人早孕滋养细胞分泌趋化因子CXCL16促进自身增殖和侵袭

本文探讨趋化因子CXCL16在细胞滋养细胞的分泌特征,以及其促进滋养细胞增殖和侵袭的生物学作用。采用原代培养人早孕滋养细胞,ELISA法检测不同种植密度培养12、24、36、48、60、 72、100h上清液中CXCL16分泌水平;[3H]TdR掺入法分析外源性CXCL16刺激后滋养细胞的增殖效应;matrigel侵袭试验分析外源性CXCL16处理后滋养细胞的侵袭性。结果表明原代培养的人早孕滋养细胞可持续分泌趋化因子CXCL16,在最初培养的48h分泌旺盛,培养至100h仍可见CX- CL16分泌;rhCXCL16浓度达100ng/ml时能够明显促进体外培养的滋养细胞增殖效应:rhCXCL16 浓度达10ng/ml时能明显促进滋养细胞的侵袭能力。实验证明人早孕滋养细胞分泌趋化因子CX- CL16,并以自分泌方式促进滋养细胞的增殖和侵袭,可能在胎盘形成和绒毛外滋养细胞的入侵中发挥重要作用。     

趋化因子CXCL10在心肌细胞及巨噬细胞中的表达机制

目的探讨心肌缺血-再灌注损伤中趋化因子CXCL10的产生机制。方法分别用LPS、H2O2、Ca2+载体A23187刺激原代培养的心肌细胞、骨髓来源的巨噬细胞或二者混合培养的共培养系统后,ELISA检测培养基上清中的趋化因子CXCL10和促炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α的含量,观察其表达动力学。结果①大剂量(10μg/mL)的LPS刺激心肌细胞主要产生趋化因子CXCL10;刺激骨髓来源巨噬细胞主要产生促炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α。②H2 O2、Ca2+通道激活剂并不能使产生趋化因子CXCL10或IL-1β、IL-6、TNF-α这些促炎性细胞因子。③骨髓来源的巨噬细胞促进心肌细胞表达趋化因子CXCL10;心肌细胞促进骨髓来源的巨噬细胞表达IL-6、TNF-α,但抑制IL-1β的表达。结论心肌细胞是心肌缺血-再灌注损伤中CXCL10潜在的细胞来源;CXCL10的表达,主要依赖于TLR4的激活。     

Claudin5、MMP-13在食管鳞癌中的表达及临床意义

目的研究Claudin5和MMP-13蛋白在食管鳞癌组织中表达及其临床意义。方法应用免疫组化技术检测90例食管鳞癌组织、28例正常食管黏膜组织中Claudin5和MMP-13蛋白的表达情况。结果食管鳞癌组织中Claudin5和MMP-13蛋白的阳性表达率分别为85.56%(77/90)和82.22%(74/90),而在正常食管黏膜组织中Claudin5和MMP-13蛋白的阳性表达率分别为25.00%(7/28)和21.43%(6/28),两者差异有统计学意义(P0.05)。MMP-13的蛋白表达在有淋巴结转移的病人中明显高于没有淋巴结转移的病人;临床分期Ⅲ+Ⅳ期组的MMP-13蛋白的表达显著高于Ⅰ期、Ⅱ期组(P0.05)。MMP-13和claudin5在食管鳞癌中表达呈正相关(r=0.6356 P0.01)。结论 MMP-13和claudin5在食管鳞癌的发生、发展过程中可能发挥重要作用,MMP-13可能作为食管鳞癌临床判断预后的又一重要指标。     

MMP-7和Survivin在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的探讨Wnt信号通路中基质金属蛋白酶7（matrix melluoproteinases7,MMP-7）和凋亡抑制基因Survivin在结直肠癌组织中表达及其与临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学染色（Elivision）方法检测100例结直肠癌组织和60例癌旁正常黏膜组织中MMP-7和Survivin蛋白的表达。结果MMP-7蛋白在100例结直肠癌组织和60例癌旁正常黏膜组织中的阳性表达率分别为77．00％（77／100）和13．33％（8／60）,两组问差异有统计学意义（P〈0．01）;Survivin蛋白在100例结直肠癌组织和60例癌旁正常黏膜组织中的阳性表达率分别为65．00％（65／lOO）和15．00％（9／60）,两组问差异有统计学意义（P〈0．01）。MMP-7与Survivin蛋白阳性表达均与肿瘤的淋巴结转移和Dukes分期有关（P〈0．05）,此外,MMP-7蛋白在结直肠癌中的阳性表达也与肿瘤的浸润深度有关（P〈0．05）。而MMP-7与Survivin蛋白的阳性表达无相关性（r=0．097,P〉O．05）。结论MMP-7和Survivin在结直肠癌中的高表达可能与结直肠癌的发生、发展、浸润和转移等相关,检测癌组织中MMP-7和Survivin的表达有助于为结直肠癌的病情进展及预后判断提供帮助。     

慢性睡眠限制状态下大鼠髁突软骨MMP-1,MMP-13表达的变化

目的:探讨MMP-1,MMP-13在慢性睡眠限制引起大鼠髁突软骨结构变化中的表达变化及作用。方法:180只雄性Wistar大鼠随机分为3组(n=60):慢性睡眠限制组(CSR)、大平台组(LC)、笼养组(CON)。每组根据试验时间不同分别分为3个亚组(n=20):7天(7D)、14天(14D)、21天(21D)组。参考改良多平台法(MMPM)建立大鼠的慢性睡眠限制模型。通过HE染色观察大鼠髁突软骨的结构变化。通过免疫组化和实时定量PCR分别检测MMP-1和MMP-13的蛋白水平及m RNA水平的表达变化。结果:HE染色和扫描电镜结果显示,CSR组的大鼠髁突软骨出现了病理性的改变。与CON和LC组比较,CSR组MMP-1和MMP-13的m RNA转录和蛋白表达水平明显升高(P0.05)。结论:慢性睡眠限制能够引起大鼠颞下颌关节髁突软骨的病理性变化。MMP-1和MMP-13的表达水平的变化可能在大鼠髁突软骨病理性改变中起关键作用。     

曲普瑞林对子宫肌瘤组织中MMP-13和TIMP-3表达的影响

目的:探讨曲普瑞林对子宫肌瘤患者肿瘤组织中MMP-13和TIMP-3表达影响。方法:选取我院收治的子宫肌瘤患者40例,随机分为两组,每组各20例。实验组予曲普瑞林后,行子宫肌瘤切除术,对照组直接行子宫肌瘤切除术,观察比较超声测量子宫和子宫肌瘤的体积,实时定量PCR法与免疫印迹法检测子宫肌层和肌瘤组织中MMP-13和TIMP-3的表达。结果:1与曲普瑞林治疗前以及对照组相比较,曲普瑞林治疗后临床症状显著改善,子宫和肌瘤体积均明显缩小,差异有统计学意义(P0.05)。2与对照组和治疗前相比较,血清雌二醇水平显著降低,差异有统计学意义(P0.05)。3与对照组相比较,肌层和肌瘤组织中MMP-13m RNA水平降低,肌层和肌瘤组织中TIMP-3m RNA水平增加,差异有统计学意义(P0.05)。结论:曲普瑞林能够通过降低血清雌二醇水平,降低肌层和肌瘤组织中MMP-3的表达,以及增加肌层和肌瘤组织中TIMP-13的表达,来缩小子宫和子宫肌瘤的体积,从而缓解患者的症状。     

环孢素A对人早孕期滋养细胞MMP-9与MMP-2表达的调控作用

本研究的目的是探讨环孢素A对人早孕期滋养细胞侵袭能力及基质金属蛋白酶9与2 (matrix metalloproteinase 9 and 2,简称MMP-9与MMP-2)表达的调节作用,为治疗反复自然流产等妊娠疾患提供新的线索。侵袭试验观察CsA对人早孕期滋养细胞侵袭能力的调节作用;RT-PCR与明胶酶谱分析CsA对滋养细胞MMP-9与MMP-2 mRNA及蛋白水平表达的影响;In-cell West- ern检测CsA作用后滋养细胞ERK1/2磷酸化水平。结果发现,1．0μmol/L CsA明显增强滋养细胞侵袭能力,MEK激酶抑制剂U0126可抑制CsA对滋养细胞的促侵袭作用;1．0μmol/L CsA可诱导MMP- 9与MMP-2基因的转录与蛋白分泌;该诱导效应同样可被U0126所阻滞;1．0μmol/L CsA以时间依赖方式促进ERK1/2的磷酸化。结果表明,CsA可激活ERK1/2,通过MAPK/ERK1/2途径促进滋养细胞MMP-9与MMP-2基因的转录与蛋白分泌,从而增强滋养细胞的侵袭能力,对滋养细胞生物学功能具有良性调节作用。     

MMP-7基因真核表达载体的构建及其在HeLa细胞中的表达与鉴定

目的：构建MMP-7基因真核重组质粒,检测并鉴定MMP-7在人宫颈癌HeLa细胞中的表达。方法：提取宫颈癌组织总RNA,通过基因克隆构建MMP-7基因真核表达重组质粒pcDNA3.1（＋）/MMP-7,酶切、PCR及基因测序鉴定,用阳离子脂质体介导采用基因转染技术转染人宫颈癌Hela细胞,RT-PCR检测外源基因的表达、间接免疫荧光法检测对表达产物进行鉴定。结果：成功构建了重组表达质粒pcDNA3.1（＋）/MMP-7并转染了人宫颈癌Hela细胞,通过RT-PCR可以检测到MMP-7 mRNA在Hela细胞中的表达,经间接免疫荧光反应可检测到明显的阳性反应,而转染空载体组表达阴性。结论：构建的重组质粒pcDNA3.1（＋）/MMP-7能在Hela细胞中表达,为该蛋白在人子宫癌后续的功能研究奠定了基础。     

MMP-9、TIMP-1及细菌L型在卵巢乳头状癌中的表达及意义

目的探讨MMP-9、TIMP-1及细菌L型在卵巢上皮性肿瘤中的表达及临床意义。方法采用原位杂交和免疫组化及革兰染色方法检测97例卵巢乳头状癌及23例卵巢乳头状瘤组织中MMP-9、TIMP-1的表达及细菌L型检出率,并用2χ检验进行统计学处理。结果卵巢乳头状癌中MMP-9及TIMP-1的表达率均明显高于良性肿瘤(P<0.005)。MMP-9在卵巢乳头状癌中临床分期Ⅲ、Ⅳ期中的表达率明显高于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.005~P<0.01),随着病理分级增高而显著增加(P<0.005~P<0.05),腹腔淋巴结有转移和有腹水者均高于无腹腔淋巴结转移和无腹水者(P<0.005~P<0.05)。而TIMP-1阳性表达与MMP-9阳性表达相反,呈负相关。细菌L型检出阳性率与病理分级及临床分期差异有显著性,腹腔淋巴结有转移比无转移者、有腹水比无腹水者差异有显著性(P<0.005)。结论MMP-9、TIMP-1基因及蛋白在卵巢肿瘤中有不同程度的异常表达,两者均可作为判断卵巢肿瘤生物学行为及患者预后参考指标。L型感染极有可能成为诱发肿瘤因素之一,它与MMP-9、TIMP-1可能有协同致瘤及恶性肿瘤侵袭和转移作用。研究细菌L型感染与肿瘤的关系,具有重要的临床应用价值。     

Human osteoclasts express different CXC chemokines depending on cell culture substrate: molecular and immunocytochemical evidence of high levels of CXCL10 and CXCL12

Chemokines are important mediators of chemotaxis, cell adherence, and proliferation and exert specific functions in bone remodeling. Despite the potential intriguing role of chemokines in the regulation of osteoclast (OC) functions, little is known about the expression of chemokines and their receptors in human OCs at different stages of differentiation. Therefore, we analyzed the expression of CXC chemokine receptors (CXCR1, CXCR2, CXCR3, CXCR4 and CXCR5) and ligands (CXCL8, CXCL10, CXCL12 and CXCL13) both at molecular and protein levels, in human OCs grown on plastic or calcium phosphate-coated slides at different stages of differentiation. Real-time PCR showed that CXCR1, CXCR2, CXCR3, CXCR4, CXCR5 and CXCL8 were expressed in undifferentiated cells and significantly decreased during OC differentiation. By contrast, CXCL10 and CXCL12 were strongly upregulated from day 0 to day 8 in cells grown on calcium phosphate-coated slides. Immunocytochemistry showed that OCs grown on plastic expressed CXCR3, CXCR4, CXCR5, CXCL8 and CXCL12, while they were negative for CXCR1, CXCR2 and CXCL10. Interestingly, both at molecular and protein levels CXCL10 and CXCL12 significantly increased only when cells were differentiated on calcium phosphate-coated slides. These data suggest that the selection of a substrate that better mimics the tridimensional structure of bone tissue, thus favoring OC maturation and differentiation, may be necessary when studying osteoclastogenesis in vitro.     

FZD10 在骨肉瘤组织中的表达及临床意义

目的:探讨骨肉瘤组织中FZD10的表达及其临床意义。方法:用S-P免疫组织化学染色法对69例骨肉瘤及35例骨软骨瘤中FZD10蛋白的表达进行检测,并对其与骨肉瘤临床病理及预后的关系进行统计学分析。结果:FZD10在骨肉瘤和骨软骨瘤组织中阳性表达率分别为89.9%和5.7%,P<0.01。FZD10蛋白表达与Enneking分期和Price分级呈正相关,与WHO分型和预后相关。结论:骨肉瘤FZD10蛋白的表达与肿瘤恶性程度密切相关,对骨肉瘤诊断和预后评估具有重要价值。     

CXCL10/IP-10 in infectious diseases pathogenesis and potential therapeutic implications

C–X–C motif chemokine 10 (CXCL10) also known as interferon γ-induced protein 10 kDa (IP-10) or small-inducible cytokine B10 is a cytokine belonging to the CXC chemokine family. CXCL10 binds CXCR3 receptor to induce chemotaxis, apoptosis, cell growth and angiostasis. Alterations in CXCL10 expression levels have been associated with inflammatory diseases including infectious diseases, immune dysfunction and tumor development. CXCL10 is also recognized as a biomarker that predicts severity of various diseases. A review of the emerging role of CXCL10 in pathogenesis of infectious diseases revealed diverse roles of CXCL10 in disease initiation and progression. The potential utilization of CXCL10 as a therapeutic target for infectious diseases is discussed.     

β1 integrin regulates MMP-10 dependant tubulogenesis in human lymphatic endothelial cells

Lymphatic vessel growth requires extensive remodeling of the extracellular matrix, a process hypothesized to be related to the expression and function of the matrix metalloproteinases. We used a protein based screening strategy to demonstrate increased matrix matalloproteinase-10 expression in human lymphatic endothelial cells undergoing collagen I induced tubulogenesis. Knock-down experiments showed that matrix metalloproteinase-10 regulated lymphatic endothelial cell tubulogenesis. β1 integrin signaling via the ERK/MAPK pathway increased matrix metalloproteinase-10 mRNA and protein expression in human lymphatic endothelial cells. These findings demonstrate a novel mechanism by which β1 integrin regulates matrix metalloproteinase-10 expression during lymphatic vessel remodeling.     

FZD10在骨肉瘤组织中的表达及临床意义

目的：探讨骨肉瘤组织中FZD10的表达及其临床意义。方法：用S-P免疫组织化学染色法对69例骨肉瘤及35例骨软骨瘤中FZD10蛋白的表达进行检测,并对其与骨肉瘤临床病理及预后的关系进行统计学分析。结果：FZD10在骨肉瘤和骨软骨瘤组织中阳性表达率分别为89.9%和5.7%,P〈0.01。FZD10蛋白表达与Enneking分期和Price分级呈正相关,与WHO分型和预后相关。结论：骨肉瘤FZD10蛋白的表达与肿瘤恶性程度密切相关,对骨肉瘤诊断和预后评估具有重要价值。