痰样品检验预报早期肺癌

医生对肺癌往往诊断过迟 ,使病人丧失及时手术的机会 .现在研究者发现 ,引起 2个抗癌基因畸变的ＤＮＡ高甲基化可帮助早期诊断肺癌 .研究者在二十世纪 70年代 ,从 2 1个患有鳞状细胞癌的病人取得痰样品进行检查 ,这些病人中有些已诊断为肺癌 ,有些则尚未诊断为肺癌 .所有这些人都是吸烟者 ,大多数人在工作时暴露于镭射气 .所有这 2 1个病人证明是有ＤＮＡ高甲基化的异常情况 ,这种ＤＮＡ高甲基化影响编码ｐ1 6和ＭＧＭＴ这 2个抑癌蛋白的 1～ 2个基因 .研究者在 2 0 0 0年 1 1月 1日的ＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ上报道 :这 2 1个病人中有…     

新化合物PRIMA1和CDB_3帮助细胞抗癌

ｐ5 3基因的活动性是癌症的先兆 ,ｐ5 3基因所编码的蛋白质与细胞ＤＮＡ相结合 ,并启动链反应 ,该链反应通常导致细胞自杀 ,于是使癌停止生长 .在约一半癌症病例中 ,ｐ5 3基因发生了突变 ,结果使有缺陷的蛋白质不能启动该抗癌的链反应 .瑞典和俄罗斯的科学家最近刚鉴定了一些这样的化合物 ,在 2 0 0 2年 3月的ＮａｔｕｒｅＭｅｄｉｃｉｎｅ上 ,他们描述了一个合成的分子可恢复突变型ｐ5 3的抗癌功能 .研究者在实验室筛选了 2 0 0 0种化合物 ,以寻找可抑制含有突变型的ｐ5 3的癌细胞生长的化合物 .他们称其中最有作用的化合物为ＰＲＩ ＭＡ …     

文摘

010 0 51炭疽杆菌水肿因子基因的克隆与序列测定 [中 ]/袁斌… / /生物技术通讯 .- 2 0 0 0 ,11( 4 ) .- 2 4 9～ 2 51采用聚合酶链反应 (ＰＣＲ)从炭疽芽孢杆菌减毒株Ｙｂ1中扩增其水肿因子 (ＥＦ)的编码区基因 ,将其克隆至ｐＧＥＭ -Ｔ载体中 ,并分步测定其序列。序列测定表明 ,该基因长 2 30 1ｂｐ ,编码 2 67个氨基酸 ,与已报道的Ｓｔｅｒｎｅ标准株的ＥＦ基因完全一致。 (紫玉 )0 10 0 52人骨形态发生蛋白 - 7全长ｃＤＮＡ的克隆及序列测定 [中 ]/饶亚兰… / /生物技术通讯 .- 2 0 0 0 ,11( 4 ).- 2 52～ 2 53从人胎儿肾中提取总ＲＮＡ…     

P63和p73参与p53依赖的细胞凋亡过程

Ｐ5 3是一个重要的抑癌基因 ,其转录翻译出的蛋白分子 ｐ5 3通过与凋亡相关靶基因 ｐ2 1、ｍｄｍ2、ｂａｘ、ＰＥＲＰ作用而使有潜在癌变倾向的细胞凋亡 ,一些ＤＮＡ损伤诱发的细胞凋亡过程也依赖于 ｐ5 3分子的启动。Ｐ6 3和 ｐ73属于 ｐ5 3基因家族成员 ,其蛋白分子 ｐ6 3和 ｐ73与ｐ5 3有结构上的相似性 ,且功能亦与细胞凋亡相关 ,但ｐ6 3和 ｐ73在凋亡中所起作用的详细机制尚且不清。麻省理工学院和哈佛大学学者ＥｌｓａＲ .Ｆｌｏｒｅｓ和ＫｅｎｎｅｔｈＹ .Ｔｓａｉ等用基因敲除法 ,先后通过 4种ＤＮＡ损伤诱导凋亡的实验 ,同时在体外…     

文摘

00 0 0 90人ｒｅｔｉｃｕｌｏｎ 4ｃ(ＲＴＮ4ｃ)的ｃＤＮＡ克隆与组织表达谱分析 [中 ]/毕安定…∥科学通报 .- 2 0 0 0 ,4 5( 9) .-960～ 967ＲＴＮｓ(ｒｅｔｉｃｕｌｏｎｓ)是一个与神经内分泌细胞生长、分化有关联的基因家族 ,迄今已发现了ＲＴＮ1,ＲＴＮ2和ＲＴＮ3等 3个成员 ,其中ＲＴＮ1和ＲＴＮ 2已被证明分别具有 3种不同长度的转录本。以一个与小细胞肺癌发病机制有关的ＲＴＮ1ｃｃＤＮＡ为信息探针 ,通过电子杂交辅助的新基因克隆技术 ,从人脑ｃＤＮＡ文库中分离到一个长 1677ｂｐ的ｃＤＮＡ ,它含有一个编码 199个氨基酸残基的完…     

黄瓜线粒体DNA类质粒pC1的性质和核酸序列研究

津研四号黄瓜线粒体中除主环ＤＮＡ外,还有４种ＤＮＡ类质粒：ｐＣ１、ｐＣ２、ｐＣ３、ｐＣ４。将环形类质粒ｐＣ１ｌｐｋ ｇｃ ｐＵＣ１９的ＥｃｏＲⅠ位点上,克隆至Ｅ．ｃｏｌｉ ＪＭ１０９中。以克隆的ｐＣ１为探针,进行同源性检测,ｐＣ１与津研四号黄瓜的核基因组、叶绿体基因组、线粒体基因组和线粒体中其他类质粒不同源。对ｐＣ１进行序列测定和分析,ｐＣ１长度２ ８８９ｂｐ,含有多个正向和反向重复序列,有３个８     

P53家族新成员——P73基因

Ｐ5 3基因的突变 ,失活及缺失与 5 0 %的人类肿瘤发生有关 .最近 ,又发现一新“Ｐ5 3样”抑癌基因Ｐ73,定位于1ｐ36 2 1ｐ36 3,由 13个外显子及 12个内含子组成 ,该基因编码的蛋白质在结构和功能上均与 ｐ5 3蛋白相似 .Ｐ73基因转录剪切可产生多种同种型 ｐ73蛋白α ,β,γ及δ .ｐ73α,β低水平表达具广泛性 ;在外周血淋巴细胞、原始角质细胞及不同肿瘤细胞株和白血病中可检测到 ｐ73γ及δ .正常人类组织中 ｐ73低表达 ,很多肿瘤细胞却高表达 ｐ73,研究表明对于癌变细胞最普遍的是 ｐ73的过表达而不是丢失 :ｐ73蛋白过表达发生在胸腺癌…     

细胞衰老主导基因p16的作用机理及其负调控

细胞衰老是生物衰老的基本单位 ,老年病的发病基础 .我们在国际上初步阐明了细胞衰老主导基因ｐ16影响衰老进程的机制 ,以及它在衰老过程中高表达的原因 .两篇相关论文 ,先后发表于 2 0 0 1年国际主流学术刊物ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ .细胞衰老过程中ｐ16基因表达比年轻时高 10～ 2 0倍 ,在国际上纷纷认为它是细胞衰老主导基因 .我们将其重组载体导入人成纤维细胞 ,结果细胞衰老加快 ;我们又将其反义重组载体导入细胞 ,抑制ｐ16表达 .结果细胞增殖能力增强与衰老表征出现减慢 ,ＤＮＡ损伤修复能力增强 (我室首先报道 )与端粒缩短减慢 (我室首先…     

一个改进的PCR过程中聚合酶复制精确性测定系统的建立

在大肠杆菌中建立了一套用于测定ＤＮＡ聚合酶在ＰＣＲ过程中复制精确性的系统,并测定了耐热ＦＤＤＮＡ聚合酶在ＰＣＲ扩增过程中的复制精确性。这一系统主要包括以质粒ｐＵＣ１１８和ｐＵＣ１１９为出发质粒所构建的一套共６个突变质粒,分别为ｐＦＤＦＰ１１８和ｐＦＤＦＰ１１９（＋１移码突变）、ｐＦＤＦＭ１１８和ｐＦＤＦＭ１１９（－１移码突变）、ｐＦＤＦＵ１１８和ｐＦＤＦＵ１１９（碱基置换突变）。这些突变质粒均不能进行ｌａｃＺ－α互补反应,因此在含有Ｘ－Ｇａｌ和ＩＰＴＧ的培养基上菌落呈白色。同时还构建了ＰＣＲ产物克隆载体ｐＦＤＦＬ１１８和ｐＦＤＦＬ１１９。以上述突变质粒为模板进行ＰＣＲ反应,取反应产物和ｐＦＤＦＬ１１８或ｐＦＤＦＬ１１９连接后转化到大肠杆菌中。若在ＰＣＲ过程中发生回复突变,则转化子在含有Ｘ－Ｇａｌ和ＩＰＴＧ的培养基上呈蓝色。由转化子中蓝白菌落个数即可计算出ＤＮＡ聚合酶的复制差错率。用这一系统测得ＦＤＤＮＡ耐热聚合酶的复制差错率为１０－５～１０－６。     

编码人疱疹病毒－6型核糖核苷酸还原酶和P41蛋白基因的克隆和序列测定

本文报道人疱疹病豢－６型（ＨＨＶ－６）ｐＳＴＹ２８ＤＮＡ片段的序列测定。应用分子克隆、缺损突变体（Ｄｃｌｅｔｉｏｎｍｕｔａｎｔ）制备和序列测定等技术,完成了３．９ｋｂＨＨＶ－６ｐＳＴＹ２８ＤＮＡ片段的全序列测定。经ＤＮＡＳＩＳ核酸蛋白软件分析,该片段含有两个开读框架（ＯＲＦ）核糖核苷酸还原酶（ＲＩＲ）ＯＲＦ有２４１４个核苷酸,可编码８０５个氨基酸;Ｐ４１蛋白由１１００个核苷酸组成。与其他疱疹病毒作氨基酸同源性比较,ＨＨＶ－６ＲｉＲ与人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）有高度同源性,最适记分（Ｏｐｔｉｍｉｚｅｄｓｃｏｒｅ）达４５９。实验结果支持Ｅｓｆｔａｔｈｉｏｕ提出的论点,ＨＨＶ－６属于β－疱疹病毒。     

泌尿系感染的尿液G-杆菌分类及抗生素耐药性分析

我们对本院 2 0 0 1年 4月～ 2 0 0 2年 4月间 4 3例G 杆菌泌尿系感染进行调查 ,报告如下。1　材料与方法1 1　菌株来源　 2 0 0 1年 4月～ 2 0 0 2年 4月间选样符合泌尿系感染诊断标准的病人 ,取中段尿分离出 4 3例G 杆菌。1 2　方法　采取中段尿 ,利用复星公司FOUTUNE .IMS细菌鉴定药敏分析系统。2　结果2 1　 14 3例尿标本中尿培养阳性率及各种细菌的比例　 14 3例尿标本中尿培养阳性为 6 4例占 4 4 8% ,其中G 杆菌 4 3例占 6 7 2 % ,葡萄球菌次之 ,14例占 2 1 9% ,霉菌 6例占9 4 % ,其他 1例占 1 5 %。2 2　G 杆菌分类情况及所…     

人结核分枝杆菌特异性核酸探针制备及结核病PCR检测技术的初步临…

采用人结核分枝杆菌染色体ＤＮＡ为模板,选择位于插入片段ＩＳ６１１０中８８４￣８６５和５６８￣５８８碱基对处的两个片段为引物,扩增出３１７ｂｐ的特异性片段,将共克隆进ｐＵＣ１９载体,酶切酶谱分析和ＤＮＡ序列测定证实为目的片段。     

应用cDNA文库快速构建法克隆高粱肌动蛋白基因

取生长一周的高粱嫩叶为材料,按照ｃＤＮＡ库快速构建法,用λｇｔ１０为载体成功地获得了含有２×１０＾０６人重组噬菌体的ｃＤＮＡ库。以水稻ＲＡｃｌ ｃＤＮＡ为探针,经噬菌体原位杂交筛选出两个阳性克隆片段,并对其中一个进行了Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交鉴定。然后将重组体中含有的ｃＤＮＡ片段亚克隆至ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ ＳＫ－载体上测序。     

人淀粉样前体蛋白基因C端在SH-SY5Y细胞系中的稳定表达及其对细胞生长发育的影响

淀粉样前体蛋白（ＡＰＰ）是阿尔茨海默氏病（ＡＤ）病因学中重要的分子,但其正常的生理功能尚不清楚．为了研究细胞内过量产生其各种片段对细胞生理机能的影响．将人ＡＰＰ６９５ｃＤＮＡ中编码Ｃ端１０５个氨基酸残基的ＤＮＡ片段重组到真核表达载体ｐＤＯＲｎｅｏ中形成重组质粒ｐＤＯＲ－ｎｅｏ－ＣＴ．然后用脂质体将其转染到人神经母细胞瘤细胞ＳＨ－ＳＹ５Ｙ中．用８００μｇ／ｍｌＧ４１８筛选获得了在ｍＲＮＡ和蛋白质水平均表达相应片段的稳定细胞系．ＭＴＴ和ＬＤＨ分析表明,ＡＰＰＣ端的表达未能对ＳＨ－ＳＹ５Ｙ细胞产生明显的毒性作用．     

克隆母牛肾成功

就在美国参议院将投票表决禁止克隆人器官的实验的前夕 ,科学家已成功地用克隆产生的小型肾及其他组织移植到母牛体内 .该实验提供了很有说服力的指征 ,即颇有争议的称为治疗性克隆的移植策略 ,能够产生基因相配的细胞 ,而人的免疫系统并不会将他当作异物排斥掉 .研究者将他们的新结果于 2 0 0 2年 7月的ＮａｔｕｒｅＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ上作了描述 .想象一下将治疗性克隆用于人 ,即将一个人需要移植的ＤＮＡ取出 ,然后插入到一个妇女卵中去 ,该卵中原有的染色体已经过剥离 .然后 ,科学家启动卵开始分裂 ,从而收获到胚胎干细胞 .从理…     

鸟枪法测序获得果蝇基因组测序成功

美国科学家宣布他们已完成了果蝇Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ基因组的破译工作。他们破译了占编码区 97%的 12 0 0 0 00 0 0个碱基。该基因组附加区的 6 0 0 0 0 0 0 0个碱基则因尚未具备测定技术而未破译 ,他们说其中几乎不含有基因。他们所用的是一种有争议的测序法 ,即鸟枪测序法 ,该法遭到许多科学家的批评 ,但现在正是这个技术获得了成功 ,其结果甚至超越了最乐观的预见。鸟枪法测序就好象做拼板游戏。研究者将果蝇的基因组随机地切成小片 ,然后测定每一个ＤＮＡ小片段的核苷酸序列 ,他们称这些小片段是“测序工厂”…     

抑制食欲的蛋白激素

科学家猜想 ,身体以多条途径向脑传达过饱信息 .但是有一个研究组现在报道 2 0多年前发现的 1个蛋白激素ＰＹＹ3 36可能是过饱信号传送到脑的基本物质 .禁食的人在餐前 2ｈ接受ＰＹＹ3 36注射后 ,吃得比未注射的人少 1 3.年轻的小鼠接受该激素每天 2次注射 ,1星期后食欲便受抑制 ,而且体重比未接受该激素注射的小鼠大大降低 .研究者将该发现及其它有关发现在 2 0 0 2年 8月 8日的Ｎａｔｕｒｅ上作了报道 .他们提示 ,对ＰＹＹ3 36研究将导致出台治疗肥胖症和饮食紊乱的新方法 ,因为该激素是有效的食欲抑制剂 .在许多情况下 ,ＰＹＹ3 36似乎是…     

新的纳米检测器检测DNA

加州大学的研究人员在 2 0 0 1年 3月份的ＮａｔｕｒｅＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ上报道他们研制成功一种高度灵敏的纳米孔检测器 ,可用来鉴定出与某些疾病相关的ＤＮＡ的微小变异 ,并可以用于无前例的快速ＤＮＡ测序。他们制造有一单孔的小膜 ,该孔恰好能使一个ＤＮＡ分子滑入。他们合成了许多不同的发夹ＤＮＡ分子 ,即单链的ＤＮＡ经自身回折形成双链 ,在一端产生了一个小环。沿着每个发夹ＤＮＡ的缠结主干 ,碱基成对排列 ,而顶端的小环上有四个不配对的碱基。研究人员将一个小膜插入一个装有盐溶液的容器中间 ,然后将已知碱基序列的发夹…     

p53基因对人胃癌细胞系恶性生长的影响

以ｐ５３ｃＤＮＡ为探针,用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹法对人胃癌细胞系ＢＧＣ８２３进行了检测,发现该细胞中ｐ５３基因存在异常,将可在真核细胞表达的重组野生型Ｐ５３质粒ｐＣ５３－ＳＮ３和突变型ｐ５３质粒ｐＣ５３－ＳＣＸ３,用指质体介导法,分别导入ＢＣＧ８２３细胞,获得了较长时间受Ｇ４１８的多个阳性克隆。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ抑迹法证实阳性克隆细胞中有外源性ｐ５３基因存在。     

尿β2-MG在接触汞作业者肾脏早期损害评价中的价值

目的:探讨尿β2-MG在接触汞作业者肾脏早期损害评价中的价值。方法:利用调查法选取本地区有接触汞作业工序的企业员工60例作为班次研究的观察组,同时选取同一时期60例非接汞作业工人作为本次研究的对照组,分别检测两组患者尿液标本的β2-MG、Cr及汞含量。结果:经过1年的分析、观察,观察者患者的尿肌酐、尿汞与对照组没有明显的差异(p0.05),无统计学意义;但是观察组患者β2-MG与对照组患者有显著的差异(p0.05),差异具有统计学意义。接触汞作业1-3年后,β2-MG值达(5.81±1.14)μmol/L,尿汞值达(1.29±0.62)μg/mmol,患者的血Cr没有明显的升高;接触汞作业3年以上的人员β2-MG、Cr及汞含量明显升高,与对照组相比具有显著的差异性(p0.05),差异具有统计学意义。结论:尿β2-MG在接触汞作业者肾脏早期损害评价中具有重要的诊断价值,可以作为肾脏早期损耗评价指标,预防患者出现严重的肾脏损伤。