scFv17改善12月龄三转基因小鼠步态的作用

目的：观察PS1M146V/APPswe/tauP301L三转基因阿尔茨海默病（AD）（3xTg-AD）模型小鼠的步态改变以及探究scFv17对其的改善作用。方法：本实验首先选用6月龄3xTg-AD小鼠（n=18）和C57BL/6野生型（WT）小鼠（n=24）,观察记录它们的步态行为,在12月龄时发现3xTg-AD小鼠的步态严重受损后,将上述两种小鼠随机分为野生型对照组（WT+PBS）（n=12）、野生型给药组（WT+scFv17）（n=12）、3xTg-AD对照组（3xTg-AD+PBS）（n=9）以及3xTg-AD小鼠给药组（3xTg-AD+scFv17）（n=9）四组。采用鼻饲方法,每次给予每只小鼠20 μl的scFv17（1.5 mg/kg）或者等体积的PBS （0.01 mol/L）,每周两次,连续给药12周后进行步态行为测试及小脑病理学检测。结果：与同月龄野生型小鼠比较,12月龄3xTg-AD小鼠后爪步幅宽度增大（P<0.01）,摇摆时间百分比减小（P< 0.01）,站立时间百分比增大（P<0.01）,运动协调和平衡能力严重受损;scFv17可改善12月龄3xTg-AD小鼠运动协调和平衡能力（P<0.01）,改善3xTg-AD小鼠小脑浦肯野细胞的形态结构,增多3xTg-AD小鼠小脑浦肯野细胞的尼氏小体（P<0.01）,减少3xTg-AD小鼠小脑皮层内淀粉样β蛋白（Aβ）斑块和浦肯野细胞胞内神经原纤维缠结（NFT）（P<0.01）。结论：3xTg-AD小鼠在12月龄时的运动协调和平衡能力明显受损,给予scFv17可明显改善12月龄3xTg-AD小鼠的步态紊乱,其作用机制可能与改善小脑浦肯野细胞结构与蛋白功能,减少Aβ斑块和NFT有关。     

高脂饮食及运动对2型糖尿病大鼠脂联素、瘦素及血糖水平的影响

目的：观察高脂饮食及运动对糖尿病大鼠脂联素、瘦素及血糖水平的影响。方法：选取SD清洁大鼠80只,雌雄各半,随机分为5组（n=16）：空白对照组（A）,普通饮食组（B）,高脂饮食组（C）,普通饮食干预组（普通饮食+运动干预,D）,高脂饮食干预组（高脂饮食+运动干预,E）;除空白组外,其余四组均给予高糖高脂饲料喂养6周后,腹腔链脲佐菌素（30 mg/kg）制备2型糖尿病模型（T2DM）;大鼠建模后,空白组、普通饮食组及普通饮食干预组给予常规饲料,高脂组及高脂饮食干预组大鼠给予高脂饲料,普通饮食干预组及高脂饮食干预组给予运动干预,采用滚筒训练器进行运动,运动频率为每天1次,每周6次,持续6周。6周后测量大鼠脂联素、瘦素、血糖及相关生化指标。结果：除空白组外,其余四组大鼠实验后脂联素水平明显降低（P<0.05）、瘦素、血糖、糖化血红蛋白、甘油三酯明显升高（P<0.05）;高脂饮食组大鼠瘦素、血糖、糖化血红蛋白、甘油三酯水平明显高于高脂饮食干预组（P<0.01）;高脂饮食干预组大鼠瘦素、血糖、糖化血红蛋白、甘油三酯水平高于普通饮食组（P<0.05）;普通饮食组瘦素、血糖、糖化血红蛋白、甘油三酯水平高于普通饮食干预组（P<0.05）;T2DM大鼠模型各组瘦素、血糖、糖化血红蛋白、甘油三酯水平均明显高于对照组（P<0.01）。高脂饮食组大鼠脂联素水平明显低于高脂饮食干预组（P<0.01）;高脂饮食干预组脂联素水平低于普通饮食组（P<0.05）;普通饮食组脂联素水平低于普通饮食干预组（P<0.05）;T2DM大鼠模型各组脂联素水平均明显低于对照组（P<0.01）。脂联素与血糖,瘦素与血糖均有相关性（R<-0.06/R>0.06,P<0.05）。结论：严格的饮食控制及运动有助于控制2型糖尿病大鼠血糖水平的稳定,其可能与控制调节大鼠体内瘦素及脂联素水平有关。     

苦参碱对大鼠乳腺癌细胞荷瘤生长及其炎性因子与免疫功能的影响

目的：探讨苦参碱对大鼠乳腺癌细胞荷瘤大鼠生长及其炎性因子与免疫功能的影响。方法：雌性Wistar大鼠60只,随机分为对照组（n=10）,乳腺癌细胞荷瘤大鼠建模组（n=50）。建模大鼠再随机分为5组（n=10）：模型组、苦参碱低（50 mg/kg）、中（100 mg/kg）、高（200 mg/kg）剂量组和香菇多糖（200 mg/kg）组。除对照组外,每只大鼠右腋皮下接种0.4 ml Walker 256乳腺癌细胞悬液（5×10⁷ cells/ml）。按10 ml/kg的体积腹腔注射给药,2次/日,连续14 d。14 d后麻醉大鼠,腹主动脉取血,取瘤组织称取质量,计算抑瘤率;检测大鼠外周血IL-2、IFN-γ、IL-6、IL-10、TGF-β、CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、IgG、IgM、IgA水平。结果：苦参碱低、中、高剂量组和香菇多糖组大鼠瘤块平均质量分别为（4.99±0.93）g、（4.52±0.92）g、（4.22±1.18）g、（4.52±0.92）g,与模型组（6.62±1.20）g比较均明显降低（P<0.01）。苦参碱各剂量组与香菇多糖组比较,瘤块平均质量无明显差异（P>0.05）。苦参碱低、中、高剂量组和香菇多糖组抑瘤率分别为24.6%、31.7%、36.3%和27.9%,组间无统计学差异。模型组大鼠IL-2、IFN-γ、CD8⁺较对照组明显降低（P<0.01）;而IL-6、IL-10、TGF-β、CD3⁺、CD4⁺、IgG、IgM、IgA较对照组明显升高（P<0.01）。苦参碱低、中、高剂量组和香菇多糖组IL-2、IFN-γ、CD8+较模型组显著升高（P<0.01,P<0.05）;而IL-6、IL-10、TGF-β、CD3⁺、CD4⁺、IgG、IgM、IgA较模型组明显降低（P<0.01,P<0.05）。与香菇多糖组比较,苦参碱低、中剂量组IgM、IgA明显升高（P<0.01,P<0.05）;高剂量组IL-2和IFN-γ、IgA水平明显升高（P<0.01,P<0.05）;低剂量组IFN-γ水平明显降低（P<0.05）;高剂量组IL-10、CD4⁺水平明显降低（P<0.01,P<0.05）。结论：苦参碱具有明显的抑制肿瘤生长的作用,其抑瘤机制与其提高细胞和体液免疫、减轻炎症反应有关。     

重组水蛭素的抗血栓形成作用及其机制

目的：研究重组水蛭素抗血栓形成的作用及机制。方法：将60只雄性昆明小鼠随机分为对照组、模型组、阿司匹林组和重组水蛭素低、中、高剂量组（n=10）。除对照组外,其余各组小鼠分别腹腔注射角叉菜胶2.5 mg/kg,诱发小鼠尾部血栓形成。注射角叉菜胶前24 h、0.5 h和注射后24 h,阿司匹林组小鼠分别腹腔注射阿司匹林25 mg/kg,重组水蛭素低、中、高剂量组小鼠分别腹腔注射0.05、0.1、0.2 mg/kg重组水蛭素,对照组和模型组小鼠分别腹腔注射等体积生理盐水。注射角叉菜胶后48 h,观察小鼠黑尾长度并计算黑尾发生率;检测血浆凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、组织型纤溶酶原激活剂（t-PA）、纤溶酶原激活物抑制因子-1（PAI-1）、6-酮-前列腺素F1α（6-keto-PGF1α）、血栓恶烷B2（TXB2）水平。结果：与对照组比较,模型组小鼠尾部形成血栓;血浆PT明显缩短（P<0.01）,PAI-1、TXB2水平明显升高（P<0.01）,t-PA、6-keto-PGF1α水平明显降低（P<0.01）。与模型组比较,重组水蛭素低、中、高剂量组和阿司匹林组小鼠尾部血栓长度明显缩短（P<0.05或P<0.01）,PT明显延长（P<0.01）,PAI-1、TXB2水平明显降低（P<0.01）,t-PA、6-keto-PGF1α水平明显升高（P<0.01）。与阿司匹林组比较,重组水蛭素低剂量组小鼠尾部血栓长度明显增加（P<0.05）,PT明显缩短（P<0.01）,PAI-1、TXB2水平明显升高（P<0.01）;重组水蛭素低、中剂量组6-keto-PGF1α水平明显降低（P<0.01,P<0.05）;重组水蛭素中剂量组PAI-1、TXB2水平明显升高（P<0.01,P<0.05）。结论：重组水蛭素有明显抗血栓形成作用,其机制可能与影响外源性凝血系统、促进纤溶功能有关。     

EPO对高脂喂养小鼠棕色脂肪组织PRDM16、FGF21表达及STAT3磷酸化水平的影响

目的：探索促红细胞生成素（EPO）对高脂饲料（HFD）喂养小鼠血糖和血浆胰岛素水平、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、糖耐量,以及棕色脂肪组织中含PR结构域蛋白16（PRDM16）、信号转导与转录激活因子3（STAT3）磷酸化水平（p-STAT3/STAT3）、成纤维细胞生长因子21（FGF21）mRNA以及蛋白质表达的影响,为肥胖及其并发症的发生机制提供线索。方法：20只高脂饲料喂养的C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组（HFD-Con）和EPO组（HFD-EPO）,两组分别腹腔注射生理盐水和EPO（200 IU/kg）,每周3次,连续4周。4周后检测两组动物的体重、血糖与血浆胰岛素水平、HOMA-IR及糖耐量的变化;分别使用实时定量PCR法和Western blot法检测棕色脂肪组织中PRDM16、STAT3、FGF21 mRNA和蛋白质水平。结果：腹腔注射EPO 4周后,HFD-EPO组小鼠体重为（26.65±0.85）g,HFD-Con组体重为（31.50±1.60）g,P<0.01。HFD-Con组血糖为（91.06±9.86）mg/dl,HFD-EPO组为（62.79±8.09）mg/dl,P<0.01;HFD-EPO组小鼠血浆胰岛素水平为（10.56±1.06）μU/ml,HFD-Con组为（13.2±1.1）μU/ml,P<0.01。与HFD-Con组比较,HFD-EPO组的糖耐量水平显著改善,胰岛素抵抗指数下降;HFD-EPO组动物棕色脂肪组织中PRDM16、FGF21mRNA以及蛋白质表达,p-STAT/STAT3水平均显著增加,两组小鼠肝脏中FGF21 mRNA含量、血浆中FGF21含量无明显差异。结论：EPO可能通过增加棕色脂肪组织中PRDM16表达促进棕色脂肪组织的分化,降低高脂喂养小鼠的血糖水平、改善高脂喂养小鼠的糖代谢状态。     

高脂食物诱导的肥胖小鼠不同脑区即刻早期蛋白和酪氨酸羟化酶的变化

目的：在高脂食物诱导肥胖的小鼠中检测多巴胺神经元的表达。方法：10只雄性小鼠饲喂高脂膳食作为高脂食物组（HFD）,10只雄性小鼠饲喂10%脂肪膳食作为对照组（NCD）。实验第10周,小鼠禁食12 h后称重,尾静脉取血测定基础血糖水平;实验11周进行葡萄糖耐受（GTT）测试和胰岛素抵抗实验（ITT）;实验12周,动物禁食4 h后处死,测定血清胰岛素和瘦素（leptin）浓度,免疫组织化学法检测即刻早期蛋白（c-Fos-ir）和酪氨酸羟化酶（TH-ir）的表达。结果：饲喂12周高脂食物后,HFD组体重明显增加。GTT测试显示HFD组在15 min和30 min血糖浓度均明显高于NCD组（P<0.05）。ITT测试显示HFD组在15 min和30 min血糖浓度均显著高于NCD组（P<0.05）。同时,禁食后,HFD组的胰岛素浓度和leptin浓度显著高于NCD组（P<0.01）。免疫组化结果表明HFD组在伏隔核、下丘脑室旁核、腹侧背盖区和黑质的c-Fos-ir细胞数均明显多于NCD组（P<0.01）,且腹侧被盖区和黑质的TH-ir和共表达TH/Fos-ir细胞也显著多于NCD组（P<0.01）。而且HFD组VTA区和SN区TH-ir的细胞数与HFD组小鼠的终体重呈正相关（P<0.05）。结论：长期饲喂高脂食物导致的肥胖与奖赏系统多巴胺神经元的可塑性有关。     

AdipoRon对2型糖尿病小鼠肾脏损伤的干预作用

目的：研究脂联素受体激动剂（AdipoRon）对2型糖尿病小鼠肾脏损伤的干预作用。方法：将40只SPF级雄性C57/BL6小鼠随机分为正常对照组（n=10）和实验组（n=30）：实验组给予高糖、高脂饲料喂养,联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素（STZ）建立2型糖尿病（T2DM）小鼠模型,再随机分为3组（n=10）：模型对照（DM）组、低剂量AdipoRon治疗（DM+L）组及高剂量AdipoRon治疗（DM+H）组。检测血清中葡萄糖含量的变化;采用酶联免疫法检测小鼠血清中胰岛素受体（INSR）、胰岛素受体底物-1（IRS-1）以及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的蛋白质含量;HE染色镜下观察肾组织形态学变化;实时荧光定量PCR法检测肾组织胰岛素促进因子-1（PDX-1）和胰岛素（insulin）mRNA的表达;Western blot检测肾组织内磷酸化胰岛素受体底物-1（p-IRS-1）蛋白质;ELISA试剂盒检测小鼠血胰岛素含量。结果：病理学检查表明,AdipoRon可减轻2型糖尿病所致小鼠肾脏损伤。与DM组小鼠比较,DM+H组和DM+L组小鼠血糖、TNF-α水平均显著降低（P<0.05）,INSR、IRS-1和p-IRS-1表达显著上升,PDX-1和insulin mRNA表达显著上升（P<0.05,P<0.01）。结论：给予AdipoRon治疗的小鼠血糖和血清TNF-α水平显著降低,INSR,IRS-1和p-IRS-1蛋白质含量,PDX-1和insulin mRNA表达均显著上升,表明AdipoRon对2型糖尿病小鼠肾脏损伤有一定的干预作用。     

有氧运动联合破壁蛋白核小球藻对高脂膳食大鼠脂代谢某些指标的影响

目的：研究有氧运动联合破壁蛋白核小球藻对高脂膳食大鼠脂代谢某些指标的影响。方法：55只雄性Wistar大鼠经过适应性饲养4 d后进行3 d、20 min/d的无负重游泳训练,筛选淘汰5只不适应游泳训练的大鼠后,按体重以数字随机分组法分为5组：普通膳食+安静对照组（C组）、高脂膳食+安静对照组（H组）、高脂膳食+小球藻+安静对照组（HC组）、高脂膳食+有氧运动组（HM组）、高脂膳食+有氧运动+小球藻组（HMC）,每组10只。HM组和HMC组进行6周每周6次60 min/d的无负重游泳训练。C组大鼠以普通饲料常规喂养;其余各组以高脂饲料喂养;HC组和HMC组大鼠灌胃破壁小球藻1次,灌胃剂量为3.9 g/（kg·d）,灌胃体积为5 ml/kg,其余各组ig等量生理盐水。6周后,测定大鼠Lee’s指数,取血、肝脏检测相关生化指标。结果：与C组比较,H组Lee’s指数,血清FFA、IL-6、TNF-α、TC、TG、LDL-c,肝脏FFA、IL-10显著升高（P<0.01）;血清HDL-c水平显著降低（P< 0.01）。与H组比较,HC、HM、HMC组Lee’s指数,血清FFA、IL-6、TNF-α、TC、TG、LDL-c,肝脏FFA、IL-10显著降低（P<0.05或P<0.01）;血清HDL-c水平显著升高（P<0.05或P<0.01）。与HC、HM组比较,HMC组Lee’s指数,血清FFA、IL-6、TNF-α、TC、TG、LDL-c,肝脏FFA、IL-10显著降低（P<0.05）;血清HDL-c水平显著升高（P<0.05）。结论：有氧运动和破壁蛋白核小球藻干预能够不同程度改善高脂膳食大鼠脂代谢,降低肥胖对肝脏造成的脂毒性。其中联合干预较单一干预更为有效。     

川芎嗪对模拟失重大鼠颈动脉平滑肌Ca2+敏感性的影响

目的：探讨川芎嗪对模拟失重大鼠颈动脉平滑肌收缩蛋白Ca²⁺敏感性的影响及机制。方法：21只雌性SD大鼠分为对照组（CON）、模拟失重组（TS）、模拟失重+川芎嗪灌饲组（LTZ）（n=7）。4周后测定大鼠颈动脉收缩性、收缩蛋白Ca²⁺敏感性及肌球蛋白轻链激酶抑制剂ML-7对以上指标的影响。结果：TS组苯肾上腺素（PHE）收缩力比CON组高25.14%（P<0.01）,LTZ组较TS组低13.46%（P<0.01）,较CON组高8.30%;ML-7可使CON、TS、LTZ组PHE收缩力分别降低8.84%、16.24%（P<0.01）和3.40%;TS组KCl收缩力比CON组高40.46%（P<0.01）,LTZ组较TS组低18.80%,较CON组高14.05%;ML-7可使CON、TS、LTZ组KCl收缩力分别降低21.97%（P<0.05）、21.88%（P<0.01）和10.84%;TS组pD2[Ca²⁺]比CON组高10.03%（P<0.01）,LTZ组较TS组低7.01%（P<0.01）,较CON组高2.32%;ML-7可使CON、TS、LTZ组pD2[Ca²⁺]分别降低2.42%、7.43%（P<0.01）和2.51%。结论：模拟失重大鼠颈动脉收缩增强可能是由动脉平滑肌收缩蛋白Ca²⁺敏感性增强所导致的。川芎嗪可改善模拟失重大鼠颈动脉的收缩功能,其机制可能与抑制血管平滑肌肌球蛋白轻链激酶继而降低Ca²⁺敏感性有关。     

熊果酸对糖尿病小鼠肝损伤的作用及其可能机制

目的：研究熊果酸对高脂饲料联合链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病小鼠肝损伤的影响,探讨其可能的作用机制。方法：随机选取20只小鼠高脂饲料喂养6周后,STZ （30 mg/kg）腹腔注射连续5 d,9 d后测空腹血糖,大于11.1 mmol/L视为糖尿病模型,将其随机分为模型组和熊果酸组（100 mg/kg）（n=10）;另取10只小鼠设为对照组。连续给药8周。小鼠称重,测定空腹血糖（FBG）,血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）含量,谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、超氧化物歧化酶（SOD）活性,丙二醛（MDA）含量,HE染色观察肝组织病理变化。结果：模型组与对照组比较,FBG、血清TC、TG含量,ALT、AST活性、MDA含量明显升高（P<0.05,P<0.01）;SOD活性明显降低（P<0.01）;HE染色显示部分肝细胞水肿,轻度脂肪变性,门管区可见淋巴细胞浸润。熊果酸组与模型组比较,FBG,血清TC、TG含量,ALT、AST活性、MDA含量明显降低（P<0.05,P<0.01）;SOD活性明显升高（P<0.01）;HE染色显示熊果酸组肝细胞排列较为整齐,水肿不明显,淋巴细胞少量存在。结论：熊果酸对高脂饲料联合STZ诱导的糖尿病小鼠肝损伤具有保护作用,其机制可能与降血糖、调节血脂、降低肝组织氧化应激水平,提高肝脏抗氧化能力有关。     

低氧性肺动脉高压小鼠肺组织apoE蛋白表达的变化及其意义

目的：观察低氧性肺动脉高压小鼠肺组织中载脂蛋白E（apoE）蛋白表达的变化,以探讨低氧性肺动脉高压形成过程中apoE蛋白表达的变化及可能的意义。方法：SPF级雄性野生型（WT）C57BL/6小鼠和雄性apoE基因敲除（apoE-KO）小鼠各20只,各随机再分为2组（n=10）：常氧组和低氧组,共4组。常压连续低氧3周（9%~11% O₂,23 h/d）复制慢性低氧性肺动脉高压模型,采用右心导管法测定小鼠右心室压（RVSP）,计算右心室与左心室加室间隔重量比RV/（LV+S）,ELISA法检测血浆中高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）和总胆固醇（TC）的含量;Western blot法检测肺组织中apoE和过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）蛋白的表达。结果：①低氧组WT小鼠RVSP、RV/（LV+S）分别较常氧组高68%和59%（P均<0.05）,血浆中HDL含量及HDL/LDL比值分别较常氧组低17%和40%（P均<0.05）,同时肺、肝组织中apoE及肺组织中PPARγ的蛋白表达分别较常氧组下调48%、52%和37%（P均<0.05）,RVSP与apoE及PPARγ蛋白表达均呈显著负相关（P均<0.01）;②低氧组apoE-KO小鼠RVSP、RV/（LV+S）较常氧组分别高96%和86%（P均<0.05）,低氧组apoE-KO小鼠RVSP和RV/（LV+S）较低氧组WT小鼠分别高29%和24%（P均<0.05）。结论：小鼠低氧性肺动脉高压的形成与肺组织中apoE蛋白表达下调有关。     

Aged wild-type littermates and APPswe+PS1/ΔE9 mice present similar deficits in associative learning and spatial memory independent of amyloid load

APPswe+PS1/ΔE9 transgenic (Tg) mice with Aβ plaque formation in neocortex and hippocampus were evaluated in tests measuring exploratory activity, anxiety, and memory ability using open field test (OFT), Y-maze, contextual fear conditioning (CFC), and Morris water maze (MWM). Wild type (WT) and Tg mice over eight months old showed same locomotion activity and anxiety level in novel stimulation, open field, and Y-maze contexts. In other experiments that measured associative memory and spatial memory in Tg mice and their littermates, the subjects also presented similar deficiencies in memory acquisition. These two aged groups showed abnormal freezing level variance especially in CFC test. In comparison to that in non-transgenic 8-week-old mice group, the acquisition of spatial memory in MWM task was impaired in aged WT and bigenic Tg mice. Taken together, aged wild-type littermates and Tg mice present similar deficits in associative learning and spatial memory independent of amyloid plaques.     

Treatment of Alzheimer's Disease with Anti-Homocysteic Acid Antibody in 3xTg-AD Male Mice

Alzheimer''s disease (AD) is an age-associated progressive neurodegenerative disorder with dementia, the exact pathogenic mechanisms of which remain unknown. We previously reported that homocysteic acid (HA) may be one of the pathological biomarkers in the brain with AD and that the increased levels of HA may induce the accumulation of intraneuronal amyloid-beta (Aβ) peptides. In this study, we further investigated the pathological role of HA in a mouse model of AD. Four-month-old prepathological 3xTg-AD mice exhibited higher levels of HA in the hippocampus than did age-matched nontransgenic mice, suggesting that HA accumulation may precede both Aβ and tau pathologies. We then fed 3-month-old 3xTg-AD mice with vitamin B6-deficient food for 3 weeks to increase the HA levels in the brain. Concomitantly, mice received either saline or anti-HA antibody intraventricularly via a guide cannula every 3 days during the course of the B6-deficient diet. We found that mice that received anti-HA antibody significantly resisted cognitive impairment induced by vitamin B6 deficiency and that AD-related pathological changes in their brains was attenuated compared with the saline-injected control group. A similar neuroprotective effect was observed in 12-month-old 3xTg-AD mice that received anti-HA antibody injections while receiving the regular diet. We conclude that increased brain HA triggers memory impairment and that this condition deteriorates with amyloid and leads to subsequent neurodegeneration in mouse models of AD.     

Apelin对改善小鼠低氧性肺动脉高压的作用及与调节脂质代谢的关系

目的：探讨外源性apelin对小鼠慢性低氧性肺动脉高压的作用及其机制。方法：SPF级雄性apoE基因敲除（apoE-KO）小鼠30只,随机均分为3组（n=10）,即常氧组、低氧组和低氧+apelin组,apelin组小鼠每天于低氧前经腹腔注射apelin-13（10 nmol/（kg·d））,其他组腹腔注射相同体积的生理盐水。采用常压连续低氧方法（9%~11% O₂,23 h/d）复制慢性低氧性肺动脉高压模型。低氧3周后,采用右心导管法测定小鼠右心室压（RVSP）和右心室与左心室加室间隔重量比,Elisa法检测血浆中高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）和总胆固醇（TC）的含量;real-time PCR法检测肝组织中三磷酸腺苷结合盒转运体A1（ABCA1）、清道夫受体B1（SR-B1）、低密度脂蛋白受体（LDLR）和3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶（HMGCR）等基因的表达。Western blot法检测小鼠肺组织中过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）蛋白的表达。结果：①低氧组小鼠RVSP、RV/（LV+S）较常氧组分别高87%、85%（P均<0.05）,apelin组小鼠RVSP、RV/（LV+S）较低氧组分别低39%、33%（P均<0.05）。②apelin组小鼠血浆中HDL-C含量、HDL/LDL比值分别较hypoxia组高21%、20%（P均<0.05）,而血浆中TC、LDL-C含量两组间无显著差异（P均>0.05）。③apelin组小鼠肝组织中LDLR、SR-B1、ABCA1基因表达分别较低氧组上调241%、112%、69%（P均<0.05）,而HMGCR基因表达下调45%（P<0.05）。④apelin组小鼠肺组织中PPARγ蛋白表达较低氧组上调47%。结论：Apelin可降低小鼠低氧性肺动脉高压,其机制与调节脂质代谢有关。     

Changes of microcirculation in healthy volunteers and patients with septic shock in Xining

Objective: The purpose of this study is to investigate the characteristic of microcirculation in healthy volunteers and patients with septic shock in both Xining(2 260 m) and Nanjing(10 m). Methods: A total of 62 cases, 33 healthy volunteers, 22 cases in Xining,(2 260 m above sea level) and 11 cases in Nanjing(10 m above sea level); and 29 septic shock, 13 cases in Xining and 16 cases in Nanjing were collected. The total vessel density(TVD), perfused vessel density(PVD), proportion of perfused vessel(PPV) and microcirculation flow index(MFI) of both healthy volunteers and septic shock had been investigated by using sidestream dark field(SDF). Analyzed and managed the image data by using AVA3.0 software. Results: In the healthy volunteers in Xining area(22 cases),the volume of TVD(15.59 ± 2.58 mm/mm~2), PVD(15.58 ± 2.58 mm/mm~2) and PPV(96.60% ± 4.63%) were significant higher than the volume of TVD(10.0 ± 2.10 mm/mm~2), PVD(10.81 ± 2.38 mm/mm~2) and PPV(84.24% ± 8.00%) of the volunteers(11 cases) in Nanjing(11 cases). But the MFI(2.17 ± 0.31) of the healthy volunteers in the Xining was significant lower(P0.05) than the MFI(3.21 ± 0.34) in the healthy volunteers of Nanjing. In the septic shock group(13 cases) in the Xining, the volume of TVD(5.44 ± 1.94 mm/mm~2), PVD(4.18 ± 1.61 mm/mm~2), PPV(42.14%± 5.38%) and MFI(1.05 ± 0.32) compared with the volume of the healthy volunteers in Xining, the TVD(15.59 ± 2.58 mm/mm~2), PVD(5.58 ± 2.58 mm/mm~2), PPV(96.60% ± 4.63%) and MFI(2.17 ± 0.30) were significant lower(P0.05). In the healthy volunteers compare with septic shock group in Nanjing area, the TVD(6.80±1.72 vs 10.00±2.10, P0.05), PVD(5.86±1.58 vs10.81±2.38,P0.05), PPV(45.42±4.86 vs 84.24±4.86, P0.05), MFI(1.28±0.28 vs 3.21±0.34 P0.05), there was significant decreased. In the septic shock group in the Xining compared with the septic shock in Nanjing, there was no significant difference. 10 of 13 patients with septic shock were survived in Xining. 13 of 16 patients with septic shock were survived in Nanjing. Conclusion: The changes of physiological and pathophysiological characteristic in microcirculation induced by hypoxia would be useful for clinical treatment of septic shock at high altitude.     

Deoxygedunin对D-半乳糖联合AlCl3诱导大鼠阿尔茨海默病病理性改变的影响

目的：观察Deoxygedunin对D-半乳糖联合AlCl₃诱导的阿尔茨海默病模型大鼠Aβ沉积、学习记忆和氧化应激的影响及其可能机制。方法：健康成年雄性SD大鼠随机分为3组（n=12）：对照组（Control）、模型组（AD）和干预组（AD+Deo）。Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆和认知功能;采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠海马组织匀浆中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量;免疫组织化学检测大鼠大脑皮层tau蛋白表达情况;Western blot实验用于检测TrkB信号通路上ERK1、AKT和TrkB蛋白的表达。结果：水迷宫结果显示,与对照组相比,D-半乳糖联合AlCl₃诱导的大鼠逃避潜伏期显著增加（P<0.05）。Deoxygedunin可逆转模型组逃避潜伏期的增加（P<0.05）。在去除平台的第7日,与对照组和干预组相比,模型组大鼠表现出逃避潜伏期增加（P<0.01）,穿越平台次数较少（P<0.05）;免疫组织化学和ELISA实验结果显示,与对照组相比,模型组Aβ、tau蛋白表达显著增加（P<0.01）,SOD、GSH-Px活性显著降低,MDA含量明显升高。与模型组相比,Deoxygedunin可逆转模型组Aβ、tau蛋白表达的增多（P<0.01）,SOD、GSH-Px活性显著降低（P<0.05）,MDA含量明显升高（P<0.05）;Western blot结果显示,Deoxygedunin干预可逆转模型组海马TrkB、AKT和ERK1的磷酸化水平的降低。结论：Deoxygedunin可通过激活TrkB信号转导通路显著逆转Aβ沉积,氧化应激和认知缺陷,提示Deoxygedunin可能作为减轻D-半乳糖联合AlCl₃诱导AD样病理功能障碍潜在的治疗备选药物。