一种改良的BrdU免疫组织化学染色抗原热修复技术

目的：探索一种简单有效的行BrdU免疫组织化学染色抗原热修复的方法。方法：本实验探索了三种抗原热修复方法：1）漂片煮沸法,2）贴片煮沸法,3）贴片改良法。将贴有冰冻组织切片的玻片置于恒温封闭体系中进行热修复。之后行BrdU免疫组化染色,栗集图像对这三种热修复方法进行比较。针对贴片改良法行BrdU与NeuN、P。CERB和DCX的荧光双标,采集图像以观察该方法在免疫荧光甄标实验中应用的可行性。结果：1）漂片煮沸法脑组织切片在经过热修复处理后,切片卷起皱缩,不能进行后续实验步骤;2）贴片煮沸法可见少量BrdU阳性细胞,但背景深,且少数脑片起泡,假阳性现象严重;3）贴片改良法B-U免疫组化及与NeuN、P-CERB和DCX的免疫荧光双标染色背景浅,阳性细胞明显。结论：采用改良的热修复法能充分暴露BrdU抗原,DAB显色及免疫荧光染色结果理想。此方法为一种较好的行BrdU免疫组织化学染色抗原热修复方法。     

不同抗原修复方法在陈旧性石蜡切片乳腺珠蛋白免疫组化中的比较

目的探讨不同抗原修复方法在陈旧性石蜡切片乳腺珠蛋白免疫组化中的效果。方法选取2010年1月至2012年4月本实验室保存的陈旧组织石蜡切片样品76例,所有样品组织均取自乳腺癌患者,各取连续3张切片分别归入试验组、高压组和微波组。微波组和高压组按照常规加热修复法处理相应患者石蜡切片,试验组在pH为3.5±0.1的柠檬酸盐缓冲液中室温修复15min。比较三组切片的抗原修复效果。结果三组切片经过不同的处理方法修复后,肿瘤细胞染色结果显示,试验组染色强度及高阳性比例分布优于高压组和微波组,差异具有统计学意义(χ~2=11.122、14.468、12.859、13.267,P0.05)。综合阳性标记分数显示,试验组阳性分数多为++、+++,与高压组、微波组分布比较差异有统计学意义(χ~2=13.713、10.331,P0.01)。试验组阳性率明显高于后两组,差异具有统计学意义(χ~2=6.199、4.475,P0.05)。试验组经修复后的脱片率(χ~2=22.800、27.059,P0.01)及折损率(χ~2=64.083、40.827,P0.01)均明显低于高压组、微波组。结论常温下pH为3.5±0.1柠檬酸盐缓冲液进行抗原修复,能减少组织脱片及折损的发生率,提高切片修复效果。     

抗原修复方法在乙肝肾免疫组化检测的应用

乙型肝炎病毒相关肾小球肾炎（HBVAssciated Glomerulne phvitis）,简称乙肝性肾炎,临床上常要求对肾穿刺乙肝肾患者的标本做乙肝表面抗原（HBsAg）,乙肝核心抗原（HBcAg）或乙肝e抗原（HBeAg）检测。然而不同的抗原修复方法对肾穿组织石蜡切片HBsAg、     

不同抗原修复条件对肠癌MMR蛋白免疫组织化学染色效果的影响

目的 采用3种不同的抗原修复条件对肠癌错配修复(mismatch repair MMR)蛋白进行免疫组织化学染色,从而找到适合本科室的最佳修复条件.方法 回顾性分析近两年工作中遇到的肠癌病例,从中抽取50例,分别进行柠檬酸缓冲液高温高压修复、EDTA缓冲液高温高压修复和CC1缓冲液BenchMark XT机器修复后染色...     

不同的抗原修复方法和染色条件对P53蛋白免疫组织化学方法结果的影响

用免疫组织化学技术检测肿瘤组织中Ｐ53 基因蛋白产物的表达 ,是探讨Ｐ53 基因与多种肿瘤的相关性研究的主要手段之一。在免疫组织化学检测中 ,不同的抗原修复方法对Ｐ53 蛋白检测结果的阳性率和染色强度有不同的影响。本文在免疫组织化学检测Ｐ53 蛋白时对不同的抗原修复方法和染色条件进行了探讨 ,摸索出能较佳地显示Ｐ53 蛋白的免疫组织化学方法条件。介绍如下 :1.材料和方法1 1材料 :经临床病理诊断为恶性肿瘤如肺癌、乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌和大肠癌等福尔马林固定、石蜡包埋的组织 ;单克隆抗体Ｐ53 ＤＯ - 7和ＬＳＡＢ试剂盒为ＤＡＫ…     

免疫组织化学中的抗原修复技术

概述了免疫组织化学中固定对组织抗原性的影响,综述了抗原修复的方法及其原理。组织块的大小、固定液的种类、浓度及固定时间的长度都影响组织的抗原性。免疫组织化学实践中常用酶消化法、酸水解法、微波金属盐法、高压锅加热法等修复组织的抗原性。     

有关抗原修复若干问题的探讨

在免疫组织化学反应过程中 ,组织由于固定等方面的问题常导致表达不佳 ,或者假性。为了解决这些问题 ,需要做抗原修复。目前抗原修复的方法较多 ,有真空负压抗原修复法 ,微波辐射抗原修复法 ,高压抗原修复法 ,隔水热抗原修复法和电炉加热抗原修复法。本文根据上述各种方法 ,在实际操作中常可发生的一些问题如 p H的应用范围的选择 ;抗原修复最佳温度的选择 ;有效温度所需要持续的时间 ;抗原修复液必须遵循自然降温的规律 ,否则将达不到抗原修复的目的 ;尽量使用足量的抗原修复液 ;切片必须附贴牢固等。并详细介绍了各种方法的使用过程。在…     

免疫组织化学中抗原修复的研究进展

组织中抗原性的妥善保存和抗原修复技术与免疫组织化学染色的成败有着十分密切的关系 ,因此如何妥善保存抗原以达到最大限度保留组织的抗原性及如何对抗原加以修复成为做好免疫组化染色的重要步骤。免疫组织化学 (ｉｍｍｕｎｏ ｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ) ,简称免疫组化 ,是免疫学与分子生物学技术和形态学相结合的一门学科 ,是用已知抗体 (或抗原 )检测组织细胞中的未知抗原 (或抗体 )的技术 ,具有操作简单、敏感性高、特异性强等优点 ,已广泛用于病理诊断、鉴别诊断及胚胎发育、神经解剖等相关学科的研究。大量实践证明组织中抗原性的…     

抗原修复技术在免疫组织化学中的作用

免疫组织化学是一门免疫学与病理形态学相结合的新兴学科 ,是现代生物医学的一项重要方法学 ,具有操作简单、敏感性高、特异性强等特点 ,已经广泛应用于临床病理及其相关学科的研究之中 [1,2 ] 。目前采用甲醛为常规标本固定剂 ,醛基与组织蛋白质中的氨基形成交联使抗原决定簇被遮蔽 ,从而影响免疫组织化学结果 ,而且这种作用随着固定时间增长而加重 [3 ]。抗原修复技术的出现 ,使得原来许多只能在冰冻切片作免疫组织化学得以在石蜡切片上实现 ,抗原修复技术在免疫组织化学中的作用愈加明显 ,并且对免疫组织化学方法的敏感性起着决定性作用[…     

不同抗原修复免疫组织化学技术在HPV应用中的比较

许多研究已证实 ,人类乳头状病毒 (ＨＰＶ)与宫颈癌及癌前病变有关。通过ＤＮＡ序列分析鉴定 ,感染人子宫颈的ＨＰＶ亚型有 6、 11、 16、 18、 31、 33、 35、 39和 42 ,其中 6和 11亚型与宫颈尖锐湿疣发病有关 ,16和 18亚型与宫颈癌关系最密切。通常检查的方法是免疫组化法、聚合酶链反应(ＰＣＲ)和ＨＰＶ -ＤＮＡ原位杂交法。由于免疫组化方法较其他两种方法简单易行 ,因此在日常工作中得到广泛应用 ,但常规石蜡切片法抗原易受固定液的影响 ,用免疫组化法检查时必须通过抗原修复技术方能达到满意的结果。为了提高ＨＰＶ免疫组化法的诊断…     

微波炉和高压锅抗原修复与不修复免疫组织化学效果的定量对比分析

某些研究认为 ,免疫组织化学方法成功与否关键在于抗原决定簇的保存和暴露。组织经 1 0 %福尔马林固定。甲醛的醛基与抗原蛋白的氨基交联 ,使决定簇的构像改变。从而影响检测蛋白表达。要充分暴露抗原决定簇 ,微波炉和高压锅抗原修复是目前常采用的方法 [1,2 ]。本实验利用高灵敏 HPIAS-1 0 0 0图像处理系统进行定量对比分析 ,从而得到微波炉和高压锅修复与否乳腺癌组织中 P53、ras P2 1、PCNA蛋白表达的阳性率和阳性表达程度对比。为得到三种癌基因蛋白免疫组织化学染色最佳效果提供详细资料。材料和方法1 .材料乳腺癌组织标本五例 ,…     

不同抗原修复方法对肝癌组织中内源性生物素的影响及对策

目的探讨不同抗原修复方法对肝癌组织中内源性生物素的影响以及消除办法.方法采用pH6.0、pH8.0及pH9.0不同pH值的抗原修复液进行修复,对30例经甲醛固定石蜡包埋的肝细胞癌组织中内源性生物素活性进行检测,并通过不同检测方法对30例肝细胞癌中AFP(Alpha Fetoprotein)染色结果进行对比.结果加热抗原修复暴露肝细胞癌组织中内源性生物素的活性.不同pH值抗原修复液对内源性生物素的活性影响各不相同,阳性强度随着pH值增高而增强.生物素阻断剂能有效阻断内源性生物素的活性.采用pH9.0Tris-EDTA进行修复加Envision检测系统可提高肝癌组织中AFP的阳性率及阳性强度.结论加热抗原修复可使被甲醛封闭的内源性生物素的活性重新暴露,对免疫组化的染色结果造成影响,生物素阻断系统是消除内源性生物素的有效方法,采用pH9.0的抗原修复液进行修复加Envision非生物素检测系统是免疫组化染色中较为理想的检测方法.     

各种癌基因蛋白微波抗原修复免疫组织化学检测的研究

本研究对1555例各种肿瘤组织标本进行微波辐射(MWI)抗原修复免疫组织化学染色,检测了14种癌基因蛋白产物.并同时选择部分标本分别作冰冻切片,常规石蜡切片进行抗原修复与不修复的对比研究.结果,经MWI抗原修复后p53(PAb1801,PAb-240,PAb-420,DO-7),p185,Rb,C-fos,C-myc,Ki-67(R),EGF,EGFr,TGFβ和Bcl-2阳性检测率明显提高(P≤0 05),而p53(CM-1),PcNA p21和nm23/NDPK经MWI抗原修复与不修复结果一致,说明有部分抗原不用修复和其他处理.另一部分抗原仅表达在冰冻切片上,如Ki-67和Ki-1单克隆抗体,经修复也无阳性表达.本文中对消化、消化与抗原修复相结合及高压处理切片的IH染色也进行了对比研究,对他们处理切片存在的优缺点也一一作了详说.     

微波处理修复抗原后免疫组织化学方法效果的比较研究

冰冻切片经微波处理进行抗原修复后,免疫组织化学方法的敏感性明显提高,显色效果明显增强。提出了冰冻切片在免疫组织化学显色前进行抗原修复的必要性     

口腔种植修复与常规修复对牙列缺失患者生活质量及龈沟液细胞因子水平的影响

目的:研究口腔种植修复与常规修复对牙列缺失患者生活质量及龈沟液细胞因子水平的影响。方法:选择从2015年7月到2016年7月在我院接受治疗的牙列缺失患者108例作为研究对象。根据随机数字表法将患者分为对照组(n=54)和观察组(n=54),对照组实施常规修复,观察组给予口腔种植修复,随访3个月后,对比两组患者疗效、生活质量、治疗前及治疗3个月后龈沟液的细胞因子水平变化以及并发症情况。结果:观察组的总有效率较对照组明显升高(98.15%vs87.04%)(P0.05)。治疗后3个月两组的生理功能、情感功能以及社会功能评分均分别较治疗前升高,且观察组高于对照组(P0.05)。治疗后3个月两组患者的白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平均分别高于治疗前,而观察组低于对照组(P0.05)。观察组患者并发症的总发生率较对照组明显降低(7.41%vs22.22%)(P0.05)。结论:牙列缺失患者经口腔种植修复方式治疗的效果更好,对于龈沟液细胞因子水平上升具有明显的抑制作用,减少并发症,值得关注及推广。     

EDTA作为抗原修复液用于大鼠脑石蜡切片NMDAR2A免疫组织化学检测的经验

突触后成分的受体分子通过免疫组织化学技术进行检测有一定的技术困难,NMDAR2A就属于这类受体分子,用石蜡切片进行免疫组织化学必须结合高灵敏、高稳定性的抗原修复手段才能获得满意的结果。在过去的实验中常用pH6．0的枸橼酸缓冲液完成抗原修复,能观察到明确的细胞质阳性的神经元。     

三种自动免疫组化仪的染色结果比较分析

目的 探讨常用Leica、Roche和Dako等3种常用自动免疫组化仪在免疫组织化学染色过程中的优缺点.方法 选取中山大学第一附属医院病理科在2021年4月期间进行免疫组织化学染色病例,抽取常用25种抗体进行评分,相同抗体在3种不同自动免疫组化仪的同时行免疫组织化学染色,染色结果由病理医生和技术质控员一起评议.结果 相...     

炭疽毒素保护性抗原的不同结构域对其表达可溶性的影响

目的：对炭疽毒素保护性抗原（PA）的不同结构域进行了缺失突变,以期找到免疫原性降低而功能变化不大的PA蛋白突变体。方法：在对PA结构域的缺失突变体进行表达时,意外发现不同的突变体表达效果之间存在很大差异,遂用DNAStar软件对PA的4个结构域和突变体进行分析。结果：PA蛋白结构域2的表面特性与其他结构域存在很大差异。结论：推断这种表面特性影响了PA突变体的可溶性特征。     

不同保鲜液对郁金香切花保鲜及其贮藏的影响

 本文研究了不同保鲜液及贮藏20-40天后对郁金香切花瓶插寿命的影响。结果表明：1. 保鲜液延长了切花的插瓶保鲜时间;2. 预处理提高了开花率及开花时间;3. 经一个月以上贮藏,开花率及插瓶保鲜时间明显下降;4. 不同品种的耐贮性能不同。