吸附精制破伤风类毒素质量改进试验

73年生产之吸附精制破伤风类毒素(简称吸精破类)系用钠法配制的氢氧化铝吸附剂制造的。在生产中由于颗粒大、粘度大、排气慢致使外观不理想,一度停止生产。74年曾对氨水法配制之氢氧化铝吸附剂作了一些小量吸附试验,从外观看较过去钠法吸附剂配制之吸精破类有所改善。但在75年生产中发现用氨法吸附剂配制之吸精破类PH不够稳定,经放置后PH逐步上升,有时可达9.0左右,外观也不够理想,有时也会出现颗粒大等问题。为了解决吸精破类生产当中的上述问题,我们对吸附剂加量、PH、以及精破类的纯度等因素作了一些比较试验,使吸精破类的质量得到了一定的改进,现将试验方法及所得结果报告如下:     

氢氧化铝吸附剂中的铝含量络合滴定法的改进

关于生物制品氢氧化铝吸附剂中的铝含量测定,我们采用双硫腙络合滴定法(1)以来,结果尚为准确。但该法耗费乙醇较多,而且指示剂不够稳定。为此,我们于一九七三年参考有关文献,加以改进,以过氯酸溶解样品,并以二甲酚橙为指示剂进行络合滴定,对精制破类、精制白类、流脑菌苗等氢氧化铝吸附制剂中的铝含量,作了一些测定试验,结果比较满意,现将试验方法与结果介绍如下:     

氢氧化铝佐剂氨水法配制工艺优化

目的:优化氢氧化铝佐剂氨水法配制工艺,提高佐剂质量。方法:优化配制工艺,包括配制过程中增加除菌过滤,提高搅拌转速,恒温等;再将优化前后配制的佐剂进行氨含量、pH、粒径、沉降率、内毒素等检测,根据检测结果进行对比。结果:优化后的氢氧化铝佐剂外观蓝白色悬液,平均粒径分布在275-435nm之间,氨含量检测1/5000,pH在4.7±0.2范围内,不易发生沉淀,内毒素5IU/mg铝,且处于无菌保存状态。结论:工艺优化提高了氢氧化铝佐剂质量,减少了批间差异。     

应用明矾——活性炭吸附法去除静脉注射用人血免疫球蛋白制 …

用活性炭、硅藻土、氢氧化铝、明矾－活性炭四种不同的吸附剂处理静脉注射用人血免疫球蛋白制剂。结果表明,明矾－活动性吸附法去除热原质最有效,同时进一步改善了制品外观,提高了制品纯度,蛋白回收率达到７５％以上,而且毒性试验和安全试验也符合标准。铝离子残余量偏低。     

应用明矾—活性炭吸附法去除静脉注射用人血免疫球蛋白制剂中的热原质

用活性炭、硅藻土、氢氧化铝、明矾—活性炭四种不同的吸附剂处理静脉注射用人血免疫球蛋白制剂。结果表明，明矾—活性炭吸附法去除热原质最有效，同时进一步改善了制品外观，提高了制品纯度，蛋白回收率达到７５％以上，而且毒性试验和安全试验也符合标准。铝离子残余量偏低     

氢氧化铝佐剂制备工艺的建立及其在鼠疫疫苗中的免疫效果评价

目的建立氢氧化铝佐剂制备工艺,并吸附抗原配制鼠疫疫苗,对其进行免疫效果评价。方法采用氯化铝与氢氧化钠反应生成氢氧化铝胶体,通过优化制备工艺,制备出纳米级铝佐剂,并对其进行连续4批质量检测,将其与丹麦ALH铝佐剂在吸附率、沉降率、粒径、配制鼠疫疫苗安全性及免疫原性方面进行比较。结果 4批次氢氧化铝含量平均值为18.67 mg/mL,氯化钠含量平均值为29.60 mg/mL,平均pH为5.66;各批次氢氧化铝佐剂沉降率及吸附率检测结果均符合《中华人民共和国药典》2020版(四部)的检测要求;粒径控制已达到纳米级,平均值为100～600 nm;配制鼠疫疫苗安全性检测结果合格,20200404批铝佐剂与ALH铝佐剂分别配制鼠疫疫苗免疫NIH小鼠,20200404疫苗组V抗体IgG、IgG1抗体效价均高于ALH疫苗组,差异均有统计学意义(P0.000 5);20200404疫苗组V抗体IgG2a抗体效价与ALH疫苗组差异无统计学意义(P0.05);20200404疫苗组与ALH疫苗组F1抗体IgG、IgG1、IgG2a抗体效价差异均无统计学意义(P0.05)。结论成功建立了氢氧化铝佐剂制备工艺,为制备鼠疫疫苗用铝佐剂奠定了基础。     

氢氧化钠法及氢氧化氨法配制氢氧化铝吸附剂应用的外观比较

破伤风原制类毒素改为氢氧化铝吸附精制破伤风类毒素以后,在免疫效果上有一定的提高。在不降低免疫效果的基础上可以减少注射针次,减小注射剂量。但近年来随着注射人数和注射次数的增加,接种后的反应人数也有增加趋势,从生产的角度来考虑,除了减少培养基中的过敏原性物质,提高精制纯度等方法外,吸附剂的配制及物理外观对制品质量也有一定的影响。目前国内氢氧化铝的配制方法有二种:一为氢氧化钠法,一为氢氧化氨法,本文仅就两法所配制的吸附精制破伤风类毒素,从物理外观方面加以比较。     

精制白喉毒素加β—丙氨酸后脱毒效果观察

精制白喉毒素加０．０２Ｍβ—丙氨酸,再加甲醛溶液经适当的时间解毒,即可转化为完全类毒化且无毒性逆转的精制白喉类毒素。此精白类的脱毒试验、毒性逆转试验、安全试验及效力试验均符合《中国生物制品规程》要求。在脱毒过程中絮状单位的损失明显低于单纯甲醛脱毒者,纯度亦相应得到了提高。     

粘盖乳牛肝菌在低磷、酸铝胁迫下的生长和代谢响应

低磷和酸铝胁迫是酸性土壤限制植物生长的主要因素。有研究指出外生菌根(ectomycorrhiza,ECM)可提高宿主植物对铝毒害和低磷胁迫的适应性。然而,目前有关ECM真菌自身对低磷和酸铝环境的适应机理还不清楚。基于此,本研究以我国南方酸性土壤广泛分布的ECM真菌——粘盖乳牛肝菌Suillus bovinus为研究对象,在纯培养条件下研究了低磷、酸铝胁迫对其生长、营养吸收及菌丝分泌物的影响。结果表明,粘盖乳牛肝菌是一种耐铝型真菌,酸铝胁迫(1 mmol/L)不影响其菌丝生长,而低磷胁迫(20 μmol/L)则显著限制其菌丝生长(P<0.05)。值得注意的是,低磷胁迫的抑制效应可被酸铝胁迫逆转。低磷胁迫显著降低了粘盖乳牛肝菌对磷的吸收(P<0.05),而酸铝胁迫则对菌丝钾的吸收有促进作用。低磷、酸铝胁迫同样改变了菌丝分泌物组成。在低磷胁迫下,大量酚酸类、有机酸及脂质代谢物的积累量下调;而酸铝胁迫下则有大量酚酸类物质上调,有机酸和脂质中上调代谢物数量也高于下调数量;低磷酸铝复合胁迫下酚酸和有机酸类代谢物积累量均显著上调。另外,吲哚-3-乙酸(IAA)在各胁迫下均显著上调。以上结果可在一定程度上解释粘盖乳牛菌对低磷、酸铝环境的适应机理,并对后续进一步阐明ECM的共生适应机理有一定指导意义。     

氢氧化铝佐剂的吸附作用可防止抗原降解

正含铝佐剂对多种抗原安全有效,因而广泛应用于商业疫苗中。其中氢氧化铝对抗原的吸附作用,因其涉及机制复杂,且受抗原性质和疫苗配方的影响,是一个复杂的领域。此外,氢氧化铝发挥作用时多种机制同时起作用,本身具有复杂性。相关文献中关于吸附作用影响抗原完整性和稳定性的理论并不统一,有氢氧化铝吸附抗原使其结构保持稳定的报道,也有氢氧化铝吸附抗原使其不稳定的报道。作者运用了一系列物理化学研究方法,如DSC和UPLC,     

一种新的人兽共患传染病——狐狸阴道加德纳氏菌病的研究：VI.阴道加德纳氏茵病灭活疫苗的研制

选用免疫原性优良的我国狐狸阴道加德纳氏菌主要流行型血清Ｉ型ＧＶＦ４４号菌株,先后试验研制了氢氧化铝胶、蜂胶和油佐剂灭活苗。试验结果表明,铝胶苗的安全性优,免疫剂量为４０亿菌／１ｍｌ,３倍免疫剂量的铝胶灭活苗接种狐狸后无任何不良反应,免疫后２１ｄ经１００个ＩＤ５０强毒的攻击,对Ｉ型的保护率达９２％,对Ⅱ、Ⅲ型的保护率达８０％以上。免疫持续期为６个月,４￣１０℃条件下可保存１０个月。通过田间试验应用证     

在氢氧化铝凝胶灭活寨卡病毒疫苗中甲醛残留量的测定方法

<正>建立了一种简便测定氢氧化铝凝胶配制的灭活寨卡病毒疫苗中甲醛残留量的方法,以用于药品质量评价。甲醛与2,4-二硝基苯肼(DNPH)反应,衍生产物用高效液相色谱检测,检测波长为360 nm。衍生化反应可在高效液相色谱中2 mL样品管进行样品直接分析。该方法已根据国际药品注册协调会议Q2指南得到充分验证。氢氧化铝凝胶质量浓度达     

一种新的人兽共患传染病——狐狸阴道加德纳氏菌病的研究 Ⅵ.阴道加德纳氏菌病灭活疫苗的研制

选用免疫原性优良的我国狐狸阴道加德纳氏菌主要流行型血清Ⅰ型GVF44号菌株,先后试验研制了氢氧化铝胶、蜂胶和油佐剂灭活苗。试验结果表明,铝胶苗的安全性优,免疫剂量为40亿菌/1ml,3倍免疫剂量的铝胶灭活苗接种狐狸后无任何不良反应,免疫后21d经100个ID_(50)强毒的攻击,对Ⅰ型的保护率达92％。对Ⅱ、Ⅲ型的保护率达80％以上。免疫持续期为6个月,4～10℃条件下可保存10个月。通过田间试验应用证实该疫苗安全、有效。     

一种新的人兽共患传染病——狐狸阴道加德纳氏菌病的研究 Ⅵ.阴道加德纳氏菌病灭活疫苗的研制

选用免疫原性优良的我国狐狸阴道加德纳氏菌主要流行型血清Ⅰ型GVF44号菌株,先后试验研制了氢氧化铝胶、蜂胶和油佐剂灭活苗。试验结果表明,铝胶苗的安全性优,免疫剂量为40亿菌/1ml,3倍免疫剂量的铝胶灭活苗接种狐狸后无任何不良反应,免疫后21d经100个ID_(50)强毒的攻击,对Ⅰ型的保护率达92％。对Ⅱ、Ⅲ型的保护率达80％以上。免疫持续期为6个月,4～10℃条件下可保存10个月。通过田间试验应用证实该疫苗安全、有效。     

酸沉降下铝毒对森林的影响(综述)

回顾了酸沉降的研究历史,总结了酸沉降对森林生态系统的影响。在此基础上综述了近二十年来酸沉降下铝毒与森林衰亡关系方面的一些研究成果,阐明铝毒是引起森林衰亡的一个重要的因素,并提出了酸沉降影响下铝毒与森林衰亡研究中存在的一些问题。     

无土栽培下酸铝耦合对银杏生长的胁迫效应

本试验采用U₂₀₇均匀设计方案,通过无土栽培方法研究酸铝耦合处理对银杏幼株生长的效应。结果表明,在pH 4.5～5.5范围内,能耐铝（AlCl₃）浓度可达0.4 mmol/L,而高浓度（0.8～1.2 mmol/L）的铝对银杏有毒害作用;pH高于5.0时,提高培养液中铝浓度对银杏生长无明显影响。总之,酸铝耦合加剧对银杏植株的毒害作用,尤其对根系的伤害更为明显,甚至导致烂根死根,从而使地上部停止生长。     

“水稻叶片倾斜法”鉴定油菜素内酯类的两点改进

采用“水稻叶片倾斜法”鉴定油菜素内酯类时有两个问题:一是采用的溶液量少,每个切段得到的液量不均匀,鉴定效果较差;二是方法中采用的马来酸钾是中和反应的产物,制各及配制各处理液时手续繁琐。针对这些,我们采用“广陆矮4号”水稻及从蜂蜡中分离精制的油菜素甾醇为试验材料作民改进,结果如下:     

细菌鞭毛染色法的进一步改进

目前,细菌鞭毛染色存在三方面的困难:准备手续烦琐,染液配制费时且有效期短,染色效果不稳定。为此,我们探讨了改进方法。在两类染色方法中,目前多认为银盐法较碱性复红法优越,我们以前法为基础作了一些改进。     

两种配方的氢氧化铝吸附基因工程乙肝疫苗的效果比较

氢氧化铝［Ａｌ（ＯＨ）３］作为ＷＨＯ 推荐的一种佐剂,已广泛应用于生物制品的各种菌疫苗制剂中。本文对两种不同配方的氢氧化铝吸附基因工程乙肝表面抗原后疫苗的效果进行比较,结果显示：三氯化铝加氢氧化钠配方制备的Ａｌ（ＯＨ）３ 配制工艺简捷,易控制工艺参数及佐剂质量,对疫苗效力的增强作用优于三氯化铝加氨水的配方。     

植物适应酸铝胁迫机理的研究进展

酸铝胁迫是限制植物正常生长发育的重要非生物胁迫因子,严重制约了我国酸性土壤地区的农业生产水平。植物抵御酸铝胁迫的形式复杂多样,如分泌有机酸、提高根际pH、分泌黏液、细胞壁对Al³⁺的固定、有机酸对细胞溶质中Al³⁺的螯合与液泡区隔化等。现有研究多集中于常规生理特征分析,缺乏深入的分子生物学解析。基于此,本文对国内外植物适应酸铝胁迫机理的相关研究进行了归纳和总结,从酸铝胁迫对植物生长与生理代谢的影响、植物适应酸铝胁迫最主要的两种生理机制(Al排除机制、Al耐受机制)以及分子水平上调控相关耐铝基因进行了综述。最后针对现有研究的不足提出了展望,以期为深入揭示植物适应酸铝胁迫的机理以及挖掘适于酸土生长的优质作物资源提供理论依据。