抗生素和干扰素

924355能产生曲张链菌素复合物的链霉菌种〔英万Vesse-linova,N.…了Folia Mierobiol一1901,56 (6)。一535~541〔译自DBA,1992,11犷11),92一06133〕 研究了链霉菌菌株1000的形态学、培养和生理生化特性及其抗生素的产生。在菌丝体和培养滤液中均产生抗生素一1011和一1012,4天后抗生素的生物合成达最大值(4 109/1)。菌株1。。o的变种1011能产生10oomg/1抗生素一1021,将之与亲本菌株10。。的生产水平(41mg/l)进行比较。经鉴定抗生素一1011为曲张链菌素。在相同培养条件下,2株链霉菌的产物组分有不同。菌株100。和壮观链霉菌(5.。户ec‘ab￡…     

抗生素和干扰素

940623用链霉菌分泌表达系统生产抗细菌肚“aPidaeci-n”〔英〕/Maeno,M.…/Biosei.Bioteehnol。Bio。hem一1993,57(7)一1206~1207〔译自DBA,1993,12(19),93一10550〕 为了获得链霉菌枯草溶菌素抑制素(SSl)’-ap记aecin融合蛋白,构建了一种表达载体质粒pjsZos一d一EAPIM,并在变铅青链霉菌菌株66中表达。融合蛋白的产量为72m幻1培养基。这种融合蛋白含有551和加在apidaeein基因前头的具Met密码子的apida“cin,起CNBr切割位点的功能。用硫酸钱沉淀、离子交换层析和反相HPLC法纯化产物,并用CNBr切割分离apidaecin(一种抗菌肤,具有1…     

基因工程

890690制备棒状病毒表达载体的方法〔专,英〕/Smith,G.E.…/US Patent US4745051.Pub。17.05.88.ApPI.US498s5a,filed 27.05.83〔译自CBA,1955, (8),3152〕 酶切棒状病毒DNA,产生一个含多角体蛋白启动子以及充足的两翼序列(以利于同源重组)的棒状DNA。将此片段插人到一种克隆载体中,并将一外源基因置子该启动子的下游,形成重组穿梭载体。(主璋瑜)890691链霉菌分泌载体仁专,英〕/USPatent US 4745056,.Pob.17.05.38,Appl.US 66384母,f呈lod 23一0.84〔译自CBA,1988,(8),3153〕 能在链霉菌(s考呷户加呷馏。中产生所需蛋白的DN…     

抗生素和干扰素

921320以金.素桩.菌作克隆签因的寄生菌对执生亲产t的形响〔英J/Godoov,A.…了Biote。hnol.Lett扩1991,13(7)一471~476〔译自DBA,1991,10(18),91一10372〕 将金霉幸链霉菌菌株B一96,BM一K,MNU一石和RS/26培养于含1%甘氨酸的培养基中。用3mg/也l溶菌酶处理菌丝,分离原生质体,在无CaCI:但含13%蔗糖的最适培养基中再生。用质粒p IJ486、pIJ了02、pIJ61和噬菌体mul/6转化除RS/26以外的全部供试菌株。根据质粒、噬菌体和染色体DNA的限制性内切酶分析,估计全部供试突变体通常都含一种修饰酶,即识别GCCGGC的Nael的同功酶。RS/26可…     

抗生素和干扰素

920494氮素同化作用对调节抗生素生产的影响〔俄〕/Chi-peva,V.…产Antibiot.Khimioter一1991,36(3)一5~s〔译自DBA,1992,20(22),91-06742〕 研究了在发酵吸水链霉菌(尽加。川。。,。e。甸卯os““州“哪)生产抗生素期间,氮素同化作用途径中酶的活力,这些酶包括谷氨酸脱氢酶(GD-H)、谷氨酞胺合成酶(GS)、谷氨酸合酶(G-OGAT)和丙氨酸脱氢酶(ADH)。将吸水链霉菌155置于含各种N源的培养基(2 09/1葡萄糖、3 .59/IKH:PO‘、0.69/IMgSO‘·了H:O和zml微量元素溶液)中,于28℃、240印m搅拌下培养。没有观察到GDH活性,高浓度的钱和丙氨…     

医药其它

921368由变铅资链娜菌分泌抗生蛋白链菌素〔俄〕/Bol。-tin,A.P.…1 Antibiot.Khimioter一1091,36(6)一s~12[译自DBA,i。。1,10(25),91一10410〕 构建T一种bireplieon载体质粒pVGi4o,其中含有编码dagA基因信号肤的表达单位。将质粒pAPS中的阿维T链霉菌(“,e尹￡o仍犷eesa”￡d‘-耐落、抗生蛋白链菌素基因克隆到质粒pVG140上,获得重组质粒p VG141和pVG142。用它们转化变铅青链霉菌(5.1畜公落da.‘)Tk64,以硫链丝菌肤抗性为基础,选择含有质粒的克隆。重组菌株能够分泌抗生蛋白链菌素。检测了培养基成分和碳源对该抗生素的影响。5.1…     

基因库构建

921317应用吸菌体展示文库制备抗体片段〔英〕/C lack-50。,T。…/Nature。一1991,352(6336)。一624~628〔译自DBA,1991,10(19),91一10869〕921318栽培花生徐州68一4核签因文库的构建〔中〕/梁涛…了莱阳农学院学报。一1990,7(3)。一iei~165 以EMBL4噬菌体多聚克隆载体将栽培花生徐州68一4的核DNA13~20kb片段进行了克隆,共得到重组噬菌体总数分别为5.6xl。,,8.4xl。,和1.3x10。的3个基因组基因文库。(孙国凤)921319弗兰克氏菌若因文库的构建〔中〕/秦敏…了西南农业学报。一1090,3(4)一56~60 采用cosm记质粒pLAFRI为载体,成功地构建…     

卡那霉素链霉菌噬菌体sKJl——温和性噬菌体

从土壤中分离出一株卡那霉素链霉菌噬菌体SKJl,该噬菌体在卡那霉素链霉菌及林肯链霉菌菌苔上产生混浊的噬菌斑。从噬斑中长出的菌落后代对SKJl噬菌体的感染产生了抗性。单株传代未见自发释放游离噬菌体。紫外线照射亦未发现诱导现象。抗性菌株经10ug／ml丝裂霉素C处理后,其中一株能释放出约5．9×103pfu／ml游离噬菌体颗粒,推测这些抗性菌株可能是溶源性菌株。菌落原位杂交实验证实抗性菌株的DNA与SKJl噬菌体DNA有同源性,说明这些抗性菌株已被SKjL噬菌体溶源化,从而确证SKJl噬菌体为一温和性噬菌体。     

基因工程

862389链霉菌和相关徽生物中应用的克隆载体〔专,英〕/Fayerman,J.T.…//USP-atent US 4513086.Pub.23.o4.85.Appl.US 404082,filed 02.08.82〔译自CBA,1985,(7),2127〕一种rD NA载体含有功能性复制原点,这一复制原点含有质粒pEL102的内切酶切割片段和一个或几个至少能表现一种抗生素抗性的DNA片段。     

超声波处理土样分离放线菌

【目的】探索超声波处理土壤悬液,增加稀有放线菌的类群。【方法】将西双版纳热带雨林的混合土样,制成土壤悬液,用超声波分别处理0-120s,用平板稀释法分离放线菌,得到纯菌落后测定其16S rRNA基因序列,进行系统发育分析,将分离菌株鉴定到属;用超声波处理已经鉴定到种且常见的10种链霉菌0-5min,后进行培养,测定其存活率。【结果】土壤悬液经超声波处理不同时间,放线菌的数量和种类逐渐增加。超声波处理已知链霉菌1-5min,对链霉菌的数量没有明显影响。【结论】用超声波处理土壤悬液40s,可以大大增加放线菌的出菌总数,明显增加稀有放线菌的种类,是一种经济且简便易行的方法。     

医药其它

922175用皿组变铅青链霉菌生产可溶性CO4衍生物的发酵过程〔会,英〕/Gerber, R.G.“·了Abst:.Pap.Am。Chem.Soe。一1091,202 Meet.,Pt.1。一BIOTs6〔译自pBA,1991,10(23),,1-13493〕 研究了利用重组变铅青链霉菌(S汁即切饥夕-cesl‘”“aos)生产可溶性CD4(sCD4)衍生物。在一个10升规模的发酵罐里,改进发酵过程使胞外产物累积量比初始摇瓶里产生的增加10倍。此发酵过程的优化主要是研究pH、溶解氧浓度,培养基组成对胞外产物累积及其稳定性的影响。培养基研究揭示,在培养基里加入一种蛋白水解物可提高产物的累积,缺少葡萄糖降低了…     

卡那霉素链霉菌噬菌体SKJ1—温和性噬菌体

从土壤中分离出一株卡那霉素链霉菌噬菌体ＳＫＪ１,该噬菌体在卡那霉素链霉菌及林肯链霉菌菌苔上产生混浊的噬菌斑。从噬斑中长出的菌落后代对ＳＫＪ１噬菌体的感染产生了抗性。单株传代未风自发释放游离噬菌体。紫外线照射亦未发现诱导现象。抗性菌株经１０μｇ／ｍｌ丝裂霉素Ｃ处理后,其中一株能释放出约５．９×１０＾３ｐｆｕ／ｍｌ游离噬菌体颗粒,推测这些抗性菌株可能是溶源性菌株。菌落原位杂交实验证实抗性菌株的ＤＮＡ与     

动物遗传工程

924596用吸岭界素N一乙酸转移蔺(P AC)作为转基因动物中新的报道甚因〔英〕/Lah。:,E .G.“·,Nu-e leie Aeids Researeh。一1991,19(12)。一3465[译自ANI,1992,4(7),3321〕 PAC通过使嚷吟霉素酪氨酸部分的氨基乙酸化,可使嚷吟霉素失活。将白黑链霉菌pac基因与子宫珠蛋白5产侧区部分和SV40多聚腺普化信号一起导入小鼠。PAC在转基因小鼠子宫中表达,但不在家畜或家禽中表达。(朱遐)924587爪幼成体和招蚌专性珠蛋白基因在转基因小砚中的表达〔英〕/Dillon,N.…/Nueleie Aeids Re-seareh一1901,i。(22)一6227~6230〔译白ANI,1992,4(…     

酶和发酵工程

861949蛋白酶对黑曲霉C突变体合成葡糖糖化酶的影响【英〕/Fiedurek,J.…了ActaMierobiol.Pol一1985,34(1)一25一32〔译自DBA,1985,4(8),85一04112〕 用紫外光照射和用0.01%亚硝基肌处理黑曲霉C分生抱子悬液,这株菌具有葡糖糖化酶合成活性。由分生抱子长出的1230个培养物中选到     

激素和活性多肽

用。e一毗咯霉素酮作为模型底物,对糖昔化活性对生长期的依赖性、糖昔化作用的时程以及影响加利利链霉菌的底物浓度进行了研究。活性最大时是对数生长期。(邓永鸿;郭殿瑞)8Gll28一步法纯化来自人胎盘的雌二醇一17一刀一脱氢酶〔英〕/Mendoza一HernandeZ,G.…     

基因工程

862962装配型质粒克隆用载体〔专,英]Hunter,1.5.了European Patent Appl.EP 0146368.Pub.26.06.85.Appl.GB833659,filed 16.12.83〔译自CBA,1985, (9),2835」 构建了一个双功能的杂种装配型质粒克隆载体,它能够在大肠杆菌和链霉菌属中复制。这个载体叫pPZ74,它可能用于在大肠杆菌中构建基因文库,然后,可以下经进一步的DNA操作,即能被转回到链霉菌中。 (郭殿瑞)862963编码兔肿瘤坏死因子(TNF)的DNA,具有上述插人的DNA的运载体,用上述载体转化的寄生,兔TNF多肤和这种肚的生产方法〔专,日〕/Yamada,M一了European Patant Appl。…     

医药其它

921792利用变铅,链.菌生物转化洋地黄毒试元【英〕/Dahiya,J.5.了Indian J.Mierobiol一1991,31(3)一251~256〔译自DBA,1991,20 (21),91一12157〕 将悬浮于Tween一80的洋地黄毒贰元(1g)加人到4日龄的变铅青链霉菌生长培养基中,于26~30℃下温育21天。温育后,离心和浓缩培养液,然后用氯仿一甲醇(3:1)抽提。对抽提液进行硅胶TLC,并经Nueleosil5Cis上的HPLC分离和纯化产物。收集到6种级分,对其进行MS、PMR和CMR光谱分析。经鉴定这些物质为洋地黄毒贰元、17一夕一H一洋地黄毒贰元、3一epi一17一声一洋地黄毒贰元、17一声一H一aeovenos…     

质粒研究与载体构建

922767用于抗体筛选的农面表达载体〔英〕/Breitling,F.…/Gene。一1901,104(2),一i‘7~153仁译自DBA,1092,11(3),92一012凌03 构建了一种新载体(质粒噬菌体pSEX),它表达与大肠杆菌噬菌体基因一皿蛋白融合的单链抗体(Ab)。通过此载体可用少量抗原从大基因库中筛选出专性Abs。在无1 PTG存在下通过野生型一21一噬菌体在大肠杆菌JM101里诱导产生了抗溶菌酶Ab一plll融合蛋白。利用针对重链和轻链间衔接序列的表位的单克隆Ab,以及N一末端序列的抗血清 鉴定了这种融合蛋白。此融合蛋白能与上述抗原结 合,组合到侵染性质粒噬菌体粒子里(能…     

酶和发酵工程

朴0130 T 4ONA连接酶〔英〕/未署名厂英 国Bi。一Rad Lab.的新闻稿一28.01.87〔译、自CBA,1987,(4),2550〕 英国Bio一Rad Laboratories公司生产 出了一种对具有粘性和钝末端的及NA有活性的纯化T注DN人连接酶。该酶是从之噬菌体NM989溶源的大肠杆菌(百.coIl’)的菌株中分离出来的。(郝慧斌)8801引新型耐热的支链淀粉酶及其生产方法〔专,英〕/Katkoein,D.M.…了US Pa-tent US、628028。P:lb.09.12.86.ApP-1.US 737309,filed 23.05.85仁译自CB-A,1987,(4),1553〕 在70℃和PH6的条件下没有底物存在时培养100分钟,Thermoanaerobi…     

基因库构建

922110在噬菌体表面装配组合抗体库:genelll位点〔英〕/Barbaslll,C.F.…/Proe.Natl.Aead.Sei.U.S。A一1991,55(18)一7975~7982仁译自DBA,1991,10(23),13354〕 建成phagemid pCombs系统,以使线型噬菌体M13(克隆于大肠杆菌XLI一Blue)表面的组合抗体Fab库呈单价。Fab片段与gene一111蛋白C-末端区融合。表面带有人抗一破伤风类毒素克隆10C Fab片段的噬菌体与非特异性噬菌体相比抗原覆盖表面积增大1000~100000倍。用此系统分拣预先鉴定的人组合抗一破伤风类毒素Fab基因库,以验证其可用性。此基因库已重新构建于pComb3中,保留了原有的…