脆弱类杆菌与大肠杆菌混合感染的小鼠皮下脓肿模型的定量研究

本文用临床上厌氧菌感染中最常见的B.f(脆弱类杆菌)与兼性菌中最常见的E.c(大肠杆菌)作混合感染致病协同性研究的模式菌株,从定量角度建立小鼠皮下脓肿的感染模型。结果表明,单独在昆明小鼠皮下接种B.f 10~7(CFu/m)后1/10发生脓肿,10~8与10~9菌量分别有3/10及6/10发生脓肿。B.f的CP(荚膜多糖)提取物125μg、250μg、500μg,其脓肿形成率分别为1/10、2/10和4/10。单独注射E.c10~6～10~7菌量时,无脓肿及死亡发生。10~8时3/10小鼠死亡,脓肿不典型。引起感染的菌量阈值B.f为10~7,E.c为10~8。B.f致病特征为引起脓肿,E.c为引起死亡。混合感染两种菌浓度均在10~7时,5/10发生脓肿,2/10发生死亡。在感染灶中两种菌浓度总数分别保持在≥10~7。B.f与E.c混合感染时有明显的协同致死与协同致脓肿效应。     

小鼠烫伤模型及其在中草药抗菌作用研究中的初步运用

小白鼠经烫伤后在烫伤部位皮下立即接种极小量绿脓杆菌可以导致动物有规律地死亡。烫伤面积约为小鼠体表面积的6%,接种量1—2×10~4CFU。用胃膜素制成细菌悬液,接种量可以减少至40—50 CFU。庆大霉素及氯霉素能有效地保护动物。多粘菌素及所试的十多种中草药及其粗提物均未能显示保护作用。     

多肽免疫抑制牙龈卟啉单胞菌引起的小鼠感染及牙槽骨吸收作用的研究

目的探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonasgingivalis,P.g)血凝素2(hemagglutinin-2,HA-2)的氯化血红素结合位点多肽作为抗原免疫小鼠,对降低P.g感染后毒性和抑制牙周炎牙槽骨吸收的作用。方法将多肽与牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,BSA)偶联作为抗原免疫BALB/c小鼠。P.g国际标准菌株ATCC33277厌氧培养,皮下注射菌液,监测小鼠脓肿的大小及转归,评价多肽对P.g皮下感染的保护作用;口腔接种细菌感染小鼠,检测小鼠牙周炎牙槽骨吸收量,评价其对于P.g引起的牙周炎牙槽骨吸收的保护作用。结果多肽DGFPGDHYAVMISK作为抗原免疫小鼠可减小小鼠皮下接种P.g处形成脓肿的大小,并加快皮下脓肿的愈合;可抑制口腔感染P.g后小鼠牙周炎模型牙槽骨的吸收。结论多肽DGFPGDHYAVMISK免疫小鼠对P.g感染小鼠具有一定的保护作用;可减少小鼠牙周炎模型牙槽骨的吸收。为开发新的牙周病防治方法奠定基础。     

艾氏腹水癌克隆细胞株E2G8建立小鼠动物模型生物学特性研究

目的　比较不同品种 (系 )小鼠接种E2G8细胞株的某些生物学特性。方法　将E2G8细胞稀释成不同浓度 ,接种KM、DBA 2、6 15、C57BL 6及BALB c小鼠皮下或腹腔 ,观察小鼠出现可见肿块 腹水时间及小鼠生存时间 ;测量肿块直径 (cm)及瘤重 ;荷瘤小鼠腹腔注射环磷酰胺 (CTX) ,观察E2G8细胞肿瘤模型对CTX治疗的敏感性。结果　E2G8接种BALB c、6 15小鼠皮下毒性最大 ,DBA 2、C57BL 6小鼠次之 ,接种KM小鼠皮下毒性最小 ;接种DBA 2、C57BL 6、6 15小鼠腹腔毒性较大 ,致死性高 ,对BALB c和KM小鼠的致死性弱 ;E2G8瘤细胞在KM和 4种纯系小鼠皮下均能很好生长肿瘤 ,其中在KM小鼠皮下肿瘤生长最大 ,在BALB c小鼠皮下肿瘤最小 ;KM、C57BL 6、6 15、DBA 2、BALB c小鼠皮下接种瘤细胞第 12天瘤重分别为 (2 4 0± 1 30 ) ,(0 90± 0 4 8) ,(1 2 0± 0 38) ,(1 10± 0 2 9) ,(0 80± 0 30 )g ;E2G8细胞接种 5个不同品种 (系 )小鼠制备的肿瘤模型 ,用CTX治疗 ,抑瘤率由高到低依次为6 6 7% (6 15 ) ,5 5 0 % (BALB c) ,5 3 3% (C57BL 6 ) ,5 0 % (KM) ,36 4 (DBA 2 ) ,其中 6 15小鼠建立的模型对CTX的治疗最敏感。结论　E2G8细胞株接种 5个不同品种 (系 )小鼠 ,所测生物学特性不完全相同 ,但是从腹腔 皮下接种、CTX     

大鼠接种灭活仙台病毒疫苗后抗体的产生和母仔间抗体的传递

用吐温—80—乙醚、福尔马林及紫外线处理的仙台病毒灭活疫苗接种成年大鼠,观察血抑抗体动向,得到以下看法。 血抑抗体效价与接种量有关。一次皮下接种10~5HAU后,7日检出抗体,21日后达最高峰,200日后慢慢下降,但462日仍可检出抗体。皮下接种10~3及10~4HAU后,10日呈阳性,其后的变化,大体与10 HAU组相同,402日后呈阴性。雌鼠与雄鼠之间未见差异。静脉、腹腔、肌肉、皮下四种途径之间没有发现显著性差别。10~5HAU经静脉与腹腔接种4天,肌肉与皮下接种后7天均可检出抗体,14天后看不出差别。鼻腔接种组接种后21天虽可检出抗体,但与其他途径组相比,效价低。二次接种都比一次接种的抗体效价高。 Sv-V所产生的抗体能通过母乳很好地传递给仔鼠,胎盘传递不明显。即使母鼠的抗体效价高,胎儿或新生仔的抗体效价低;哺乳1～3周龄仔鼠的抗体效价几乎与母鼠相等,断乳后迅速下降,至10周龄时不能检出。     

我国首次发现的暗纹节菱孢所致皮肤真菌病的毒理实验及病理分析

从患者皮损处皮屑及活检组织中分离出的暗纹节菱孢Arthriniumphaeospermum（Corda）Ellis菌株制成混悬菌液,用兔、豚鼠及小鼠（LACA）进行动物毒理实验。表皮直接涂抹法接种,四周后未见皮肤损害;划破表皮涂沫法及皮下注射法接种,两周后实验动物的皮肤都出现浸润性斑块、小给节、皮下脓肿及脱毛的症状,对照组动物正常。再用腹腔注射法接种,小鼠两周后死亡,病解所见,腹膜、肠系膜、腹壁及肝等处,均出现散在的灰白色小脓肿;心、肺、肝、脾及肾均有病变。豚鼠两周后仍存活,当即处死解剖所见与小鼠病解改变相同。对实验动物皮损、腹膜、肠系膜、胃及肝等处的小脓肿组织进行了病理检查,结果发现皮损及器官组织均有明显的病理浸润,由多种细胞构成的浸润性肉芽肿。在病理浸润内可见大小不等的球形、卵圆形、棱形及晶体形的棕色、红色孢子．其病理改变与患者皮损病理改变相一致,其不同点是实验动物有小脓肿,肉芽肿内可见多核巨噬细胞,而在病人皮损中很少见到。     

甲硝哒唑与庆大霉素联合治疗厌氧菌与兼性菌混合感染的动物实验研究

厌氧菌与兼性菌的混合感染及其治疗是目前临床上感染性疾病和抗生素治疗研究领域内的重要问题之一,本文对小鼠混合感染的动物模型甲硝哒唑与庆大霉素治疗结果显示:当脆弱类杆菌10~9CFU/ml大肠杆菌10~8CFU/ml混合感染小鼠6h后,单用甲硝哒唑治疗死亡率为9/10,脓肿率为1/10;单用庆大霉素组死亡率2/10,脓肿率为10/10;两药联用死亡率为2/10,无脓肿发生。两药联用的治疗比较:即时组基本同6h组,而12h开始治疗组死亡率达6/10。脓肿率4/6。提示应及早联合用药以阻断细菌的协同致病作用,控制感染。     

我国首次发现的暗纹节菱孢所致皮肤真菌病的毒理实验及病理分析

从患者皮损处皮屑及活检组织中分离出的暗纹节菱孢Ａｒｔｈｒｉｎｉｕｍｐｈａｅｏｓｐｅｍｕｍ（Ｃｏｒｄａ）Ｅｌｌｉｓ菌株制成混悬菌液,用兔,豚鼠及小鼠（ＬＡＣＡ）进行动物毒理实验,表皮直接涂抹法接种,四周后未见皮肤损害,划破表皮涂沫法及皮下注射法接种,两周后实验动物的皮肤都出现浸润性斑块,小结节,皮下脓肿及脱毛的症状,对照组动物正常,再用腹腔注射法接种,小鼠两周后死亡,病解所见,腹膜,肠系膜,腹壁及肝     

C57BL/6 J小鼠黑色素瘤肺转移模型的构建

目的探讨建立C57BL/6 J小鼠黑色素瘤肺转移模型的影响因素,包括肿瘤的接种方式、细胞接种数量和成瘤周期。方法体外培养小鼠黑色素瘤细胞B16F10。1)取6~8周龄,雄性小鼠18只,随机分三组,每组6只,分别采取尾静脉注射、腹腔注射和皮下注射方式,每只小鼠注射100μL(3×10~6个细胞)B16F10细胞悬液,2周后,解剖小鼠并观察黑色素瘤的生长和转移情况;2)分3组,同上,经尾静脉分别注射3×10~6个细胞、1×10~6个细胞、3×10~5个细胞,2周后,解剖小鼠并观察黑色素瘤的生长和转移情况;3)分3组,同上,尾静脉注射1×10~6个细胞,分别于1周、2周、3周解剖小鼠,观察黑色素瘤的生长和转移情况。结果 1)尾静脉注射小鼠黑色素瘤细胞,小鼠发生肺转移的成功率为100%,而腹腔注射和皮下注射未发生肺转移。2)接种小鼠黑色素瘤细胞数量为1×10~6时,发生肺部转移的黑色素瘤细胞数量适中;接种细胞数量为3×10~6时,发生肺部转移的黑色素瘤细胞数量过多;接种细胞数量为3×10~5时,发生肺部转移的黑色素瘤细胞数量较少。3)尾静脉注射1×10~6个小鼠黑色素瘤细胞,饲养2周后,可以观察到黑色素瘤细胞明显的肺部转移,且不会导致小鼠死亡;饲养3周,黑色素瘤细胞肺部转移数量过多,且小鼠死亡过半;饲养1周,黑色素瘤细胞肺部转移数量较少。结论经尾静脉注射1×10~6个小鼠黑色素瘤细胞,生长2周时间,为构建C57BL/6 J小鼠黑色素瘤肺转移模型的推荐方法。     

不同品系小鼠对实验感染念珠状链杆菌敏感性的观察

本文通过念珠状链杆菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｂａｃｉｌｕｓｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｉｓ,Ｓ．ｍ．）实验感染昆明、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ、ＢＡＬＢ／ｃ、ＩＣＲ、ＮＩＨ、ＤＢＡ共６个品系小鼠,观察其对Ｓ．ｍ．敏感性的差异。其中昆明、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ两个品系在腹腔接种后表现出明显的临床、病理改变。昆明小鼠发病率和死亡率分别为９２％和８０％;Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ分别是８０％和１２％。昆明小鼠较之Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠起病急、病情严重,多数动物死于感染的急性期。其余品系的发病率为：ＮＩＨ８％、ＢＡＬＢ／ｃ和ＤＢＡ４％,没有动物死亡;ＩＣＲ在接种后无任何临床病理改变。在实验感染后临床病理改变方面,昆明小鼠和Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠间有较大不同。昆明小鼠以末梢血管淤血、四肢尾部水肿、关节炎、截瘫、腹泻为主,而Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠则以注射部位和其它部位皮下脓肿、化脓性关节炎为主。本研究提示,中国昆明小鼠对Ｓ．ｍ．敏感性最高,可以将其作为“哨兵动物”用于实验大鼠Ｓ．ｍ．的常规监测;不同品系小鼠不仅对实验感染Ｓ．ｍ．的敏感性不同,而且表现出不同的临床病理改变。     

荧光标记技术在肿瘤模型研究中的应用

目的利用绿色荧光小鼠和红色荧光蛋白标记肿瘤细胞,建立荧光标记的小鼠肿瘤模型,并建立活体荧光成像和荧光显微镜成像在整体和细胞水平直接观察肿瘤的技术。方法将小鼠B16黑色素瘤细胞接种到绿色荧光蛋白转基因小鼠皮下,建立GFP小鼠肿瘤模型。以红色荧光蛋白作为标记基因导入小鼠黑色素瘤细胞B16细胞,建立稳定表达红色荧光蛋白的细胞株。将表达红色荧光蛋白B16细胞接种到绿色荧光转基因小鼠皮下,建立双荧光小鼠肿瘤模型。用荧光显微镜和活体荧光成像系统检测小鼠肿瘤的发生发展。结果分别建立了GFP小鼠肿瘤模型和双色荧光小鼠肿瘤模型。利用活体荧光影像仪可以观察双色荧光小鼠模型中受体绿色荧光组织和红色荧光移植肿瘤相互融合。利用荧光显微镜,可以观察到肿瘤内绿色荧光标记的来源于受体小鼠的血管和免疫细胞。经香菇多糖刺激的GFP小鼠肿瘤模型的移植瘤组织中,来源于受体小鼠绿色荧光标记的免疫细胞明显多于经生理盐水刺激的对照小鼠。结论利用绿色荧光小鼠和红色荧光RFP标记肿瘤细胞建立荧光标记的小鼠肿瘤模型,采用活体荧光成像仪和荧光显微镜可在整体和细胞水平直接观察肿瘤的生长以及肿瘤与宿主的相互作用。     

人OC-3-VGH卵巢癌细胞裸小鼠肿瘤模型的建立

目的建立人OC-3-VGH细胞株卵巢癌裸小鼠模型并观察该肿瘤生物学生长特性。方法OC-3-VGH细胞株复苏后加入10 mL RPMI-1640培养液,放入培养箱,传2～3代后,取细胞悬液,均以4×106个细胞,每只0.2 mL分别接种至BALB/c雌性裸小鼠皮下,2月后处死取材,观察肿瘤生长特性和转移情况。结果皮下接种一周后,裸鼠长出肿瘤,并随时间而增大,体积呈指数增长,第42天始,明显增大（P〈0.05）。组织学检查发现裸鼠皮下肿瘤细胞均细胞体积较大,细胞核大而染色深,核分裂相较多、异型性明显,接种2个月时,未发生其他组织转移。结论建立了新的卵巢癌动物模型,并初步研究了其生物学特性,为卵巢癌治疗方法的研究拓宽了道路。     

小鼠Lewis肺癌不同部位皮下移植瘤模型的比较

目的探究不同部位肺癌皮下移植瘤存在的差异,为肺癌研究者提供提供基础依据。方法将稳定表达虫萤光素酶的小鼠Lewis肺腺癌细胞(ll2-luc-m38)分别注射于C57 BL/6小鼠的右腋皮下、右腹股沟皮下、脚垫皮下,定期利用小动物活体成像系统观察小鼠皮下移植瘤成瘤情况及转移情况,观察不同部位荷瘤小鼠的生存时间和死亡率,肿瘤组织取材,采用石蜡包埋、切片、HE染色做出病理学诊断。并将小鼠处死后立即进行肺部组织固定、观察转移灶。对皮下移植瘤行切除术观察小鼠术后生存情况和转移情况。结果腋下组和腹股沟组成瘤时间较早,成瘤率为100%,脚垫组成瘤时间较晚,成瘤率为33%;腹股沟组和腋下组瘤体积增长迅速,其中腹股沟组瘤体积增长最快;接种后第21天腋下组70%的小鼠出现了肺转移,转移灶数目较多;腹股沟组50%小鼠出现肺转移,且转移灶数目较少;脚垫组小鼠未观察到肺转移灶。脚垫组小鼠死亡率最高。腹股沟组和腋下组小鼠可行皮下移植瘤切除术,术后存活率为100%。结论小鼠lewis肺癌皮下移植瘤模型中,腹股沟组和腋下组成瘤率高,可耐受移植瘤切除术,手术死亡风险低,便于监测,操作简单且可重复性高,其中腋下组转移性更好。     

Aβ_(1~15)疫苗预防Tg2576小鼠脑病理变化和认知退化的研究

探讨Aβ亚单位疫苗接种后对Tg2576小鼠脑病理变化和认知退化的预防作用.32只5月龄Tg2576小鼠随机分成4组:对照组(只接种佐剂),Aβ42组(接种Aβ42疫苗),Aβ1~15组(接种Aβ1~15疫苗)和Aβ36~42组(接种Aβ36~42疫苗),每组8只.3组接种疫苗小鼠的血清抗Aβ42抗体滴度比对照组显著增高;脑组织匀浆内也可检测到少量抗体.Morris水迷宫实验结果显示Aβ42组、Aβ1~15组和Aβ36~42组与对照组小鼠的行为学有明显改善.取各组2只小鼠的脾细胞培养,经ConA或各自抗原刺激后,3组疫苗免疫后小鼠脾细胞增殖显著高于对照组;Aβ42组,IL-4和IL-10相对较高,而IL-2和INF-γ相对较低;Aβ1~15组中IL-4和IL-10较高;Aβ36~42组IL-2和INF-γ较高.免疫组织化学法显示对照组小鼠脑皮质与海马部位有大量老年斑,而Aβ42组和Aβ1~15组脑内无老年斑出现,Aβ36~42组小鼠脑内有少量老年斑.实验证明Aβ1~15亚单位疫苗可防止Tg2576小鼠认知行为的退化,阻止Tg2576小鼠脑内Aβ沉积和老年斑的形成.     

反刍兽源附红细胞体感染小鼠的研究

目的　采用反刍兽源附红细胞体感染小鼠 ,研究附红细胞体的感染途径及在小鼠体内的消长规律 ,试图建立附红细胞体感染动物模型。方法　经小鼠腹腔、皮下接种含有附红细胞体的奶牛、山羊血液 ,脏器悬液和接触感染。结果　四种接种方法均获成功 ,附红细胞体在小鼠体内呈现一定的规律性。感染后第 8天附红细胞体在小鼠的血液可以查见。感染后第 15～ 18天附红细胞体的感染率达到高峰。感染后第 2 0d附红细胞体逐渐消失。在整个实验过程中未见感染小鼠明显的临床症状。结论　可以用小鼠建立附红细胞体感染动物模型。附红细胞体的感染方式有以下几种 :腹腔、皮下接种、接触感染。     

卡介苗ERP基因缺失突变株在小鼠体内毒力的研究

为初步研究卡介苗ERP基因缺失突变株对小鼠的毒性作用,将卡介苗ERP基因缺失突变株和BCG分别皮下接种BALB/c小鼠后,取小鼠脾脏和肺脏匀浆,将匀浆液稀释后接种于罗氏培养基,培养3周后计菌落数(CFU);同时观察肺部病理改变,并比较和分析免疫16周时各组小鼠肺、肝、脾的脏器系数.结果表明,卡介苗ERP基因缺失突变株较BCG对BALB/c小鼠毒性低.     

鼠单克隆抗-HBs的单克隆抗独特型抗体的制备及其免疫原性的研究 Ⅱ.Ab_2—1的免疫原性研究

用一株单克隆抗独特型抗体细胞株,Ab_2-1免疫4只BALB/c小鼠和2只家兔。每只小鼠每次经腹腔接种100#gAb_2-1,共接种4次;每只家兔每次经皮下注射1mgAb_2-1,共注射4次。经免疫的小鼠和家兔都产生了抗-HBs,经两种竞争性抑制试验证实,这些抗-HBs是特异性的。小鼠抗-HBs滴度为2~(-6)至2~(-9);家兔抗-HBs滴度从2~(-10)至2~(-12)。这些资料提示:单克隆抗独特型抗体能模拟HBsAg,具有类似HBsAg的免疫原性。     

悉生小鼠体内大肠杆菌和青春型双歧杆菌对艰难梭菌的拮抗作用

本文应用悉生小鼠做模型,研究了大肠杆菌(E.coli)和青春型双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)对艰难梭菌(Clostridium diffi-cile)的拮抗作用。E.coli和B.adolescentis预先接种无菌SSB小鼠,再用C.difficile攻击。结果表明,E.coli和E.coli B.adolescentis对小鼠均有保护作用,保护平分别为87.5%(7/8)和100%(8/8)。B.adolescentis定值后数量达10~(10.28)CFU/g,且对E.coli数量和小鼠本身无影响。E.coli和B.adolescentis联合比E.coli单独抑制C.difficile在肠道中繁殖的作用更强(0.02>P>0.01),但对其毒素产生和粘附力的作用无明显差异。C.difficile攻击后的1～14天,小鼠粪便中C.difficile菌数在10~4至10~8CFU/g内变化,细胞毒素为10~3CFU/g,A毒素滴度为10~2/g,B.adolescentis也一度下降10~2CFU/g。接种C.difficile后,小鼠虽无明显的腹泻症状,但组织学仍可观察到肠粘膜有充血和分泌增加等轻度损害。扫描电镜和普通光镜均发现E.coli单独或与B.adolescentis共同吸附在肠粘膜微绒毛表面,未见有C.difficile吸附。     

糖肽对小鼠Lewis肺癌实验性转移作用的初步病理观察

我们曾报道从小鼠Lewis肺癌组织通过蛋白水解酶及分子筛层析分离的总糖肽,在体外可明显地抑制某些肿瘤细胞及分离的层粘连蛋受体与基膜成分层粘连蛋白的识别和结合。本文报告将此糖肽与Lewis肺癌细胞混合,通过尾静脉注入小鼠体内,对实验性癌转移的抑制作用。初步病理结果表明,此糖肽几乎可以完全抑制实验性转移瘤的形成,保护小鼠不死于癌转移。提示糖肽可能具有阻断癌转移之作用。将实验组一部分存活小鼠再行同种癌细胞皮下接种,可以照常成瘤。表明糖肽阻抑实验性癌转移的效能可能并非调动了宿主的免疫机制所致。糖肽还可减慢皮下接种的癌细胞的生长速度,但对癌细胞并无直接毒性作用。     

小鼠接种百日咳鲍氏杆菌疫苗后产生对腺病毒感染的抵抗力

<正>百日咳鲍氏杆菌菌苗(BPV)具有多种免疫调节活性。从百日咳鲍氏杆菌(BP)提取的某些无菌体成分具有其中某些免疫调节活性。小鼠接种BPV或BP提取物后其病毒感染的发病机理发生改变。腹腔内接种BPV后5～7天的小鼠对鼻内流感病毒攻击的易感性增强。脑内狂犬病毒攻击的同时,经皮下、静脉或腹腔内接种BP提取物,则试验动物对该病毒攻击的抵抗力增强。腹腔