丙肝病毒抗原在肝细胞癌组织中的定位——共聚焦激光扫描显微镜观察

应用共聚焦激光扫描显微镜（ＣｏｎｆｏｃａｌＬａｓｅｒＳｃａｎｎｉｎｇＭｉｃｒｏｓｃｏｐｅ,ＣＬＳＭ）观察免疫荧光标记的丙型肝炎病毒核心抗原（ＨＣＶＣＰ－１０）在肝癌组织中的表达,与免疫组化普通光镜观察结果比较,显示ＨＣＶＣＰ－１０抗原在肝细胞癌和癌周肝组织的定位特点,介绍ＣＬＳＭ在病理学中的应用。研究结果表明：ＨＣＶＣＰ－１０抗原大部分存在于胞浆,少部分存在于胞核,ＨＣＶ的表达有核内过程;ＨＣＶＣＰ－１０抗原在癌周肝组织的表达明显强于癌组织;ＣＬＳＭ比普通光镜在确定抗原定位上有更大的优越性     

胞质微丝改变与鼻咽癌细胞增殖和凋亡的关系

胞质微丝改变与鼻咽癌细胞增殖和凋亡的关系廖新波,孙宁,唐慰萍（广东医院病理学教研室湛江５２４０２３）本文应用激光共聚焦显微镜（ＣＬＳＭ）技术,研究鼻咽癌细胞胞质微丝骨架改变与癌细胞增殖、凋亡的关系。鼻咽癌细胞（ＣＮＥ－ＺＺ）体外培养（分诱导凋亡组和对...     

激光扫描共聚焦显微镜系统及其在细胞生物学中的应用

激光扫描共聚焦显微镜是近十年发展起来的医学图象分析仪器,现已广泛应用于荧光定量测量、共焦图象分析、三维图象重建、活细胞动力学参数监测和胞间通讯研究等方面。其性能为普通光学显微镜质的飞跃,是电子显微镜的一个补充。本文以美国Ｍｅｒｉｄｉａｎ公司的ＡＣＡＳＵＬＴＩＭＡ３１２为例简要介绍了激光扫描共聚焦显微镜系统的结构、功能和生物学应用前景。     

牙釉质中有机物成分的显微分析研究

本文使用ＬＭ、ＣＬＳＭ、ＳＥＭ、ＴＥＭ、ＥＤＸ－Ｘ显微分析方法对年轻正畸病人的前磨牙进行成分及断层研究。     

激光共聚焦显微技术在植物学中的应用

激光扫描共聚焦显微镜（Ｌａ－ｓｅｒ　Ｓｃａｎｎｉｎｇ　Ｃｏｎｆｏｃａｌ　Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ,ＬＳＣＭ）是近年来发展起来的一种新型高精度显微镜,它在荧光显微镜成像基础上加装了激光扫描装置,使用可激发的荧光探针对样品进行标记,利用计算机进行图像采集处理,从而可得到样品内部细微结构的荧光图像。目前此种显微技术不仅用于观察经固定的各种细胞和组织结构,而且还可对活细胞的形态、结构,离子实时动态等进行观察和定量荧光测定,以及定量图像分析。另外,该仪器还具备样品断层扫描,三维图像重建的独特功能。因此,共聚焦…     

激光共聚焦显微技术在瓮安生物群中的应用

激光共聚焦显微技术是一种以激光作为激发光源,通过特殊装置"针孔"来过滤离焦光线以提高光学分辨率和对比度的光学成像技术。由于大部分化石不能自发荧光,该技术在古生物学领域尚未实现大范围的应用。但若围岩能自发荧光而与化石之间具有一定衬度,或化石因含特殊成分能在特定波段激光照射下自发荧光而产生结构衬度,则可以运用激光共聚焦显微技术获得在普通光学显微镜及荧光显微镜下难以清晰观察到的信息。为推动激光共聚焦技术在古生物学领域中的应用,文中系统介绍了该技术的原理与使用方法,并以埃迪卡拉纪磷酸盐化特异埋藏的瓮安生物群微体化石为例,展示了该技术在化石成像中的若干优势。实验结果表明,瓮安生物群微体化石因富含磷灰石可自发荧光实现成像,使用激光共聚焦显微成像技术观察瓮安生物群化石薄片不仅可以获得较好衬度,而且还能提高成像的分辨率和清晰度。此外,在化石薄片的厚度范围内还可以实现化石结构三维重建。     

“中国遗传学会第十届全国激光生物学学术会议”将在武汉召开

会议主题 激光生物学的发展和应用 1学术报告： 大会将邀请院士和特聘教授等作特邀报告和专题报告,并安 排分组交流。第一分会场：包括激光生物学和生物光子学的基础研究,激光生物技术（含微束照射技术、光镊技术、成像技术、光谱技术、共聚焦扫描显微技术、细胞分流技术等）及其仪器的研制、应用。     

氧化诱导K_(562)细胞凋亡机制的初步探讨

以过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）诱导人慢性髓细胞白血病（Ｋ５６２）细胞为凋亡模型,采用流式细胞仪（ｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ,ＦＣＭ）和激光共聚焦扫描显微镜（ｌａｓｅｒｃｏｎｆｏｃａｌｓｃａｎｎｉｎｇｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ,ＬＣＳＭ）研究细胞凋亡,形态观察出现核固缩,核碎裂及凋亡小体等典型凋亡特征．ＤＮＡ电泳图谱出现“Ｌａｄｄｅｒ”．ＦＣＭ检测在Ｇ０／Ｇ１峰前出现一低ＤＮＡ含量的凋亡峰．ＬＣＳＭ显示凋亡细胞ｃ－Ｆｏｓ．ｃ－Ｊｕｎ和ＮＦκＢ表达量均有不同程度的增加．该结果提示上述三种转录因子可能参与氧化诱导凋亡过程中基因的调控作用．     

激光扫描共聚焦技术分析中药8892对U_（14）癌细胞的作用

我们证明中药８８９２对小鼠生存率和抑瘤率有明显效果的同时,并应用激光扫描共聚焦显微镜观察了中药８８９２对纯小鼠Ｕ１４癌细胞的作用,实验结果证明中药８８９２能直接破坏癌细胞ＤＮＡ、ＲＮＡ,抑制癌细胞增殖,这为中药抗癌作用的临床应用提供有力的依据。本文还讨论了激光共聚焦显微镜（ＣＬＳＭ）的功能,细胞断层抄描光切片（细胞ＣＴ）,三维重建,立体旋转等等,这在普通显微镜下是见不到的。因此应用这种新技术会促进中医药研究的发展。     

征稿启事

《激光生物学报》是中国遗传学会主办的学术期刊,主要刊登以人类、动物、植物和微生物为实验对象的激光（光）生物学、生物光子学、激光（光）生物医学（含光子中医学、光动力疗法、激光整形美容）、放射生物学（含激光育种、辐射育种、空间育种等）、离子束生物工程及其相关的激光生物技术（含微束照射技术、光镊技术、成像技术、光谱技术、共聚焦扫描显微技术、细胞分流技术等）、仪器研制诸领域基础研究和应用研究方面具有原创性的高水平研究论文、专题综述,     

苹果四倍体品种天星的花粉形态及胚囊发育特征研究

利用扫描电子显微镜(SEM)和激光扫描共聚焦显微镜( LSCM)技术对二倍体富士苹果及其四倍体芽变品种天星的花粉性状及胚胎发育特征进行了观察与研究,结果表明:四倍体天星品种的畸形花粉率为10.27％,明显高于富士,花粉萌发率低,为62.42％.2个品种的花粉粒大部分侧面观为长椭圆形,具3沟型萌发孔沟,两极端形状宽而平整,极面观为三角形,但四倍体天星的花粉粒的极轴长和赤道轴长均大于二倍体富士,但P/E值小,差异显著,其花粉粒形状不及二倍体富士规则且饱满程度也低.四倍体天星的花粉表面为纵向条状纹饰,有少量分叉和穿孔,花粉外壁略显粗糙,不如二倍体富士的外壁光滑.天星和富士均为蓼型胚囊,二者均存在异常胚囊现象,天星的异常胚囊现象包括极核位置异常、极核数目异常、卵器结构异常、胚囊内有多个发育滞后的细胞等;而在富士中仅发现少数胚囊结构不完整的现象.     

三疣梭子蟹精子顶体反应前后胞内Ca~(2+)的变化

应用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)和Fluo-3/AM荧染技术对三疣梭子蟹精子顶体反应前后的胞内Ca2 变化进行了观察和检测.结果显示,在精子顶体反应过程中,胞内Ca2 主要分布在细胞核、穿孔器和胞质膜残存处,胞内Ca2 浓度([Ca2 ]I)总体上呈现先上升后下降的趋势.顶体反应前精子的平均荧光强度为35.95±5.71;穿孔器前伸、顶体囊膜翻转阶段精子的平均荧光强度为66.80±7.35;顶体囊膜脱落、顶体丝形成阶段精子的平均荧光强度为3.87±2.82;上述各阶段间精子荧光强度有极显著差异(P<0.01).顶体反应穿孔器前伸、顶体囊膜翻转阶段的精子相比顶体反应前精子,[Ca2 ]I显著提高;而在顶体囊膜脱落、顶体丝形成阶段,[Ca2 ]I则急剧下降,只在顶体丝基部胞质膜残存处有微量Ca2 存在.初步探讨了三疣梭子蟹精子顶体反应前后胞内Ca2 变化的功能.     

激光扫描共聚焦显微镜在孢粉研究中的应用

在MRC1000型激光扫描共聚焦显微镜下,观察具有自发荧光的孢子、花粉、沟鞭藻以及疑源类等不同时代的化石标本,发现现代和第四纪孢粉具有较强的自发荧光,古生代的孢子自发荧光强度最弱。后者很难聚焦成清晰的二维投影图像。在观察孢粉样品过程中,选择合适的激光波长及激光扫描强度是关键的技术问题。一般以氪、氩离子激发为效果最佳,以波长488,568,647nm最合适。     

烟草悬浮细胞在凋亡过程中Ca2+分布的共聚焦显微成像研究

以Fluo-3AM为游离Ca²⁺荧光探针,利用激光扫描共聚焦显微镜（Laser Scanning Confocal Microscope,LSCM）对烟草悬浮细胞在热激诱导的凋亡过程中Ca²⁺时空分布进行了研究。结果显示,在正常细胞中,Ca²⁺集中分布在细胞壁和细胞核中,细胞质中分布较少;在凋亡早期细胞中,细胞质中Ca²⁺的浓度增加;在凋亡晚期的细胞中,细胞核中的Ca²⁺浓度增加较为明显。结果提示,在凋亡过程中,Ca²⁺的定位分布存在一定的规律。     

The Sound Suppression Characteristics of Wing Feather of Owl (Bubo bubo)

Many species of owls are able to fly noiselessly,and their wing feathers play an important role for the silent flight.In this paper,we studied the sound suppression mechanism of the eagle owl (Bubo bubo) by Stereo Microscope (SM),Scanning Electron Microscopy (SEM) and Laser Scanning Confocal Microscope (LSCM).To investigate the effects of special characteristics of wing feather on owl silent flight,the acoustic properties,including the sound absorption coefficient and flight noise,were compared between the eagle owl and common buzzard (Buteo buteo).The results show that the eagle owl generates lower noise than common buzzard during flight,and its wing feather has better sound absorption properties.The leading edge serration and trailing edge fringe can improve the pressure fluctuation of turbulence boundary,and suppress the generation of vortex sound.The elongated distal barbules form a multi-layer grid porous structure which also has an effect on sound absorption.This research not only can give the inspiration for solving the aerodynamic noise of aircraft and engineering machine,but also can provide a new idea for the design of low-noise devices.     

真菌的自发荧光现象研究

本试验用激光共聚焦扫描显微镜对三株不同真菌的菌丝、分子孢子以及子实体的自发荧光现象进行了观察,结果发现：处于相同培养条件的三株真菌的荧光分布特点不一,并且同一真菌在不同培养基条件下所表现的荧光现象亦有差异,说明真菌的自发荧光具有种属特异性并受到培养基质等因素的影响,而培养时间对荧光强度及类别的影响不显著。化学试剂的处理试验表明,弱碱性物质对真菌的荧光具有减弱效应,而强碱性物质对真菌的荧光则表现为增强,提示不同真菌细胞内的自发荧光物质结构上和组分上的差异,其变化可导致荧光性质的改变。     

重症休克时平滑肌细胞内的钙动力学变化

使用荧光比率方法研究血管平滑肌细胞钙动力学变化在重症休克血管反应性降低中的作用．复制SD大鼠失血性休克模型,分离肠系膜细动脉血管平滑肌(ASMC)．使用荧光探针Fluo-3／AM、FuraRed双标记比率方法结合激光扫描共聚焦显微成像技术测定单个平滑肌细胞钙动力学变化,观察ATP敏感钾通道(KATP)特异性阻滞剂优降糖对血管反应性和钙动力学影响、实验结果发现休克后2h(失代偿期),血管反应性明显降低,norepinephrine作用带来的平滑肌细胞内钙离子浓度升高的程度明显减弱;加入优降糖可明显提高NE对平滑肌细胞内钙离子的升高作用,改善细动脉对NE的反应性．带来血管反应性部分恢复．     

利用CLSM检测GFP基因在家蚕的瞬时表达

将绿色荧光蛋白(GFP)基因导入农蚕蛹(G0)的睾丸,利用激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)系统检测,得到GFP基因在家蚕刚孵出未进食的幼虫(蚁蚕)(G1)瞬时表达的荧光图像。 Abstract:Plasmid DNA containing the GFP(Green Fluorescent Protein)reporter gene was injected into the testis of silkworm(Bombyx mori L.)pupa(G0),we observe the fluorescence imaging of expression of GFP gene in silkworm newly-hatched larvae(G1)examined by Confocal Laser Scanning Microscope.     

激光扫描共聚焦显微镜术检测单个血小板钙波动方法的探讨

目的 探讨血小板贴壁的简易方法,同时,观察单个血小板激活前后细胞内钙波动及形态变化的规律。方法 采用多种粘附剂固定血小板,利用钙荧光探针（Fluo-3/AM)（终浓度10－20μmol)进行染色,在激光扫描共聚焦显同镜检测下加入二磷酸腺苷,观察和分析血小板内Ca^2 浓度及形态变化。结果 多聚赖氨酸促进血小板贴壁固定的效果最佳;单个血小板活后细胞内Ca^2 浓度为激活前的128％,形态圆形或椭形转为不规则形,有空泡,突起形成。结论 多聚赖氨酸是血小板贴壁的理想粘附剂,本方法能简易,快捷地监测血小板激活过程中胞浆内钙离子动态变化及形态改变,有助于血小板功能的深入研究。