气相色谱法测定紫杉醇注射液中乙醇的含量

目的:建立紫杉醇注射液中乙醇含量的测试方法。方法:采用氢火焰离子化检测器(FID)、以水为溶剂,采用DB-WAX聚乙二醇毛细管柱(30m×0.25mm×0.25um),载气为高纯氦,分流比79:1,柱温:80℃,检测器温度220℃,气化室温度220℃。结果:乙醇在1.03ug/ml-20.58ug/ml的范围内呈良好的线性关系,(r=0.9997),回收率为99.50%(RSD=0.56%),最低检测限为1.0ug/ml。结论:该方法简便、快速,满足于质量控制要求。     

气相色谱法测定抗毒素中的间甲酚含量

采用气相色谱法测定抗毒素中的间甲酚含量。样品用苯甲醇作内标,经高氯酸沉淀蛋白、氯仿抽提后,通过HP-INNO-WAX柱,以氢火焰检测器测定间甲酚含量。内标峰与样品峰的分离度大于1.5,平均回收率及变异系数分别为100.067%和1.93%,测定线性范围0.0202~1.7588mg/ml,最小检测限为0.01272mg/ml,该方法准确快速,比化学方法好。     

气相色谱法测定啤酒中的游离脂肪酸

气相色谱法测定啤酒中辛酸到二十二碳酸共１１种游离脂肪酸,采用多级溶剂萃取及薄层色谱纯化技术进行样品制备,并采充氮措施抑制脂肪酸的氧化产生,此方法有较好的重复性和回收率。     

气相色谱法测定生物制品中苯酚含量

本文采用气相色谱法测定了几种生物制品中苯酚含量。样品无需进一步处理,加入内标液后直接上柱测定,色谱峰形良好,线性范围宽,平均回收率和变异系数分别为１０１．８％ 和１．０８５％ ,最小检测限为１０ μｇ／ｍ ｌ,本法操作简单,样品用量少,可作为测定生物制品中苯酚含量的一种常规方法。     

气相色谱法测定发酵液中胆固醇的含量

气相色谱法测定了发酵液中胆固醇的含量。采用Rtx-1（100%二甲基聚硅氧烷）毛细管色谱柱、FID检测器进行分析测定。当胆固醇浓度在0～200μg/mL范围内与色谱峰面积呈良好线性关系（r=0.9981）。方法的平均回收率为99.38%,相对标准偏差为0.75%（n=8）,最低检出限可达到0.816μg/mL。气相色谱法作为发酵液中胆固醇含量的快速测定方法,具有试剂用量少、操作简单、结果准确等特点。     

气相色谱法测定CO2释放速率

采用红外分析仪测定CO_2时,常发生水分干扰,且测定时间长。本文采用气相色谱法测定CO_2,具有快速、准确、灵敏度高和操作简单等特点。     

气相色谱法测定结核菌耐药性的研究

本文应用气相色谱法对结核菌的耐药性进行了研究。在与传统法对比试验中,两法符合率为86.4%。气相色谱法可在6天报告比较准确的结果,比传统试管法提前2周,提示此法有较大的实用价值。     

气相色谱法测定猪结肠内容物中短链脂肪酸含量

目的:为了准确测定猪结肠内容物中蛋白质代谢物短链脂肪酸含量以研究猪结肠蛋白质代谢情况,本文拟利用气相色谱建立一种更准确快速分析猪结肠内容物中短链脂肪酸含量的方法。方法:实验选用体重相近的21日龄断奶的杜长大三元杂交仔猪,单栏饲养。试猪麻醉后放血致死,迅速剖开腹腔,收集结肠末端内容物,保存于-80℃。收集到的结肠末端内容物用偏磷酸预处理,利用毛细管气相色谱法程序升温测定猪结肠内容物中短链脂肪酸含量。结果:结肠内容物经偏磷酸预处理3 h后,在程序升温、0.8 m L/min载气流量的气相色谱条件下,内容物中乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸和戊酸得到有效分离,其回收率为93%~113%,相对标准偏差为0.46%~0.70%,变异系数小于1%。结论:此方法具有操作简便、快速、准确的优点,是测定动物肠道内容物中短链脂肪酸较为理想的方法。     

气相色谱法测定银杏内酯衍生物中有机溶剂残留量

建立了气相色谱法测定银杏内酯衍生物中甲醇、丙酮、乙腈、乙酸乙酯等有机溶剂残留量的方法.以苯为内标,样品经溶解直接进样测定,色谱柱为CP-SIL 24CB 毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm).有机溶剂添加回收率在96.9%～99.6%之间,有机溶剂的最小检出限在0.29～0.48 μg /mL之间.该方法快速、准确、操作简便,能满足银杏内酯酯衍生物中甲醇等有机溶剂残留的定量检测.     

人和牛血清白蛋白的极谱测定

人或牛血清白蛋白溶液调至ｐＨ１０并在４℃左右放置３０ｈ,诱导出重复性良好的极谱峰。然后把试样溶液调至适当ｐＨ并记录极谱电流。在浓度低于１．０×１０－５ｍｏｌ／Ｌ时,峰电流对浓度作图是直线,试样浓度可从图上直接读出。对影响白蛋白测定的诸因素作了详细研究和讨论。结果对富含硫的蛋白质的极谱研究有参考价值。     

重组人血清白蛋白在汉逊酵母中的表达与纯化

优化人血清白蛋白（Human Serum Albumin, HSA）基因的密码子,合成基因连接到用于汉逊酵母（Hansenula polymorpha）表达的表达载体上,构建成重组人血清白蛋白（recombinant Human Serum Albumin, rHSA）表达质粒,转化汉逊酵母细胞,筛选得到的rHSA高表达细胞株HP-rHSA－C,30L发酵罐批式发酵表达量可达1.033g/L,经Streamline SP,Phenyl Bio-Sep 6FF,DEAE Sepharose层析分离获得纯化蛋白,除菌过滤后稀释,进行小鼠免疫原性分析,结果与人血清中提取的人白蛋白具有相同的抗原、抗体反应特性。     

人血清白蛋白纯化技术研究进展

本文综述了国内外关于血浆人血清白蛋白（pHSA）和基因重组人血清白蛋白（rHSA）分离纯化的进展和发展趋势。以冷乙醇沉淀为主的pHSA分离方法仍是目前多数工业采用的工艺,但近年来发展的离子交换色谱、凝胶过滤色谱、亲和色谱等多种色谱分离技术具有自动化程度高、生产周期短、更符合GMP等特点,正在逐步取代传统的冷乙醇沉淀法。当前用基因工程技术表达的人血清白蛋白对分离纯化提出了新的挑战。为获得高纯度、安全、稳定的产品,各种色谱分离技术得到更多的应用,其中扩张床离子交换色谱可以省去离心、过滤等传统固液分离操作。尽管rHSA的纯化技术已有一定的发展,但纯化过程仍需进一步优化以提高产品纯度及收率。     

Characterization of Sulfhydryl Heterogeneity in Human Serum Albumin and Recombinant Human Serum Albumin for Clinical Use

Since human serum albumin has one sulfhydryl group and 17 disulfides, reactive sulfhydryl groups give rise to heterogeneity. The present paper presents a comparison of sulfhydryl heterogeneity in human serum albumin and recombinant human serum albumin for clinical use. Low molecular weight sulfhydryl compounds were identified from both sources. The recombinant albumin had a much higher sulfhydryl content than plasma serum albumin.     

人血清白蛋白基因的打靶研究

为获得整合有人血清白蛋白(HSA)基因的猪胎儿成纤维细胞克隆,从猪基因组文库中杂交筛选得到猪血清白蛋白(PSA)基因全序列35kb并克隆了人血清白蛋白cDNA序列,扩增猪血清白蛋白基因5′调控序列7.2kb片段及第一内含子至第四内含子2.8kb的片段;构建了含有neo及tk正负筛选标记基因的人血清白蛋白基因打靶载体,并验证了neo基因的有效性。将线性化的打靶载体通过电击转染的方法整合到猪胎儿成纤维细胞基因组中,利用G418及GANC进行细胞克隆的抗药性筛选,PCR及Southern blot鉴定抗药性细胞克隆,最终获得3个发生同源重组的细胞克隆。这为下一步进行体细胞核移植制备生产人血清白蛋白转基因猪奠定了基础。     

重组人血清白蛋白表达研究进展

本文综述了重组人血清白蛋白在细菌,酵母,植物和动物等表达系统中表达的研究进展。用酵母表达系统,尤其是毕赤酵母,表达的重组白蛋白产量高且提取工艺简单,是其产业化最具有前途的表达系统。同时在转基因动物、植物中培养表达也具有诱人的前景。     

引起重组白蛋白电泳检测假性结果的研究

目的:建立SDS-PAGE结合pH值变化对重组人血白蛋白电泳检测假性结果的分析方法。方法:采用还原SDS-PAGE(12.5%)和Native-PAGE(8%～25%),将包含重组人血白蛋白的发酵上清液的pH值分别调为4.0、5.0、6.0、6.5、7.5、8.0、9.0和10.0进行电泳分析。结果:在不同的pH值条件下,重组人血白蛋白会出现不同程度的降解。结论:包含重组人血白蛋白的发酵液中存在不同种类的蛋白酶,导致重组人血白蛋白的假性降解。     

疏水层析结合冷乙醇沉淀纯化人血清白蛋白

将层析技术与冷乙醇工艺相结合用于人血清白蛋白的纯化 ,对各过程所采用的层析介质及层析条件进行了探索 ,得到了一条从人血浆中制备血清白蛋白的新路线 :将一步冷乙醇沉淀后的血浆上清进行脱盐除乙醇 ,用阳离子交换介质CMSepharoseFF以透过式层析的模式吸附非白蛋白组分 ,最后选用ButylSepharoseFF一步疏水层析后所得样品经SDS-PAGE银染显示一条单带 ,分析其纯度大于 99% ,计算工艺收率为 81.2%。与传统冷乙醇工艺相比较 ,该工艺最终样品纯度更高 ,且层析可以在常温下操作 ,易实现自动化控制.     

重组人血白蛋白临床研究进展

人血白蛋白是人血浆中最丰富的蛋白质,具有许多重要的生理特性,用途广泛。目前主要以毕赤酵母作为宿主表达的重组人血白蛋白,开发了重组人血白蛋白的纯化技术,同时对重组人血白蛋白结构进行了分析,结果表明与人血浆白蛋白基本一致。临床研究结果表明重组人血白蛋白与人血浆白蛋白有着几乎相同的疗效和安全性。综述了重组人血白蛋白的性质结构分析及酵母表达系统;重点介绍了重组人血白蛋白在临床方面研究进展。     

重组人血清白蛋白在Pichia pastoris中分泌表达影响因素的研究

为获得高产稳产重组人血清白蛋白的Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ细胞株用于高密度发酵,构建了多种分泌表达载体,在Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ中作表达,研究表达载体构建等因素对表达量的影响。发现采用酿酒酵母α性成熟因子前导肽比人血清白蛋白天然前导肽作为分泌信号肽的表达量要高１０％左右。而载体整合方式、整合拷贝数、５’非翻译区的改造和甲醇利用表型等对表达量无规律性影响。筛选到的高表达株经高密度发酵,细