疫苗

920121微载体ONA盆组细胞用于生产HBsAg仁会,英」/Yuan,2.Y.一/Ann.N.Y.Acad.Sc,一1990,613一555一346〔译自DBA,1992,10 (9),91一04958〕 将一个编码乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原全序列的3.5 kb Hindlll/Pstl片段以及取自肝瘤pLc/PRF/5细胞的侧序列置入牛乳头状瘤病毒载体质粒pBHSne015,形成表达质粒pBHSneos。用pBHSneos质粒转染LTK细胞,得重组细胞系BHSi,能产生HBV表面抗原(HBVsAg),分子量为27000。BHSi或葡糖氧化酶与藻酸钠(Kelc。)混合,并经喷气管嘴喷人1。1%CaCI:溶液中,形成小珠。用0.05%聚一L一赖氨酸溶液处理…     

动物细胞培养及单克隆抗体

921758浦定苏云金芽抱杆菌的活生物t浓度〔俄〕/Mura-tov,V.S.…1 Mikrobiologiya一1901,60(3)。一546~551〔译自DBA,1091,10(21),91-12214〕 发展3一种用来测定苏云金芽抱杆菌(Ba成-Z妞。比。八:好e:就幻培养物细胞活力及优化培养基的方法。在复合培养基上培养该菌2个亚种de-“‘rol““5 49/7和K助,sta无￡Z一52。用苯胺蓝和荧光素染色,在荧光显微镜下检测细胞、抱子和晶体。在营养生长阶段,用两种染料所得结果相似,表明在此阶段基本无死细胞,在颗粒形成阶段,16~25%(菌株49/7)和10~25%(Z一52)的细胞无活力。还可测定此阶段(从颗粒中…     

能源上的应用

891021最大限度提高固定化细胞反应器的产量〔会,英〕/Vega,J.L.…了Aoll.N.Y .Aead.Sei一1957,506一208~228〔译自DBA,1988,7(16),88一08088〕 固定化细胞反应器的乙醇产量已提高到最大限度。利用由戊二醛交联在明胶载体上的酿酒酵母(Saccharom夕cesc“re”i“ae)的立式固定化细胞反应器,对于达到高的稀释率和细胞浓度是有效的。反应器长时间很稳定,在这段时期内细胞浓度不断增加而不达到稳定态。为了从空隙中除去多余的生物量,必须定期进行气体清洗。在葡萄糖浓度为15一20%时,”%的葡萄糖转化为乙醇。底物浓度高和流速快促进了质量传…     

Vero细胞在不同微载体固定化培养中的生长和代谢

目的:比较Vero细胞在不同的商品化微载体中固定化培养的生长和代谢。方法:以Vero细胞在含1%新生牛血清的DMEM/F12中培养的细胞形态、活细胞密度和细胞活力为指标,考察Vero细胞在2D MicroHex、Biosilon、Cytodex1和Cytopore1微载体固定化培养的细胞生长;以葡萄糖比消耗速率(qglc)、乳酸比生产速率(qlac)、谷氨酰胺比消耗速率(qgln)和谷氨酸比生产速率(qglu)为指标,考察Vero细胞在不同微载体固定化培养的细胞代谢。结果:Vero细胞在2DMicroHex、Biosilon、Cytodex1和Cytopore1微载体固定化培养7d的活细胞密度分别为18.4×105cells/ml、21.9×105cells/ml、23.9×105cells/ml和16.2×105cells/ml,生长在Cytodex1表面的Vero细胞分布均匀、形态清晰;Vero细胞在不同微载体固定化培养的代谢指标基本相同。结论:Vero细胞在Cytodex1微载体固定化培养的效果优于其它商品化微载体,可作为目前用于病毒疫苗生产的Vero细胞固定化培养的首选微载体。     

基因标记、转化、表达与检测

921682木枪发醉菌树千毕赤醉母的遗传转化〔会,英〕/H。,N .W.Y.…了APpl。Bioehem.Bioteeh-nol一1991,25~29一369一s7e〔译自DBA,1901,10(21),91一12053」 发展了适用于树干毕赤酵母(尸￡。矶。。“娜t-￡。)CBS7126的质粒转化系统。将含有酿酒酵母2一声m复制源和卡那霉素抗性标记的质粒载体(如pUCKms,7.57kb)引导到酵母细胞中,并以染色体外因子的方式稳定遗传。含此载体的转化子能抗G418。从转化子中回收到相同的质粒,拷贝数很高。另外,在相同条件下,大肠杆菌一产阮假丝酵母(Ca:d玄da”‘感l玄s)穿梭载体pLCii(含有该假丝酵母的…     

抗生素和干扰素

922885谷扭欲、菊萄摘、碑酸盐和碱众属离子对合成培并签中的诺卡氏菌产生头娜亲一C的影响〔英〕/Kirp-ekar,A。C。…1 Bioteehnol.Bioeng一1991,35(9)一1100~110。〔译自DBA,1992,11(3),92一01343」一42一将诺卡氏菌Noea,“a lae‘a二‘。ra”5 AT-CC27382的头霉素一C高产突变株分批培养在含合成培养基SM一4的摇瓶和搅拌罐内(27℃),抗生素的产生发生在细胞生长期间,并随着细胞生长的减慢而迅速下降。谷氨酸是细胞生长的重要底物,且消耗迅速。葡萄糖也是这一阶段所需要的,并部分被消耗。在发酵后期,氨与剩余的葡萄糖一起被利用,抗生…     

利用固定化原生质体生产L—谷氨酸

在含有生物素(50μg/L)的培养基中培养的黄色短杆菌(Brevibacterium flavum),经溶菌酶处理后制得其原生质体,再固定在琼脂—乙酰纤维素基质的滤器中。该固定化原生质体可用于葡萄糖、尿素为原料的间歇系统中生产L—谷氨酸。在最佳条件下,其L—谷氨酸的生产能力高于固定化细胞的2.5倍,最大生产能力开始可达到1.5mg/ml。该固定化原生质体能够重复使用六次,其生产能力还能保持初始生产能力的70%左右。     

激素和活性多肽

923629用固定化细胞转化类固醉〔英〕/Schmauder,HP.…产J .Basie Mierobiol一1991,3飞(6)。一453~477仁译自D月A,1992,11(7),92-03743〕 从以下方面综述了固定化细胞转化类固醇(不包括类固醇的侧链降解)(19了5~199。):固定化技术;用固定化细胞(细菌、真菌或植物以及专利方法)转化类固醇;生理学及工程方面;生物物理问题以及雷斯青霉(pe:￡e￡11￡。二,a￡。r,‘。无“)将13一乙基一gon一4一“n一3,17一二酮(GD)系统转变成15一a一经基一13一乙基一9011--4一ell-3,17一二酮(15一OH一GD)的初步实验。此实验初步检测人工膜的生物物理性质,…     

聚氨酯泡沫固定产脂肪酶粗状假丝酵母(Candida valida T2)细胞的研究

对聚氨酯泡沫固定产脂肪酶粗状假丝酵母(Candida valida T2)细胞的固定化条件进行了研究.实验结果表明,聚氨酯泡沫颗粒经密度和粒径筛选,酸碱处理,以及固液比优化,载体固定细胞干质量比达到1571 mg/g,细胞脂肪酶的酶活为每克干细胞1415 U.电镜图片显示粗状假丝酵母菌(Candida valida T2)在载体孔隙内和脊壁上缠绕充盈,生长良好,固定结构稳定.固定化细胞连续催化水解桐籽油5批次,细胞相对水解酶活保持率达73%,固定细胞的损失率为12.5%.固定化细胞颗粒显示出良好的操作稳定性和酶活保持率,为进一步的应用研究提供了实验基础.     

疫苗

920505产生乙型肝炎表面抗原(HB,Ag)的重组体酿酒醉母在分批进料培养中的生长速度控制C英〕/Gu,M .B.…了Appl.Mierobiol.Bioteehnol一109一,35(i)一46~50仁译自DBA,2991,20(13),91一06764〕 含编码乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)质粒的酿酒酵母20B12细胞被培养于含20%葡萄搪、5%酪蛋白氨基酸、5.5%酵母氮碱基、维生素及微量元素的培养基中。控制培养基的添加速度,得到的恒定比生长速率为0.12~0.18/小时。按指数增加培养基速度时,延长指数生长期。以批量培养生产动态为基础的分批进料培养增加HBsAg产量10倍。当比生长速率控制于一个与…     

抗生素和干扰素

920494氮素同化作用对调节抗生素生产的影响〔俄〕/Chi-peva,V.…产Antibiot.Khimioter一1991,36(3)一5~s〔译自DBA,1992,20(22),91-06742〕 研究了在发酵吸水链霉菌(尽加。川。。,。e。甸卯os““州“哪)生产抗生素期间,氮素同化作用途径中酶的活力,这些酶包括谷氨酸脱氢酶(GD-H)、谷氨酞胺合成酶(GS)、谷氨酸合酶(G-OGAT)和丙氨酸脱氢酶(ADH)。将吸水链霉菌155置于含各种N源的培养基(2 09/1葡萄糖、3 .59/IKH:PO‘、0.69/IMgSO‘·了H:O和zml微量元素溶液)中,于28℃、240印m搅拌下培养。没有观察到GDH活性,高浓度的钱和丙氨…     

海藻酸钙凝胶颗粒固定化抗冻酵母AFY-1的机制分析及条件优化

本文旨在开发抗冻酵母AFY-1的海藻酸钙凝胶固定化技术,探明固定化机制。在不同海藻酸钠浓度、Ca Cl2浓度和固化时间条件下制备固定化酵母,并在一定条件下进行乙醇发酵,分析发酵能力与酵母生长、凝胶颗粒通透性之间的关系,然后通过响应面实验优化固定化条件。实验结果显示,乙醇收率随凝胶颗粒通透性的增加呈线性增加,而酵母生长与固定化条件无关,基本保持不变。当固定化条件为海藻酸钠质量分数1.45%、Ca Cl2质量分数17.45%、固化时间1.09 h时,固定化酵母的乙醇收率可达24.1%,高于游离酵母的20.9%。此外,固定化酵母的生长能力明显强于游离酵母。在固定化酵母的乙醇发酵中,每个三角瓶(250 m L)内的总细胞数从5.0×10~8个增加到大约11.2×10~8个;而在游离酵母的乙醇发酵中,每个三角瓶内的总细胞数从5.0×10~8个仅增加到7.5×10~8个。     

利用固定化菌半连续生产微生物絮凝剂的研究

利用多孔聚酯泡沫为载体,进行了微生物絮凝剂产生菌的固定化条件优化和半连续生产絮凝剂的研究。研究发现,利用多孔聚酯可吸附固定XN1菌丝细胞,且能够较长时间保持高的活性。选择载体颗粒0.5cm×0.5 cm×0.5 cm,固液比为6 g/L,接种量105个孢子/mL培养基可达到较好的固定化和产絮凝剂效果。利用最佳固定化条件进行絮凝剂的摇瓶半连续生产实验发现,在最佳条件下,固定化XN1菌产絮凝剂可连续达12批次,且絮凝活性均在90%以上,说明利用多孔聚酯泡沫颗粒作为固定化载体,连续生产絮凝剂的方法是可行的。且和游离菌生产絮凝剂相比,生产效率可提高77.78%。     

激素和活性多肽

890969用固定化的酵母转化细胞连续生产促生长因子(somatomedin)C二英]/sodc,!反.…了气1)I)1 .Miefobioi.13工ot。Chnol一1988,28(卜乱)]988,7(16)一215一221仁译 88一07936]I一)BA 应用酉拟珍。一1目子基囚M上一“一j建构J’一株分泌促生长因子C(S MC)的酿酒酵姆(Saeeharo,n夕e。;e。厂。:i“ae冲封株。将合zJ玄的SMC毯因插人到质粒p254中,得到F一g,处理后得到正确融合的u一}习子分泌质粒ps30/25。将MF一“一l/S MC融合体引入酵姆穿梭载体后,转化酿洒畔毋菌株B.I 199]o在含酪氨酸和色氮酸的51)培养基‘},培养转化细胞。将在含…     

谷子原生质体的分离和培养(简报)

取继代培养后4—5天的谷子(Setariaitalica,品种豫谷一号)悬浮培养细胞,用含2%纤维素酶(Onozuka Rs)和0.1%果胶酶(Pectolyase Y 23)的酶溶液酶解分离原生质体。原生质体纯化后的产量在2—6×10~6原生质体/克鲜重。原生质体在培养2天后形成细胞壁并开始进行分裂。在培养6天时的分裂频率达5—12%。此后随添加新鲜培养基并降低培养基的渗透压,形成细胞团。培养一个月后,可将可见的细胞团转移到附加2,4-D和激动素的MS琼脂培养基上,即形成旺盛生长的愈伤组织。     

微载体浓度与细胞接种密度对ST细胞生长的影响

选择合适的微载体浓度、细胞接种密度以提高微载体利用率,优化微载体培养体系猪睾丸细胞(Swine testicle cells)的贴附生长与维持。使用DMEM补加10%血清、LSM(Low serum medium)两种培养基考察微载体浓度、细胞接种密度对细胞生长维持的影响,进而比较ST细胞在不同条件下对Cytodex1微载体的利用率。结果显示,使用LSM在T150方瓶中连续传代培养30d,平均比生长速率为0.626d~(0-1),是DMEM补加10%FBS培养基的1.15倍。选择10×10~5cells/mL细胞接种3g/LCytodex1搅拌瓶体系,最大细胞密度为38.3×10~5cells/mL,微载体利用率上升到58.8%。在灌注培养体系中培养ST细胞15d,最终细胞密度达到36.6×10~5cells/mL,扩增了13.6倍。微载体悬浮培养的使用一方面有利于ST细胞的贴附与生长,实现高密度生长,另一方面增加了微载体的使用成本,选择合适的微载体浓度、细胞接种密度,能够最大化利用微载体与培养基中的营养物质实现细胞的最优生长。     

陶瓷载体固定化酵母发酵动力学研究

固定化细胞和固定化酶一样,作为固液两相的非均相催化反应系统,其反应速度无疑受到内外扩散的影响。世界各国的化学工程学者在固定化酶反应动力学方面研究得较多,固定化细胞反应动力学研究虽有些报道,但主要集中在以海藻酸钙为载体的固定化系统,且载体形状为球形颗粒。对于其他材料的不同形状颗粒载体的固定化细胞动力学研究报道较少。陶瓷作为固定化细胞载体是我们研究的一种固定化细胞的新型载体,在机械强度,孔径大小,细胞与之结合牢固度及其稳定活性,再生性能方面有其特有的优越性^[10]。为了给在生产实践中使用这种新型载体提供理论依据,本文采用球型陶瓷和拉西环陶瓷为载体固定化酵母,对它们的发酵动力学进行了比较研究。     

组织与原生质体培养

922236种间杂文水稻杂种的花药愈伤诱导及绿色植株的高频再生[英〕/Rout,J.R.…2 Euphytiea一1992,54(2)一155~159〔译自DBA,1991,10 (23),91一13558〕 将种间水稻杂种o,,;a sa‘￡。a LJ.火0.,。-f‘尹0900 Griff.的花药培养在N6和Potato一2培养基上,每一培养基补加7种组合的植物生长因子 (2,4一D、NAA、Kn)和6%(w/v)蔗糖。花药在连续弱光下培养,把2一3周龄的愈伤移到改良MS再生培养基里。所有培养物均保持在23~25℃下。在Potato一2培养基上花药愈伤的诱导率为9.9~23.9%,在N6培养基上为3.9~9.4%。2二g/l NAA最适于愈伤诱导。在两…     

食品上的应用

921561谷氮酸棒杆菌产赖氮酸报乙酸敏感突变株对葡萄箱的利用〔英〕/Costa一Ferreira,M.…/Appl.B ioehem.Bioteehnol一1992,27(3)一251~257〔译自DBA,1991,10(18),91一10571〕 在用亚硝基脏诱变后,由谷氨酸棒杆菌(C。-,梦介ebaete,‘”m 91”￡a仍‘c”仍)ATCC 21513分离出氟乙酸敏感突变株。突变株和亲株在含1009/I葡萄糖一水合物、0.了g/1 KH:PO‘、49/1 KZHP-O‘·3H:O、0 .39/1 MgSO‘·7H:O、连09/l (NH‘):50‘、209/l胰蛋白酶、209/l碳酸钙、smg/1硫胺素和60那g/l生物素的培养基中(PH7.0)于50℃摇瓶(220rpm)培养48hr…     

生物脱硫菌根癌土壤杆菌UP-3的固定化研究

生物脱硫催化剂固定化研究对生物脱硫技术的推广应用具有重要的意义。该文以筛选出的具有脱硫能力的根癌土壤杆菌UP-3为固定化研究对象,二苯并噻吩(DBT)为生物催化脱硫的模型化合物,主要考察了菌株UP-3的培养条件、固定化方法和载体、固定化操作条件和固定化细胞的使用条件。结果表明：以桑特斯培养基在30℃下培养28h的根癌土壤杆菌UP-3具有最佳活性。采用3wt％海藻酸钠水溶液为包埋载体,液菌比为20：1,在4℃下1wt％CaCl2水溶液中固定化24h,得到的固定化细胞脱硫性能最好。在30℃下,反应6d可将浓度为625mg／L的DBT降解60％以上。