磷脂与胆固醇混合单分子层(LB膜)结构性质的研究

气液界面上人工铺展的脂类单分子层(LB膜)作为生物膜研究的一种模型正越来越引起人们的重视.我们利用LB膜技术可以严格地控制膜组份及压力等参数的特点,并与扫描电镜形貌观察相结合,对DMPE/Cholesterol二元混合脂类单分子层的结构性质(特别是相行为)进行了研究.各种不同比例混合的DMPE/Cholesterol单分子层的压力(π)—面积(A)等温曲线由实验获得.通过对所获得的π—A曲线族的解析函数:1)压缩角(?)—分子平均密度(ρ)曲线,2)分子平均面积(A)—组分(X)曲线的分析,得到了DMPE/Cholesterol的压力—组分相图.由相图中可分析出二维混合脂类单分子层的液—液二级相变(伴随“气态”分子取向的有序化),液→固一级相变(伴随gauche—trans的转变),及固→固二级相变(伴随gel态分子取向的重排).相图分析的结果已为扫描电镜的观察所证实.     

脱血红素细胞色素c插入磷脂单分子层能力的研究

介绍了一种改进的、用于研究膜脂-蛋白相互作用的气-液界面单分子层实验模型及实验装置,并在该实验装置上研究了来自马心和金枪鱼心的线粒体前体蛋白脱血红素细胞色素c与大豆磷脂单分子层的相互作用,实验结果表明这两种前体蛋白对大豆磷脂单分子层都具有较强的亲和性和插膜能力,其临界插膜压力分别为43mN/m、45mN/m.     

山莨菪碱促进心磷脂脂质体膜融合

前文曾报道,山莨菪碱能诱发心磷脂脂质体形成六角形Ⅱ结构,本文采用荧光共振能量转移技术研究了山莨菪碱对心磷脂脂体融合的影响,实验结果表明,山莨菪碱能诱发心磷脂脂质体融合并能促进由C_2~(2+)诱发的融合速率.     

糖和膜脂的相互作用：脂质体稳定性的研究

糖对脂有保护作用。在有糖存在的条件下,可使载药脂质体先处于干燥状态,当其再水化时,脂质体内含物不漏出,并完好地保持脂双层结构。本文详细地阐明了糖对脂保护作用的分子机理：阻止膜融合,降低膜脂的主相变温度,抑制侧向相分离,抑制双层→非双层的相变等,并阐述了糖对膜保护作用在实际应用中的前景。     

磷脂组成对脱脂蛋白模型多肽与脂质体相互作用的影响

根据脱脂蛋白的脂结合序列合成了两个两亲性多肽Ａｍｐ１和Ａｍｐ２,在Ａｍｐ２在缬氨酸残基取代了Ａｍｐ１第４位的赖氨酸残基。用内源荧光谱发射峰的蓝移,包埋的钙氯黄素在脂质体中的渗漏,丙烯酰胺对多肽色氨酸残基的淬灭等手段比较了Ａｍｐ１与Ａｍｐ２与具有不同磷脂组成的脂质体的相互作用,并研究了温度的影响。     

DMPC单分子层膜及细胞色素C氧化酶重组脂质体表面的扫描隧道显微镜观察

本文报导了扫描隧道显微镜对固相磷脂单分子层膜以及重组了细胞色素C氧化酶后的脂质体表面结构的观察.对DMPC单分子层著,得到了有关磷脂头部形态,大小及排态状况等结构信息,达到分子水平分辨;对重组酶后的脂质体表面,也得到了氧化酶分子在膜上的结构信息.     

Ca~（2＋）与含β－桐酸磷脂脂质体的相互作用

通过测定含β－桐酸（β－ＥＳＡ）的双棕榈酰磷脂酰胆碱（ＤＰＰＣ）脂质体在加入Ｃａ（２＋）后浊度,粒度及内包荧光物释放的变化,研究了Ｃａ（２＋）与ＤＰＰＣ／β－ＥＳＡ脂质体的相互作用,结果表明,ＤＰＰＣ／β－ＥＳＡ脂质体是一类对外加Ｃａ（２＋）敏感的脂质体,Ｃａ（２＋）的作用首先是引起脂质体间的集聚然后使脂质体融合;此时加速脂质体内包荧光物的释放。     

免疫脂质体与人胃癌细胞的相互作用

我们把抗人胃癌细胞M85的单克隆抗体3Hll插入脂质体的脂双层做成免疫脂质体,研究了这些免疫脂质体与M85细胞的相互作用.结果表明,M85细胞对免疫脂质体的吸收与温育时间、温度密切相关.在37℃温育10小时,细胞吸收的免疫脂质体的量是在4℃时的7倍左右.37℃温育5小时,靶向脂质体结合在M85靶细胞上的量是非靶向脂质体的2倍多;与非靶细胞—人皮肤成纤维细胞Fb32的结合量只有与M85靶细胞结合量的1/6.游离单抗3Hll能够抑制靶向脂质体与靶细胞的结合,而专一性与3Hll抗体不同的单抗3G9则不能.NH_4Cl和NaN_3等内吞作用抑制剂使靶细胞吸收免疫脂质体的量分别减少58%和79%.与此同时,NH_4CI还能抑制包入脂质体的ADM,而不能抑制游离ADM的细胞毒作用.因此我们的结论是,3Hll免疫脂质体能够与靶细胞专一地结合,并把所荷载的物质主要经内吞作用输送到细胞内,杀伤靶细胞.用荧光显微镜对与荧光免疫脂质体温育的M85细胞进行的形态观察也支持上述结论.     

SpA蛋白与磷脂单分子膜相互作用的研究

利用石英表面沉积ＬＢ膜的紫外吸收特性与ＣＤ谱特性研究了磷脂单分子膜与ＳｐＡ的相互作用,实验结果表明,单分子膜的疏密状态,蛋白质与膜表面的电荷特性及亚相Ｃａ＾２＋离子浓度均对该蛋白质与磷脂的相互作用有显著的影响,蛋白质在磷膜中的镶嵌与吸附作用为生物膜的重组提供了新的途径。     

牛胰多肽(Bovine Pancreatic Polypeptide)和DMPC脂质体相互作用的荧光研究

本文用多种荧光探剂标记脂质体,通过荧光光谱、荧光强度以及荧光偏振的变化,阐明牛胰多肽与磷脂之间存在较强的结合,这种结合主要是静电相互作用与疏水相互作用.牛胰多肽与磷脂结合后,使膜结构稳定,这可能是牛胰多肽具有细胞保护作用的原因之一.     

山莨菪碱与酸性磷脂脂质体的亲水与疏水作用——激光拉曼光谱及差光谱的研究

本文从分子水平上研究了山茛菪碱与酸性磷脂脂质体的亲水与疏水相互作用.通过测定在不同pH条件下,酸性磷脂头部基因PO_3~(2-)的特征拉曼光谱振模的变化,证明药物与酸性磷脂头部的负电基团有较强的静电相互作用,并且这种作用与药物引起脂肪酸链构象改变有关.采用拉曼差光谱的方法,进一步研究了药物的苯环与酸性磷脂的疏水相互作用.观察到反映苯环两种不同振动的特征振模在药物同磷脂作用过程中发生的不同变化,从而获得较直接的证据说明药物的苯环插入脂双层.     

CALCIUM-DEPENDENT BINDING OF BRAIN GLUTAMATE DECARBOXYLASE TO PHOSPHOLIPID VESICLES

The binding of glutamate decarboxylase (GAD), to phospholipid vesicles (liposomes) in the absence and in the presence of several Ca²⁺ and Mg²⁺ concentrations was studied. Phosphatidylcho-line-phosphatidylserine (4:1) liposomes are capable of binding GAD in a Ca²⁺-dependent manner. The per cent of GAD bound increased from 5 to 65°., in a sigmoid shape with Ca²⁺ concentrations in the 0.2-4 mm range. Mg²⁺ also induces GAD binding but is less effective than Ca²⁺ The Ca²⁺ -dependent binding of GAD is not the result of unspecific association of protein, since Ca²⁺ did not promote any binding of choline acetyltransferase or lactate dehydrogenase. Furthermore, the relative specific activity (^o_o enzyme activity/% protein) of GAD associated to liposomes increases 4-fold from 0 to 2 mm Ca²⁺. The per cent of GAD bound attains a plateau at a ratio phospholipid/protein of about 1.5. and decreases when the pH increases from 6.5 or 6.8 to 7 or 7.25. Na⁺ or K⁺ at a 100mm concentration also induce binding of GAD to liposomes. Phosphatidylcholine liposomes (without phosphatidylserine) practically did not bind GAD at any Ca²⁺ concentration. The Ca²⁺-dependent association of GAD to phosphatidylcholine-phosphatidylserine liposomes is very similar to that previously reported using brain membranes, and it correlates also well with the reported Ca²⁺-dependent aggregation of phosphatidylserine molecules in phospholipid membranes of similar composition. It is concluded that phosphatidylserine is probably involved in the Ca²⁺-dependent binding of GAD to brain membranes. Phospholipid vesicles seem to be a useful experimental model for studying the mechanisms of this GAD association to membranes and the possible physiological implications of the GAD-Ca²⁺-membrane interaction regarding the release of newly synthesized GABA from nerve endings.     

(Na~++K~+)—ATP酶与磷脂膜的相互作用

本文研究了不同磷脂对兔肾外髓质(Na~++K~+)-ATP酶活性的影响、结果表明,DOPC、PG重组活性最高,用DMPC重组导致酶失活,酸性磷脂有利于维持该酶活性.DSC及自旋标记ESR实验结果示出(Na~++K~+)-ATP酶有选择地与酸性磷脂相互作用.     

菌紫质、磷脂与水的相互作用:红外光谱与吸附重量研究

应用紫膜等温吸附及红外差光谱技术研究细菌紫膜中水与蛋白、磷脂的相互作用.观察到酰胺Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ带在R<0.05及0.08相似文献   

牛胰多肽与CL／PC脂质体作用后二级结构的变化

用傅立叶变换红外光谱研究了ＢＰＰ与膜作用后其二级结构的变化,通过对红外光谱中酰胺Ｉ谱带进行解卷积、微分及曲线拟合等处理,结果表明,ＢＰＰ与脂膜作用后,其二级结构中α－螺旋成分增多,无规卷曲成分减少。     

小鼠胚胎与子宫单层上皮细胞共培养的研究

本文报道建立了小鼠胚胎与小鼠子宫单层上皮细胞体外共培养系统。结果揭示;小鼠胚胎与 子宫单层上皮细胞共培养可以促进胚胎的发育、粘附和扩展;如果培养液中加入 ３、６７ × １０－６ｍｏｌ／Ｌ １７β－雌二醇,可以显著提高胚胎在共培养系统中的发育率、粘附率和扩展率。以上结果表明：小鼠 胚胎与小鼠子宫单层上皮细胞共培养系统是研究胚泡着床机理较理想的研究手段。     

INTERACTION OF OLIGONUCLEOTIDES WITH CELLULAR PROTEINS

Oligonucleotides (ODNs) conjugated to 4-[(N-2-chloroethyl-N-methyl) amino] benzylamine were used to investigate ODN-binding proteins in cells of different origin. The data obtained demonstrate that 68, 46, 38 and 28 kDa ODN-binding proteins are universal for tested cell lines.