基于p38MAPK通路探讨银杏叶提取物对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道黏液高分泌及血管重塑的影响

摘要 目的：探讨银杏叶提取物（Ginkgo biloba extract, GBE）通过调控p38MAPK通路对慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease,COPD）大鼠气道黏液高分泌及肺血管重塑的影响。方法：将90只大鼠随机分为空白对照组、COPD模型组、GBE高剂量组、GBE中剂量组、GBE低剂量组、SB203580组。采用香烟烟雾熏吸联合气道内注入脂多糖（LPS）的方法建立COPD大鼠模型,造模结束后分组给药;通过维多利亚蓝+VG染色观察大鼠肺小动脉病理改变,测量血管壁厚度占血管外径百分比（WT%）、管壁面积占血管面积百分比（WA%）的变化;酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠肺泡灌洗液（BALF）与血清中TNF-α、TGF-β的表达;实时荧光定量法（RT-PCR）检测肺组织表皮生长因子受体（EGFR）、黏蛋白5AC（MUC5AC）mRNA表达;蛋白质印迹法（Western Blot）检测肺组织EGFR、MUC5AC、p-p38MAPK蛋白的表达。结果：与空白对照组比较,COPD模型组WT%、WA%明显升高（P＜0.05）;与COPD模型组比较,各药物干预组WT%、WA%明显降低（P＜0.05）;COPD模型组大鼠BALF及血清中TNF-α、TGF-β水平较空白对照组明显升高（P＜0.05）,各药物干预组TNF-α、TGF-β水平较COPD模型组明显下降（P＜0.05）;COPD模型组大鼠肺组织EGFR、MUC5AC mRNA与空白对照组相比明显升高（P＜0.05）,各药物干预组大鼠肺组织EGFR、MUC5AC mRNA与COPD模型组相比显著降低（P＜0.05）;COPD模型组大鼠肺组织中EGFR、MUC5AC、p-p38MAPK蛋白的表达与空白对照组相比明显升高（P＜0.05）,各药物干预组大鼠肺组织中EGFR、MUC5AC、p-p38MAPK蛋白的表达与COPD模型组相比明显降低（P＜0.05）,不同GBE剂量干预组中EGFR、MUC5AC、p-p38MAPK蛋白的表达量随着给药剂量增加而减少。结论：GBE能够抑制COPD大鼠气道黏液分泌、改善肺血管重塑,其机制可能与抑制p38MAPK通路有关。     

COPD大鼠肺组织中小窝蛋白-1 的表达及其与气道重塑的关系

目的:探讨小窝蛋白-1(Caveolin-1)在COPD大鼠肺组织中的表达及其与气道重塑的关系。方法:采用10周龄Wister大鼠20只,随机分为对照组与实验组,每组10只,对照组常规饲养,实验组采用烟熏法+内毒素法建立COPD模型。第91天处死全部大鼠,测定肺功能后取肺组织,采用免疫组织化学法检测Caveolin-1的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠肺组织匀浆中白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的含量;分析Caveolin-1的表达与IL-8、TNF-α、TGF-β表达的相关性。结果:与对照组比较,实验组大鼠的肺顺应性明显下降,肺弹性阻力及气道阻力显著升高,肺组织TNF-α、IL-8、TGF-β1的含量明显升高,Caveolin-1的表达明显降低,差异均有统计学意义(P0.05)。大鼠肺组织中Caveolin-1的表达与IL-8、TNF-α、TGF-β1含量呈显著负相关(P0.05)。结论:Caveolin-1在COPD大鼠肺组织中的表达明显降低,可能通过促进炎性细胞因子的释放与气道重塑参与COPD的发生和发展。     

HDAC8抑制剂PCI-34051对慢性支气管哮喘小鼠的治疗作用

目的探讨组蛋白去乙酰化酶8抑制剂PCI-34051对慢性哮喘小鼠气道炎症、气道重塑和气道高反应的治疗作用。方法 BALB/C小鼠分为正常组、哮喘组、地塞米松组和PCI-34051组。测定气道阻力,BALF细胞计数和分类计数,ELISA检测IL-4、IL-5、TGF-β1和IFN-γ。HE染色观察气道炎症,AB-PAS和Masson染色测定气道重塑。Western blot测定α-SMA和TGF-β1表达。结果与哮喘组比,地塞米松组和PCI-34051组气道阻力降低,BALF中炎性细胞总数和嗜酸性粒细胞减少,IL-4、IL-5、TGF-β1表达下降。地塞米松组和PCI-34051组HE染色气道周围炎症减轻,气道平滑肌增厚减弱;AB-PAS染色杯状细胞化生减轻;Masson染色面积减少。Western blot发现地塞米松组和PCI-34051组TGF-β1表达下降,但α-SMA降低不明显。结论 PCI-34051能够缓解慢性哮喘气道炎症、气道高反应和气道重塑。     

SAHA对TGF-β诱导人胚肺成纤维细胞α-SMA蛋白及前胶原蛋白mRNA表达的影响

目的:探讨在转化生长因子-β 1(TGF-β1)刺激下,组蛋白去乙酰化酶抑制剂辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)对人胚肺成纤维细胞系HELF向肌成纤维细胞(MF)分化时,α-SMA蛋白及前胶原蛋白mRNA表达的影响.方法:体外培养人胚肺成纤维细胞系HELF,并根据不同的实验目的分为空白对照组,TGF-β1处理组以及SAHA干预组.细胞处理结束后,用Western blot检测α-SMA表达,RT-PCR检测Ⅰ、Ⅲ型前胶原的mRNA表达水平.结果:空白对照组中几乎无α-SMA蛋白表达,TGF-β1处理后α-SMA水平显著增高,而SAHA能有效降低α-SMA的水平.SAHA孵育24h后,能够明显抑制TGF-βl刺激后的细胞表达Ⅰ型和Ⅲ型前胶原蛋白mRNA,并且具有明显的剂量依赖性.结论:SAHA能降低TGF-βl诱导HELF细胞向MF转化时α-SMA表达以及前胶原蛋白表达.     

TGF-β1/Smads通路在哮喘气道重塑中的表达及意义

为了探讨TGF-β1/Smads通路在哮喘气道重塑中的表达及意义,本研究选取清洁级雄性SD大鼠40只,将大鼠随机分为4组,正常对照组,哮喘2周组,哮喘4周组和哮喘8周组,每组10只。其中哮喘2周组、哮喘4周组和哮喘8组大鼠制作哮喘模型,分别在激发哮喘2周、4周和8周后处死,采用HE染色观察各组气道重塑,同时测量气道形态学参数,采用免疫组化染色检测TGF-β1、Smad2和Smad7蛋白表达。结果表明与哮喘2周组和哮喘4周组相比,哮喘8周组气道支气管壁周围有大量细胞浸润,气道平滑肌增厚,管腔狭窄;哮喘各组总管壁面积、内壁面积和平滑肌面积均明显高于正常对照组(p<0.05),其中哮喘8周组总管壁面积、内壁面积和平滑肌面积分别为(42.26±1.61)μm^2、(34.40±1.22)μm^2和(8.22±1.12)μm2,明显高于哮喘2周组和哮喘4周组(p<0.05);哮喘8周组TGF-β1和Smad2蛋白表达分别为1.562±0.122和1.613±0.121,明显高于哮喘2周组和哮喘4周组(p<0.05),而Smad7蛋白表达为0.251±0.081,明显低于哮喘2周组和哮喘4周组(p<0.05)。本研究初步推测TGF-β1/Smads通路在哮喘气道重塑中有重要作用,其中TGF-β1和Smads可能有促进气道重塑的作用,而Smad7可能有抑制气道重塑作用,值得进一步研究。     

大黄素对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞间质转分化的影响

目的:探讨大黄素对TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)间质转分化的影响。方法:不同浓度大黄素分别作用于TGF-β1诱导HK-2细胞24 h和48 h,通过细胞增殖实验确定最佳大黄素最佳给药浓度。TGF-β1诱导HK-2细胞24 h后收集细胞用于免疫印迹Western blot和实时荧光定量PCR(RT-PCR)分析。Western印迹法分别检测纤维化相关蛋白Collagen IV的表达,和肾小管上皮细胞向间充质细胞转分化关键蛋白α-SMA和E-Cadherin的表达;RT-PCR法检测肾小管上皮细胞向间充质细胞转分化关键蛋白α-SMA的表达。结果:由细胞增殖实验结果表明40μM大黄素是最佳给药浓度。Western结果表明,与模型组相比,大黄素组下调纤维化相关蛋白Collagen IV的表达,大黄素组与模型组蛋白差异有统计学意义(P0.05)。与模型组相比,大黄素组下调α-SMA蛋白表达水平,而上调E-Cadherin蛋白表达,差异有统计学意义(P0.05)。RT-PCR结果表明,与模型组相比,大黄素组降低α-SMA mRNA的含量,大黄素组与模型组α-SMA mRNA含量差异有统计学意义(P0.05)。结论:大黄素可通过抑制TGF-β1诱导的HK-2细胞间质转分化,从而发挥延缓肾间质纤维化的过程。     

结缔组织生长因子在慢性阻塞性肺疾病血管重建中表达研究

目的:探讨结缔组织生长因子(CTGF)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)血管重建中的表达及意义。方法:将30例有吸烟史的男性鳞癌需要手术的患者按其肺功能结果分成二组,对照组:(肺功能正常组);COPD稳定期组:(肺功能异常组),每组15例,标本来自于癌旁的肺组织,肺血管重塑的形态学观察行HE和MASSON三色染色,行免疫组化来观察CTGF蛋白、PCNA蛋白在肺血管平滑肌中的表达。结果:(1)COPD组肺动脉管壁面积/管总面积(WA%)、管壁的胶原厚度、肺动脉平滑肌中CTGF蛋白及PCNA蛋白的表达与对照组相比差异有统计学意义。(2)CTGF与管壁面积/管总面积(WA%)、管壁的胶原厚度及血管平滑肌中PCNA表达呈正相关(,r值分别为0.81、0.68、0.86,P<0.05)。吸烟指数与管壁面积/管总面积及PCNA的表达呈正相关(r=0.73,0.99,P<0.01)。结论:单纯吸烟者即有血管重建,吸烟伴COPD者血管重建更加严重,CTGF在COPD患者肺血管中的表达较对照组高,可能参与了COPD血管重建过程。     

干细胞对环孢素肾病大鼠肾组织转化生长因子β1的影响

目的观察干细胞治疗技术对环孢素肾病大鼠肾组织转化生长因子β1(TGF-β1)的影响。方法实验大鼠分成3组,每组10只大鼠:C组:正常对照组;H组:模型组;B组:骨髓间充质干细胞治疗组。28 d处死大鼠切取肾脏,免疫组织化学染色、RT-PCR、Western blot测定肾组织TGF-β1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平。采用单因素方差分析比较各组数据。结果 (1)免疫组织化学染色结果显示:与C组比较,H组、B组TGF-β1(0.899±0.046vs 9.524±1.232,6.437±0.728;P0.01)、α-SMA(2.427±0.188 vs 11.912±2.610,9.232±2.268;P0.01)表达水平均显著升高,差异具有统计学意义。与H组比较,B组大鼠的TGF-β1(9.524±1.232 vs 6.437±0.728;P0.01)、α-SMA(11.912±2.610 vs 9.232±2.268;P0.01)表达水平显著下降,差异具有统计学意义;(2)RT-PCR结果显示:与C组比较,H组、B组TGF-β1(0.119±0.003 vs 0.826±0.004,0.651±0.004;P0.01)、α-SMA(0.370±0.006 vs 0.900±0.007,0.642±0.007;P0.01)m RNA水平均显著升高,差异具有统计学意义(P0.05)。与H组比较,B组大鼠的TGF-β1(0.826±0.004 vs 0.651±0.004;P0.01)、α-SMA(0.900±0.007 vs 0.642±0.007;P0.01)m RNA水平显著下降,差异具有统计学意义;(3)Western blot结果显示:与C组比较,H组、B组TGF-β1(0.218±0.004 vs 0.825±0.003,0.650±0.006;P0.01)、α-SMA(0.263±0.003vs 0.841±0.003,0.615±0.003;P0.01)蛋白水平均显著升高,差异具有统计学意义。与H组比较,B组大鼠的TGF-β1(0.825±0.003 vs 0.650±0.006;P0.01)、α-SMA(0.841±0.003 vs 0.615±0.003;P0.01)蛋白水平显著下降,差异具有统计学意义。结论骨髓间充质干细胞治疗可以下调环孢素肾病大鼠肾组织TGF-β1表达水平,减少α-SMA表达水平,从而改善大鼠肾间质纤维化程度。     

HSC的活化、增殖与TGF-β1及其Ⅰ型受体在中晚期纤维化肝组织中的改变及护杆片对其的影响

目的 探讨护肝片对中、晚期纤维化大鼠肝组织肝星状细胞(HSC)的活化与增殖及转化生长因子-β1(TGF-β1)及其Ⅰ型受体(TβRⅠ)表达的影响.方法 采用12.5% CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型,自造模之日起,大鼠分组灌胃给药(护肝片921mg·kg-1)或溶媒,每日一次,直至8或13周末,分别处死动物,取左叶肝组织石蜡包埋,制作组织芯片,免疫组化S-P法检测大鼠肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、TGF-β1及TβRⅠ蛋白的表达,并用MetaMorph图像分析系统计数α-SMA阳性细胞数、对TGF-β1及TβRⅠ蛋白表达量进行定量分析.结果 1.模型复制8周和13周,模型组的肝损伤及其纤维化分级均明显高于正常组(P＜0.01),护肝片组的肝损伤及其纤维化分级均轻于模型组.2.模型复制8周和13周,模型组活化的HSC(即α-SMA阳性细胞)数量较正常组明显增多、TGF-β1及TβRⅠ蛋白的表达较正常组明显增强(P＜0.01);3.护肝片显著抑制8、13周纤维化肝组织HSC的活化与增殖和TGF-β1及TβRⅠ蛋白的表达(P＜0.01).结论 抑制HSC的活化与增殖和TGF-β1及TβRⅠ的表达可能是护肝片抗肝纤维化作用的靶点之一.     

阿胶对COPD模型小鼠的保护作用以及对MMP-2、MMP-9、TGF-β1水平的影响

利用香烟烟雾暴露法建立慢性阻塞性肺疾病(COPD)小鼠模型,观察阿胶对模型小鼠气道重塑及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、转化生长因子-β1(TGF-β1)因子表达的影响,初步探讨其治疗慢性阻塞性肺疾病的作用机制。将24只雄性C57BL/6小鼠随机分为3组,分别是对照组、模型组和阿胶组,模型组利用香烟烟雾暴露法建立COPD小鼠模型,阿胶组在模型组基础上每日按照3 g/kg体重给予0.2 m L阿胶烊化液灌胃。12周后采用ELISA法检测肺泡灌洗液中MMP-2、MMP-9、TGF-β1蛋白水平,利用RT-PCR法检测肺组织中MMP-2、MMP-9、TGF-β1 m RNA水平。结果表明,模型组小鼠气道壁和平滑肌明显增厚,气道管腔狭窄,黏膜下层稍变宽,有部分上皮细胞脱落,气道周围有炎性细胞浸润,肺间质明显增厚,阿胶组上述改变较模型组明显改善;模型组肺脏MMP-2、MMP-9、TGF-β1 m RNA水平和蛋白水平均显著升高(p0.01),阿胶能显著降低肺泡灌洗液和肺脏组织中MMP-2、MMP-9、TGF-β1的表达水平(p0.01)。本研究表明香烟烟雾暴露会导致模型小鼠呼吸道和肺脏组织细胞外基质的降解和沉积失衡,造成气道重塑和肺实质破坏及间质增生,MMP-2、MMP-9、TGF-β1的异常表达在这一过程中发挥了重要作用,阿胶能通过调节MMP-2、MMP-9、TGF-β1的异常表达,有效抑制气道炎症和气道重塑的发生。     

lncRNA BANCR 在晶体上皮细胞上皮-间质转化，增殖、凋亡及自噬的作用

目的:探索长链非编码RNA BANCR(lncRNA BANCR)在人晶状体上皮细胞FHL24中对上皮-间质转化的作用,并进一步探究了其调控晶体上皮细胞增殖、凋亡及自噬的作用及相关分子机制。方法:运用qReal-time PCR检测TGF-β诱导对FHL24细胞内EMT相关标志物α-SMA,E-cadherin,Coll I,ZO1及BANCR m RNA相对表达量。细胞中转染BANCR。Western印迹检测各组细胞中EMT相关标志蛋白及LC3Ⅱ/Ⅰ的蛋白表达。MTT法检测各组细胞的增殖,凋亡情况。结果:与正常对照组比较,TGF-β诱导组细胞中BANCR,α-SMA, Coll I,ZO1 m RNA的相对表达量明显增加,而E-cadherin m RNA显著下降,差异均有统计学意义(t=-5.031,-7.145,-9.023,-6.012, 5.097均P0.05),以上因子的蛋白表达趋势相同,差异均有统计学意义(均P0.05)。si RNA-BANCR TGF-β诱导组细胞中E-cadherin m RNA相对表达量比si RNA TGF-β诱导组显著增加(t=-9.98, P0.05);α-SMA,Coll I及ZO1 m RNA相对表则显著减少(t=9.003; 27.738; 19.620, P0.05)。抑制BANCR后细胞增殖活力48、72 h时细胞活性显著降低(t=5.032, 9.041,均P0.05),细胞凋亡率显著升(t=16.772,P0.001)。自噬标志蛋白LC3-II/LC3-I比例增加(P 0.05)。结论:长链非编码BANCR参与了晶体上皮细胞的抑制其上皮-间质转化,抑制BANCR可抑制晶体上皮细胞增殖、增加凋亡及自噬的发生。     

慢性阻塞性肺病大鼠模型的肺功能及肺组织病理学变化评估

目的:探讨被动吸烟的时间长短与慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠模型的肺功能及肺组织病理学的变化之间的关系.方法:采用被动吸烟法建立COPD大鼠模型,随机分为被动吸烟4周组、6周组、8周组和对照组,分别测定和评估不同时间段的各组大鼠模型的肺功能和气道肺组织的病理变化.结果:6周组及8周组大鼠模型的呼气峰流速(PEF)显著降低、气道内压上升坡度(IP-slope)显著增高,与对照组比较P＜0.01.以PEF值小于对照组的大鼠80%PEF值为存在气流受限的界线,则4周组、6周组、8周组出现气流受限的鼠分别为0只(0)、6只(75%)及8只(100%),6周组及8周组的大鼠气流受限发生率显著高于4周组(P＜0.01).8周组大鼠出现明显气道壁增厚、气道狭窄及显著肺气肿改变,其气道壁炎细胞浸润、杯状细胞化生、气道壁坏死糜烂、纤维结缔组织及平滑肌增生等评分均显著高于对照组(P＜0.01),气道坏死糜烂、小气道阻塞发生率及气道平滑肌增生等指标显著高于6周组(P＜0.01).6周组中有6只大鼠出现气道狭窄及肺气肿改变,气道壁炎细胞浸润、杯状细胞化生、气道壁坏死糜烂、纤维结缔组织及平滑肌增生等评分均显著高于对照组(P＜0.01).6周组及8周组大鼠PEF值与气道壁纤维组织和平滑肌增生呈显著负相关(P＜0.05);而4周组大鼠未出现典型肺气肿及气道狭窄.结论:COPD的形成与吸烟时间有关,在吸烟量相同条件下,吸烟时间越长,气道和肺组织病变越重,气流受限的发生率越高.     

miR-21对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞间质转分化的影响

目的:观察miR-21在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)上皮间质转分化(EMT)中的作用,并探讨miR-21参与调控HK-2细胞EMT的可能靶点。方法:体外培养的HK-2细胞分为6组:正常对照组、转化生长因子β1(TGF-β1)模型组、miR-21 mimic阴性组、miR-21 mimic组、miR-21 inhibitor阴性组和miR-21 inhibitor组。细胞经4 ng/ml TGF-β1处理建立EMT模型,检测miR-21和EMT相关指标的表达变化,利用基因转染技术,将miR-21 mimic质粒或miR-21 inhibitor质粒转染经TGF-β1处理的HK-2细胞,使细胞过表达或抑制表达miR-21,在此基础上观察细胞EMT相关指标的变化以及磷酸酯酶(PTEN)基因的影响。结果:(1)与正常组相比,模型组的miR-21含量显著升高(P0.05),上皮表型标志物E-cadherin的mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P0.01),间质表型标志物α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA和蛋白水平也显著升高(P0.05,P0.01);(2)转染miR-21 mimic后,与miR-21 mimic阴性对照组相比,miR-21含量显著升高(P0.01),PTEN、E-cadherin的mRNA和蛋白水平显著降低(P0.05,P0.01),α-SMA mRNA和蛋白水平显著升高(P0.05,P0.01);转染miR-21 inhibitor后,与miR-21 inhibitor阴性对照组相比,miR-21含量显著降低(P0.01),PTEN、E-cadherin的mRNA和蛋白含量显著升高(P0.05,P0.01),α-SMA mRNA、蛋白水平显著降低(P0.05,P0.01)。结论:miR-21在TGF-β1诱导的HK-2细胞EMT发生中具有重要作用,并且可能通过靶基因PTEN参与EMT相关分子的表达调控。     

结缔组织生长因子在慢性阻塞性肺疾病血管重建中表达研究

目的：探讨结缔组织生长因子（CTGF）在慢性阻塞性肺疾病（COPD）血管重建中的表达及意义。方法：将30例有吸烟史的男性鳞癌需要手术的患者按其肺功能结果分成二组,对照组：（肺功能正常组）;COPD稳定期组：（肺功能异常组）,每组15例,标本来自于癌旁的肺组织,肺血管重塑的形态学观察行HE和MASSON三色染色,行免疫组化来观察CTGF蛋白、PCNA蛋白在肺血管平滑肌中的表达。结果：（1）COPD组肺动脉管壁面积/管总面积（WA%）、管壁的胶原厚度、肺动脉平滑肌中CTGF蛋白及PCNA蛋白的表达与对照组相比差异有统计学意义。（2）CTGF与管壁面积/管总面积（WA%）、管壁的胶原厚度及血管平滑肌中PCNA表达呈正相关（,r值分别为0.81、0.68、0.86,P〈0.05）。吸烟指数与管壁面积/管总面积及PCNA的表达呈正相关（r=0.73,0.99,P〈0.01）。结论：单纯吸烟者即有血管重建,吸烟伴COPD者血管重建更加严重,CTGF在COPD患者肺血管中的表达较对照组高,可能参与了COPD血管重建过程。     

转化生长因子β1和Snaill参与糖尿病大鼠肾小管上皮细胞向间充质细胞转变

本文旨在观察转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和锌指转录因子Snaill在糖尿病(diabetesmellitus,DM)大鼠.肾组织中的表达,并初步探讨它们与肾小管上皮细胞向间充质细胞转变的关系.链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱发大鼠DM,按病程分为2、4、8、12、16、20、24周、16周胰岛素治疗(16wA)、20周胰岛素治疗(20wA)和24周胰岛索治疗(24wA)组(n=6).其中胰岛素治疗组动物从第13周起用胰岛素控制血糖至正常水平,每一时点均设鼠龄匹配的正常对照组.测定各组血糖、24 h尿蛋白、血肌酐(serum creatinine,Scr)、肾脏指数.PAS染色光镜观察肾脏病理学改变.免疫组织化学检测肾脏SnMll、TGF-β1、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、E-钙黏素和纤连蛋白(fibronectin,FN)的表达;Western blot检测肾皮质SnailI、TGF-β1和E-钙黏素蛋白表达.RT-PeR检测肾皮质Snaill和E-钙黏素mRNA表达.结果显示:(1)DM各组大鼠的血糖、24 h尿蛋白、Scr、肾脏指数均较正常对照组明显升高(P<0.05,P<0.01),胰岛素治疗组大鼠上述指标均较DM组显著降低(P<0.01).(2)TGF-β1和Snmll免疫组织化学阳性染色见于DM各组大鼠肾小管,正常对照组未见阳性表达,胰岛素治疗组大鼠弱阳性表达,并随治疗时间延长而减少.从16周开始在DM大鼠肾小管上皮细胞可见α-SMA蛋白阳性表达,胰岛素治疗组大鼠未见α-SMA蛋白表达;DM组大鼠E-钙黏素蛋白阳性染色明显少于正常对照组.(3)DM组大鼠肾皮质TGF-β和Snaill蛋白以及Snaill mRNA表达较正常对照组显著增高(P<0.01),胰岛素治疗组大鼠则显著低于DM组(P<0.01);DM组E.钙黏素mRNA和蛋白表达与TGF-β1和Snaill呈相反变化.结果提示,TGF-βl和Snaill可能参与DM大鼠肾小管上皮细胞向问充质细胞转变,胰岛素治疗可抑制两者表达并阻断肾小管上皮细胞向间充质细胞转变.     

85例重症支原体肺炎患儿肺功能动态观察及临床意义

目的:分析85例小儿重症支原体肺炎(Mycoplasma pneumoniae pneumonia,MPP)肺功能指标动态变化情况,为临床上重症MPP的诊断和预后评估提供有效参考。方法:回顾性选取我院儿科接诊的重症MPP患儿85例为重症组,并选取基线资料差异不显著的轻症MPP患儿72例(轻症组)为研究对象。全部MPP患儿均行大环内酯类抗感染治疗,联合头孢曲松抗菌治疗,并予氨溴索祛痰等对症支持治疗,比较重症组与轻症组发病急性期与恢复期肺功能指标的变化。结果:(1)重症组在急性期大气道通气指标FVC、PEF、FEV1、FEV1/FVC表达量均显著低于轻症组(P0.05);重症组FVC、PEF、FEV1、FEV1/FVC在恢复期和轻症组无显著差异(P0.05);(2)重症组小气道通气指标FEF25、FEF50、FEF75、FEF25-75在各个时间节点均与轻症组有显著差异(P0.05)。结论:儿童重症MPP具有发病急性期大、小气道受损严重的特点,大气道在恢复期各项指标均接近正常,而小气道在恢复期各项指标仍处于异常表达的状态。肺功能指标的动态监测对重症MPP有一定临床意义。     

慢性阻塞性肺疾病患者血清NE、α1-AT、CRP、PCT的表达及与肺功能的关系研究

目的:探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血清中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、α1-抗胰蛋白酶(α1-AT)、C-反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)的表达水平及其与肺功能的相关性。方法:选取2013年3月-2015年6月河北北方学院附属第一医院呼吸内科收治的COPD患者87例作为研究对象,其中急性加重期(急性组)患者49例,稳定期(稳定组)患者38例,另选取同时期在本院进行健康体检的志愿者30例为对照组,检测并对比急性组、稳定组和对照组受试者的血清NE、α1-AT、CRP、PCT水平及肺功能指标,并分析COPD患者NE、α1-AT、CRP、PCT水平与肺功能的相关性。结果:与对照组对比,急性组与稳定组患者的NE、CRP、PCT水平均明显升高,α1-AT水平明显降低(P0.05),且急性组患者的NE、CRP、PCT水平高于稳定组,α1-AT水平低于稳定组(P0.05);急性组与稳定组患者的第1秒用力呼气容积占预计值的百分比(FEV1%)、第1秒用力呼气容积/用力肺活量(FEV1/FVC)均低于对照组,且急性组FEV1%、FEV1/FVC低于稳定组(P0.05);经Spearman相关性分析显示,NE、CRP、PCT与FEV1%及FEV1/FVC均呈负相关,α1-AT与FEV1%及FEV1/FVC呈正相关(P0.05)。结论:COPD患者血清NE、CRP、PCT表达水平均明显升高,α1-AT表达水平明显降低,且NE、α1-AT、CRP、PCT均与肺功能存在一定相关性,加强对此类指标的监测有助于对COPD患者病情判断及治疗指导。     

β-转化生长因子在哮喘气道重塑中的作用

哮喘是一种慢性气道炎症性疾病.哮喘患者体内表达较高水平的B一转化生长因子(TGF-β).TGF-B可加重上皮细胞受损,促进气道平滑肌细胞,肌成纤维细胞增殖,通过促进细胞外基质的合成、诱导结缔组织生长因子表达从而导致气道上皮下纤维化,气道壁增厚,进而直接参与哮喘气道炎症和重塑的发生、发展过程.TGF-β在哮喘的气道重塑中有着极其重要的作用,因此针对其治疗已经成为防治哮喘气道重塑的新的研究方向.     

痰热清注射液对COPD患者血清TGF-β与MMP-9水平的影响

目的:分析痰热清注射液对慢性阻塞性肺病(COPD)患者血清转化生长因子-β(TGF-β)与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平的影响。方法:将102例COPD患者按随机数表法分作对照组与观察组,各52例。对照组予以常规治疗,观察组基于对照组加用痰热清注射液治疗,比较两组治疗前后血清TGF-β、MMP-9水平,用力肺活量(FVC)、1s用力呼气容积(FEV1),二氧化碳分压(PaCO_2)、氧分压(PaO_2),CD4~+、CD8~、CD4~+/CD8~+,证候积分,临床疗效及不良反应的发生情况。结果:治疗后,观察组血清TGF-β、MMP-9水平、PaCO_2、证候积分均显著低于对照组,PaO_2、CD4~+、FVC、FEV1、CD4~+/CD~+、治疗总有效率均显著高于对照组(P0.05)。两组药物副反应的发生情况比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:痰热清注射液可有效降低COPD患者血清TGF-β及MMP-9水平,并改善患者动脉血气、肺功能及免疫功能。