎发育观察

通过人工繁殖，我们先后获得４批大鲵幼苗。本文对大鲵早期胚胎发育过程进行了细致观察，确定了发育过程的时序，详细描述了外形特征，同时绘制出各发育时期的特征图。     

中国大鲵生殖激素的初步研究

首次全面报道了中国大鲵6项生殖激素的研究结果.采用电化学发光技术,检测了雌雄中国大鲵在繁殖期与非繁殖期的血清中垂体泌乳素、卵泡生成激素、黄体生成激素、雌二醇、孕酮和睾酮6项生殖激素的含量.实验结果表明,雌雄性中国大鲵在繁殖期间与非繁殖期间的6项生殖激素检测结果没有明显的差异,对中国大鲵血清中的生殖激素与繁殖期的相关性进行了初步探讨,为中国大鲵生殖内分泌学的研究和人工繁殖积累了资料.     

商南地区大鲵的种群组成

大鲵(Megalobatrachus davidfanus)是我国特有的珍贵动物。过去泛捕乱猎,大鲵资源遭到一定程度的破坏,有的地方濒于绝迹。因此,研究大鲵的种群组成,了解资源概况,颇有必要。1978年6月,我们在商南县腰庄公社,对大鲵的种群组成作了观测;1979年9—10月,在太白县做了大鲵的人工繁殖试验;又调查了大鲵的收购数字。现将大鲵种群组成的资料汇总整理如下,以资参考。大鲵种群组成的分组依据我们在商南县腰庄清油河上游,长500米,宽5—10米的河流中共捕获大鲵49尾。根据     

中国大鲵不同组织同工酶的比较研究

中国大鲵Chinese Giant Salamander(Andrias davidianus)是1869年被David[1]在中国西部发现的,俗称娃娃鱼、狗鱼、啼鱼,隶属两栖纲、有尾目、隐鳃鲵科、大鲵属,是世界上最大的珍稀有尾两栖类动物,被列为国家二级保护动物。曾广泛分布于我国中南部各省,是由水生脊椎动物向陆生脊椎动物过渡的类群,具有独特的科研和经济价值[2,3],从20世纪70年代起,很多学者[4—6]对大鲵的性腺发育、人工繁殖、胚胎发育及大鲵的资源状况和生态等方面做了一些研究,而有关中国大鲵同工酶方面的研究很少,同工酶的研究不仅有助于探讨个体发育过程中个体基因的表…     

大鲵的自然受精试验

众所周知,在进行家鱼人工繁殖时,关于受精的方法有两种：一种是自然交配、自然产卵、自然受精;另一种是人工采精、人工采卵、人工授精。自然受精和人工授精,各有各的优点,不能相互取代,各生产单位可根据自已的生产条件选用。在进行大鲵人工繁殖时,关于受精的方法,也应该有两种。目前全国有30余所科研院所和院校进行研究(见“大鲵成熟精、卵的形态学观察及受精卵孵化中的形态变化”《淡水渔业》1999年第3期),迄今然仍未见大鲵的自然受精方面的报道。我们做了一点工作,报道如下供参考。     

大鲵的身体测量

大鲵(Ａｎｄｒｉａｓｄａｖｉｄｉａｎｕｓ)系国家二级保护野生动物。笔者于1993年夏、秋两季,在安徽省黄山市祁门县凫峰乡和休宁县流口乡收集到105尾大鲵活体,体重70～4450ｇ。饲养在人工建造的大鲵饲养场内,开展人工繁殖研究。现将自野外收集时测得的大鲵身体各部位数据分析结果报道于后。1　测量的数据(1)体重(ｇ):大鲵身体离开水后10分钟左右测得;(2)全长(ｃｍ):吻端至尾尖长度;(3)头长(ｃｍ):吻端至左右颈褶中间点长度;(4)头宽(ｃｍ):头最宽处长度;(5)尾长(ｃｍ):肛孔后缘至尾尖长度;(6)前肢长(ｃｍ):前肢基部至指尖长度;(7)后肢长(ｃ…     

四川省兴文县大鲵洞的大鲵种群中白化基因的频率

四川省兴文县的大坝镇(离兴文县30km左右)与云南省毗邻,大坝镇之南有一个名为“大鲵洞”的地下阴河出口.每年山洪暴发时,会有许多幼小的大鲵(Andrias davidianus)从洞口涌出.2006年1月7日,笔者曾亲自参与对大鲵洞及其大鲵的考察.每年春季从大鲵洞涌出的大鲵中,有若干比例的白化     

温度对禁食大鲵碳氮代谢的影响

本文研究温度对禁食大鲵碳代谢和氮代谢的影响,结果表明：随着温度的升高、禁食大鲵的碳代谢和氮代谢均上升,其代谢率升高,禁食大鲵的代谢率很低,１５℃时,每日每公斤体重内的蛋白质消耗为０．７克左右,从理论上证明大鲵的耐饥能力很强,雄性大鲵比雌性大鲵的代谢率稍高。     

野生中国大鲵Sox基因的克隆与序列分析

Sox基因家族是一类编码转录因子的基因家族,其产物具有一个HMG-box基序保守区,调节动物的性别决定与分化过程,并参与多种器官的发育。参照人SRY基因HMG-box保守区序列及有关文献,设计一对简并引物,PCR扩增了野生雌性中国大鲵（Andrias davidianus）基因组DNA,结果得到了一条长约220 bp的产物片段;菌落PCR扩增结果表明,克隆后的白色菌落中90%以上都是阳性克隆;通过SSCP技术筛选到3种有差异的阳性克隆,进行测序,获得了3个Sox基因：Sox4a、Sox4b与Sox14。对所得序列进行序列比对和聚类分析,结果显示该基因在分子进化上具有高度的保守性。对中国大鲵Sox基因的研究,目前国内外尚未见报道。为研究中国大鲵性别决定机制以及Sox基因进化提供了分子遗传学资料。     

Bone endocrine regulation of energy metabolism and male reproduction

Usually vertebrate physiology is studied within the confined limits of a given organ, if not cell type. This approach has progressively changed with the emergence of mouse genetics that has rejuvenated the concept of a whole body study of physiology. A vivid example of how mouse genetics has profoundly affected our understanding of physiology is skeleton physiology. A genetic approach to bone physiology revealed that bone via osteocalcin, an osteoblast-secreted molecule, is a true endocrine organ regulating energy metabolism and male reproduction. This ongoing body of work that takes bone out of its traditional roles is connecting it to a growing number of peripheral organs. These novel important hormonal connections between bone, energy metabolism and reproduction underscore the concept of functional dependence in physiology and the importance of genetic approaches to identify novel endocrine regulations.     

大鲵Agouti基因的克隆、表达及多态性分析

刺鼠信号蛋白(Agouti)是哺乳动物和鸟类黑色素合成过程中的重要调控因子,影响动物的体色(毛色)。为研究Agouti在两栖动物体色形成过程中的作用,本研究利用PCR技术扩增得到大鲵Andrias davidianus的Agouti基因部分cDNA序列并进行了相关的生物信息学分析,进一步使用实时荧光定量PCR检测了大鲵Agouti基因在皮肤、肝脏等10个组织和器官中的表达情况,并检测了4种不同体色大鲵皮肤组织中Agouti基因的表达量。同时采用直接测序法,比较了不同体色大鲵Agouti基因编码区的序列差异。结果显示,大鲵Agouti基因cDNA序列长1 068 bp,开放阅读框399 bp,编码132个氨基酸残基。蛋白质同源性分析表明,大鲵Agouti蛋白具有与其他物种一致的保守Agouti结构域,其蛋白质序列与两栖爬行类序列相似性较高,与哺乳动物和鸟类相似性较低。系统进化分析显示,大鲵Agouti基因与高山倭蛙Nanorana parkeri、美国短吻鳄Alligator mississippiensis、中华鳖Pelodiscus sinensis等物种的亲缘关系较近。实时荧光定量PCR分析表明,Agouti基因mRNA在大鲵不同组织中均有表达,皮肤中的表达量最高。在4种不同体色大鲵皮肤组织中,黄色皮肤中的Agouti基因表达量高于其他体色。不同体色大鲵Agouti基因编码区序列一致。大鲵Agouti基因独特的序列特征及其表达的组织特异性暗示了其在两栖动物体色形成过程中可能具有与其他物种不同的调控机制。这些结果为进一步研究Agouti在大鲵体色形成过程中的作用提供了基础资料。     

卢氏县大鲵种群年龄结构和性比的初步研究

对大鲵种群样本(n=252)及观察到的当年孵化的幼鲵进行测量,样本采自河南省卢氏县大鲵自然保护区。以大鲵体长、体重为指标,用重心法聚类划分出8个年龄组(不含当年孵化幼鲵)。在此基础上结合大鲵的生长发育特点,同时与人工养殖条件下的生长情况进行对照,根据样本聚类情况推断出大鲵5个个体年龄组及相应的体长和体重指标,对卢氏县大鲵20世纪90年代初的种群年龄结构和性比进行了分析,探讨了以大鲵体长和体重为生长指标、用聚类分析法划分大鲵年龄组的可能性。     

饲养中国大鲵氨基酸组成分析

实验对饲养中国大鲵氨基酸组成成分进行了比较全面的测定与分析,结果表明:饲养中国大鲵肌肉的蛋白质质量分数为164.3 g.kg-1,水解氨基酸总量为160.6 g.kg-1,各种氨基酸组成相当全面,必需氨基酸(EAA)为75.2 g.kg-1,占氨基酸总量的46.82%,符合人体需要量模式的程度相当高,为优质食物蛋白,可与做为参考蛋白的鸡蛋蛋白相媲美。研究同时发现呈味氨基酸总量70.5 g.kg-1,占氨基酸总量的43.90%,为研发味道鲜美的大鲵食品提供了有力的数据。     

中国大鲵消化系统13种器官的蛋白水解酶种类和活性分析

蛋白水解对生命活动是必不可少的(Vassali et al., 1994),蛋白质的酶解修饰(Xu et al.,1999)、细胞的迁移、组织再生与修复、消化系统对食物中蛋白质的消化等均与蛋白水解酶有关(Baimbridge et al.,1992),许多病理过程也与蛋白水解酶功能失调有关(Teichert et al., 1989; Monard, 1988).因此开展大鲵消化系统各器官的蛋白水解酶种类和性质的研究,对了解大鲵消化系统各器官的功能、演化及大鲵的营养需求、食性、消化生理等是必要的.本文对大鲵消化系统各器官的蛋白水解酶特征进行了初步分析,现将结果报道如下.     

秦岭山区中国大鲵生境因子的选择

通过对秦岭山区中国大鲵(Andrias davidianus)栖息地生境因子调查、统计,利用R语言分析了各因子与大鲵生境选择的相关性,得出研究结果:秦岭山区影响大鲵生存的主要因子为栖息地类型(相关系数r=0.98),其次是水温(相关系数r=-0.8)、河岸坡度(r=-0.6)和p H (r=-0.6);浊度(相关系数r=0.5)、电导率(r=0.49)、DO(r=0.4)、人为干扰(r=0.35)和海拔(r=0.31)对大鲵分布影响不大。研究结果为探讨中国大鲵对野生环境的适应性选择提供了参考。     

Effects of an artificial diet on development, reproduction and digestive physiology of Chrysopa septempunctata

The effects of an artificial diet on growth, development, reproduction and digestive physiology of Chrysopa septempunctata Wesmael were determined. The results showed that the reproduction was highly correlated with weights of females and activities of trypsin-like and chymotrypsin-like enzymes of C. septempunctata. The influences of diet on the digestive physiology such as digestive enzyme activity of a predator may be used to assess the reproductive potential of a predator, and therefore to provide a way to speed up the development and screening of artificial diets.     

中国大鲵研究概况

中国大鲵(Andrias davidianus)为我国特有物种,也是国家二类保护水生野生动物.野生大鲵多栖息在山区溪流里,喜穴居,怕光怕声,以鱼蟹等水生动物为食,从数量上看,以陕西秦岭山区居多.大鲵经济价值极高,在美食、保健、医药、观赏等方面均具有广泛开发利用的前景,因而颇受社会各界关注.近年来对大鲵的科学研究涉及多个...     

中国大鲵 Dmrt 基因 DM 结构域的克隆及序列分析

Dmrt 基因家族是一个与性别决定相关的基因家族,该家族成员共有一个具有 DNA 结合能力的保守基序-DM 结构域。为了进一步探讨该家族在系统进化中的保守性,本研究通过简并 PCR 技术,扩增并克隆了中国大鲵（Andrias davidianus）基因组中的 DM 结构域。序列分析显示,中国大鲵基因组中存在 Dmrt 基因的 DM 结构域。其核酸序列与猕猴、青鳉、人、小鼠、牛、热带爪蟾相应 Dmrt 基因 DM 结构域的相似性分别为 91%、92%、92%、89%、91%、84%。其蛋白序列与上述物种的相似性均为91%,表现为4个氨基酸的变异。即第 19、34、36 和 45 位的精氨酸分别由半胱氨酸、谷胱酰胺、色氨酸和谷胱酰胺所取代。这些氨基酸的变化对其蛋白总体的三维构型没有显著影响。聚类分析结果表明,不同进化地位物种的 Dmrt 基因 DM 结构域编码序列存在高度的同源性,显示 Dmrt 基因在系统进化上的高度保守。