花生壳培养基对香菇菌丝生长的影响

为探讨花生壳对香菇菌丝生长的影响情况,此实验采用固体平板和液体摇瓶培养的方法,研究了花生壳在不同浓度下对香菇菌丝生长的影响。通过测定各处理组的菌丝干重、胞内多糖等生长参数,结果发现香菇在添加适当浓度的花生壳培养基上培养均能促进菌丝的生长,尤其是在30g/L培养基中生长促进效果最明显。因此,花生壳农业废料可为今后废物利用提供技术参考。     

放线菌气生菌丝插片培养方法

放线菌大多为多核单细胞丝状多分枝,菌丝相互交错在一起构成菌丝体。在固体平板培养基表面,有些放线菌(如链霉菌科、高温放线菌科、小多孢菌科和游动放线菌科)可分化出气生菌丝和基内菌丝(营养菌丝)。     

液体培养基培养青霉菌的尝试

霉菌的形态观察,是生物学教育专业的一个基础实验,目的是让学生观察到清晰、完整、保持自然状态的霉菌形态,包括培养基内的营养菌丝、气生菌丝及孢子丝。但通常所采用的固体培养基往往观察不到培养基内清晰的营养菌丝,影响学生对霉菌整体形态的掌握。为此,我们将固体培养基改为液体培养基,取材     

丛枝菌根真菌的垂直平板定时转动培养及菌丝生长观察*

设计了垂直平板定时转动培养方法暗培养丛枝菌根真菌（Gigaspora margarita Becker ＆ Hall）孢子,发现培养基上生长的营养菌丝较少分枝,培养基转动前后生长的菌丝之间有一明显的折点,定时转动所形成的众多折点将延伸菌丝分成若干个节段,使形成的菌丝面局限在易观察的小范围内。此法是诱导菌丝定向生长、测量菌丝长度和生长速度的好方法,为菌丝理化特性和生物学特性的研究提供了实验依据。活跃生长的菌丝,每天生长7.7±0.9mm。试验证明：丛枝菌根真菌菌丝延伸生长部位是菌丝尖端,其生长的向地性是对地心引力的感应,感应的敏感部位也在生长菌丝的尖端。     

不同种质资源蛹虫草菌丝生长特性及其多糖产量的研究

研究本试验中6株不同来源的蛹虫草菌株(150707,150715,150725,150808,52244,51762)的菌丝生长特性及其多糖产量。测定这6株蛹虫草菌丝生长速度、分生孢子产量,利用水提醇沉法提取不同菌株粗多糖。研究发现在不同培养基上不同来源的这6株蛹虫草菌丝生长速度、产分生孢子量、多糖得率不同,在加富PDA培养基上生长速度较快,但是在血平板培养基上孢子产量及多糖得率较优。分析得出150707、52244两个菌株孢子产量和多糖产量相对较高,为优势菌株,血平板培养基为蛹虫草孢子及多糖产量较优培养基。     

龙胆泻肝汤氯仿提取物对白念珠菌VVC临床株菌丝抑制作用研究

目的观察龙胆泻肝汤氯仿提取物(chloroform extracts of Longdan xiegan decoction,CELX)对白念珠菌菌丝形成的影响,探讨其可能的作用机制。方法采用微量稀释法测定龙胆泻肝汤不同溶剂提取物对15株VVC临床株的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC);采用固体培养基和半固体培养基观测菌落形态及菌丝侵袭能力;XTT还原法评价白念珠菌菌丝活性;平板法计数6h内药物对白念珠菌CFU的影响;荧光显微镜下观察菌丝代谢活力;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测其菌丝相关基因:ALS3、SSA1、SUN41、HWP1、UME6和ECE1的表达量。结果 CELX对15株VVC临床株MIC介于32~64mg/L之间,效果优于总提物、石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和水提取物的MIC;256mg/L的CELX能显著抑制菌丝的形成;256mg/L的CELX在固体培养基中可抑制菌落褶皱,在半固体培养基中可抑制菌丝侵袭;qRT-PCR结果显示256 mg/L CELX可使菌丝相关基因ALS3、SSA1、SUN41、HWP1、UME6和ECE1分别下调81.6%、60.2%、69.8%、73.7%、49.5%、52.8%。结论龙胆泻肝汤氯仿提取物(CELX)可通过影响菌丝相关基因的表达来抑制菌丝的形成,从而降低白念珠菌对机体的侵袭力。     

白假丝酵母菌突变株ORF19.2500的功能研究

目的筛选50株白假丝酵母菌基因缺失菌,寻找出对白假丝酵母菌生物被膜形成相关基因,进一步探究白假丝酵母菌生物膜的致病机制。方法利用培养生物被膜的方法筛选50株基因缺失菌;利用XTT法验证所筛选出的白假丝酵母菌突变株ORF19.2500生物被膜形成缺陷;进一步观察ORF19.2500基因缺失菌生长、菌丝形成。结果用XTT法证明白假丝酵母菌突变株orf19.2500生物膜形成缺陷,且生长曲线和滴琼脂平板的方法均提示其生长速率减慢。在spider培养基上白假丝酵母菌突变株orf19.2500不能诱导菌丝形成,但在YPD+10%小牛血清则菌丝形成正常。结论白假丝酵母菌突变株orf19.2500可利用spider培养基缺陷而影响其酵母、菌丝二态性的转化,及其生物被膜的形成。     

维拉帕米增加伊曲康唑体外抗烟曲霉能力

目的探讨临床药物维拉帕米对伊曲康唑体外抗烟曲霉能力的影响。方法在仅含伊曲康唑(ITZ)和含有ITZ与维拉帕米(Vera)的平板上观察烟曲霉菌落生长情况;显微镜下观察烟曲霉在仅含ITZ和两药联合的液体培养基中孢子萌发和菌丝生长情况;使用微量液基稀释法和E-test方法测试两个药物联用后的伊曲康唑对烟曲霉最低抑菌浓度。结果ITZ联用Vera比单用ITZ对烟曲霉菌落生长、菌丝萌发抑制效果更明显,并且显著降低了ITZ对烟曲霉的MIC。结论维拉帕米增加伊曲康唑对烟曲霉的体外抗菌能力。     

猴头菌菌丝富硒特性及富硒深层发酵的研究

为获得高产的富硒猴头菌菌丝体,采用平板法,通过Na_2SeO_3浓度梯度实验,从H2、H99、NK 3种猴头菌中筛选出耐硒品种;以猴头菌菌丝干重为指标,采用单因素试验结合正交试验优化培养基的碳源、氮源、无机盐和维生素,并进一步通过均匀设计试验确定各营养元素的配比;以菌丝干重和有机硒含量为指标,确定深层发酵培养基中Na_2SeO_3的浓度。结果表明:3种猴头菌中H2最耐硒,在含6μg/mL的Na_2SeO_3平板培养基中培养的菌丝适合作为后续研究的菌种;优化的液体培养基成分为5.8%可溶性淀粉、5.8%黄豆粉、0.04%CaCl_2、0.024%VB_1+VB_2+VB_6,此时菌丝干重理论值可达2.37 g/100 mL;当液体培养基含12μg/mL的Na_2SeO_3时,菌丝生长不受抑制,有机硒含量最高,达136.8 mg/kg菌丝。该研究为富硒猴头菌产品的开发和利用奠定了基础。     

苹果盘二孢的分离培养研究

苹果盘二孢Marssonina coronaria引起的褐斑病是造成我国苹果树早期落叶的主要原因,由于该病菌分离培养困难,阻碍了对其生物学特性的研究,进而影响了对其防治机理和流行规律的研究。本研究应用4种培养基质,探索了3种方法对苹果盘二孢的分离效果。结果表明,3种方法均可分离到病原菌,但组织块分离法和分生孢子团分离法成功率仅有10%左右,而单孢分离法污染少,成功率高达到90%以上,明显优于其他两种方法。不同培养基上菌落形态、大小和产孢情况差异也很大,培养1个月(25℃)后PDA上菌落黑褐色隆起,表面蚯蚓粪状,无气生菌丝,无子实体和基内菌丝;10%V8培养基上菌落中央隆起,黑褐色,表面生少量气生菌丝,边缘放射状,基内菌丝深褐色,有子实体;苹果叶片葡萄糖琼脂培养基(LDA)上菌落平坦,黄褐色,表面生茂密的金黄色气生菌丝,基内菌丝深褐色,有子实体;苹果叶片煎汁葡萄糖琼脂培养基(LEDA)上菌落有明显的不规则隆起,黄褐色至黑褐色,表面生少许气生菌丝,菌落生长缓慢,无基内菌丝,分生孢子盘菌落表面生,菌落直径仅2mm左右,而在其他培养基上的菌落直径可达6-8mm,说明培养基质、分离方法均对苹果盘二孢的分离培养和生长发育有明显的影响。     

苹果盘二孢Marssonina coronaria的分离培养研究

苹果盘二孢Marssonina coronaria引起的褐斑病是造成我国苹果树早期落叶的主要原因,由于该病菌分离培养困难,阻碍了对其生物学特性的研究,进而影响了对其防治机理和流行规律的研究.本研究应用4种培养基质,探索了3种方法对苹果盘二孢的分离效果.结果表明,3种方法均可分离到病原菌,但组织块分离法和分生孢子团分离法成功率仅有10%左右,而单孢分离法污染少,成功率高达到90%以上,明显优于其他两种方法.不同培养基上菌落形态、大小和产孢情况差异也很大,培养1个月(25℃)后PDA上菌落黑褐色隆起,表面蚯蚓粪状,无气生菌丝,无子实体和基内菌丝;10%V8培养基上菌落中央隆起,黑褐色,表面生少量气生菌丝,边缘放射状,基内菌丝深褐色,有子实体;苹果叶片葡萄糖琼脂培养基(LDA)上菌落平坦,黄褐色,表面生茂密的金黄色气生菌丝,基内菌丝深褐色,有子实体;苹果叶片煎汁葡萄糖琼脂培养基(LEDA)上菌落有明显的不规则隆起,黄褐色至黑褐色,表面生少许气生菌丝,菌落生长缓慢,无基内菌丝,分生孢子盘菌落表面生,菌落直径仅2mm左右,而在其他培养基上的菌落直径可达6-8mm,说明培养基质、分离方法均对苹果盘二孢的分离培养和生长发育有明显的影响.     

阿魏菇菌糠提取液对四种食用菌菌丝生长的影响

目的:解决菌糠再利用技术问题.方法:采用平板培养法,对在PDA培养基中加入不同体积比的阿魏菇菌糠提取液对鸡腿菇、香菇、杏鲍菇和金针菇菌丝生长的影响进行了研究.结果:当PDA培养基中菌糠提取液加入量为10%～50%时,对香菇和金针菇菌丝生长有促进或明显促进作用;而加入量为10%的菌糠提取液对杏鲍菇菌丝生长无显著影响,但当阿魏菇菌糠提取液加入量大于10%时,明显抑制杏鲍菇和鸡腿菇的菌丝生长.结论:可利用阿魏菇菌糠作为栽培香菇和金针菇的培养料.     

高山被孢霉的基因组及转录组的提取技术研究北大核心CSCD

基因组和转录组的高通量测序对样品的纯度和含量要求较高,旨在通过研究高山被孢霉在不同培养条件下和采用不同菌丝处理方法对其基因组和转录组质量的影响来确定最佳提取方式。结果表明,PDA培养基培养的菌丝与发酵培养基培养的菌丝经基因组提取后在琼脂糖凝胶电泳中有明显不同的表现,使用发酵培养基培养的菌丝提取的基因组DNA无降解,而以PDA培养基培养的菌丝提取的基因组DNA出现部分降解。在使用国产试剂盒做高山被孢霉转录组RNA提取实验中发现,使用液氮速冻后破碎菌丝并结合使用β-疏基乙醇更易提取到高浓度且无降解的转录组样品。     

高山被孢霉的基因组及转录组的提取技术研究

基因组和转录组的高通量测序对样品的纯度和含量要求较高,旨在通过研究高山被孢霉在不同培养条件下和采用不同菌丝处理方法对其基因组和转录组质量的影响来确定最佳提取方式。结果表明,PDA培养基培养的菌丝与发酵培养基培养的菌丝经基因组提取后在琼脂糖凝胶电泳中有明显不同的表现,使用发酵培养基培养的菌丝提取的基因组DNA无降解,而以PDA培养基培养的菌丝提取的基因组DNA出现部分降解。在使用国产试剂盒做高山被孢霉转录组RNA提取实验中发现,使用液氮速冻后破碎菌丝并结合使用β-疏基乙醇更易提取到高浓度且无降解的转录组样品。     

一种观察放线菌气生菌丝的简单方法

放线菌是由纤细的菌丝所形成的单细胞菌丝体。菌丝体又包括二个部分,潜入在培养基中的为营养菌丝(亦称为基内菌丝);生长在培养基表面的为气生菌丝,气生菌丝分化出形成孢子的菌丝称作孢子丝。孢子丝的形状可呈螺旋形、波浪弯曲形或分枝状等。孢子丝的形状常常作为分类的重要依据。     

玻璃纸琼脂平板透析法的改进

玻璃纸琼脂平板透析法在霉菌、放线菌的形态观察中经常用到，但以往的操作步骤繁琐，污染机率高。经改进后，操作简单，成功率高。改进后的制作过程如下：首先制备液体培养基（不加琼脂、其它成分不变），然后取培养皿加入２～３层与培养皿底部大小相同的圆形滤纸。根据培...     

氨基酸对白念珠菌形态学影响的研究

目的初步探讨单个氨基酸对白念珠菌形态学的影响。方法用0．67％的酵母氮源基础培养基和2％葡萄糖配制成SD合成培养基,37％恒温摇床培养,研究单个天然氨基酸对白念珠菌形态学的影响,并分别通过不添加碳源和厌氧条件下培养观察对精氨酸诱导的菌丝的影响。结果在含10mmol／L的L－精氨酸的SD液体培养基中,可见大量的菌丝。在含10mmol／L的L一半胱氨酸、L．苏氨酸、L－缬氨酸和L－色氨酸的sD液体培养基中,可见典型的酵母细胞,未见菌丝。在含10mmol／L的其他单个氨基酸的SD液体培养基中可见混合的酵母和菌丝结构。在不含氨基酸或含各种天然氨基酸的SD固体培养基上,白念珠菌的菌落均光滑。但在含10mmol／L的L-精氨酸固体培养基上,光滑的菌落周围可见小的突起,镜下可见菌丝。无氧条件下,无论有无碳源,含精氨酸的SD培养液中白念珠菌只能形成酵母细胞,生长部分受到抑制。结论精氨酸可以诱导白念珠菌菌丝形成,厌氧条件下精氨酸不能诱导白念珠菌菌丝形成。     

尖顶羊肚菌液体培养基质与条件的研究

通过对尖顶羊肚菌液体培养基质与条件的研究,明确其菌丝生长的最适pH值、最适温度、适宜光照条件、适宜葡萄糖和蛋白胨浓度、适宜培养基,以便应用于尖顶羊肚菌液体菌种的生产和工业发酵。结果表明:菌丝的最适生长温度为2 5℃;最适生长pH值为6 ;葡萄糖和蛋白胨最适浓度分别为2 0 0g/L和10g/L ;菌丝在黑暗环境下生长良好,光照对菌丝生长具有抑制作用;用胡萝卜酵母膏培养基振荡培养形成的菌丝球多,菌丝生长量大;菌丝球在不同培养基中生长,可引起培养液pH值的上升或者下降;菌丝球可利用培养基内的氨基酸,使氨基酸降解,在胡萝卜酵母膏培养基中振荡培养8d的菌液总氨基酸含量较原液减少了36 71% ,亮氨酸、异亮氨酸和甲硫氨酸含量的下降幅度最大     

大蒜素对白念珠菌形态转换的影响研究

目的探讨大蒜素对白念珠菌形态转换的影响及其作用机制。方法倒置显微镜观察白念珠菌菌丝形成的体外动力学过程;采用CLSI-M27-A3微量液基稀释法检测大蒜素对白念珠菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC);倒置显微镜观察不同浓度大蒜素对白念珠菌在Spider液体培养基中菌丝形成的影响;qRT-PCR法检测在不同浓度大蒜素作用下白念珠菌菌丝相关基因HWP1、ALS1、EFG1、PDE2表达水平的变化。结果白念珠菌在Spider液体培养基中6 h时出现较长菌丝,24 h后镜下可见大量念珠菌菌丝包裹酵母细胞,紧密交错;大蒜素对白念珠菌的MIC值为25μg/mL;倒置显微镜观察(25~100)μg/mL浓度的大蒜素能明显抑制Spider液体培养基中白念珠菌菌丝的生长;qRT-PCR结果显示,在(25~100)μg/mL浓度的大蒜素作用下,白念珠菌菌丝相关基因表达下调。结论大蒜素能有效抑制白念珠菌的形态转换,其作用机制可能与调节菌丝形成相关基因的表达水平有关。     

致病真菌对甲侵袭性的体外初步研究

目的观察不同致病真菌在体外对甲板的侵袭能力。方法将分离自甲真菌病患者的致病真菌包括白念珠菌、红色毛癣菌和短帚霉,接种到沙堡培养基中,同时将灭菌甲板埋植入接种处。第28d时,取出甲板,进行病理切片,观察真菌对甲板的侵袭能力。结果病理显示接种于红色毛癣菌及短帚霉的甲板内可见菌丝生长,而接种于白念珠菌的甲板内无菌丝生长。结论皮肤癣菌和霉菌可以在甲板内侵袭生长,而白念珠菌对甲板无侵袭能力。