中药“枳壳”的组织培养与植株再生（简报）

以酸橙的茎段为外植体,进行离体再生体系研究.结果表明,培养基MS + 6-BA 1.0 mg/L + IAA 0.5 mg/L + CH 400 mg/L适宜不定芽诱导;培养基MS + 6-BA 0.5 mg/L+ IAA 0.25 mg/L + CH 400 mg/L适宜不定芽增殖;培养基1/2MS + NAA 1.0 mg/L + IBA 2.0 mg/L生根效果较好,生根率达80%以上.     

睡菜离体快繁技术的研究

以睡菜的幼嫩茎段为外植体,接种到附加不同浓度激素配比(6-BA/NAA)的MS培养基,诱导睡菜愈伤组织、芽及根的生长。研究发现,外植体在1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA+MS的培养基上培养10d,可观察到浅绿色的愈伤组织。愈伤组织转接到4.0mg/L 6-BA+0.3mg/L NAA+MS培养基上2周左右可生成芽。对带芽的愈伤组织再进行诱导生根进而形成完整再生植株,最适根诱导培养基为0.3mg/L 6-BA+1.0mg/L NAA+MS培养基。该实验采用植物离体快繁技术成功建立了睡菜再生体系,为睡菜种苗规模化奠定了技术基础。     

蚊净香草快速繁殖研究

以蚊净香草嫩叶和叶柄为外植体进行培养,筛选合适的外植体与诱导、增殖和生根的最佳培养基。结果表明,叶片外植体在MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L培养基最适于诱导愈伤组织和不定芽;MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.3mg/L培养基有利于不定芽增殖;无根苗在含有低浓度无机盐和生长素水平的生根培养基上易生根,生根率高达100%。     

玉竹的组织培养与快速繁殖

以玉竹[Polygonatum odoratum (Mill.) Druce]根状茎、叶片和茎段为外植体,于附加不同激素配比的MS培养基中诱导愈伤组织、不定芽和不定根,探讨增殖培养和植株再生的条件.结果表明,叶片和茎段外植体诱导愈伤组织和芽的分化率很低;而根状茎外植体易于培养,有较高的诱导率和增殖倍数,其愈伤组织、不定芽和不定根的诱导率分别可达87%、90%和99%以上.适宜根状茎外植体愈伤组织诱导的培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,有利于增殖和丛生芽分化的培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA和MS+3.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,而1/2MS+3.0～5.0 mg/L NAA适宜诱导试管苗生根培养.试管苗的移栽成活率可达85%以上.     

海蝇子草组织培养与快速繁殖(简报)

以海蝇子草带芽茎段为外植体进行离体快速繁殖,在MS + 6-BA 0.5 mg/L + NAA 0.1 mg/L培养基上可诱导不定芽,在MS + 6-BA 2.0 mg/L + NAA 0.1 mg/L培养基上进行增殖培养,在1/2 MS + NAA0.5 mg/L培养基上进行生根培养,生根后移栽到泥炭土+少许珍珠岩的基质中,成活率达90%以上。     

药用植物金荞麦愈伤组织诱导与植株再生

目前转基因技术已成为植物定向遗传改良的重要手段,而建立稳定高频的离体再生系统是实现遗传转化的基础和前提.本试验以25 ～30 d苗龄的金养麦(Fagopyrum dibotrys)无菌苗叶片、茎节间、叶柄为外植体进行愈伤组织诱导与植株再生研究.结果表明:叶片在MS +2,4-D 4.0 mg/L +6-BA 1.0 mg/L培养基上愈伤组织诱导率达到89％.茎节间在MS +2,4-D 2.0 mg/L +6-BA 2.0 mg/L培养基上愈伤组织诱导率为87％.叶柄在MS +2,4-D 4.0 mg/L +6-BA 2.0 mg/L+ IBA 0.2 mg/L培养基上的最高诱导率仅为54％.愈伤组织分化不定芽的适宜培养基为MS +6- BA2.0 mg/L +TDZ0.2 mg/L +NAA0.2 mg/L;金荞麦不定芽在1/2 MS +NAA 0.5 mg/L的培养基上生根效果最好.组培再生植株经炼苗后移栽到田间成活率达80％以上,且生长表现正常.高频完整再生体系的建立,为金荞麦进一步遗传操作和扩大药材资源奠定了基础.     

向日葵离体再生体系的建立

为了建立高效的向日葵离体再生体系,从基因差异、外植体取材、生长素和细胞分裂素浓度、附加物的添加等方面出发,对向日葵愈伤诱导、分化、生根等过程进行了系统优化。结果表明：杂交材料相对于自交材料更容易实现再生;最佳外植体是生长4 d的子叶;最佳愈伤诱导培养基是MS培养基 (MS) +2.0 mg/L 6-苄基腺嘌呤 (6-BA)+0.5 mg/L奈乙酸 (NAA)+1.0 mg/L激动素 (KT),诱导率最高可达100％;最佳分化培养基是MS+0.2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.3 mg/L KT+0.3 mg/L硝酸银 (AgNO3)+0.2 g/L活性炭 (AC),芽分化率可达71％;最佳生根培养基是1/2 MS+0.6 mg/L吲哆丁酸 (IBA),生根率最高为77％。方差分析表明,材料基因型、外植体生长时间、激素、AgNO3、AC对向日葵再生呈现显著性影响。     

不同植物生长调节剂对铁皮石斛(Dendrobium candidum)再生的影响

本实验以铁皮石斛无菌苗茎段为外植体,通过添加不同浓度的植物生长调节剂,诱导铁皮石斛愈伤组织形成与分化,建立铁皮石斛组织培养再生体系。结果表明,外植体接种5 d后,在改良MS培养基上添加2 mg/L PBU和0.05 mg/L IAA,可达到100%的愈伤诱导率。将愈伤组织接种在MS培养基上,添加0.1 mg/L NAA和0.5 mg/L 6-BA,不定芽诱导率为90.8%。适合铁皮石斛芽增殖培养基为:MS+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+100 mg/L Vc+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA。PBU浓度为0.5 mg/L,NAA浓度为0.05 mg/L时,芽苗生长情况良好,最适合用于不定芽伸长。铁皮石斛最适生根的培养基为:MS+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+100 mg/L Vc+0.5 mg/L IBA,生根率可高达94.1%。本研究成功建立了铁皮石斛高效再生体系。     

商陆离体再生体系的构建

目的:建立商陆离体再生体系。方法:选取商陆的幼茎、茎节、叶片、叶柄和顶芽为外植体,以MS作为基本培养基,通过添加不同浓度配比的植物生长调节剂分别进行愈伤组织、丛生芽和生根诱导,筛选商陆离体再生体系方案。结果:顶芽和幼茎为外植体诱导的愈伤组织出愈时间早,愈伤组织质量高,以培养基MS+6-BA0.5 mg/L+2.4-D 0.5 mg/L的诱导率最高,达到100%;其中,只有以顶芽产生的愈伤组织才能分化出丛生芽,芽分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.25 mg/L,诱导率为98%;诱导生根的适宜培养基为1/2 MS+NAA 0.3 mg/L,诱导率达100%。结论:建立和完善了商陆离体再生体系方案,为商陆遗传转化体系的构建奠定了基础。     

花生幼叶不定芽诱导与快速繁殖

以花生品种‘粤油7号’6~8 d龄幼叶为外植体进行植株再生研究。结果表明,外植体在MS+0.6 mg/L NAA+8 mg/L 6-BA+1 mg/L AgNO₃+3 mg/L Gln培养基上,诱导不定芽效果好,经两次继代培养出芽率达81.03%,每个外植体平均出芽数达5.79个。经伸长培养基MS+2 mg/L 6-BA+4 mg/L GA₃培养,不定芽伸长长度达1.0~2.0 cm。试管苗在培养基1/2 MS+0.5 mg/L NAA+3 mg/L IBA上生根率达86.15%,不定根粗而长,有侧根,移栽成活率达90%,结实率100%。     

红金钻蔓绿绒高频再生体系的建立

以红金钻根茎、叶片、叶柄为外植体,通过直接诱导不定芽和间接(愈伤组织)诱导不定芽途径,建立组培快繁体系。本研究发现:根茎直接诱导不定芽最佳培养基:MS+3 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+2 mg/L GA_3;通过愈伤组织间接诱导不定芽及其分化的最佳培养基:MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA;不定芽增殖最佳培养基:MS+3.0 mg/L 6-BA+0.8 mg/L IBA;生根最佳培养基为:1/2MS+0.75 mg/L NAA。将植株种植于草炭和珍珠岩以3:1混合的基质中,成活率达98%。     

金线莲外植体筛选及愈伤组织诱导研究

以金线莲茎段、叶片、茎片、不定芽为试材,分别在添加6-BA、ZT、NAA、KT 5个不同处理的MS及1/2MS培养基上培养,诱导愈伤组织。结果表明,以茎段、茎片、不定芽为外植体,在MS + 6-BA 2.0 mg/L + NAA0.5 mg/L、MS + NAA 2.0 mg/L + KT 0.1 mg/L和MS + 6-BA 2.0 mg/L + NAA 0.5 mg/L + ZT 0.2 mg/L培养基中培养,均能成功诱导愈伤组织。不定芽为诱导愈伤组织最佳外植体,最佳培养基为MS + 6-BA 2.0 mg/L + NAA 0.5 mg/L + KT 0.2 mg/L。     

观赏羽衣甘蓝高频再生体系的建立

观赏羽衣甘蓝是一种赏食兼用的耐冻优良景观植物.为了通过基因工程手段赋予其抗虫性,并进一步提高其低温耐受性,获得新的抗性种质,本研究以优良育种品系为试材,详细探讨了影响离体培养不定芽再生的因素,建立了高效再生体系.以8份不同类型羽衣甘蓝基因型的带柄子叶、子叶、下胚轴为外植体,研究了不同基因型、不同外植体、不同的培养基激素浓度配比及添加AgNO3对不定芽诱导的影响.结果表明:无论基因型及使用的培养基,带柄子叶均为最佳外植体;不同的基因型、不同外植体其最佳的芽诱导培养基不同;筛选出两份材料,其带柄子叶分别在L6(MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1mg/L)及L3(MS+6-BA 1.5 mg/L)培养基中不定芽诱导率为100%,下胚轴诱导率最高也能达88.33%;培养基中添加4 mg/L AgNO3不利于羽衣甘蓝的不定芽诱导;再生株生根以MS+NAA 0.1 mg/L效果好,生根率可达100%.     

茎秆的第一节间离体再生空心菜

以空心菜(Ipomoea aquatica Forsk.)品种‘白骨柳叶’为材料,通过筛选植物外植体和调整培养基激素配比等方法,首次建立了茎秆第一节间为外植体的空心菜离体再生体系。结果表明,在MS基本培养上添加0.05%的植物组织培养抗菌剂PPM可获得大量空心菜无菌苗;植株子叶和下胚轴的切段均未诱导出不定芽,而茎秆第一节间为外植体能成功诱导出不定芽,诱导成功率为20%,最佳培养基配方为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA;不定芽诱导生根的最佳培养基配方为1/2 MS+0.1 mg/L NAA,生根率为100%。诱导成功后,将完整的再生苗移栽至基质土中,成活率可达100%。     

三倍体毛白杨组织脱分化培养与植株体再生

采用毛白杨三倍体幼叶作为外植体进行组织培养,以MS为基本培养基获得了再生植株。从NAA和IAA与6-BA间进行的18个正交试验中,选择出适宜脱分化培养基MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L,对三倍体毛白杨愈伤组织诱导率为87.6%。5种生长素与6-BA配比的再分化培养基中,12MS+IAA 0.1mg/L+6-BA 0.1mg/L对不定芽的分化诱导率可达到68.5%;MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.01mg/L的培养基可使单芽直接增殖出7.4个芽。在MS+IBA 1.0mg/L的生根培养基上,试管苗的生根率可达85.7%。     

香蕉草叶柄离体培养与快速繁殖(简报)

以香蕉草叶柄为外植体进行离体培养及快速繁殖条件研究。结果表明,叶柄外植体在培养基MS＋6-BA 2．0mg／L＋NAA 0．3mg／L＋蔗糖30g／L＋卡拉胶7g／L上诱导形成愈伤组织后,转入分化培养基MS＋KT 1．0mg/L＋NAA0．2mg/L可诱导不定芽分化;不定芽转入增殖培养基MS＋6-BA 1.0mg/L＋NAA 0．5mg／L可旺盛增殖,增殖系数4．5。不定根分化培养基为MS＋IBA 0．2mg／L＋NAA 0．05mg／L,生根苗在水族箱移栽成活率达98％。     

甘肃瑞香组织培养技术研究

以野生甘肃瑞香顶芽为外植体进行组织培养实验研究。结果表明:甘肃瑞香愈伤组织诱导的培养基为MS+2,4-D3.0 mg/L+6-BA3.0 mg/L;愈伤分化培养基为MS+ZT2.0 mg/L+NAA0.5 mg/L;不定芽增殖培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.2 mg/L,平均增殖倍数为7.8;生根培养基为1/2MS+NAA0.5 mg/L,生根数平均为3条左右,生根率为85%以上。     

万寿菊杂交亲本的离体培养

以万寿菊‘钻石’雄性不育株的幼嫩叶片和子房为外植体进行离体快繁,结果表明:培养基MS+0.8 mg·L-1 IAA+0.6 mg·L-1 6-BA+30 g·L-1蔗糖既有利于叶片愈伤组织的诱导也有利于不定芽的分化,愈伤组织诱导率达97.9％,不定芽诱导率达45.8％;培养基MS+0.5 mg·L12,4-D+0.5 mg·L-16-BA+ 30 g·L-1蔗糖为诱导子房愈伤组织的最佳培养基,出愈率为77.8％;培养基MS+0.05 mg·L -1 NAA+0.5 mg·L-1 6-BA+ 30g·L-1蔗糖为诱导子房愈伤组织不定芽分化的最佳培养基;将不定芽接至MS培养基上,7d后即可生出不定根,生根率可达98％,移栽成活率达90％以上.     

鼎湖山紫背天葵组织培养及植株再生

选用紫背天葵无菌苗叶片为外植体,建立了离体培养体系,并探讨其愈伤组织生长和不定芽诱导的适宜培养条件。通过研究得出:愈伤组织诱导的最佳培养基是MS+2,4-D 1.00 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+LH 200 mg/L+CH200 mg/L+YE 200 mg/L,愈伤组织诱导率为96.88%。不定芽诱导培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+LH 200 mg/L+CH 200 mg/L+YE 200 mg/L,不定芽诱导率为77.3%。不定芽转至1/2MS培养基中均可100%生根并长成完整植株,小苗移栽成活率达到90%。     

韭菜胚根高效植株再生体系的建立

为了建立韭菜高频植株再生体系,以韭菜胚根的不同部位为外植体,研究了不同部位愈伤组织和芽的诱导。结果表明,胚根尖为诱导愈伤组织的最佳外植体,愈伤诱导率达到81.4%,出芽率达到73.3%;比较在不同激素配方上的愈伤组织诱导和芽的分化,在MS+1 mg/L BA+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L KT培养基中再生率最高,诱愈率达到80%以上,不定芽分化率达78.8%,繁殖系数为24.7;在MS+1 mg/L GA+0.5 mg/L KT不定芽伸长培养基中,30 d不定芽伸长为独立植株,比例为85.5%;独立的韭菜苗在1/2MS+0.3 mg/L IAA中生根率及根系状况最佳。通过该方法 130 d左右即可从胚根脱分化再生出植株。