双孢蘑菇杂交菌株As2796家系的分子遗传研究

应用PCR和凝胶电泳等技术,对双孢蘑菇杂交菌株As2796及其亲本和子代作分子遗传标记跟踪分析,结果如下：1）总DNA的RAPD分析表明,随着遗传代数的增加,杂种子代和出发异核体亲本间的遗传差异逐渐增大;2）mtDNA的酶切图谱表明,亲本8213及其杂交子代具有相同的基因型,表明双孢蘑菇mtDNA呈单亲遗传;3）Est同工酶的PAGE图谱表明,结合了亲本02高产特征和8213优质特征的杂交子代具有两个亲本的标记带型,证明Est同工酶标记是双孢蘑菇新菌株特性预测或鉴定的有效指标。     

农杆菌介导双孢蘑菇AS2796转化体系的优化

双孢蘑菇Agaricus bisporus是一种药食皆宜的食用真菌,具有极高的经济价值,近年来在双孢蘑菇全基因组测序完成后,功能基因组学的研究逐步提上日程。其中,高效的遗传转化体系作为技术基础成为研究重点。农杆菌介导的遗传转化体系作为一种高效的功能基因组研究方法,在双孢蘑菇中已经得到了广泛的应用,但是仍然存在着效率较低的问题有待解决。为了提高双孢蘑菇的农杆菌转化效率,找到双孢蘑菇遗传转化的最优条件,本实验首先对双孢蘑菇的潮霉素抗性压力进行了筛选,结果显示20mg/L的潮霉素浓度可以抑制菌丝生长,而50mg/L的潮霉素浓度则可以完全抑制菌丝生长。其次,对农杆菌菌株、菌液浓度、乙酰丁香酮浓度、菌丝培养时间以及浸染时间做了L16（4 ⁵）的正交实验,通过对各因素影响的分析,得出对转化效率影响最大的因素为菌丝培养时间和农杆菌菌株,且当菌株为LBA4404、菌液浓度OD₆₀₀=0.8、乙酰丁香酮浓度为100μmol/L、菌丝培养时间为40d、浸染时间为10min时,农杆菌介导的双孢蘑菇遗传转化效率最高。     

双孢蘑菇杂交菌株As2796家系的分子遗传研究

应用PCR和凝胶电泳等技术,对双孢蘑菇杂交菌株As2796及其亲本和子代作分子遗传标记跟踪分析,结果如下: 1) 总DNA的RAPD分析表明,随着遗传代数的增加,杂种子代和出发异核体亲本间的遗传差异逐渐增大; 2) mtDNA的酶切图谱表明,亲本8213及其杂交子代具有相同的基因型,表明双孢蘑菇的mtDNA呈单亲遗传; 3) Est同工酶的PAGE图谱表明, 结合了亲本02高产特征和8213优质特征的杂交子代具有两个亲本的标记带型,证明Est同工酶标记是双孢蘑菇新菌株特性预测或鉴定的有效指标。     

双孢蘑菇‘双孢106’的选育报告

‘双孢106’是‘A20’通过单孢选育的品种。子实体散生,少量丛生,近半球形。菌盖白色,表面光洁,直径3.5-5.0cm,厚2.0-3.0cm,质地致密;菌柄白色,粗短,近圆柱形,基部略膨大,长2.0-2.8cm。发菌适温22-25℃,子实体生长发育温度10-24℃,最适温度16-18℃。鲜菇粗纤维含量1.00%,蛋白质含量3.54%,氨基酸总量2.84%。该品种出菇早,子实体圆整、结实,产量高,商品化等级高。适宜双孢蘑菇工厂化设施栽培。     

双孢蘑菇优质高产栽培技术

我们于1994年引进台湾双抱蘑菇菌种及相关的栽培技术,结合本地区的具体情况,经过大面积栽培试验,生物转化率为35％左右,最高可达50％,现将此技术介绍如下：1栽培料的质量要求稻草：新鲜并且干燥,水分含量18％以下。硫酸按：白色结晶,含氮量21％。尿素：白色结晶,含氮量46％。过磷酸钙：黄褐色或灰色粉末,PZq含量15％。轻质碳酸钙：白色至灰色粉末,op含量95％以上,pH7．0～8．so熟石灰：白色粉末,pH11Lll。大米糠：黄白色粉末,无酸臭味,且不得结决。2菇房结构和栽培床的搭建①菇房结构：利用空闲民房作菇房,也可建成大棚式…     

不同地区双孢蘑菇中蘑菇氨酸含量的比较研究

蘑菇氨酸曾被怀疑具有潜在的致癌效应,但其生理作用目前还存在争议.为比较分析我国不同地区双孢蘑菇中蘑菇氨酸含量,本研究采用反相高效液相色谱法检测了我国5个双孢蘑菇产区30份新鲜双孢蘑菇样品中蘑菇氨酸的含量.结果显示,我国双孢蘑菇中蘑菇氨酸含量范围较广,为155.6～934.4mg/kg FW.在此基础上,分析了菌株类型、培养料类型和采收季节等因素对蘑菇氨酸含量的影响.结果表明,不同菌株、不同栽培条件下生产的双孢蘑菇中蘑菇氨酸的含量差异明显.     

双孢蘑菇遗传多样性分析

应用AFLP指纹技术对双孢蘑菇的20个野生菌株和5个栽培品种的遗传多样性进行了研究。AFLP指纹揭示出20个野生异核体菌株所固的基因型。5个商业品种表现出比较一致的AFLP指纹,但也显示出它们之间的一些差别。由单孢分离获得的同核体菌株携带着部分异核体菌株的AFLP指纹;由同一子实体分离得到的大部分单孢菌株是异核体菌株,它们具有与其亲本一致的AFLP指纹。UPGMA分析揭示出2个与地理分布（美洲、欧洲）和相对应的组。研究结果表明：（1）在野生菌株之间存在着明显的遗传差异;（2）大多数单孢分离的菌株具有与母本一致的遗传物质;（3）野生菌株间的遗传变异大于栽培品种间的变异;（4）在双孢蘑菇的遗传多样性分析中,AFLP技术是非常有效的工具。     

双孢蘑菇子实体营养成分分析

测定了双孢蘑菇子实体中氨基酸、矿质元素、多糖、粗蛋白、粗脂肪、灰分、粗纤维、核苷酸、维生素C和SOD等含量。结果表明,粗蛋白含量为37．86％,在测定的18种氨基酸中含有17种氨基酸,8种必须氨基酸含量占氨基酸总量的42．30％;必需氨基酸与非必需氨基酸比值（E／N）为0．73。还含有丰富的多糖、纤维素、超氧化物歧化酶（SOD）和核苷酸类物质。     

双孢蘑菇分子标记研究进展

双孢蘑菇（Agaricus bisporus）是世界上最重要的人工栽培的食用菌,近20年来双孢蘑菇分子标记研究发展迅速,取得了许多阶段性成果。本简要地对双孢蘑菇同工酶标记,电泳核型,RFLP,RAPD,AFLP等分子标记研究的发展状况进行了综述。     

核磁共振,磁化水对双孢蘑菇176菌株同工酶的影响

用普通水制备马铃薯葡萄糖培养基（ＰＤＡ）和用磁化水制备马铃薯葡萄糖培养基（ＭＰＤＡ）,分别培养双孢蘑菇１７６ 菌株。用不同磁场强度的核磁共振处理这些双孢蘑菇的菌丝体,以不处理为对照（ＣＫ）。取磁场处理后５ 小时的菌丝体进行酯酶同工酶（ＥＳＴ）,多酚氧化酶同工酶（ＰＯ）酶谱分析,并转接ＰＤＡ 和ＭＰＤＡ上培养１４ 天,再次分析同工酶谱。结果表明：０．１Ｔ磁场强度对双孢蘑菇ＥＳＴ和ＰＯ 产生的影响最明显,可使某些酶带活性降低或消失,某些酶带活性增强甚至诱发出ＰＯ的新酶带。但这些同工酶酶谱所发生的变化,需要培养较长时间才能明显表现出来。核磁共振处理后转接到ＰＤＡ 上培养,会使已发生变化的同工酶,变化更显著,用ＭＰＤＡ 培养双孢蘑菇ＥＳＴ酶谱发生改变,但是能使ＰＯ的酶活性增强。     

氮离子束注入姬松茸担孢子的生物学效应研究

氮离子束注入与紫外线辐射对姬松茸担孢子萌发的影响显著不同,表现出一定程度的马鞍型效应.不同剂量的氮离子束注入姬松茸担孢子,其产生的生物学效应不同:氮离子注入束流为200×2.6×1013N /cm2,筛选到一株箱栽生物学效率提高47.0%的姬松茸新菌株AbML11;氮离子注入束流为400×2.6×1013N /cm2,筛选到一株子实体呈现白色突变的姬松茸新菌株AbML7;氮离子注入束流为500×2.6×10"N13/cm2,筛选到一株具有AEC抗性突变的姬松茸新菌株AbML2.     

稳恒磁场对两种不同构象状态的离体牛肝过氧化氢酶的生物学效应研究

通过活力测定,紫外差光谱,多维荧光光谱及差示扫描量热分析,研究了0.23～0.61T稳恒磁场对两种不同构象状态的离体牛肝过氧化氢酶的生物学效应,被选择用于研究的酶的构象状态分别为4℃的钝化状态和25℃的活化状态,二者具有明显不同的构象,4℃时,酚分子处于钝化状态,经0.23～0.61T稳恒磁场处理不同的时间后,几乎不表现出任何磁生物学效应;25℃时,酶分子处于活化状态,经磁场处理后,表现出明显的磁生物学效应;酶活力增加,同时构象发生变化。构象变化导致λ210～310nm紫外差光谱的出现,荧光偏振度的增加,在λ330nm荧光发射峰发射强度的改变及差示扫描量热曲线的产生,研究结果表明：不同的初始构象状态可能是产生不同磁效应的根本原因。     

磁性纳米材料的生物医学应用进展

以四氧化三铁为代表的医用磁性纳米材料具有独特的磁学性能、表面易功能化、良好的生物学相容性等特点,在纳米医学相关领域展现出巨大的应用前景,特别是近年来它作为可介导外场的智能材料,在材料设计和生物医学应用方面均取得了突破性的进展.鉴于此,本文围绕磁性氧化铁纳米材料的生物医学应用,着重介绍近年来其在磁共振影像探针、磁热和磁力效应的生物医学应用、诊疗一体化以及纳米酶催化等领域的研究进展,并对磁性纳米材料在生物医学领域未来的发展方向进行了展望.     

磁性细胞分选技术的应用与生物学评价

磁性细胞分选技术是一种利用超顺磁性纳米复合材料进行细胞分选的细胞高度特异性快速分选技术,在免疫学、干细胞学、肿瘤学和临床医学等领域应用广泛。本文综合阐述了磁性细胞分选技术的分类和应用,讨论了近几年出现的几项基于磁性细胞分选的新技术和面临的挑战。重点分析了磁性细胞分选产品生物学评价的必要性,并提出了10项与磁性细胞分选产品相关的生物学评价技术参数：得率、纯度、无菌、细胞毒性、细胞形态、活率、细胞的光散射特性、细胞的荧光抗体标记能力、细胞活化、细胞增殖,该评价技术参数的提出对磁性细胞分选规范化应用具有重要的推动作用。     

褐蘑菇碱提物降血糖作用研究

目的：研究褐蘑菇碱提物的降血糖作用。方法：四氧嘧啶灌胃造高血糖小鼠模型,随机分成6组,分别是正常对照组、模型对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组、阳性对照组,前两组以生理盐水连续灌胃7d,阳性对照组灌胃消渴丸溶液连续7d。高、中、低剂量组（100、200、400mg/kg）以褐蘑菇碱提物溶液连续灌胃7d,摘眼球取血,测定空腹血糖值。结果：高、中、低剂量组对糖尿病小鼠的降糖率分别是16.9%、20.2%和15.1%,阳性对照组的降糖率是25.1%。结论：褐蘑菇碱提物中剂量组降糖效果要优于高、低剂量组。褐蘑菇碱提物能显著降低四氧嘧啶所制备的糖尿病小鼠血糖浓度。     

Biological control of mushroom brown blotch disease using antagonistic bacteria

Button mushroom brown blotch disease is one of the most important and devastating diseases in Iran which is caused by Pseudomonas tolaasii. To screen antagonistic bacteria against this pathogen, major mushroom cultivation centres in Iran were surveyed and samples were taken from compost, soil cover and button caps with or without visible symptoms. In total, 120 bacteria were isolated on the basis of their morphology and pathology on excised tissue blocks of the fresh Agaricus bisporus. Among all tested bacteria, thirty-six isolates produced variable inhibition zones and reduced the symptom incidence on tissue blocks of A. bisporus. The most effective antagonistic bacteria caused almost 100% inhibition of pathogenic bacterium. To confirm the identification of antagonistic bacteria, RNA polymerase beta-subunit gene (rpoB) of five antagonistic strains (A1, A2, A3, A4 and A6) were amplified using primer sets of long amplicon primers (LAPS) and LAP27. The polymerase chain reaction products of the strains A1, A3 and A6 were sequenced. Based on phenotypic, biochemical and molecular characteristics, the bacterial antagonists were identified as P. putida (A1), P. reactants (A2 and A6), P. fluorescens (A3 and A4) and Bacillus subtilis (A5), respectively. In all four criteria including weight of the diseased and healthy caps, per cent disease severity and per cent disease incidence, the treatment 2 (P. fluorescens A4) was the most effective from among T1, T3, T4 and T5 treatments. Overall results of this study suggest that bacterial antagonists may be potential biocontrol agents for biological promotion of the health and growth of button mushroom.     

Addition of magnetic field capability to existing extremely-low-frequency electric field exposure systems

Magnetic field systems were added to existing electric field exposure apparatuses for exposing cell suspensions in vitro and small animals in vivo. Two horizontally oriented, rectangular coils, stacked one directly above the other, have opposite electric currents. This configuration minimizes leakage fields and allows sham- and field-exposure systems to be placed in the same room or incubator. For the in vitro system, copper plates formed the loop-pair, with up to 900 A supplied by a 180:1 transformer. Electric fields were supplied via electrodes at the ends of cell-culture tubes, eight of which can be accommodated by each exposure system. Two complete systems are situated in an incubator to allow simultaneous sham and field exposure up to 1 mT. For the in vivo system, four pairs of 0.8 x 2.7-m coils made of copper bus bar are employed. This arrangement is energized from the power grid via a 30:1 transformer; horizontal magnetic flux densities up to 1 mT can be generated. Pairs of electrode plates spaced 30.5 cm apart provide electric field exposure of up to 130 kV/m. Four systems with a capacity of 48 rats each are located in one room. For both the in vitro and in vivo systems, magnetic exposure fields are uniform to within +/- 2.5%, and sham levels are at least 2,500-fold lower than exposure levels. Potential confounding factors, such as heating and vibration, were examined and found to be minimal.